Khảo sát đột biến gene proc và prosi trên bệnh nhân huyết khối tĩnh mạch sâu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - ĐẶNG HUỲNH MINH ĐỨC KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN GENE PROC VÀ PROS1 TRÊN BỆNH NHÂN HUYẾT KHỐI TĨNH MẠCH SÂU LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - ĐẶNG HUỲNH MINH ĐỨC KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN GENE PROC VÀ PROS1 TRÊN BỆNH NHÂN HUYẾT KHỐI TĨNH MẠCH SÂU NGÀNH: KHOA HỌC Y SINH (SINH LÝ HỌC) MÃ SỐ: 8720101 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS MAI PHƯƠNG THẢO THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2020 MỤC LỤC Lời cam đoan i Danh mục chữ viết tắt thuật ngữ Anh – Việt ii Danh mục bảng iv Danh mục hình v Danh mục sơ đồ - biểu đồ v MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Huyết khối tĩnh mạch sâu 1.2 Gene PROC gene PROS1 14 1.3 Tình hình nghiên cứu giới nước 24 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Thiết kế nghiên cứu 30 2.2 Đối tượng nghiên cứu 30 2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu 31 2.4 Cỡ mẫu nghiên cứu 31 2.5 Xác định biến số 32 2.6 Phương pháp thu thập số liệu 33 2.7 Quy trình nghiên cứu 39 2.8 Phương pháp phân tích liệu 40 2.9 Đạo đức nghiên cứu 40 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 41 3.1 Tỉ lệ đột biến PROC PROS1 42 3.2 Mối liên quan đặc điểm mẫu nghiên cứu tình trạng mang đột biến 43 3.3 Mối liên hệ đột biến gene với biến số lâm sàng, cận lâm sàng 47 3.4 Đặc điểm biến đổi di truyền PROC, PROS1 50 CHƯƠNG BÀN LUẬN 56 4.1 Tỉ lệ đột biến PROC PROS1 56 4.2 Mối liên quan tình trạng mang đột biến đặc điểm mẫu nghiên cứu 58 4.3 Mối liên hệ đột biến gene với đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng 60 4.4 Đặc điểm biến đổi di truyền 63 4.5 Ưu điểm hạn chế nghiên cứu 70 KẾT LUẬN 72 KIẾN NGHỊ 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO vi PHỤ LỤC 1: Phiếu thu thập liệu xviii PHỤ LỤC 2: Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu xx PHỤ LỤC 3: Khuyến cáo chẩn đoán xác định HKTMS xxiii PHỤ LỤC 4: Bản tóm tắt đặc điểm bệnh nhân đột biến gene xxiv PHỤ LỤC 5: Danh sách đối tượng tham gia nghiên cứu xxvii PHỤ LỤC 6: Bản chấp thuận Hội đồng đạo đức xxix i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả luận văn Đặng Huỳnh Minh Đức ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ THUẬT NGỮ ANH – VIỆT Viết tắt Tiếng Anh ABI Applied Biosystems Tiếng Việt Incorporated ALT Alanine aminotransferase APC Activated protein C Protein C hoạt hóa APTT Activated Partial Thời gian Thromboplastin Thromboplastin Time hoạt hóa phần AST Aspartate transaminase AT Antithrombin BUN Blood Urea Nitrogen Lượng nitơ máu dạng ure ELISA HGMD Enzyme-Linked Miễn dịch hấp thụ liên kết ImmunoSorbent Assay với Enzyme Human Gene Mutation Cơ sở liệu đột biến Database gene người Huyết khối tĩnh mạch sâu HKTMS INCIMEDI Incidence of deep vein Tỉ lệ mắc huyết khối tĩnh thrombosis, diagnosed by mạch sâu, chẩn đoán duplex ultrasound in siêu âm Duplex Medical departments trung tâm y tế iii Viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt INR International Normalized Chỉ số bình thường hóa Ratio quốc tế PC Protein C PCR Polymerase Chain Phản Reaction chuỗi polymerase PROVEAN ứng khuếch đại Protein Variation Effect Analyzer PS Protein S PT Prothrombin Time SIFT Sorting Intolerant From Thời gian Prothrombin Tolerant TFPI Tissue inhibitor factor pathway Chất ức chế đường liên quan đến yếu tố mô iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Những tình trạng tăng đơng ngun phát Bảng 1.2 Những tình trạng tăng đông thứ phát 11 Bảng 1.3 Phân loại thiếu hụt protein S 16 Bảng 1.4 Tần suất nguyên nhân di truyền chủng tộc 26 Bảng 1.5 Tần suất xuất đột biến gene PROC PROS1 28 Bảng 2.1 Các biến số đặc điểm dịch tễ tiền 32 Bảng 3.1 Số liệu tóm tắt tuổi mẫu nghiên cứu 43 Bảng 3.2 Số liệu tóm tắt giới tính mẫu nghiên cứu 45 Bảng 3.3 Đặc điểm tiền gia đình 46 Bảng 3.4 Mối liên hệ đột biến gene với yếu tố dịch tễ tiền 47 Bảng 3.5 Đặc điểm nồng độ chất kháng đông 48 Bảng 3.6 Mối liên hệ đột biến PROC với nồng độ PC 49 Bảng 3.7 Mối liên hệ đột biến gene PROS1 với nồng độ PS 49 Bảng 3.8 So sánh đột biến công cụ sinh học 53 Bảng 4.1 So sánh đặc điểm nguyên nhân di truyền bệnh nhân 56 Bảng 4.2 So sánh đặc điểm dịch tễ tiền nghiên cứu 59 Bảng 4.3 So sánh tỉ số chênh nghiên cứu 61 Bảng 4.4 So sánh phổ đột biến dân số châu Á từ nghiên cứu 65 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sinh lý bệnh huyết khối tĩnh mạch Hình 1.2 Cơ chế đông máu Hình 1.3 Cơ chế kháng đông protein C protein S Hình 1.4 Hình ảnh huyết khối tĩnh mạch sâu siêu âm 13 Hình 1.5 Vị trí gene PROC nhiễm sắc thể số 14 Hình 1.6 Vị trí gene PROS1 nhiễm sắc thể số 15 Hình 1.7 Phân tích giải trình tự gene PROC 23 Hình 1.8 Giải trình tự gene PROC phát đột biến nucleotide 24 Hình 3.1 Phổ đột biến gene PROC 51 Hình 3.2 Phổ đột biến gene PROS1 52 DANH MỤC SƠ ĐỒ - BIỂU ĐỒ Sơ đồ 2.1 Giải trình tự Sanger phát đột biến 38 Sơ đồ 2.2 Quy trình nghiên cứu 39 Sơ đồ 3.1 Phân bố đối tượng tham gia nghiên cứu 41 Biểu đồ 1.1 Phổ đột biến bệnh nhân huyết khối tĩnh mạch sâu Mỹ 25 Biểu đồ 3.1 Kết giải trình tự Sanger mẫu nghiên cứu 42 Biểu đồ 3.2 Phân bố độ tuổi mẫu nghiên cứu 43 Biểu đồ 3.3 Phân bố giới tính mẫu nghiên cứu 44 Biểu đồ 3.4 Phân bố tiền gia đình mẫu nghiên cứu 45 Biểu đồ 3.5 Nồng độ chất kháng đông mẫu nghiên cứu theo giới 46 Biểu đồ 3.6 Nồng độ chất kháng đơng theo nhóm nghiên cứu 48 Biểu đồ 3.7 Tần suất loại đột biến gene mẫu nghiên cứu 50 Biểu đồ 3.8 Phân bố đột biến 53 MỞ ĐẦU Huyết khối tĩnh mạch sâu (HKTMS) tình trạng cục máu đơng gây tắc phần hay toàn hệ thống tĩnh mạch sâu, đặc biệt chi Các biến chứng bệnh, có thuyên tắc phổi nguyên nhân phổ biến thứ ba gây tử vong bệnh tim mạch toàn giới, chiếm nửa triệu ca tử vong năm Mỹ Châu Âu [7], [76] Tỉ lệ mắc bệnh năm 80 100.000 dân [33], [97] Vì bệnh lý diễn tiến âm thầm thường khơng chẩn đốn sớm phát tử vong, nên tỉ lệ thấp so với thực tế Tại Việt Nam, ước tính có đến 22% bệnh nhân nội khoa nhập viện có huyết khối tĩnh mạch sâu khơng triệu chứng [2] Trong số ca bệnh mới, có đến 30% bệnh nhân tử vong vòng 30 ngày 20% bị đột tử thuyên tắc phổi; 30% bệnh nhân tiếp tục hình thành huyết khối tĩnh mạch tái phát vòng 10 năm [48] Về lâu dài, hội chứng sau huyết khối gây đau, phù, loét chi, gây gánh nặng kinh kế nguy tàn tật suốt đời HKTMS bệnh lý đa yếu tố, yếu tố di truyền có vai trò quan trọng xuất tiên lượng bệnh [72] Yếu tố di truyền hầu hết đột biến gene gây bất thường số lượng chất lượng chất kháng đông Yếu tố mắc phải bao gồm tình trạng bất động, phẫu thuật, ung thư, thai kỳ, sử dụng nội tiết tố Thiếu hụt yếu tố kháng đông protein C (PC), protein S (PS), antithrombin (AT) thuộc nhóm nguy cao di truyền [100] Chẩn đoán thiếu chất kháng đông thường dựa vào xét nghiệm đông máu, nhiên, kết bị ảnh hưởng nhiều yếu tố bệnh cấp tính, liệu pháp điều trị, mang thai Ngày nay, với tiến kỹ thuật giải trình tự, việc chẩn đốn xác định đột biến hồn tồn thực Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xv 86 Sirachainan N et al (2010), "Protein C deficiency in Thai children with thromboembolism: a report of clinical presentations and mutation analysis", Thrombosis research 125 (2), pp 200-202 87 Skelley J W et al (2017), "The use of direct oral anticoagulants in inherited thrombophilia", Journal of thrombosis thrombolysis 43 (1), pp 24-30 88 Suehisa E et al (2001), "Frequency of natural coagulation inhibitor (antithrombin III, protein C and protein S) deficiencies in Japanese patients with spontaneous deep vein thrombosis", Blood coagulation fibrinolysis 12 (2), pp 95-99 89 Tang L et al (2012), "Genetic background analysis of protein C deficiency demonstrates a recurrent mutation associated with venous thrombosis in Chinese population", PloS one (4), pp 357-373 90 Tang L et al (2012), "PROC c 574_576del polymorphism: a common genetic risk factor for venous thrombosis in the Chinese population", Journal of Thrombosis Haemostasis 10 (10), pp 2019-2026 91 Tang L et al (2013), "Common genetic risk factors for venous thrombosis in the Chinese population", The American Journal of Human Genetics 92 (2), pp 177-187 92 Ten Kate M et al (2008), "Protein S deficiency: a clinical perspective", Haemophilia 14 (6), pp 1222-1228 93 Thomassen M et al (2015), "Tissue factor‐independent inhibition of thrombin generation by tissue factor pathway inhibitor‐α", Journal of Thrombosis Haemostasis 13 (1), pp 92-100 94 Tsay W et al (2004), "R147W mutation of PROC gene is common in venous thrombotic patients in Taiwanese Chinese", American journal of hematology 76 (1), pp 8-13 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xvi 95 Undas A et al (2016), "Direct Oral Anticoagulants in Patients with Thrombophilia: Challenges in Diagnostic Evaluation and Treatment", Advances in clinical experimental medicine: official organ Wroclaw Medical University 25 (6), pp 1321-1330 96 van Ommen C H et al (2017), "Inherited thrombophilia in pediatric venous thromboembolic disease: why and who to test", Frontiers in pediatrics 5, pp 50 97 Waheed S M et al (2018), "Deep Vein Thrombosis (DVT)", StatPearls [Internet], StatPearls Publishing 98 Weingarz L et al (2013), "Prevalence of thrombophilia according to age at the first manifestation of venous thromboembolism: results from the MAISTHRO registry", British journal of haematology 163 (5), pp 655-665 99 Wilbur J et al (2012), "Diagnosis of deep venous thrombosis and pulmonary embolism", American family physician 86 (10), pp 913919 100 Wolberg A S et al (2015), "Venous thrombosis", Nature Reviews Disease Primers (1), pp 1-17 101 Wypasek E et al (2017), "Genetic characterization of antithrombin, protein C, and protein S deficiencies in Polish patients", Pol Arch Intern Med 127 (7-8), pp 512-523 102 Wypasek E et al (2017), "Venous thromboembolism associated with protein S deficiency due to Arg451* mutation in PROS1 gene: a case report and a literature review", J Genet 96 (6), pp 1047-1051 103 Xie W et al (2017), "Protein C deficiency resulting from two mutations in PROC presenting with recurrent venous thromboembolism", Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xvii Journal of vascular surgery cases innovative techniques (4), pp 254-256 104 Yin T et al (2014), "Dysfunction of protein C anticoagulant system, main genetic risk factor for venous thromboembolism in northeast Asians", Journal of thrombosis thrombolysis 37 (1), pp 56-65.105 Yue Y et al (2019), "Pathogenic variants of PROC gene caused type I activity deficiency in a familial Chinese venous thrombosis", Journal of Cellular Molecular Medicine 23 (10), pp 7099-7104 106 Zhang Y et al (2016), "A novel PROS1 mutation, c 74dupA, was identified in a protein S deficiency family", Thrombosis research 148, pp 125-127 107 Zhu T et al (2011), "Normal ranges and genetic variants of antithrombin, protein C and protein S in the general Chinese population Results of the Chinese Hemostasis Investigation on Natural Anticoagulants Study I Group", Haematologica 96 (7), pp 1033-1040 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xviii PHỤ LỤC 1: Phiếu thu thập liệu MS-HKTMS: PHIẾU THÔNG TIN LÂM SÀNG KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN GENE PROC VÀ PROS1 ĐỂ XÂY DỰNG VÀ HỒN CHỈNH QUY TRÌNH TẦM SỐT, ĐIỀU TRỊ PHỊNG NGỪA VÀ TƯ VẤN DI TRUYỀNCHO BỆNH NHÂN THUYÊN TẮC HUYẾT KHỐI TĨNH MẠCH SÂU Họ tên (viết tắt tên): Sinh năm: Giới tính: Địa (viết tắt): Lí khám bệnh: Mô tả lâm sàng: Kết siêu âm Doppler: Gia đình có người thân chẩn đốn HKTMS (ghi rõ người thân): Có yếu tố lâm sàng khơng? Có Khơng □ □ Vửa trải qua phẫu thuật lớn □ □ Chấn thương □ □ Đang có bệnh lý ác tính □ □ Đang hóa trị □ □ Thay khớp gối hay khớp háng Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xix Chấn thương cột sống □ □ Đang điều trị liệu pháp □ □ Đang điều trị corticoid □ □ Đang uống thuốc ngừa thai □ □ Nằm bất động giường > □ □ Béo phì □ □ Có thai □ □ hormon ngày Xét nghiệm khác: Định lượng protein C: Định lượng protein S: PT: APTT: INR: Fibrinogene: BUN: Creatinin: AST: ALT: Kết giải trình tự gene: Nhân viên lấy thơng tin Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Ngày … tháng … năm 20 … Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xx PHỤ LỤC 2: Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu BẢN THÔNG TIN DÀNH CHO ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU VÀ XÁC NHẬN CHẤP THUẬN THAM GIA NGHIÊN CỨU Tên nghiên cứu: : Khảo sát đột biến gene PROC PROS1 để xây dựng hồn chỉnh quy trình tầm sốt, điều trị phịng ngừa tư vấn di truyền cho bệnh nhân thuyên tắc huyết khối tĩnh mạch sâu Nghiên cứu viên: TS.BS Phạm Văn Dũng PGS TS BS Nguyễn Hoài Nam TS BS Đỗ Đức Minh PGS.TS BS Mai Phương Thảo BS Đặng Huỳnh Minh Đức I THƠNG TIN VỀ NGHIÊN CỨU Mục đích tiến hành nghiên cứu Huyết khối tĩnh mạch sâu (HKTMS) bệnh lý tim mạch thường gặp, đứng hàng thứ ba sau nhồi máu tim đột quỵ Đây bệnh lý đa nguyên nhân chế bệnh sinh cịn chưa hiểu biết rõ ràng Có nhiều ngun nhân gây HKTMS nguyên nhân thường kết hợp với nhau, đó, nguyên nhân chia thành nhóm mắc phải (bệnh lý, dùng thuốc…) di truyền (bất thường cấu trúc giải phẫu, đột biến gene dẫn đến thay đổi số lượng chất lượng thành phần tham gia q trình đơng máu…) Trong quần thể người Châu Á, đột biến gene mã hóa cho protein C protein S xem nguyên nhân di truyền gây bệnh HKTMS Trong nghiên cứu này, chúng tơi xác định tình trạng đột biến gene PROC PROS1 đối tượng bệnh nhân HKTMS tình nguyện tham gia Nếu quý vị đồng ý tham gia nghiên cứu, tiến hành lấy mẫu máu quý vị để xác định bất thường di truyền có gene Cuối nghiên cứu, đưa kết đột biến gene cho đối tượng tham gia nghiên cứu có quan tâm Thời gian: nghiên cứu dự kiến tiến hành thời gian từ 09/2018 đến 04/2020 với thời gian thu thập liệu từ 09/2018 đến 01/2019 II SỰ TỰ NGUYỆN THAM GIA VÀ TÍNH BẢO MẬT • Chúng tơi muốn mời anh/ chị tham gia vào nghiên cứu Quyết định tham gia hồn tồn tự nguyện khơng ép buộc dụ dỗ anh/ chị Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxi • Anh/ chị từ chối, thay đổi định hay rút khỏi nghiên cứu mà không lo ngại ảnh hưởng đến quy trình thăm khám chữa bệnh thường qui bệnh viện • Sau cung cấp thơng tin nghiên cứu, lợi ích bất lợi đây, anh/ chị cân nhắc thật kỹ, hỏi người lấy chấp thuận câu hỏi thắc mắc Nếu đồng ý tham gia nghiên cứu anh chị ký tên vào đồng thuận • Nghiên cứu chúng tơi thu thập thông tin sức khỏe bạn Những thơng tin giữ an tồn bảo mật Hồ sơ bệnh án anh/ chị dán mã số nghiên cứu kiểm tra thường xuyên nhóm nghiên cứu Tên anh/chị không sử dụng báo cáo công bố khoa học liên quan Các thông tin khoa học khác từ mẫu máu lưu trữ an toàn sử dụng phép hội đồng y đức người tham gia nghiên cứu III CÁC NGUY CƠ VÀ BẤT LỢI CHO BỆNH NHÂN Bất lợi: • Anh/chị cần thời gian để hỏi hiểu rõ nghiên cứu, nghe trả lời chi tiết liên quan đến nghiên cứu Nếu đồng ý tham gia, anh/chị cho lấy mẫu, phân tích mẫu máu • Anh/chị rút 2ml máu ngoại biên để lưu giữ sau tiến hành định lượng protein C, protein S giải trình tự gene PROC, PROS1; chi phí lấy máu tồn quy trình nghiên cứu nghiên cứu viên chi trả Anh/chị có cảm giác đau lấy máu, hết nhanh sau Kỹ thuật lấy máu kiểm soát để bảo đảm nguy chảy máu chỗ tiêm không đáng kể, người dùng thuốc chống đơng Lợi ích: • Anh/chị thông báo kết định lượng protein C, protein S, kết đột biến gene PROC PROS1 miễn phí vịng khoảng tháng kể từ ngày tham gia nghiên cứu • Nếu Anh/chị có kết dương tính với đột biến gene PROC PROS1, anh/chị hổ trợ tư vấn vấn đề di truyền tương ứng thành viên gia đình nguy sau kết Nghiên cứu đơn hoạt động chuyên môn, không hỗ trợ tài cho bệnh nhân tham gia nghiên cứu Nếu có thắc mắc liên quan đến nghiên cứu, anh/chị liên hệ với thành viên phụ trách: Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxii PGS TS BS NGUYỄN HỒI NAM, điện thoại: 0903920815, email: dr.hoainamnguyen@gmail.com TS BS ĐỖ ĐỨC MINH, điện thoại: 0932999989; email: ducminh@ump.edu.vn IV PHẦN CHẤP THUẬN THAM GIA NGHIÊN CỨU Tôi đọc hiểu thơng tin đây, có hội xem xét đặt câu hỏi thông tin liên quan đến nội dung nghiên cứu Tơi nói chuyện trực tiếp với nghiên cứu viên trả lời thỏa đáng tất câu hỏi Tôi nhận Bản Thông tin cho đối tượng nghiên cứu chấp thuận tham gia nghiên cứu Tôi tự nguyện đồng ý tham gia nghiên cứu Chữ ký người tham gia: Họ tên _ Chữ ký _ Ngày tháng năm: _ Chữ ký Nghiên cứu viên/người lấy chấp thuận: Tôi, người ký tên đây, xác nhận bệnh nhân/người tình nguyện tham gia nghiên cứu ký chấp thuận đọc tồn thơng tin đây, thơng tin giải thích cặn kẽ cho Anh/Chị Anh/Chị hiểu rõ chất, nguy lợi ích việc Anh/Chị tham gia vào nghiên cứu Họ tên _ Chữ ký _ Ngày tháng năm: _ Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxiii PHỤ LỤC 3: Khuyến cáo chẩn đốn xác định HKTMS Khuyến cáo Nhóm Mức chứng Siêu âm Doppler tĩnh mạch với nghiệm pháp ấn: khuyến cáo trường hợp có xác suất lâm sàng cao trung bình bị HKTMS chi (*) - Kết siêu âm dương tính cho phép chẩn đốn B I HKTMS chi (huyết khối lấp đầy lòng tĩnh mạch, làm tĩnh mạch ấn không xẹp, xẹp phần, và/hoặc có tượng khuyết màu, phổ Doppler không thay đổi theo nhịp hô hấp) (*) Xác suất lâm sàng cao trung bình tổng điểm ≥ dựa vào thang điểm Wells cải tiến (không áp dụng cho phụ nữ mang thai) Thang điểm Wells cải tiến Dấu hiệu lâm sàng (nếu bị chân, đánh giá chân triệu chứng nặng hơn) Điểm Đau dọc đường hệ tĩnh mạch sâu +1 Sưng toàn chi +1 Bắp chân sưng > cm so với bên đối diện (đo lồi củ +1 chày 10 cm) Phù ấn lõm +1 Giãn tĩnh mạch nông bàng hệ (không phải búi giãn tĩnh +1 mạch mạn tính) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxiv PHỤ LỤC 4: Bản tóm tắt đặc điểm bệnh nhân đột biến gene Tiền Mã STT bệnh Giới Tuổi nhân gia Nồng độ PC / Exon đình PS Nucleotide thay Protein thay Loại đột Kiểu đổi đổi biến gene Nguồn HK01 Nữ 27 Không PS: 0,00 PROS1 c.253T>C p.Tyr85His Sai nghĩa Dị hợp tử Mới HK02 Nữ 34 Không PS: 0,00 PROS1 c.233C>T p.Thr78Met Sai nghĩa Dị hợp tử [36] HK03 Nam 35 Không PS: 0,00 PROS1 c.269G>T p.Arg90Leu Sai nghĩa Dị hợp tử Mới HK06 Nữ 41 Không PC: 4,14 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] HK07 Nữ 18 Có PC: 2,02 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] HK08 Nam 17 Có PC: 2,15 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] HK11 Nam 46 Không PC: 0,95 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] PS: 0,07 PROS1 c.265C>T p.Leu89* Vô nghĩa Dị hợp tử Mới HK14 42 Không PC: 0,00 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa HK16 Nam 40 Không PC: 0,00 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 10 HK17 68 Không PS: 0,00 13 PROS1 c.1351C>T p.Arg451* Vô nghĩa Dị hợp tử [102] Nữ Nữ Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Đồng hợp tử [81] Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxv 11 HK18 Nữ 17 Không PC: 0,00 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 12 HK21 Nữ 31 Không PC: 0,64 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 13 HK22 Nam 41 Không PC: 1,46 PROC c.323A>C p.His108Pro Sai nghĩa Dị hợp tử Mới 14 HK24 Nam 59 Không PC: 1,57 PROC c.532G>C p.Ala178Pro Sai nghĩa Dị hợp tử [79] 15 HK27 Nữ 50 Không PC: 0,48 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 16 HK35 Nữ 48 Không PC: 1,44 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa 17 18 19 HK40 HK42 Nữ Nữ HK43 Nam 31 47 72 Không Không Không PC: 0,00 PS: 0,01 PC: 4,54 7 PROC c.577_579delAAG PROS1 c.253T>C PROC c.577_579delAAG Đồng hợp tử [81] Mất p.Lys193del nucleotide, Dị hợp tử [52] Dị hợp tử Mới Dị hợp tử [52] in-frame p.Tyr85His Sai nghĩa Mất p.Lys193del nucleotide, in-frame 20 HK45 Nữ 35 Không PC: 3,66 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 21 HK46 Nữ 56 Có PS: 0,01 PROS1 c.715A>T p.Lys239* Vô nghĩa Dị hợp tử Mới Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxvi 22 HK47 Nữ 47 Không PS: 0,02 13 PROS1 c.1351C>T p.Arg451* Vô nghĩa Dị hợp tử [102] 23 HK48 Nữ 33 Không PC: 0,00 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] 24 HK49 Nữ 28 Không PC: 0,00 PROC c.565C>T p.Arg189Trp Sai nghĩa Dị hợp tử [36] * Tham chiếu theo: NM_000312 (PROC) NM_000313 (PROS1) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxvii PHỤ LỤC 5: Danh sách đối tượng tham gia nghiên cứu Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxviii Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh xxix PHỤ LỤC 6: Bản chấp thuận Hội đồng đạo đức Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn