ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN HƢỚNG Tên đề tài ĐÁNH GIÁ ẢNH HƢỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN NUÔI TRỒNG TỚI KHẢ NĂNG TẠO QUẢ THỂ CỦA NẤM ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO Cordyceps militaris KHÓA LUẬN TỐT NG[.]
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN HƢỚNG Tên đề tài: ĐÁNH GIÁ ẢNH HƢỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN NUÔI TRỒNG TỚI KHẢ NĂNG TẠO QUẢ THỂ CỦA NẤM ĐƠNG TRÙNG HẠ THẢO Cordyceps militaris KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành/ ngành: Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Thái Nguyên – năm 2016 n ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN HƢỚNG Tên đề tài: ĐÁNH GIÁ ẢNH HƢỞNG CỦA ĐIỀU KIỆN NUÔI TRỒNG TỚI KHẢ NĂNG TẠO QUẢ THỂ CỦA NẤM ĐƠNG TRÙNG HẠ THẢO Cordyceps militaris KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành/ ngành : Công nghệ Sinh học Lớp : K44 – CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 – 2016 Giảng viên hƣớng dẫn: TS Dương Văn Cường ThS Bùi Tuấn Hà n i LỜI CẢM ƠN Được đồng ý Ban Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, thời gian thực tập em tiến hành thực đề tài “Đánh giá ảnh hƣởng điều kiện nuôi trồng tới khả tạo thể nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris” Kết thúc thời gian thực tập Phòng Sinh học Phân tử - Viện Khoa học Sự sống – Đại học Thái nguyên, đến em hoàn thành đề tài tốt nghiệp Để đạt kết ngày hôm nay, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Ban Chủ nhiệm Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm thầy cô giáo Khoa tạo điều kiện tốt cho em suốt thời gian thực tập Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy giáo Dương Văn Cường, thầy giáo Bùi Tuấn Hà, kĩ sư Ma Thị Trang kĩ sư Vũ Hoài Nam tận tình bảo, giúp đỡ hướng dẫn em thời gian thực đề tài Cuối cùng, em xin cám ơn gia đình tạo điều kiện vật chất tốt ln chỗ dựa tinh thần cho em trình thực tập; cảm ơn bạn bè giúp đỡ em thời gian vừa qua Mặc dù thân cố gắng thời gian thực đề tài có hạn nên khóa luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận ý kiến đóng góp chân thành từ thầy cô bạn để đề tài hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2016 Sinh viên Hà Văn Hƣớng n ii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1: Thành phần hóa học chủ yếu hai lồi Đông trùng hạ thảo quan trọng Bảng 3.1: Thiết bị, dụng cụ hóa chất 19 Bảng 3.2: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường khác đến khả sinh trưởng sợi nấm 23 Bảng 3.3: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường khác đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 23 Bảng 3.4: Nghiên cứu ảnh hưởng bột nhộng tằm đến khả sinh trưởng sợi nấm 24 Bảng 3.5: Nghiên cứu ảnh hưởng bột nhộng tằm đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 25 Bảng 3.6: Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 26 Bảng 4.1: Kết nghiên cứu ảnh hưởng môi trường khác đến khả sinh trưởng sợi nấm 28 Bảng 4.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng mơi trường khác đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh 30 Bảng 4.3: Kết nghiên cứu ảnh hưởng bột nhộng tằm đến khả sinh trưởng sợi nấm 34 Bảng 4.4: Kết nghiên cứu ảnh hưởng bột nhộng tằm đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 36 Bảng 4.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 40 n iii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Đơng trùng hạ thảo Cordyceps militaris Hình 3.1: Sơ đồ quy trình ni cấy nấm Đơng trùng hạ thảo 21 Hình 4.1 Đặc điểm hình thái hệ sợi, mật độ hệ sợi công thức môi trường A, môi trường B, môi trường C sau 10 ngày cấy giống 29 Hình 4.2.: Đặc điểm hình thái, chiều dài thể nấm cơng thức môi trường khác 31 Hình 4.3: Nấm Cordyceps militaris nuôi trồng môi trường A, môi trường B, Môi trường C 32 Hình 4.4: Đặc điểm hình thái hệ sợi, mật độ hệ sợi công thức với tỉ lệ % nhộng tằm khác sau ngày cấy giống 35 Hình 4.5 Đặc điểm hình thái, chiều dài thể nấm công thức tỉ lệ phần trăm bột nhộng tằm khác 37 Hình 4.6 Ảnh hưởng tỉ lệ bột nhộng tằm đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh họ 38 Hình 4.7 : Đặc điểm hình thái, chiều dài thể nấm cơng thức nhiệt độ khác 41 n iv DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT BE : Biological Efficiency CS : Cộng CT : Công thức CV : Coeficient of Variation Duncan : Duncan’s Multiple Range Test-DMRT Đ/c : Đối chứng ĐTHT : Đông trùng hạ thảo LSD : Least Singnificant Difference Test MTN : Môi trường NAA : α-Naphthalene acetic acid n v MỤC LỤC Trang Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa lý thuyết 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học 2.1.1 Tên gọi Đông trùng hạ thảo 2.1.2 Sơ lược lịch sử nghiên cứu phân loại Đông trùng hạ thảo 2.1.3 So sánh loài ĐTHT Cordyceps sinensis Cordyceps militaris 2.1.4 Thị trường giá 10 2.2 Nghiên cứu giá trị dược liệu nấm Đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris 11 2.2.1 Giá trị dược liệu theo y học cổ truyền Đông Á 11 2.2.2 Giá trị dược liệu theo y học đại 12 2.2 Tình hình nghiên cứu ni trồng nấm Cordyceps militaris ngồi nước 14 2.2.1 Tình hình nghiên cứu ni trồng nấm Cordyceps militaris giới 14 2.2.2 Tình hình nghiên cứu ni trồng nấm Cordyceps militaris nước 16 n vi Phần 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 19 3.1.1 Đối tượng 19 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 19 3.1.3 Vật liệu nghiên cứu 19 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 20 3.2.1 Địa điểm tiến hành nghiên cứu 20 3.2.2.Thời gian tiến hành nghiên cứu 20 3.3 Nội dung nghiên cứu 20 3.4 Phương pháp nghiên cứu 20 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu 20 3.4.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 21 3.4.2.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường khác đến khả sinh trưởng sợi nấm, hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 22 3.4.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng bột nhộng tằm đến khả sinh trưởng sợi nấm, hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 23 3.4.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 25 3.4.3 Chỉ tiêu theo dõi 26 3.4.3 Phương pháp xử lý số liệu 27 Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Ảnh hưởng môi trường khác đến khả sinh trưởng sợi nấm, hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 28 n vii 4.1.1 Ảnh hưởng môi trường khác đến khả sinh trưởng sợi nấm 28 4.1.2 Ảnh hưởng môi trường khác đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 30 4.2 Ảnh hưởng bột nhộng tằm đến khả sinh trưởng sợi nấm, hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 33 4.2.1 Ảnh hưởng bột nhộng tằm đến khả sinh trưởng sợi nấm 33 4.2.2: Ảnh hưởng bột nhộng tằm đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 36 4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 39 4.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hình thành phát triển mầm thể, suất sinh học 39 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 5.1 Kết luận 43 5.2 Đề nghị 43 n Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Đông trùng hạ thảo (ĐTHT) tên khoa học Cordyceps loài nấm ký sinh số lồi trùng Vào mùa Đơng nấm xâm nhiễm, ký sinh vào thể côn trùng Đến mùa Hè, hệ sợi nấm phát triển thành nấm nhú lên khỏi mặt đất gốc dính liền vào thân sâu Chính mà nấm có tên gọi Đơng trùng hạ thảo, có nghĩa mùa đơng trùng, mùa hạ cỏ Từ y học cổ truyền Trung Hoa y học đại nước phát triển Mỹ, châu Âu công nhận giá trị dược lý ĐTHT Loài nấm Cordyceps militaris loài thuộc họ Cordyceps, thể nấm có hàm lượng hoạt chất có hoạt tính sinh học như: Cordycepin (3'-deoxyadenosine) chất tương tự nucleoside có hoạt tính sinh học bao gồm kháng khuẩn, kháng nấm, kháng u, hoạt động kháng virus [9],[ 38] Kim et al (2006) chứng minh cordycepin có khả ức chế dependently collagen, chất gây tượng kết tập tiểu cầu dẫn đến tượng vỡ mảng xơ vữa động mạch vành [18] Adenosine cho có tác dụng điều hịa miễn dịch, bảo vệ tim mạch Mannitol Cordyceps militaris có chức hoạt tính sinh học, lợi tiểu, chống chứng ho máu [25] Superoxide dismutise để phòng ngừa điều trị xuất huyết não, viêm loét, loại bỏ tình trạng viêm, loạn nhịp tim, phù nề, nhiễm độc, bệnh thấp khớp, thấp khớp, viêm khớp dạng thấp, tổn thương xạ, nhiễm độc thuyên tắc Đông trùng hạ thảo cịn có chứa nhiều loại vitamin (trong 100g đơng trùng hạ thảo có 0,12 g vitamin B12; 29,19 mg vitamin A; 116,03 mg vitamin C, ngồi cịn có vitamin B2 (riboflavin), vitamin E, vitamin K ) ngồi cịn có khoảng 25 - 30 % protein n