Luận án tiến sĩ nghiên cứu đặc điểm và giá trị của các yếu tố tiên lượng tới kết quả của một số phác đồ điều trị đa u tủy xương

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HÀN VIẾT TRUNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM VÀ GIÁ TRỊ CỦA CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG TỚI KẾT QUẢ CỦA MỘT SỐ PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ ĐA U TỦY XƯƠNG TỪ 2015 - 2018 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI *** -HÀN VIẾT TRUNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM VÀ GIÁ TRỊ CỦA CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG TỚI KẾT QUẢ CỦA MỘT SỐ PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ ĐA U TỦY XƯƠNG TỪ 2015 - 2018 Chuyên ngành : Huyết học Truyền máu Mã số : 62.72.01.51 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS VŨ MINH PHƯƠNG HÀ NỘI LỜI CAM ĐOAN Tơi Hàn Viết Trung, nghiên cứu sinh khóa 34 Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Huyết học – Truyền máu, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS TS Vũ Minh Phương Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Người viết cam đoan Hàn Viết Trung CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN ÁN Từ viết tắt Tiếng Anh CAR-T Cell Chimeric Antigen Receptor T-cell CRAB CRP CS ĐUTX ECOG FDA FISH FLCr Hb HHTM HR IMWG ISS KĐU LBHT LBMP LBMPRT LBTT LDH MGUS Tiếng Việt Tế bào lympho T chứa thụ thể kháng nguyên dạng khảm Tổn thương quan đích ĐUTX C-Reactive Protein Protein C phản ứng Cộng Đa u tủy xương Eastern Cooperative Oncology Chỉ số tồn trạng theo nhóm hợp tác Group Performance Status ung thư học phía Đơng Food and Drug Administration Cục Quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ Fluorescence In Situ Kỹ thuật lai huỳnh quang chỗ Hybridization Free Light Chain Ratio Tỷ lệ chuỗi nhẹ tự Hemoglobin Huyết sắc tố Huyết học – Truyền máu Hazard ratio Tỷ suất ngẫu nhiên International Myeloma Hiệp hội Nghiên cứu Đa u tủy Working Group xương quốc tế International Stage System Hệ thống phân chia giai đoạn quốc tế Không đáp ứng Lui bệnh hoàn toàn Lui bệnh phần Lui bệnh phần tốt Lui bệnh tối thiểu Lactat Dehydrogenase Lactat Dehydrogenase Monoclonal gammopathy of Bệnh tăng đơn dòng undetermined significance gammaglobumin khơng điển hình MPI MPT MRI NCCN NB NK NLR NST OS PCLi PFS R-ISS SLTC SMM TGF-b TNF- a VAD VCD VD VEGF Myeloma prognostic index Nguy phối hợp đa yếu tố Phác đồ hóa chất Melphalan prednisolon thalidomide Magnetic Resonance Imaging Chụp cộng hưởng từ National comprehensive Mạng lưới Ung thư Quốc gia Mỹ cancer network Người bệnh Natural killer cell Tế bào diệt tự nhiên Neutrophil/Lymphocyte rate Tỷ lệ số lượng bạch cầu trung tính/số lượng lymphơ Nhiễm sắc thể Overal survival Thời gian sống thêm toàn Plasma Cell Labeling Index Chỉ số tăng sinh tích luỹ tế bào dịng tương bào bất thường tủy xương (tỷ lệ tế bào plasma pha S chu kỳ tế bào) Progession free survival Thời gian sống bệnh không tiến triển Revised International Stage Hệ thống phân chia giai đoạn quốc System tế sửa đổi Số lượng tiểu cầu Smouldering myeloma Đa u tủy xương thể tiềm tàng Transforming growth factor b Yếu tố tăng sinh chuyển dạng beta Tumor necrosis factor a Yếu tố hoại tử khối u alpha Bortezomib (Velcade) – Adriamycin – Dexamethasone Bortezomib (Velcade) – Cyclophosphamide – Dexamethasone Bortezomib (Velcade)Dexamethasone Vascular endothelial growth Yếu tố tăng trưởng nội mạch factor  VRD Phác hóa chất Bortezomib (Velcade) – Remicade (Lenalidomide) – Dexamethasone Phác hóa chất Bortezomib (Velcade) – Thalidomide – Dexamethasone VTD β2M β2 Microglobumin MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 Sơ lược lịch sử bệnh nguyên, bệnh sinh 1.1.1 Sơ lược lịch sử bệnh 1.1.2 Dịch tễ học 1.1.3 Sinh bệnh học đa u tủy xương 1.1.4 Sinh bệnh học tổn thương quan cuối 1.1.5 Tiêu chuẩn chẩn đoán xác định bệnh ĐUTX 13 1.1.6 Chẩn đoán phân biệt1 .14 1.2 Các yếu tố tiên lượng Đa u tủy xương 15 1.2.1 Các bất thường di truyền .15 1.2.2 Các yếu tố tiên lượng lâm sàng .20 1.2.3 Các yếu tố tiên lượng huyết học 20 1.2.4 Các yếu tố tiên lượng sinh hóa 22 1.2.5 Theo nhóm yếu tố tiên lượng 25 1.2.6 Một số nghiên cứu yếu tố tiên lượng Việt Nam .29 1.3 Điều trị bệnh Đa u tủy xương .30 1.3.1 Tổng quan lịch sử điều trị bệnh Đa u tủy xương 30 1.3.2 Các thuốc điều trị bệnh đa u tủy xương 31 1.3.3 Các phác đồ điều trị bệnh nhân chẩn đoán ĐUTX 35 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .37 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu .37 2.2 Đối tượng nghiên cứu 37 2.3 Phương pháp nghiên cứu 38 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu .38 2.3.2 Cỡ mẫu 38 2.3.3 Phương pháp chọn mẫu 39 2.3.4 Biến số số 39 2.3.5 Vật liệu nghiên cứu .43 2.3.6 Các kỹ thuật xét nghiệm nghiên cứu 43 2.4 Các tiêu chuẩn phân loại đánh giá sử dụng nghiên cứu .47 2.4.1 Tiêu chuẩn chẩn đoán theo IMWG 2014 47 2.4.2 Tiêu chuẩn đánh giá kết điều trị ĐUTX theo IMWG 48 2.4.3 Các phác đồ điều trị áp dụng 50 2.4.4 Tiêu chuẩn nguy phối hợp đa yếu tố MPI .52 2.5 Thu thập số liệu 53 2.5.1 Thông tin cần thu thập 53 2.5.2 Sai số khống chế sai số .53 2.6 Phân tích xử lý số liệu 54 2.7 Đạo đức nghiên cứu 55 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 57 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 57 3.1.1 Đặc điểm người bệnh phân bố theo tuổi .57 3.1.2 Đặc điểm người bệnh phân bố theo giới .58 3.1.3 Đặc điểm tình trạng lâm sàng người bệnh theo thang điểm phân loại Eastern Cooperative Oncology Group 58 3.1.4 Đặc điểm phân loại theo thể bệnh 59 3.1.5 Đặc điểm phân loại theo phân độ ISS 59 3.1.6 Đặc điểm phân loại theo phác đồ điều trị 59 3.2 Các yếu tố tiên lượng người bệnh ĐUTX 60 3.2.1 Đặc điểm yếu tố di truyền .60 3.2.2 Các yếu tố tiên lượng lâm sàng .62 3.2.3 Các yếu tố tiên lượng huyết học 63 3.2.4 Các yếu tố tiên lượng sinh hóa 64 3.3 Mối liên quan yếu tố tiên lượng hiệu điều trị 65 3.3.1 Kết điều trị chung 65 3.3.2 Mối liên quan yếu tố phác đồ điều trị với hiệu điều trị 66 3.3.3 Mối liên quan yếu tố tiên lượng tới thời gian OS PFS 71 3.3.4 Nguy tử vong theo yếu tố tiên lượng 79 3.3.5 Nguy tiến triển theo yếu tố tiên lượng .83 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 86 4.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 86 4.1.1 Đặc điểm người bệnh phân bố theo tuổi .86 4.1.2 Đặc điểm người bệnh phân bố theo giới .87 4.1.3 Đặc điểm tình trạng lâm sàng người bệnh phân loại theo thang điểm Eastern Cooperative Oncology Group 87 4.1.4 Đặc điểm phân loại theo thể bệnh 88 4.1.5 Đặc điểm phân loại theo ISS 89 4.2 Các yếu tố tiên lượng người bệnh ĐUTX 90 4.2.1 Đặc điểm yếu tố di truyền .90 4.2.2 Đặc điểm tiên lượng theo yếu tố huyết học 94 4.2.3 Đặc điểm tiên lượng theo yếu tố sinh hóa 95 4.2.4 Đặc điểm tiên lượng theo nhóm yếu tố nguy .96 4.3 Mối liên quan yếu tố tiên lượng hiệu điều trị 97 4.3.1 Kết điều trị chung 97 4.3.2 Mối liên quan yếu tố tiên lượng với hiệu điều trị 99 4.3.3 Mối liên quan yếu tố tiên lượng với thời gian OS PFS105 4.3.4 Mối liên quan yếu tố nguy với nguy tử vong 121 KẾT LUẬN 130 KIẾN NGHỊ .132 DANH MỤC BÀI BÁO ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại giai đoạn theo Durie- Salmon .22 Bảng 1.2 Phân chia giai đoạn theo International Stage System 23 Bảng 1.3 Phân chia giai đoạn International Stage System cập nhật 24 Bảng 1.4 Các nhóm thuốc điều trị ĐUTX 27 Bảng 2.1 Bảng số lâm sàng ECOG theo thang điểm WHO 35 Bảng 2.2 Các phác đồ thuốc 42 Bảng 2.3 Các phác đồ cổ điển 44 Bảng 2.4 Các tính điểm phân loại bệnh nhân theo MPI .45 Bảng 3.1 Đặc điểm phân loại người bệnh theo thang điểm ECOG .50 Bảng 3.2 Đặc điểm phân loại người bệnh theo thể bệnh 51 Bảng 3.3 Đặc điểm phân loại người bệnh theo phân nhóm ISS 51 Bảng 3.4 Tỷ lệ điều trị theo phác đồ 51 Bảng 3.5 Kết NST tế bào tủy xương nhuộm băng 52 Bảng 3.6 Giảm số lượng NST tế bào tủy xương người bệnh ĐUTX 52 Bảng 3.7 Tăng số lượng NST tế bào tủy xương người bệnh ĐUTX 52 Bảng 3.8 Kết phân tích đột biến NST kỹ thuật FISH 53 Bảng 3.9 Phân loại theo Mayo Clinic 53 Bảng 3.10 Phân loại theo giai đoạn R-ISS 54 Bảng 3.11 Các yếu tố tiên lượng lâm sàng 54 Bảng 3.12 Các yếu tố tiên lượng huyết học 55 Bảng 3.13 Các yếu tố tiên lượng sinh hóa 56 Bảng 3.14 Tỷ lệ đáp ứng sau đợt điều trị 57 Bảng 3.15 Tỷ lệ đáp ứng điều trị theo đột biến NST 58 Bảng 3.16 Mối liên quan yếu tố tuổi đến đáp ứng điều trị 59 Bảng 3.17 Mối liên quan yếu tố số lâm sàng đến đáp ứng điều trị .59 Bảng 3.18 Phân tích đơn biến yếu tố huyết học đến đáp ứng điều trị 60 Phụ lục Phương pháp thực kỹ thuật phân tích NST FISH Trung tâm Huyết học Truyền máu, Bệnh viện Bạch Mai 3.1 Phương pháp thực kỹ thuật phân tích NST - Ngày 1: Ni cấy tế bào o DTX ni cấy vịng 24h tủ ấm 37oC o Môi trường nuôi cấy bao gồm 6ml RPMI 1640, 1,5ml Marrow Max Bone, 1,5ml huyết thai bê (FBS) - Ngày 2: Thu hoạch tế bào o Chuẩn bị dung dịch nhược trương KCl 0,075M để tủ ấm 37 oC trước thu hoạch 1h o Chuẩn bị dung dịch Carnoy II theo tỷ lệ Methanol: Acid Acetic= 3:1 o Cho 50 µl Colcemid vào ống nuôi cấy, trộn để tủ ấm 10 phút o Ly tâm với tốc độ 1000 vòng/phút phút, hút bỏ dịch giữ lại 1-2 ml dịch cặn o Thêm 6-8 ml dung dịch KCl 0,075M sau trộn đều, để tủ ấm vòng 25 phút o Bổ sung vào ống nuôi cấy 1-2 ml dung dịch Carnoy II, trộn đều, ly tâm 1000 vòng/ phút phút, hút bỏ dịch o Thêm vừa đủ 8-10ml Carnoy II, trộn để nhiệt độ phòng 10 phút o Ly tâm 1000 vòng/ phút phút, hút bỏ dịch nổi, giữ lại 12ml dịch cặn o Lặp lại thao tác rửa Carnoy II khoảng lần o Cuối pha loãng dịch cặn thành huyền dịch theo tỷ lệ 1:10 để nhỏ tiêu o Sau nhỏ tiêu bản, tiến hành nhuộm Giemsa để đọc sơ băng G để phân tích Karyotype bệnh nhân 3.2 Phương pháp thực kỹ thuật FISH Kỹ thuật lai huỳnh quang nguyên tắc sử dụng đoạn dị có gắn huỳnh quang nhằm đánh dấu bất thường, sở xác định bất thường có tế bào tương bào bệnh lý Kỹ thuật tiến hành cụ thể sau: - Ngày o Kiểm tra lam, chọn lam sạch, ghi tên tuổi mã số lam o Nhỏ huyền dịch lên lam kính (Huyền dịch thu hoạch từ DTX trực tiếp sau lấy mẫu sau nuôi cấy 24h) o Đánh dấu vùng tế bào có mật độ phù hợp bút kim cương o Chuẩn bị máy lai FISH: Bật máy 30 phút trước sử dụng o Xịt nước vào giấy thấm giữ ẩm o Cài đặt máy chế độ: 75oC/5m 37oC/20h o Chuyển Probe hóa chất FISH khỏi tủ -20 oC, rã đông nhiệt độ phịng Vortex spin nhẹ o Mix Probe hóa chất FISH theo tỷ lệ: 1µl Probe + 7µl LSI Buffer + 2µl nước cất / lam o Votex spin nhẹ o Nhỏ 10µl dd Probe vào vùng đánh dấu, gắn lamen 22x22 (mm) o Dán kín xung quanh vùng lai keo dán Cement Rubber o Đăt lam vào máy lai FISH, khởi động máy - Ngày o Chuẩn bị bể điều nhiệt 75oC o Đặt cóng đựng dung dịch rửa (0,3%NP40) trước 30 phút o Tháo bỏ lamen o Nhúng lam vào dd rửa phút, lắc tay o Chuyển lam qua dd rửa (0,1%NP40) phút nhiệt độ phòng o Thấm nước sau lưng cạnh lam o Để khô 3-10 phút o Nhỏ 10µl DAPI lên vùng đánh dấu, gắn lamen 22x22 (mm) o Để tủ -20oC vài tiếng trước phân tích o Lưu ý: Các thao tác từ bước mix Probe Buffer trở phải đảm bảo thực tránh ánh sáng - Các Probe sử dụng cho kỹ thuật FISH o Vysis D13S319/13q34 FISH Probe Kit xác định Del 13 o Vysis IGH/FGFR3 DF FISH Probe Kit xác định t(4;14) o Vysis TP53/CEP17 FISH Probe Kit xác định Del 17 o Vysis IGH/MAF DF FISH Probe Kit xác định t(14,16) Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH KARYOTYPE TẾ BÀO TỦY XƯƠNG BỆNH NHÂN ĐA U TỦY XƯƠNG Nguyễn Duy C - 64 tuổi - 26/01/2016 Khương Gia Q - 81 tuổi - 09/03/2017 Hình Mất NST Y, thêm NST số Hình Mất NST Y bất thường khác Nguyễn Thị K - 62 tuổi - 19/09/2016 Trần Thị T - 69 tuổi - 20/02/2017 Hình Mất NST số 7, 13, 14, 17 Hình Mất NST số 13, 14, 20 bất thường khác số bất thường khác Nguyễn Quốc T - 73 tuổi - 05/03/2015 Nguyễn Văn T - 50 tuổi - 30/09/2016 Hình Thêm NST số 1, 3, 5, 7, Hình Thêm NST số 3, 5, 7, 9, 17, 19, số bất thường khác 21 bất thường khác Quách Văn Y - Nam - 50 tuổi Cao Duy C - Nam - 60 tuổi Hình Đa bội kèm số tổn Hình Đa bội kèm số tổn thương thương phức tạp cấu trúc NST phức tạp cấu trúc NST Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH FISH TẾ BÀO TỦY XƯƠNG BỆNH NHÂN ĐA U TỦY XƯƠNG Nghiêm Xuân T - 07/05/2018 Bình thường Trương Văn H - 17/05/2018 Chuyển đoạn t(14;16) Mất đoạn del(17p) Lê Văn N - 16/05/2018 Đa bội Phụ lục THỜI GIAN OS VÀ PFS CỦA CÁC NHÓM BỆNH NHÂN PHÂN LOẠI THEO CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG VÀ PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ Biểu đồ Thời gian OS PFS theo đột biến NST MayoClinic phác đồ điều trị Biểu đồ 2.Thời gian OS PFS theo R-ISS phác đồ điều trị Biểu đồ 3.Thời gian OS PFS theo tuổi phác đồ điều trị Biểu đồ 4.Thời gian OS PFS theo ECOG phác đồ điều trị Biểu đồ 5.Thời gian OS PFS theo tỷ lệ tương bào phác đồ điều trị Biểu đồ 6.Thời gian OS PFS theo Hb phác đồ điều trị Biểu đồ 7.Thời gian OS PFS theo NLR phác đồ điều trị Biểu đồ 8.Thời gian OS PFS theo SLTC phác đồ điều trị Biểu đồ 9.Thời gian OS PFS theo Albumin phác đồ điều trị Biểu đồ 10.Thời gian OS PFS theo β2M phác đồ điều trị Biểu đồ 11.Thời gian OS PFS theo Creatinin phác đồ điều trị Biểu đồ 12.Thời gian OS PFS theo FLCr phác đồ điều trị Biểu đồ 13 Thời gian OS PFS theo nồng độ Calci phác đồ điều trị Biểu đồ 14 Thời gian OS PFS theo nồng đọ LDH phác đồ điều trị Biểu đồ 15 Thời gian OS PFS theo MPI phác đồ điều trị