Luận án Tiến sĩ Nghiên cứu các kiểu hình tế bào viêm và biểu hiện của gen FOXP3 và hGRα trong bệnh polyp mũi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NAM HÀ NGHIÊN CỨU CÁC KIỂU HÌNH TẾ BÀO VIÊM VÀ BIỂU HIỆN CỦA GEN FOXP3 VÀ hGRα TRONG BỆNH POLYP MŨI LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC TP Hồ Chí Minh – Năm 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN NAM HÀ NGHIÊN CỨU CÁC KIỂU HÌNH TẾ BÀO VIÊM VÀ BIỂU HIỆN CỦA GEN FOXP3 VÀ hGRα TRONG BỆNH POLYP MŨI Chuyên ngành: Tai - Mũi - Họng Mã số: 62720155 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS NGUYỄN THỊ NGỌC DUNG TS PHẠM HÙNG VÂN TP Hồ Chí Minh – Năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả Nguyễn Nam Hà MỤC LỤC Trang DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Phân loại theo mô bệnh học thông thường 1.2 Phân loại theo tế bào viêm 1.3 Tế bào viêm vấn đề liên quan tế bào viêm polyp mũi 10 1.4 Các gen điều hòa tế bào viêm 20 1.5 Các nghiên cứu nước 26 1.6 Các nghiên cứu nước 28 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Thiết kế nghiên cứu 30 2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 30 2.3 Đối tượng nghiên cứu 30 2.4 Các biến số nghiên cứu 31 2.5 Các bước thực 34 2.6 Xử lý số liệu 40 2.7 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 40 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 42 3.1 Đặc điểm tế bào viêm tế bào Lympho polyp mũi 42 3.2 Đặc điểm biểu gen FOXP3 hGRα polyp mũi 50 3.3 Sự liên quan phân nhóm bệnh với đặc điểm dịch tễ mẫu khảo sát độ nặng lâm sàng 54 3.4 Sự đáp ứng với điều trị steroids phân nhóm bệnh 69 CHƯƠNG BÀN LUẬN 88 4.1 Đặc điểm tế bào viêm tế bào Lympho polyp mũi 88 4.2 Đặc điểm biểu gen FOXP3 hGRα polyp mũi 96 4.3 Sự liên quan phân nhóm bệnh với đặc điểm dịch tễ mẫu khảo sát độ nặng lâm sàng 99 4.4 Sự đáp ứng với điều trị steroids phân nhóm bệnh 103 KẾT LUẬN 114 KIẾN NGHỊ 116 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: Bảng câu hỏi thu thập số liệu PHỤ LỤC 2: Quy trình nhuộm hóa mơ miễn dịch PHỤ LỤC 3: Quy trình xét nghiệm biểu hiệu gen PHỤ LỤC 4: Danh sách bệnh nhân nghiên cứu bệnh viện Nhân dân Gia Định PHỤ LỤC 5: Danh sách bệnh nhân (mẫu chứng) bệnh viện Nhân dân Gia Định PHỤ LỤC 6: Letter of confirmation NUS – List of patients – List of controls PHỤ LỤC 7: Danh sách bệnh nhân xét nghiệm gen hGRα công ty Nam Khoa PHỤ LỤC 8: Danh sách bệnh nhân (mẫu chứng xét nghiệm gen hGRα) công ty Nam Khoa DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT BCAT Bạch cầu toan BCTT Bạch cầu trung tính BN Bệnh nhân EPOS European Position on Sinusitis and Nasal Polyps FOXP3 Foxhead P3 GC Glucocorticoid HE Hematolysin Eosin hGRα Human Glucocorticoid Receptor Alpha IHC ImmunoHistoChemical IL Interleukin NCS Nghiên cứu sinh RT-qPCR Reserve Transcription Quantitative Polymerase Chain Reaction SNOT-22 SinoNasal Outcome Test - 22 TH1 T- helper TH2 T- helper T-reg T- regulatory TP.HCM Thành phố Hồ Chí Minh DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Số lượng trung bình BCAT mơ polyp 42 Bảng 3.2 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số lượng BCAT theo phân nhóm bệnh .43 Bảng 3.3 Số lượng trung bình BCTT mô polyp 44 Bảng 3.4 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số lượng BCTT theo phân nhóm bệnh .45 Bảng 3.5 Số lượng trung bình tế bào TH2 mô polyp 47 Bảng 3.6 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số lượng tế bào T H2 theo phân nhóm bệnh 47 Bảng 3.7 Số lượng trung bình tế bào TH1 mô polyp 48 Bảng 3.8 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số lượng tế bào T H1 theo phân nhóm bệnh 48 Bảng 3.9 Số lượng trung bình tế bào T-reg mô polyp 49 Bảng 3.10 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số lượng tế bào T-reg theo phân nhóm bệnh 50 Bảng 3.11 Chỉ số biểu gen FOXP3 mô polyp trước dùng steroids 51 Bảng 3.12 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số biểu gen FOXP3 theo phân nhóm bệnh 52 Bảng 3.13 Chỉ số biểu gen hGRα mô polyp 52 Bảng 3.14 So sánh bắt cặp giá trị trung bình số biểu gen hGRα theo phân nhóm bệnh 53 Bảng 3.15 Đặc điểm giới tính phân nhóm bệnh 54 Bảng 3.16 Đặc điểm tuổi phân nhóm bệnh 54 Bảng 3.17 Đặc điểm tiền hen phân nhóm bệnh .55 Bảng 3.18 Đặc điểm tiền dị ứng phân nhóm bệnh 55 Bảng 3.19 Đặc điểm tiền hút thuốc phân nhóm bệnh .56 Bảng 3.20 Số lượng polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 56 Bảng 3.21 Số lượng polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 58 Bảng 3.22 Điểm trung bình SNOT-22 phân nhóm bệnh 60 Bảng 3.23 So sánh bắt cặp giá trị trung bình SNOT-22 theo phân nhóm bệnh .61 Bảng 3.24 Độ thường gặp triệu chứng SNOT-22 phân nhóm bệnh .62 Bảng 3.25 So sánh bắt cặp độ thường gặp triệu chứng SNOT-22 theo phân nhóm bệnh 63 Bảng 3.26 Độ nặng triệu chứng SNOT-22 phân nhóm bệnh 66 Bảng 3.27 So sánh bắt cặp độ nặng triệu chứng SNOT-22 theo phân nhóm bệnh 67 Bảng 3.28 Sự giảm độ polyp mũi trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .69 Bảng 3.29 Điểm SNOT-22 trước sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .72 Bảng 3.30 So sánh bảng điểm SNOT-22 trước-sau điều trị theo phân nhóm 73 Bảng 3.31 Số lượng BCAT trước sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .74 Bảng 3.32 Số lượng BCTT trước sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .76 Bảng 3.33 Số lượng tế bào TH2 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .77 Bảng 3.34 Số lượng tế bào TH1 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .79 Bảng 3.35 Số lượng trung bình tê bào T-reg trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 80 Bảng 3.36 Chỉ số biểu gen FOXP3 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 81 Bảng 3.37 Chỉ số biểu gen hGRα trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 84 Bảng 4.1 So sánh số lượng bạch cầu toan với Cao Ikeda 89 Bảng 4.2 So sánh số lượng bạch cầu trung tính chúng tơi với Ikeda 91 Bảng 4.3 So sánh tỉ lệ phân bố nhóm bệnh theo số lượng tế bào viêm .92 Bảng 4.4 So sánh tỉ lệ giảm độ polyp mũi sau điều trị steroids .103 Bảng 4.5 So sánh điểm SNOT-22 trước sau điều trị steroids .104 Bảng 4.6 So sánh số lượng bạch cầu toan trước- sau điều trị steroids 106 Bảng 4.7 So sánh số lượng bạch cầu trung tính trước- sau điều trị steroids 107 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 3.1 Phân bổ phân nhóm bệnh theo số lượng tế bào viêm 46 Biểu đồ 3.2 Phân bố số biểu gen FOXP3 theo phân nhóm bệnh 51 Biểu đồ 3.3 Phân bố số biểu gen hGRα theo phân nhóm bệnh 53 Biểu đồ 3.4 Phân bố độ polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 57 Biểu đồ 3.5 Đánh giá độ nặng polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 57 Biểu đồ 3.6 Phân bố độ polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 59 Biểu đồ 3.7 Đánh giá độ nặng polyp khe mũi theo phân nhóm bệnh 59 Biểu đồ 3.8 Phân bố điểm SNOT-22 theo phân nhóm bệnh 61 Biểu đồ 3.9 Độ thường gặp triệu chứng mũi xoang 64 Biểu đồ 3.10 Độ nặng triệu chứng mũi xoang 68 Biểu đồ 3.11 Phân bố tỉ lệ giảm độ polyp mũi sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 70 Biểu đồ 3.12 Điểm SNOT-22 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh .73 Biểu đồ 3.13 Phân bố số lượng BCAT trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 75 Biểu đồ 3.14 Phân bố số lượng BCTT trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 77 Biểu đồ 3.15 Phân bố số lượng tế bào TH2 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 78 Biểu đồ 3.16 Phân bố kết số lượng tế bào TH1 trước-sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 79 Biểu đồ 3.17 Phân bố kết số lượng tế bào T-reg trước sau điều trị steroids theo phân nhóm bệnh 80 112 có số gen cao khơng giảm độ sau điều trị Trong bệnh nhân có số gen thấp giảm độ tốt sau điều trị Nghiên cứu Li, 2012 khơng phân tích số gen FOXP3 phân nhóm[44] Chỉ số biểu gen hGRα Các bệnh nhân thuộc phân nhóm “Ưu bạch cầu toan” có số gen hGRα mRNA/β-actin mRNA giảm có ý nghĩa thống kê, với p