Đề cương ôn thi môn học Phân tích thực phẩm 1) Hãy nêu các loại mẫu cần được phân tích trong công nghệ thực phẩm Mục đích lấy các loại mẫu này để làm gì? a) Nguyên vật liệu xác định chất lượng, thành.
Đề cương ơn thi mơn học Phân tích thực phẩm 1) Hãy nêu loại mẫu cần phân tích cơng nghệ thực phẩm Mục đích lấy loại mẫu để làm gì? a) Nguyên vật liệu: xác định chất lượng, thành phần tính ổn định nguyên liệu b) Mẫu trình chế biến: để xác định xem quy trình chế biến ảnh hưởng đến sản phẩm c) Thành phẩm: sản phẩm có đạt yêu cầu d) Mẫu đối thủ cạnh tranh: để phát triển sản phẩm e) Mẫu sản phẩm bị khiếu nại: so sánh với mẫu đạt chuẩn 2) Hãy nêu bước cần tiến hành phân tích thực phẩm - Thiết lập phương pháp phân tích chuẩn: phương pháp phân tích chuẩn cần rõ ràng, xác, kiểm nhà phân tích cần thiết lập lại nhà phân tích khác - Lấy mẫu: q trình chuẩn bị đại diện tồn thực phẩm cần phân tích - Chuẩn bị mẫu để trích ly: thực thi q trình cần thiết để chuẩn bị mẫu nguyên cho giai đoạn trích ly, thường mẫu rắn Ví dụ nghiền thơ, tán mịn ly tâm - Trích ly hợp chất cần phân tích: q trình trích hợp chất cần phân tích khỏi mẫu thơ ban đầu - Phân tách, loại bỏ chất khác gây ảnh hưởng đến kết phân tích, thường phương pháp sắc kí, tách hợp chất - Phát hiện, nhận dạng hợp chất cần phân tích: nhận dạng trực tiếp thiết bị cảm biến (detector) - Xác định và/hoặc định lượng hợp chất cần phân tích: thơng qua tín hiệu ghi nhận thành phần mẫu phát đường chuẩn Nội dung tín hiệu chuyển hóa thành thơng tin định tính định lượng - Lưu trữ thơng tin: ghi chép lưu trữ kết phân tích Tùy đặc tính mẫu yêu cầu mà chọn hiệu chỉnh bước phân tích thích hợp 3) Hãy cho biết dạng mẫu thường lấy để kiểm tra Nêu cách ngắn gọn điểm cần lưu ý dạng mẫu Tuỳ theo vị trí lấy mẫu Từ lô: kho nguyên liệu kho bán thành phẩm Đánh giá tỉ lệ khuyết tật Từ dây chuyền sản xuất: mẫu nguyên liệu, thành phẩm, bán thành phẩm Kiểm tra quy trình sản xuất có ổn định khơng Tuỳ theo mặt hàng Sản phẩm đóng chai, đóng mẫu: đơn vị mẫu chai hay hộp Sản phẩm rời: đơn vị mẫu quả, thùng hay khối lượng Các dạng mẫu lấy kiểm tra : Sản phẩm có bao gói: lấy mẫu đặn, từ vị trí khác bao gói, độ dày khác lô Sản phẩm lỏng sệt, bột nhào: cần khuấy trộn sản phẩm, sản phẩm phân lớp lấy mẫu lớp theo tỉ lệ, tránh lấy mẫu vị trí đặc biệt Mẫu khí : Dạng động : lấy mẫu dòng Dạng tính : lấy mẫu điểm Trạng thái nửa tĩnh: lấy nơi trộn kĩ, tránh lấy miệng Sản phẩm dạng sợi, khơng bao gói: cần tạo đồng Trong sản xuất, nên lấy sản phẩm dạng động 4) Bạn xem xét sử dụng phương pháp để phân tích định lượng cấu tử X sản phẩm thực phẩm công ty bạn Hãy liệt kê yếu tố bạn cần xem xét trước định áp dụng phương pháp Kích thước mẫu hàm lượng chất cần phân tích mẫu Tính đắn phương pháp phân tích: tức khả cho kết phân tích gần giá trị thực mẫu Đồng thời áp dụng yếu tố: giá thành phép phân tích, thời gian hồn thành phân tích, trang thiết bị phịng thí nghiệm Giới hạn xác định: lượng chất nhỏ xác định Độ nhạy, chọn lọc: mẫu phân tích có nhiều tạp chất gây cản trở việc phân tích nên chọn phương pháp cho chất gây cản trở cho phép xác định, tức có độ chọn lọc cao độ nhạy tốt Tốc độ phân tích: phân tích đủ nhanh đủ xác - 5) So sánh phương pháp sắc ký mỏng (TLC), sắc khí (GC) sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Sắc kí mỏng Sắc khí Sắc ký lỏng cao áp Pha tĩnh Bảng rắn( nhựa kim loại) Rắn lỏng Lỏng rắn Pha động Chất lỏng Khí Lỏng ( dung môi Đặc điểm Thiết bị đơn giản, thời gian không kéo dài, tách cấu tử dễ dàng, tự động hoá có độ lặp lại cao Nhiệt độ ảnh hưởng tới q trình tách cột sắc kí khí phải ổn nhiệt ( có trường hợp phải ổn nhiệt O độ cao nhiệt độ phòng) dùng cho cấu tử có độ bay cao Tốc độ nhanh Độ phân giải cao (nhiều loại pha tĩnh) Độ nhạy cao ( kết hợp nhiều loại detector Tái sử dụng cột Phân tích cẩu tử có phân tử lượng lớn bị ion hoá Mẫu dễ thu hồi Hoạt động Gồm kim loại, dung mơi bình chứa Bản chất hệ sắc kí lỏng rắn mà pha tĩnh Gồm : cột, detector, phận nạp liệu, bình mang khí Gồm : dung mơi, bơm, phận nạp mẫu, detector ứng dụng trải thành lớp mỏng bảng kính nhựa kim loại Cơ chế: dung dịch mẫu nhỏ đường xuất phát cách bảng rìa 2-3m, rìa bảng nhúng vào dung mơi thích hợp tác dụng lục mao dẫn, dung môi di động dọc theo lớp hấp phụ chuyển động cẩu tử hỗn hợp với vận tốc khác nhau, đưa tới việc tách cấu tử khuyếch tán cấu tử lớp hấp phụ vừa theo chiều dọc vừa theo chiều ngang Nhờ có khí mang chứa bình, mẫu nghiên cứu dẫn vào cột tách sắc kí, cột tách sắc kí dẫn vào cột tách sắc kí, cột tách sắc kí ổn định nhiệt độ theo yêu cầu phép phân tích nhờ vùng điều nhiệt Q trình tách xảy cột sắc kím sau cấu tử khỏi cột sắc kí, sau cấu tử khỏi cột sắc kí thời điểm khác vào detector Tại chúng chuyển thành tín hiệu điện, tín hiệu khuyếch đại phân khuyếch đại, xử lí đưa số liệu cần thiết Dung mơi (pha động) bơm qua cột, cột nhồi chất rắn mang (pha tĩnh), phận nạp mẫu ( chứa chất A + B) cho phép lấy xác lượng mẫu đưa vào cột sắc kí Tuỳ vào lực pha động, pha tĩnh mà A hay B trước Người ta dùng detector để phát thay đổi thành phần chất thoát khỏi cột, số detector chuyển thành tín hiệu điện ghi máy thị thích hợp Phân tích hợp chất hữu vơ Tách phân tích hỗn hợp khí Xác định thành phần thực Phân tích hầu hết hợp chất hữu phẩm Phân tích sản phẩm dầu mỏ, khí mỏ Phân tích hỗn hợp chất lỏng 6) Vẽ sơ đồ trình bày sơ lược phận thiết bị săc ký khí (GC) - Cột sắc ký khí: có độ dài lớn nhiều so với sắc ký lỏng 10 – 100m , thường cuộn vào để tiết kiệm khơng gian Có dạng cột sắc ký khí : Cột nhồi : pha tĩnh nhồi kín vào cột Loại cột có độ phân giải thấp sử dụng Cột mao quản: pha tĩnh phủ lên bề mặt bên cột Cột mao quản có khả phân tách cấu tử tốt cột nhồi Đầu dị : hỗn hợp khí mang cấu tử sau khỏi cột phân tích đến đầu dò phát đầu dò 7) Vẽ sơ đồ trình bày sơ lược phận thiết bị săc ký lỏng cao áp (HPLC) Bơm : phận giúp bơm dung mơi để tạo dịng chảy lưu lượng lớn áp suất cao - Phải làm vật liệu trơ với dung mơi, chịu hố chất - Tạo dịng chảy lưu lượng lớn ( lên tới 5ml/phút) ổn định ( 50% N phi thu giữ acid tích protein protein , Melanine boric H3BO3 thơ - Chuẩn độ ion borate HCl Biuret - Biret peptit phản - tốn KD - Không nhạy ứng với Cu2+ tạo thành - Nhanh đơn giản phương pháp Lowry phức hợp có màu tím - Màu sắc biến đổi Cần – mg protein đo 540nm so với cho lần đo - Amini acid đơn phương pháp Lowry, - Các muối ammoni dipeptit không phản UV nồng độ cao ứng - Có hợp chất phi gây ảnh hưởng - xác định mẫu protein gây ảnh - Màu thay đổi có lk peptir hay hưởng đến phản ứng tùy loại protein, không Biuret gelatin cho màu hồng- vùng nồng độ đo - Khơng phát N tím tuyến tính – 5mg/ từ nguôn ml peptide protein - sử dụng đường chuẩn độ với BSA protein mẫu Lowry - Cu2+ mơi - Tính chun biệt - Rất nhạy cảm với trường kiềm tạo phức cao, nhanh đơn thay đổi pH hợp với pro, cu2+ xúc giản (~1.5 giờ) - Màu dễ bị biến đổi tác oxi hố nhóm - Rất nhạy: 20-100 loại protein phenol tyrosine µg (gấp 50-100 lần khác (nhiều tryptophan so với Biuret, 10-20 so với Biuret) - Bicinchoninic acid Ultraciolet Bradford thuốc thử Folin tạo lần so với UV 280 - Có nhiều hợp chất màu xanh 750nm nm gây ảnh hưởng: sucrose,lipid, đường khử,hexoamine, amino sulfate 2+ + - Pro khử cu cu - Mức độ nhạy tương • Màu khơng bền theo môi trường đương với Lowry thời gian nên cần kiềm Cu tạo phức Phương pháp kiểm soát tốt thời gian hợp với BCA có màu micro-BCA phân tích để đo A tím 562nm nâng độ nhạy cao • Đường khử ảnh (0,5 – 10 mg) hưởng kết nhiều - Đơn giản, cần so với phương bước trộn hỗn pháp Lowry hợp • Nồng độ - Thuốc thử BCA ammonium sulfate bền thuốc thử cao gây ảnh Lowry hưởng - Các chất tẩy rữa • Mật độ quang không muối đệm không ảnh tỉ lệ tuyến tính với hưởng phản ứng nồng độ protein - pro có amino acid - Nhanh nhạy • Ảnh hưởng chứa nhân thơm cảm (gấp nhiều lần hợp chất khác hấp thụ tốt 280nm so với Biuret) hấp thụ UV: Nucleic như: tryptophan, • Cần 100 àg acid cng hp th tyrosine protein ã Khơng ảnh bước sóng 280nm - sai số % nhân hưởng • Các amino acid thơm pro thay ammonium sulfate tryptophan tyrosine đổi muối đệm thực tế có hàm khác lượng biến đổi nhỏ • Phương pháp phân thực phẩm tích khơng phá hủy • Dung dịch cần phải mẫu, thích hợp ứng sạch, không dụng detector màu sắc ký Trong mơi trường • Nhanh (~ phút) • Các chất tẩy rữa acid, pro mang điện • Tính lập lại cao dung mơi hữu có tích gắn kết với • Độ nhạy cao, gấp thể gây ảnh hưởng coomanssie brilliont nhiều lần so với màu blue G250, từ màu đỏ phương pháp Lowry • Phức hợp Proteinlợt 465nm sang xanh • Khơng bị ảnh thuốc nhuộm lợt 595nm hưởng ion gắn kết vào cuvette dương K+ , N+ thạch anh Mg2+ • Màu biến đổi theo ammonia sulfate loại protein nên phải • Khơng bị ảnh chọn protein chuẩn độ hưởng cẩn thận polyphenols carbohydrate sucrose • Đo protein hay peptide với phân tử lượng >4000 dalton Nihydrin Các amino acid tự Nhanh so với - diện phần bị nung nóng Kjeldanl nhỏ amini acid, peptit, dung dịch đệm amine Sẽ đánh giá Ph 5,5 Thì phản ứng sai thành phần pro với ninhydrin tạo hợp - độ thấp chất màu xanh lam 570nm Nhuộm màu Mấu pro trộn với - đơn giản, nhanh - ảnh hưởng ion âm lượng dư chất yếu tố: nhiệt độ, thành nhuộm biết trước Ph phần phi pro, hệ thống thấp, nhóm bazo điện, chất lượng pro pro mang điện tích dương gắn kết tuyên tính với điện tích âm chất nhuộm tạo kết tủa Phẫn chất nhuộm thừa xác định cách đo màu 470nm 12) Trong phương pháp nhuộm màu ion âm, mẫu với hàm lượng protein cao có kết qua đo mật đo quang cao hay thấp Giải thích - kết đo A thấp Vì pro nhiều liên kết với thuốc nhuộm tạo nhiều kết tủa Phần thuốc nhuộm thừa ít, màu nhạt đó, kết đo A thấp 13) Người ta cần so sánh mẫu có chứa lipid Đối với tính chất bên đây, tên phép kiểm tra dùng để lấy thơng tin mong muốn • Mức độ chưa bão hòa: số iod, quang phổ tử ngoại • Dự báo tính nhạy cảm với oxy hóa: schaal over test, AOM • Xác định tình trạng thiu bị oxy hóa: số peroxide • Khối lượng phân tử dầu trung bình: số xà phịng hố 14) Việc phân tích mẫu dầu cho kết sau Trong trường hợp, kết cho biết điều tính chất mẫu? Hãy mô tả cách ngắn gọn nguyên tắc đo phương pháp a) Chỉ số xà phòng cao / thấp acid béo nhiều hay chuỗi ngắn hay dài khối lượng phân tử trung bình lớn hay nhỏ - Cho 1g chất béo + phenolphtalein + m gam KOH dư n gam Chuẩn độ KOH dư acid tìm n gam lượng KOH phản ứng m-n gam tính số xà phịng b) Chỉ số iod thấp nối đơi mức độ bão hồ thấp - Dựa vào khả acid béo khơng bão hồ kết hợp nguyên tử halogen vào nối đôi Cho chất béo tác dụng lượng thừa halogen ta xác định lượng tính số iod c) Chỉ số TBA cao: mức độ oxi hoá cao d) Chỉ số acid thấp: acid béo tự Dùng KOH để trung hoà acid béo tự 1g chất béo phenolphtalein màu đỏ hồng bền e) Thời gian đo phương pháp oxy hoạt hóa dài số cao sản phẩm bền mùi vị bị oxi hố - Xác định thời gian cần thiết lập đạt số peroxide xác định ( thường 100) điều kiện thí nghiệm 980C, thổi oxy vào mẫu 15) Chỉ số peroxide, số TBA giá trị đo nối đơi nối ba liên hợp cho biết tính chất mẫu lipid Các kết cho ta biết điều mẫu lipid Phân biệt phương pháp kiểm tra dựa vào tảng hóa học phép đo sử dụng - Chỉ số peroxide: đánh giá mức độ oxi hoá mẫu Chỉ số peroxid cao q trình oxi hố cao mẫu dễ bị oxhi hoá - TBA, nối đơi – ba liên hợp : đánh giá tình trạng mẫu bị oxi hố nhiều Chỉ số peroxide Nối đôi, nối ba liên hợp TBA - số g iod giải phóng - đo giai đoạn đầu trình - đo malonaldehyde ( peroxide có 100g oxh nhiều q trình oxi hố mẫu - nối đơi liên hợp đo 233nm cao) - khơng khí, acid béo - nối ba liên hợp đo 268nm - Malonaldehyde phản ứng chất béo đặc biệt acid - đo vùng quang phổ tử với TBA tạo hợp chất có màu béo khơng bão bị oxi ngoại thu kiện quan đo quang phổ tử ngoại hoá phần tạo peroxide gây phổ tương quan A khả kiến tượng ôi thiu bước sóng - A lứn sản phẩm bị - lượng iod giải phóng - A lớn nối đơi, nối oxi hố nhiều chuẩn độ dung dịch ba liên hợp nhiều Na2S2O3 16) Hãy kể tên phương pháp phân tích sử dụng nhằm xác định ảnh hưởng loại chất chống oxy hóa cho mẫu dầu ăn Đo số peroxide mẫu dầu cs chất chống oxi hố Đo TBA, nối đơi, nối ba liên hợp Xác định hợp chất hữu bay 17) Giải thích điểm giống khác biệt phương pháp sau mặt nguyên lý đo: Giống Khác DNS Ferricyanur Schaffer – harmann Somogyinelson bertrand nguyên lí đo để định lượng đường khử Đường + thuốc thử hc có màu đo 540nm Đo quang phổ vùng khả kiến Lập đường chuẩn glucose với nồng độ khác Đường khử khử Fe3+ Fe2+ có màu xanh dương đo quang phổ khả kiến 690nm Đường khứ Cu2+ Cu+ Cu+ + I- CuI kết tủa Đường khử nhiều Cu+ nhiều CuI kết tủa nhiều I thừa I2 tạo thành với I thừa I2 chuẩn độ Na2S2O3 + hồ tinh bột Đường khử khử Cu2+ Cu+ Cu+ khử hợp chất arsenomoly bdate tạo phức hợp chất màu đo 520nm Đường khử Cu2+ Cu+ (Cu2O) Cu+ + Fe3+ Fe2+ + Cu2+ Fe2+ + KmnO4 Fe3+ Vml KmnO4 khử Fe3+ Fe2+ định lượng Cu+ định lượng Cu2+ định lượng đường khử 18) Năng lượng phân tử khác biệt so với lượng nguyên tử? Năng lượng electron: phụ thuộc vào phân bố e Biến thiên số hạng gắn liền với chuyển e từ orbitan phân tử đến obitan phân tử Năng lượng phân tử = 19) Hấp thụ phân tử vùng tử ngoại khả kiến (UV-Vis) liên quan đến chuyển hóa loại mức lượng nào? - Năng lượng điện từ 20) Hấp thụ phân tử vùng hồng ngoại (IR) liên quan đến chuyển hóa loại mức lượng nào? - Năng lượng dao động 21) Trong quang phổ huỳnh quang, bước sóng tia phát xạ dài so với bước sóng tia sử dụng để kích thích mẫu phân tích? - Bước sóng tia phát xạ lớn bước sóng tia kích thích Vì phân tử hấp thu lượng thấp bị kích thích chuyển lên mức lượng cao Khi đường trở bước sóng thấp phân tử phát xạ tia huỳnh quang lượng nhiệt độ đó, lượng hấp thụ lớn lượng phát quang 22) Tại người ta thường đo sử dụng giá trị mật độ quang độ truyền suốt để định lượng cấu tử phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến (UVVis)? Người ta thường đo mật độ quang A độ truyền suốt T tính tốn theo T đòi hỏi tỉ mỉ, chi tiết kết phân tích dễ sai lệch ( chẳng hạn cần có vân tay cuvette làm kết đo sai lệch lớn, ) Còn dùng mật độ quang A đơn giản hơn, thuận tiện sai số thấp nhiều T = I/I0 – 10-abc Đại lượng T không thuân tiện cho việc biểu diễn qua C ( có dạng luỹ thừa đường cong ) T không tỉ lệ tuyến tính với nồng độ C Để tiện cho việc tính tốn, phân tích người ta chuyển thành lgT = -abc => -lgT = abc = A Với A: mật độ quang Đo độ hấp thụ cấu tử chùm sáng đơn sắc chiếu qua, tỷ lệ tuyến tính với nồng độ C Sử dụng giá trị A tiện để định lượng cấu tử mẫu 23) Hãy cho biết ngun nhân dẫn đến tượng đường chuẩn độ mật độ quang nồng độ khơng tuyến tính ảnh hưởng cấu tử lạ: - cấu tử lạ cation: tác dụng với thuốc thử tạo hợp chất màu hấp thụ quang làm sai lệch kết đo phía dương - Cấu tử lạ anion: phản ứng với kim loại M cần phân tích, làm cho phức màu MX hình thành khơng hồn tồn độ anion lớn phức khơng hình thành Sự phụ thuộc A =f(C) Khi nồng độ q lỗng q đặc đồ thị hàm số A = f(C) bị khác thường bị uốn cong Dựa vào phổ hấp thụ - Phổ hấp thụ dung dịch chất hấp thụ xạ điện tử nồng độ khác ( điều kiện pH, dung mơi, thành phần dung dịch…) có khác bước sóng lớn Khơng tn theo định luật Beer ảnh hưởng pH ảnh hưởng hiệu ứng liên hợp - mơi trường có số điện môi thấp thường xảy phản ứng liên hợp làm giảm nồng độ chất hấp thụ xạ điện tử dùng xạ điện từ không đơn sắc ánh sáng không đơn sắc chiếu qua chất hấp thụ quang, có nghĩa dịng sáng tói có nhiều tia sáng với bước sóng khác làm tỷ lệ hấp thụ không đồng Kết đường phụ thuộc A=f(c) bị lệch phía âm 24) Hãy cho biết tiêu chuẩn để lựa chọn bước sóng thích hợp mà đo mật độ quang mẫu Tại lựa chọn có vai trị quang trọng? - Cấu tử: chọn bước sóng mà cấu tử hấp thụ tối ưu nhất, tín hiệu hấp thụ cao kết xác - Dung mơi: bước sóng khơng bị dung môi hấp thụ, bị dung môi hấp thụ tín hiệu nhiễu, dẫn đến sai lệch kết đo mật độ quang - Cuvette : bước sóng khơng bị cuvette hấp thụ 25) Khi người ta chỉnh bước sóng để đo mẫu máy đo quang phổ phận bên máy thực tế hiệu chỉnh Bộ phận hoạt động chỉnh bước song người ta sử dụng kết mật độ quang đọc máy để xác định nồng độ mẫu - Bộ phận hiệu chỉnh: phận tách sóng ( vĩ nhiễu xạ) - Vĩ nhiễu xạ miếng thuỷ tinh có khắc nhiều vạch liền nhau, số lượng vạch phụ thuộc vào xạ Tuỳ khoảng cách d mà ánh sáng tán sắc khác nên ta chỉnh bước sóng thích hợp qua khe hẹp - Khi ta chỉnh bước sóng lựa bước sóng tối ưu nên cấu tử hấp thụ nhiều nhất, tốt - Do đó, ta đo mật độ quang A xác, từ ta định lượng mẫu 26) Hãy cho biết điểm giống khác biệt mặt thiết bị nguyên lý máy đo quang phổ tử ngoại khả kiến (UV-Vis) quang phổ huỳnh quang Ưu điểm quang phổ huỳnh quang so với UV-Vis UV -Vis Huỳnh quang Thiết bị Giống Gồm phận: Nguồn sóng, nguồn điện, phận tách sóng mẫu, detector, phân truy xuất Khác Có thêm phận tách sóng nối dectector mẫu: chọn bước sóng lớn để đo phổ phát xạ rộng Ngun lí Giống Ánh sáng đa sắc qua phận tách sóng phân thành ánh sáng đơn sắc Sau qua khe hẹp chọn bước sóng thích hợp chiếu qua mẫu Khác mẫu hấp Các phân tử chất cần phân tích hấp thụ thụ bước sóng lượng xạ điện từ, bị kích thích chuyển lên tương thích, mức lượng cao Khi trở mức ghi thành tín lượng thấp, phát xạ phổ huỳnh quang nguyên hiệu dạng phổ tử đặc trưng cho nguyên tố cần xác định Bộ phận qua detector tách sóng chọn bước sóng huỳnh quang thích hợp, xử lí truy xạ huỳnh quang chuyển tói detetor vào xuất ngoại phân ghi phổ huỳnh quang nguyên tử Ưu điểm huỳnh quan với UV – Vis Có chọn lọc bước sóng UV – Vis Chỉ bước sóng thích hợp nhận bước sóng kích thích phát phát xạ Độ nhạy, độ chọn lọc cao, khoảng nồng độ cho phụ thuộc tuyến tính, cho phép xác định nhiều nguyên tố với độ phát thấp, nhanh Độ nhạy cao kết hợp ưu điểm: đo trực tiếp cường độ phát huỳnh quang nguyên tử dùng thêm nguồn kích thích phụ Xác định đồng thời nhiều nguyên tố mẫu phân tích 27) Mơ tả thành phần thiết yếu máy đo quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FTIR) chức năng chúng So sánh hoạt động FTIR với máy đo hồng ngoại tán sắc thành phần thiết yếu chức phận máy đo quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier: nguồn sáng: tạo tia hồng ngoại Giao thoa kế: gồm gương cố định, gương di động phận chia chùm sáng Nhiệm vụ phân tách thành ánh sáng đơn sắc chiếu qua mẫu FTIR Tán sắc Bức xạ hồng ngoại khỏi giao thoa kế ánh sáng từ nguồn sáng - chùm sáng đa qua mẫu đến detector Detecter ghi sắc , phân tách thành ánh sáng đơn sắc nhận biến đổi cường độ xạ theo quãng ( hệ thống tách gồm lăng kính, cấu tử đường d mà gương di động thực chuyển tín khe vào khe ra) tới mẫu, mẫu hấp thụ hiệu dạng điện v theo quãng đường Xây phần, phần tới phận tín hiệu dectector dựng hàm cường độ xạ i nghịch dấu với Tại detector, tín hiệu ánh sáng bị biến đổi qng đường thành tín hiệu điện sau ghi hình vẽ hình 28) Ưu điểm máy đo hồng ngoại FTIR so với máy đo hồng ngoại tán sắc Dùng giao thoa kế làm rộng khe sáng, lượng ánh sáng thu giao thoa kế lớn nhiều Giảm nhiễu, làm tăng tính hiệu Sử dụng computer nên đo phổ tự động hoá mức độ cao Phổ lưu trữ đối chiếu với phổ chất thư viện máy Khơng phải xử lí phá mẫu trước phân tích 29) Trình bày so sánh loại detector (đầu dò hay cảm biến) sử dụng sắc ký khí Đầu dị Detector dẫn nhiệt Detector cộng kết điện tử ( ECD) Dựa vào mức độ ion hoá Dựa khả làm nguội Dựa vào độ âm điện các cấu tử dạng dây tóc điện trở khí mang cấu tử Các cẩu tử bị hút lửa nhiệt độ cao đặt phía khí mang bị từ trường Các ion bị hút bắn tia beta vào tách làm điện cực phần ion dương ion âm Mẫu bị phá huỷ Không bị phá mẫu Mẫu bị phá huỷ Độ nhạy cao Độ nhạy không cao Độ nhạy cao 30) Hãy cho biết sai số mắc phải phương pháp phân tích thuộc vào loại sai số Dự đốn kết phương pháp phân tích độ độ xác a) Sử dụng pipett ln hút lượng 0,96 ml thay 1,00 ml - sai số hệ thống kết khác biệt với giá trị thực khoảng 0,04ml => xác không đùng b) Thuốc thử không cho vào ống nghiệm trước đo mật độ quang phân tích protein - sai số thơ ( sai động tác kĩ thuật phân tích) Kết phân tích sai số thường bị phân tán không gần với giá trị mong đợi khơng khơng xác c) Cơ chất không cho vào ống nghiệm phương pháp đánh giá enzyme