ĐẶT VẤN ĐỀ Thiết kế cấu trúc dựa trên mục tiêu phân tử đang trở thành hướng đi chủ yếu trong nghiên cứu thuốc điều trị ung thư. Trong số các mục tiêu phân tử tiềm năng, enzym histon deacetylase (HDAC) thu hút sự quan tâm của nhiều nhà khoa học do chúng có vai trò vô cùng quan trọng trong quá trình hình thành và phát triển tế bào ung thư. Nhiều hợp chất mới đã được phát hiện và nghiên cứu hoạt tính ức chế HDAC, trong đó nổi bật nhất là nhóm các dẫn xuất của acid hydroxamic, với bốn thuốc đã được cấp phép điều trị gồm vorinostat, belinostat, panobinostat và givinostat. Các dẫn chất hydroxamic có chung cấu trúc khung, bao gồm ba phần: (1) nhóm acid hydroxamic gắn kết với ion kẽm tại trung tâm hoạt động của các enzym HDAC, (2) cầu nối là mạch hydrocarbon thân dầu, và (3) nhóm nhận diện bề mặt là nhân phenyl và/ hoặc dị vòng, gắn với cầu nối qua liên kết amid hoặc amin, có khả năng tương tác với các acid amin tại bề mặt của enzym. Các kết quả nghiên cứu đã công bố cho thấy phần nhận diện bề mặt là các cấu trúc dị vòng thơm giàu electron như benzothiazol, arylthiadiazol, indolin, oxoindolin, ... có tiềm năng mang lại hiệu quả ức chế HDAC và độc tính cao đối với tế bào ung thư. Quinazolin là một cấu trúc dị vòng như vậy. Khung quinazolin có đặc điểm giàu điện tử, rất phù hợp với vai trò là nhóm nhận diện bề mặt. Nó có mặt trong nhiều hợp chất mang hoạt tính sinh học đa dạng, như ức chế vi nấm (albaconazol), virus (luotonin A), kháng ung thư (raltitrexed) và chống viêm (rutaecarpin). Cấu trúc này đã được ứng dụng trong thiết kế kháng sinh mới, các thuốc chống viêm, giảm đau, thuốc tác động lên hệ thần kinh hoặc tế bào ung thư. Nhiều dẫn chất quinazolin đã được chứng minh là có tác dụng kháng tế bào ung thư theo các cơ chế khác nhau thông qua ức chế tổng hợp thymidylat, hệ enzym chỉnh sửa ADN, thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì, tubulin polymerase hay tyrosin kinase. Tuy nhiên, hiện chưa có nhiều nghiên cứu khai thác khung quinazolin trong thiết kế chất ức chế HDAC mới. Từ những phân tích nêu trên, luận án “Thiết kế và tổng hợp các acid hydroxamic mang khung quinazolin hướng tác dụng kháng tế bào ung thư” đã được thực hiện với hai mục tiêu chính như sau: (1) Thiết kế và tổng hợp được khoảng 50 acid hydroxamic mới mang khung quinazolin hướng ức chế enzym HDAC và tác dụng kháng tế bào ung thư. (2) Đánh giá tác dụng ức chế enzym HDAC và tác dụng kháng tế bào ung thư của các chất tổng hợp được.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN THANH HIẾU THIẾT KẾ VÀ TỔNG HỢP CÁC ACID HYDROXAMIC MANG KHUNG QUINAZOLIN HƯỚNG TÁC DỤNG KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2023 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 HISTON DEACETYLASE VÀ CÁC CHẤT ỨC CHẾ HISTON DEACETYLASE 1.1.1 Histon deacetylase vai trò ung thư 1.1.2 Các chất ức chế histon deacetylase 1.2 QUINAZOLIN VÀ DẪN CHẤT 1.2.1 Cấu trúc, tính chất 1.2.2 Hoạt tính sinh học 1.2.3 Các phương pháp tổng hợp 1.3 PROTEIN DOCKING VÀ ỨNG DỤNG TRONG THIẾT KẾ THUỐC 1.3.1 Giới thiệu protein docking ứng dụng thiết kế thuốc 1.3.2 Qui trình docking Chương NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU 2.1.1 Nguyên liệu cho nghiên cứu docking, dự đoán dược động học - độc tính 2.1.2 Nguyên liệu sử dụng cho tổng hợp hóa học 2.1.3 Nguyên liệu sử dụng cho thử hoạt tính sinh học 2.2 TRANG THIẾT BỊ 2.2.1 Trang thiết bị cho nghiên cứu docking, dự đoán dược động học – độc tính 2.2.2 Trang thiết bị cho tổng hợp hóa học xác định cấu trúc 2.2.3 Trang thiết bị cho thử hoạt tính sinh học 2 19 19 20 25 41 41 42 43 43 43 43 44 44 44 44 45 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3.1 Nội dung nghiên cứu 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 KẾT QUẢ THIẾT KẾ CẤU TRÚC, DỰ ĐỐN TƯƠNG TÁC, TỔNG HỢP HĨA HỌC VÀ KHẲNG ĐỊNH CẤU TRÚC 3.1.1 Kết thiết kế cấu trúc dự đoán tương tác chất với HDAC2 3.1.2 Kết tổng hợp hóa học 3.1.3 Kết phân tích liệu phổ 3.2 KẾT QUẢ THỬ TÁC DỤNG ỨC CHẾ ENZYM, ĐỘC TÍNH TẾ BÀO VÀ DỰ ĐỐN MỘT SỐ THƠNG SỐ DƯỢC ĐỘNG HỌC – ĐỘC TÍNH 3.2.1 Kết thử tác dụng ức chế enzym gây độc tế bào 3.2.2 Kết dự đoán số thơng số dược động học độc tính Chương BÀN LUẬN 4.1 BÀN LUẬN VỀ TỔNG HỢP HÓA HỌC VÀ KHẲNG ĐỊNH CẤU TRÚC 4.1.1 Tổng hợp hóa học 4.1.2 Khẳng định cấu trúc 4.2 BÀN LUẬN VỀ LIÊN QUAN CẤU TRÚC – TÁC DỤNG 4.2.1 Hoạt tính sinh học dãy chất Ia-h, IIa-d IIIa-d 4.2.2 Hoạt tính sinh học dãy chất IVa-i, Va-i VIa-c 4.2.3 Hoạt tính sinh học dãy chất VIIa-i VIIIa-i 4.2.4 Liên quan cấu trúc – tác dụng dẫn chất 4.3 BÀN LUẬN VỀ CÁC HỢP CHẤT TIỀM NĂNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 4.3.1 Bàn luận hợp chất tiềm 4.3.2 Bàn luận phương pháp nghiên cứu KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC 45 45 46 55 55 55 60 83 102 102 104 105 105 105 111 121 121 126 130 133 142 142 145 148 13 C-NMR : H-NMR : Ac2O ACC AcOH ADN ALL AML ARN Asp BLCA BRCA CD CESC : : : : : : : : : : : : CLL CREB : : CTCL Cys DBU DCM DHFR DLBC : : : : : : DMF DMSO EGFR : : : FDA : DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Carbon - 13 magnetic resonance spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13) Proton magnetic resonance spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) Anhydrit acetic Adrenocortical carcinoma (Ung thư biểu mô vỏ thượng thận) Acid acetic Acid deoxyribonucleic Acute lymphatic leukemia (Ung thư bạch cầu cấp tính) Acute myelogenous leukemia (Ung thư bạch cầu tuỷ bào cấp tính) Acid ribonucleic Acid aspartic Bladder urothelial carcinoma (Ung thư biểu mô bàng quang) Breast invasive carcinoma (Ung thư biểu mô xâm lấn vú) Catalytic domain (Vùng xúc tác) Cervical squamous cell carcinoma and endocervical adenocarcinoma (Ung thư biểu mô tế bào vảy cổ tử cung ung thư biểu mô tuyến cổ tử cung) Chronic lymphatic leukemia (Ung thư bạch cầu mãn tính) cAMP response element-binding protein (Protein liên kết với phần tử đáp ứng cAMP) Cutaneous T-cell lymphoma (U lympho tế bào T da) Cystein 1,8-Diazabicyclo(5.4.0)undec-7-en Dicloromethan Dihydrofolat reductase (Enzym khử dihydrofolat) Lymphoid neoplasm diffuse large B-cell lymphoma (Ung thư hạch bạch huyết khuếch tán u lympho tế bào B lớn) Dimethylformamid Dimethyl sulfoxid The epidermal growth factor receptor (Receptor yếu tố tăng trưởng biểu bì) U.S Food and Drug Administration (Cơ quan quản lý thực phẩm dược phẩm Mỹ) GBM Glu Gly HAT HCC HDAC HDACi His HL HR-MS : : : : : : : : : : IC50 : IR Isozym J Leu LGG LUAD LUSC Lys MDS MeCN MeOH Met MM MS NCI-H23 NSCLC : : : : : : : : : : : : : : : : PC3 PDB Phe Pro PyBOP : : : : : Glioblastoma multiforme (U nguyên bào xốp đa dạng) Acid glutamic Glycin Histone acetyltransferase (Enzym histon acetyltransferase) Hepatocellular carcinoma (Ung thư biểu mô tế bào gan) Histone deacetylase (Enzym histon deacetylase) Histone deacetylase inhibitors (Các chất có tác dụng ức chế HDAC) Histidin Hodgkin lymphoma (Ung thư hạch Hodgkin) High resolutioan mass spectroscopy (Phổ khối lượng có độ phân giải cao) Half-maximal inhibitory concentration (Nồng độ ức chế 50 %, nồng độ ức chế tối đa nửa) Infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại) Isoforms of HDAC (Dạng enzym HDAC) Hằng số tương tác (Hz) Leucin Brain lower grade glioma (U thần kinh đệm cấp não) Lung adenocarcinoma (Ung thư biểu mô tuyến phổi) Lung squamous cell carcinoma (Ung thư biểu mô tế bào vảy phổi) Lysin Myelodysplasia syndrome (Hội chứng loạn sản tuỷ) Acetonitril Methanol Methionin Multiple myeloma (Bệnh đa u tủy) Mass spectroscopy (Phổ khối lượng) Dòng tế bào ung thư phổi người thể tế bào không nhỏ Non-small cell lung carcinoma (Ung thư biểu mơ phổi khơng phải tế bào nhỏ) Dịng tế bào ung thư tiền liệt tuyến người Protein data bank (Ngân hàng liệu protein) Phenylalanin Prolin Benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophospho hexafluorophosphat Reflux SAHA Ser SIRTs STAD SW620 TGCT THF Thr TMS Try TSA Tyr UCEC UCS Val (ppm) Hồi lưu Acid suberoylanilid hydroxamic Serin Sirtuins (Các protein điều hoà chuỗi thông tin 2) Stomach adenocarcinoma (Ung thư biểu mô tuyến dày ) Dòng tế bào ung thư đại tràng người Testicular germ cell tumors (U tế bào mầm tinh hoàn) Tetrahydrofuran Threonin Tetramethylsilan Tryptophan Trichostatin A Tyrosin Uterine corpus endometrial carcinoma (Ung thư biểu mô nội mạc tử cung) : Uterine carcinosarcoma (Ung thư biểu mô sợi tử cung) : Valin : Độ chuyển dịch hóa học (phần triệu) : : : : : : : : : : : : : : DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các nguyên liệu sử dụng tổng hợp hóa học Bảng 2.2 Tỷ lệ thành phần dung dịch định lượng tác dụng ức chế HDAC Bảng 3.1 Năng lượng liên kết với HDAC2 chất Ia-h, IIa-d IIIa-d Bảng 3.2 Năng lượng liên kết với HDAC2 chất IVa-i, Va-i VIa-c Bảng 3.3 Năng lượng liên kết với HDAC2 chất VIIa-i VIIIa-i Bảng 3.4 Tác dụng ức chế HDAC gây độc tế bào dẫn chất Bảng 4.1 Kết ức chế HDAC gây độc tế bào chất Ia-h, IIa-d IIIa-d Bảng 4.2 Kết ức chế HDAC gây độc tế bào IVa-i, Va-i VIa-c Bảng 4.3 Kết ức chế HDAC gây độc tế bào chất VIIa-i VIIIa-i Bảng 4.4 Năng lượng liên kết với HDAC6 chất Ia-h, IIa-d, IIIa-d VIIIa-i Bảng 4.5 Tóm tắt liên quan cấu trúc – tác dụng dẫn chất Bảng 4.6 Kết dự đoán số thơng số lý hóa, thơng số dược động học độc tính chất VIIc, VIIg, VIIIc VIIIh 43 51 57 59 60 102 122 127 131 140 142 143 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1 Phản ứng oxy hóa quinazolin (a) phản ứng khử hóa quinazolin (b) Sơ đồ 1.2 Phản ứng nhân/thế điện tử quinazolin Sơ đồ 1.3 Phản ứng alkyl hóa quinazolin Sơ đồ 1.4 Phản ứng Niementowski Sơ đồ 1.5 Phản ứng Niementowski dùng vi sóng (theo Besson T.) Sơ đồ 1.6 Phản ứng Niementowski dùng vi sóng (theo Vanelle P.) Sơ đồ 1.7 Phản ứng Niementowski dùng ion lỏng (theo Kathiravan M K.) Sơ đồ 1.8 Tổng hợp piriqualon (theo El-Bayouki K A M.) Sơ đồ 1.9 Tổng hợp quinazolinon-PBD (theo Farag A.A.) Sơ đồ 1.10 Tổng hợp dẫn chất quinazolinon có sử dụng vi sóng (theo Liu J F.) Sơ đồ 1.11 Tổng hợp dẫn chất 2,3-diaryl-4(3H)-quinazolinon (theo Giridhar R.) Sơ đồ 1.12 Tổng hợp dẫn chất C4 quinazolinon (theo Boyapati S.) Sơ đồ 1.13 Tổng hợp dẫn chất N3 quinazolinon (theo Gupta D.) Sơ đồ 1.14 Tổng hợp dẫn chất 2,3 quinazolin-4(3H)-on Sơ đồ 1.15 Phản ứng ngưng tụ đóng vịng từ acid anthranilic, ortho ester (hoặc acid formic) amin Sơ đồ 1.16 Phản ứng oxy hóa đóng vịng tạo quinazolinon (theo Bakavoli M.) Sơ đồ 1.17 Tổng hợp deoxyvasicinon rutaecarpin Sơ đồ 1.18 Phản ứng oxy hóa đóng vịng có xúc tác Darko KB Sơ đồ 1.19 Tổng hợp 5-arylpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7(6H)-on có xúc tác InCl3 Sơ đồ 1.20 Tổng hợp dẫn chất quinazolinon (theo Shariff M.) Sơ đồ 1.21 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Ir (theo Zhou J.) Sơ đồ 1.22 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Pd (theo YokoyamaY.) Sơ đồ 1.23 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Fe (theo Deng G J.) Sơ đồ 1.24 Tổng hợp (-)-benzomalvin A phản ứng aza-Wittig Sơ đồ 1.25 Phản ứng aza-Wittig có xúc tác Cu(I) (theo Molina P.) Sơ đồ 1.26 Phản ứng aza-Wittig tạo dẫn chất amin quinazolinon (theo Wu M H.) Sơ đồ 1.27 Phản ứng aza-Wittig sử dụng kỹ thuật tổng hợp pha rắn (theo Ding M.W.) Sơ đồ 1.28 Tổng hợp toàn phần luotonin A (theo Malacria M.) Sơ đồ 1.29 Tổng hợp quinazolinon chuỗi phản ứng gốc (theo Chiba S.) Sơ đồ 1.30 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Cu (theo Fu H.) Sơ đồ 1.31 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Cu (theo Ma D.) Sơ đồ 1.32 Tổng hợp quinazolinon khơng có xúc tác kim loại (theo Iqbal M A.) Sơ đồ 1.33 Tổng hợp quinazolinon có xúc tác Pd (theo Li B.) 20 20 20 26 26 26 27 27 28 28 29 29 29 30 30 31 31 32 32 32 33 33 33 34 34 35 35 35 36 36 37 37 37 Sơ đồ 1.34 Carbonyl hóa có xúc tác Pd để tổng hợp quinazolinon (theo Alper H.) Sơ đồ 1.35 Carboxamid hóa có xúc tác Pd để tổng hợp quinazolinon (theo Zhu Q.) Sơ đồ 1.36 Carboxamid hóa có xúc tác Pd để tổng hợp quinazolinon (theo Willis M.C.) Sơ đồ 1.37 Phản ứng carbonyl hóa cấu tử có xúc tác Pd (theo Wu X.F.) Sơ đồ 1.38 Phản ứng carbonyl hóa cấu tử có xúc tác Pd (theo Wu X.F.) Sơ đồ 1.39 Tổng hợp quinazolinon qua chất trung gian Vilsmeier (theo Soghra) Sơ đồ 1.40 Tổng hợp quinazolinon qua chất trung gian Vilsmeier (theo Shireen) Sơ đồ 1.41 Cơ chế phản ứng tổng hợp quinazolinon qua trung gian Vilsmeier Sơ đồ 1.42 Tổng hợp quinazolinon từ anhydrid isatoic Sơ đồ 2.1 Tóm tắt qui trình tổng hợp dãy I Sơ đồ 2.2 Tóm tắt qui trình tổng hợp dãy II Sơ đồ 2.3 Tóm tắt qui trình tổng hợp dãy VII Sơ đồ 3.1 Qui trình tổng hợp dãy chất Ia-h Sơ đồ 3.2 Qui trình tổng hợp dãy chất IIa-d Sơ đồ 3.3 Qui trình tổng hợp dãy chất IIIa-d Sơ đồ 3.4 Qui trình tổng hợp dãy chất IVa-i Va-i Sơ đồ 3.5 Qui trình tổng hợp dãy chất VIa-c Sơ đồ 3.6 Qui trình tổng hợp dãy chất VIIa-i Sơ đồ 3.7 Qui trình tổng hợp dãy chất VIIIa-i Sơ đồ 4.1 Cơ chế phản ứng Niementowski ngưng tụ tạo vòng quinazolin-4(3H)-on Sơ đồ 4.2 Cơ chế phản ứng tạo vòng 2-methylquinazolin-4(3H)-on qua trung gian benzoxazinon Sơ đồ 4.3 Cơ chế phản ứng N-alkyl hóa dẫn chất quinazolin-4(3H)-on Sơ đồ 4.4 Cơ chế phản ứng C4-amin hóa khung quinazolin-4(3H)-on Sơ đồ 4.5 Cơ chế phản ứng N-acyl hóa tạo acid hydroxamic 38 38 38 39 39 39 40 40 40 48 48 49 61 64 67 69 75 76 80 105 106 107 109 110 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cấu trúc vi tinh thể HDAC nhóm I HDAC6 Hình 1.2 Cơ chế xúc tác phản ứng thủy phân acetyl-Lysin HDAC Hình 1.3 Ảnh hưởng HDAC đến chu trình phát triển tế bào ung thư Hình 1.4 Cấu trúc ba phần chất ức chế HDAC Hình 1.5 Cấu trúc số chất ức chế HDAC phê duyệt cho điều trị thử nghiệm lâm sàng Hình 1.6.A Các chất ức chế chọn lọc HDAC1-2 cấu trúc benzamid Hình 1.6 B Các chất ức chế chọn lọc HDAC3 cấu trúc benzamid Hình 1.7 Tương tác SAHA với HDAC8 (A-C) vùng xúc tác HDAC3 (D) Hình 1.8 Cấu trúc tương tác 20 (PCI34051) với HDAC8 Hình 1.9 Các chất ức chế HDAC8 cấu trúc tetrahydroisoquinolin Hình 1.10 Các chất ức chế HDAC8 cấu trúc tripeptidomimetic sulfur Hình 1.11 Chất ức chế HDAC8 cấu trúc pyrazol Hình 1.12 Các chất ức chế HDAC8 cấu trúc vòng thơm dị vòng thơm Hình 1.13 Các chất ức chế HDAC8 cấu trúc triazol (theo Suzuki T Ingham O J.) Hình 1.14 Các chất ức chế HDAC8 cấu trúc O-aryl N-hydroxycinnamid Hình 1.15 Cấu trúc số chất ức chế HDAC6 Hình 1.16 Cấu trúc số khung quinazolin quinazolinon Hình 1.17 Cấu trúc raltitrexed (35) 2-(cinnamylthio)-6-(methyl/nitro)3-phenyl-2,3-dihydroquinazolin-4(1H)-on (36) Hình 1.18 Cấu trúc 2-((2-aminothiazol-5-yl)thio)-6-methyl-3phenylquinazolin-4(3H)-on (37) Hình 1.19 Cấu trúc dẫn chất pyrrolo[1,2-a]quinazolin-5(4H)-on Hình 1.20 Cấu trúc 2-(3-(4-(4-fluorophenyl)-3,6-dihydropyridin-1(2H)yl)propyl)-8-methylquinazolin-4(3H)-on (40) Hình 1.21 Cấu trúc dẫn chất 4-aminoquinazolin ức chế EGFR Hình 1.22 Cấu trúc dẫn chất 4- 6-alkoxy-4-aminoquinazolin Hình 1.23 Cấu trúc dẫn chất -halopropionamid vị trí quinazolinon Hình 1.24 Cấu trúc dẫn chất 2-(thiophen-2-yl)quinazolin-4(3H)-on Hình 1.25 Cấu trúc (E)-6-chloro-3-(pyrimidin-2-yl)-2-styrylquinazolin-4(3H)-on Hình 1.26 Cấu trúc 2-(3-methoxyphenyl)quinazolin-4(3H)-on Hình 1.27 Cấu trúc dẫn 2-phenyl-6-(pyrrolidin-1-yl)quinazolin-4(3H)-on Hình 1.28 Cấu trúc 2-(naphthalen-1-yl)-6-(pyrrolidin-1-yl)quinazolin-4(3H)-on Hình 1.29 Cấu trúc albaconazol 10 12 12 13 13 14 14 15 15 16 17 18 19 21 21 21 22 22 22 23 23 23 24 24 24 25 Phụ lục 6.259 Phổ IR chất VIIIf Phụ lục 6.260 Phổ MS (positive) chất VIIIf - 163 - Phụ lục 6.261 Phổ MS (negative) chất VIIIf Phụ lục 6.262 Phổ 1H-NMR chất VIIIf - 164 - Phụ lục 6.263 Phổ 13C-NMR chất VIIIf Phụ lục 6.264 Phổ IR chất VIIIg - 165 - Phụ lục 6.265 Phổ MS (positive) chất VIIIg Phụ lục 6.266 Phổ MS (negative) chất VIIIg - 166 - Phụ lục 6.267 Phổ 1H-NMR chất VIIIg Phụ lục 6.268 Phổ 13C-NMR chất VIIIg - 167 - Phụ lục 6.269 Phổ IR chất VIIIh Phụ lục 6.270 Phổ MS (positive) chất VIIIh - 168 - Phụ lục 6.271 Phổ MS (negative) chất VIIIh Phụ lục 6.272 Phổ 1H-NMR chất VIIIh - 169 - Phụ lục 6.273 Phổ 13C-NMR chất VIIIh Phụ lục 6.274 Phổ IR chất VIIIi - 170 - Phụ lục 6.275 Phổ MS (positive) chất VIIIi Phụ lục 6.276 Phổ MS (negative) chất VIIIi - 171 - Phụ lục 6.277 Phổ 1H-NMR chất VIIIi Phụ lục 6.278 Phổ 13C-NMR chất VIIIi - 172 - Phụ lục Kết thử hoạt tính ức chế HDAC độc tính tế bào dẫn chất Phụ lục 7.1 Kết thử hoạt tính ức chế HDAC độc tính tế bào dẫn chất dãy I-III - 173 - Phụ lục 7.2 Kết thử hoạt tính ức chế HDAC độc tính tế bào dẫn chất dãy IV-VI - 174 - Phụ lục 7.3 Kết thử hoạt tính ức chế HDAC độc tính tế bào dẫn chất dãy VII-VIII - 175 - Phụ lục Nồng độ ức chế HDAC độc tính tế bào dẫn chất so với SAHA Phụ lục 8.1 Nồng độ ức chế HDAC dẫn chất so với SAHA Chất (R=) -H Dãy I 1,78 Dãy II 5,17 Dãy III 0,96 Dãy IV 2,00 Dãy V 3,69 7-methyl 3,96 2,70 0,65 1,15 1,92 6-methyl 2,13 3,09 0,39 2,15 3,50 7-methoxy 4,39 1,08 6,7- 1,61 Dãy VI 3,15 Dãy VII 1,35 Dãy VIII 3,83 1,43 2,26 2,00 0,70 0,35 1,78 1,22 0,88 8,46 0,87 0,74 2,00 5,62 1,83 1,96 2,12 3,00 0,57 2,52 0,85 1,12 1,35 0,52 2,19 1,88 1,30 2,70 1,00 1,00 1,00 1,00 0,62 dimethoxy 7-fluoro 3,74 6-fluoro 6,52 6-Cloro 2,65 0,74 3,30 6-nitro SAHA 1,00 1,00 1,00 0,62 1,00 Ghi chú: Nồng độ ức chế HDAC tính theo tỉ lệ với nồng độ ức chế enzym chất đối chiếu dương tính SAHA (đơn vị tính: lần, SAHA = 1) - 176 - Phụ lục 8.2 Nồng độ gây độc tế bào dẫn chất so với SAHA Chất (R=) Dòng tế bào -H SW620 PC3 1,85 7-methyl Dãy I Dãy II SW620 PC3 1,96 NCIH23 1,82 1,00 1,30 1,54 1,54 6-methyl 1,05 0,82 0,72 7methoxy 6,7dimethoxy 7-fluoro 1,65 1,17 0,34 Dãy III SW620 PC3 1,00 NCIH23 1,24 0,54 0,16 0,28 0,38 0,41 0,29 0,23 Dãy IV SW620 PC3 0,37 NCIH23 0,47 0,08 0,06 NCIH23 0,12 0,23 0,27 0,32 0,05 0,04 0,05 0,31 0,27 0,37 0,04 0,03 0,03 1,42 0,16 0,14 0,17 0,27 0,21 0,44 0,34 0,39 0,69 0,64 0,59 0,39 0,33 0,42 6-fluoro 2,16 1,30 1,13 0,34 0,33 0,50 6-Cloro 0,45 0,24 0,41 0,07 0,14 0,06 0,37 0,47 0,42 1 0,23 0,26 0,21 0,21 0,22 0,29 6-nitro SAHA Chất (R=) Dòng tế bào -H Dãy V 1 1 Dãy VI SW620 PC3 0,32 0,26 NCIH23 0,35 7-methyl 0,32 0,31 0,37 6-methyl 0,31 0,29 0,34 7methoxy 6,7dimethoxy 7-fluoro 0,27 0,29 0,70 6-fluoro 1 Dãy VII SW620 PC3 0,33 0,49 SW620 PC3 0,34 NCIH23 0,44 0,39 0,52 NCIH23 0,94 0,14 0,21 0,27 0,39 0,50 0,55 0,09 0,05 0,16 0,10 0,08 0,17 0,34 0,33 0,34 0,63 0,45 0,19 0,84 0,68 0,84 0,94 1,76 2,19 1,50 1,99 2,65 0,55 0,27 0,32 0,61 0,77 0,76 1,04 1,07 1,54 0,22 0,08 0,12 0,18 0,19 0,25 0,35 0,44 0,55 6-Cloro 0,19 0,09 0,15 0,20 0,16 0,13 0,15 0,15 0,20 6-nitro 0,26 0,27 0,31 0,12 0,28 0,27 0,50 0,55 0,74 SAHA 1 1 1 0,19 0,16 NCIH23 0,28 Dãy VIII 0,13 SW620 PC3 0,31 1 Ghi chú: Nồng độ gây độc tế bào tính theo tỉ lệ với nồng độ gây độc tế bào chất đối chiếu dương tính SAHA (đơn vị tính: lần, SAHA = 1) - 177 -