Untitled SỔ TAY AN TOÀN PHÒNG THÍ NGHIỆM (Lab Safety Rules and Guidelines) LƯU HÀNH NỘI BỘ TP HỒ CHÍ MINH, 2018 RIBE – BioD – CETNARM Phòng thí nghiệm thuộc Viện Nghiên cứu Công nghệ Sinh học, Trung T[.]
RIBE – BioD – CETNARM SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM (Lab Safety Rules and Guidelines) LƯU HÀNH NỘI BỘ TP HỒ CHÍ MINH, 2018 Lời mở đầu Phịng thí nghiệm thuộc Viện Nghiên cứu Cơng nghệ Sinh học, Trung Tâm Công Nghệ Quản Lý Môi Trường Và Tài Nguyên Bộ môn Công nghệ Sinh học, bố trí nhà A1 (6.500 m2) A2 (2.700 m2), với 1.200 m2 nhà lưới/màng hecta cảnh quan khu vực, tạo nên hệ thống “thí nghiệm – thực nghiệm” thuận tiện cho sinh viên, học viên, nghiên cứu viên thực hoạt động nghiên cứu, tập huấn chuyển giao kỹ thuật, phát triển sản phẩm Bên cạnh thuận lợi, nhiều vấn đề liên quan đến “an tồn” đặt nguy cháy nổ, đổ tràn hóa chất, tổn thương đến cá nhân tập thể thường trực Sổ tay an tồn phịng thí nghiệm (ATPTN) tài liệu hướng dẫn cung cấp kiến thức nhằm xử lý cố nguy suốt thời gian hoạt động khu vực A1 A2 “Sổ tay” soạn thảo dựa yêu cầu đảm bảo hoạt động cho “Vilas 17025-2017”, nhiên, “Sổ tay” sử dụng cho tất phịng thí nghiệm, phòng thực hành, nhà lưới/nhà màng, “chỉ dẫn” quan trọng chi tiết giúp ứng xử an toàn “nguy cơ” xảy suốt trình làm việc Cùng với “Sổ tay Phịng thí nghiệm – Thực hành Công nghệ Sinh học”, tất sinh viên, học viên cao học, nghiên cứu sinh, kỹ thuật viên, nghiên cứu viên, cán giảng dạy nhà A1, A2 khu vực nghiên cứu trực thuộc phải tự giác tuân thủ nghiêm túc “quy định” Sổ tay “Sổ tay” cấp phát cho phịng thí nghiệm/phịng thực hành hiệu chỉnh Ban quản lý Kỹ thuật Chất lượng Vilas 17025 (Hình ảnh sổ tay lấy từ nguồn tài liệu tham khảo) SỐ ĐIỆN THOẠI KHẨN CẤP Trong trường hợp khẩn cấp, liên lạc với người phụ trách phịng thí nghiệm phận chức theo số điện thoại sau để hỗ trợ, hướng dẫn Bộ phận Chữa cháy cứu hộ, cứu nạn Cấp cứu y tế Phòng y tế Trường Đội bảo vệ - PCCC Trường Lãnh đạo Viện Xử lý cố hóa học Xử lý cố sinh học PCCC Viện Người phụ trách Nguyễn Hữu Bình Đặng Trung Thu Lê Đình Đơn Lê Thị Diệu Trang Phùng Võ Cẩm Hồng Nguyễn Ngọc Hà Trịnh Thị Phi Ly Huỳnh Văn Biết Trương Phước Thiên Hồng Phan Hữu Tín Số điện thoại 114 115 0283.896.3345 0907.505.899 0919.005.895 0836.970.267 0913.111.606 0909.115.572 0379.700.703 0932.056.277 0903.975.795 0389.604.889 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Chƣơng 1: HƢỚNG DẪN CHUNG VỀ AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM 1.1 MỤC ĐÍCH VÀ PHẠM VI ÁP DỤNG “Sổ tay” tài liệu cung cấp kiến thức, kỹ bản, cần thiết chuẩn hóa thao tác PTN nhằm đảm bảo an toàn cho ngƣời sử dụng, an toàn cho thiết bị, an toàn cho mơi trƣờng cộng đồng Ngồi tài liệu đƣợc xem tiêu chuẩn cho đánh giá mức độ tin cậy chuẩn mực kết nghiên cứu, phân tích đào tạo Các cán bộ, sinh viên, học viên cao học, nghiên cứu sinh phải nắm vững hƣớng dẫn tài liệu để phòng tránh và/hoặc ứng phó với cố xảy làm việc phịng thí nghiệm đạt chuẩn Vilas 17025:2017 mở rộng cho PTN nghiên cứu chun sâu, phịng thực hành chun ngành cơng nghệ sinh học/cơng nghệ sinh học mơi trƣờng Ngồi PTN có quy định đặc thù chun mơn riêng nhằm đảm bảo an tồn cho ngƣời tài sản 1.2 PHÂN CẤP TRÁCH NHIỆM Sơ ph ng Thử nghiệ Vi 025-2017 Trƣởng phòng thử nghiệm Quản l kỹ thuật Quản l chất lƣợng iểm nghiệm viên Cá nhân hoạt động PTN 1.2.1 T h nhiệ ủ T ƣ ng ph ng nghiệ + Chịu trách nhiệm trƣớc Viện trƣởng hoạt động PTN + Chịu trách nhiệm chung hoạt động quản l kỹ thuật PTN + Đảm bảo xây dựng trì hoạt động PTN phù hợp với chuẩn mực quy định theo ISO/IEC 17025:2017 + Xem xét tài liệu, quy định liên quan tới hoạt động PTN trƣớc trình lãnh đạo Viện duyệt ban hành 1.2.2 T h nhiệ ủ Q ản hấ ƣ ng Q C + Phụ trách chất lƣợng chịu đạo trực tiếp Lãnh đạo Viện + Chịu trách nhiệm vấn đề chất lƣợng Đảm bảo xây dựng trì hoạt động PTN phù hợp với chuẩn mực quy định theo ISO/IEC 17025:2017 + Phổ biến, phân phối tài liệu hệ thống quản l đến tất cấp, nhân viên liên quan Viện Thu hồi huỷ bỏ tài liệu cũ ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TOÀN PHỊNG THÍ NGHIỆM + Lƣu giữ hồ sơ chất lƣợng, tài liệu hệ thống quản l , soát xét cập nhật hồ sơ, tài liệu + Duy trì hệ thống quản l thông qua việc xây dựng kế hoạch thực kế hoạch đánh giá nội bộ, xem xét lãnh đạo, hành động khắc phục phòng ngừa 1.2.3 T h nhiệ ủ Q ản kỹ h ậ Q KT + Chịu trách nhiệm chung vấn đề kỹ thuật hoạt động thử nghiêm + Xem xét tài liệu, quy định có liên quan tới hoạt động PTN trƣớc trình Lãnh đạo Viện duyệt ban hành + Thẩm xét kết thử nghiệm trƣớc trình trƣởng phịng phê duyệt, đƣợc phép k phiếu kết thử nghiệm Trƣởng phòng thử nghiệm vắng mặt, có ủy quyền + Quyết định vấn đề kỹ thuật PTN dừng tiếp tục công việc + Tổ chức thực phƣơng pháp thử nghiệm + Phối hợp h trợ với Trƣởng PTN QLCL hoạt động liên quan đến chất lƣợng thử nghiệm phòng + Thử nghiệm mẫu theo phân cơng Trƣởng phịng + Tham gia vào việc kiểm tra bảo trì thiết bị phòng 1.2.4 Kỹ h ậ viên + Thực việc thử nghiệm mẫu theo đ ng hƣớng dẫn phƣơng pháp quy định + Duy trì áp dụng hệ thống quản l chất lƣợng theo tiêu chuẩn ISO/ IEC 17025: 2017 + Quản l tốt trang thiết bị, dụng cụ đo hiệu chuẩn thuộc phạm vi đƣợc phân công quản l không để hƣ hỏng, mát bảo đảm sẽ, trật tự, ngăn nắp nơi làm việc + Thực công việc khác PTN Trƣởng PTN giao 1.3 CÁC CÁ NHÂN HOẠT ĐỘNG TẠI PTN Các cá nhân thực hoạt động nghiên cứu, đào tạo, phân tích PTN chịu trách nhiệm cho an tồn an toàn đồng nghiệp, khách mời, cộng tác viên làm việc chung M i cá nhân làm việc PTN phải: Đƣợc hƣớng dẫn thao tác sử dụng thiết bị làm việc Đƣợc hƣớng dẫn an toàn PTN Biết nơi để trang thiết bị an toàn Tuân thủ thủ tục quy phạm thực hành PTN Báo cáo tất tai nạn, cố tránh đƣợc khả phơi nhiễm hóa chất, vi khuẩn nguy hiểm đến trƣởng PTN (T.PTN) Số điện thoại khẩn cấp (ĐT C) 1.4 MỘT SỐ QUI ĐỊNH CHUNG VỀ AN TOÀN TRONG PTN + Tất cá nhân làm việc PTN phải đƣợc học tập, kiểm tra nội quy an toàn lao động, nắm vững quy trình, quy phạm kỹ thuật biện pháp đảm bảo an toàn lao động ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TOÀN PHỊNG THÍ NGHIỆM + M i ngƣời làm việc, giữ gìn vệ sinh tuân thủ hƣớng dẫn T.PTN nơi qui định + Phải đọc kỹ tài liệu, hiểu rõ chi tiết thí nghiệm trƣớc tiến hành dự báo trƣớc cố xảy để chủ động phịng tránh + Quần áo, trang phục PTN phù hợp với nhiệm vụ yêu cầu PTN + hông gây trật tự PTN + hông h t thuốc, ăn uống, mang thức ăn vào PTN Thực phẩm không đƣợc bảo quản tủ lạnh PTN + Vệ sinh nơi thí nghiệm trƣớc sau tiến hành Bỏ chất thải đ ng nơi quy định + Các dụng cụ thí nghiệm nhƣ trang thiết bị an toàn phải để đ ng nơi quy định + Giữ lối hiểm thơng thống đề phịng trƣờng hợp khẩn cấp + Sử dụng loại thùng rác thích hợp khơng đƣợc để rác tích lũy PTN + kiểm tra điện nƣớc, vịi nƣớc khóa cửa trƣớc 1.5 QUY TẮC CHUNG VỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU hi cá nhân thực nghiên cứu cần trung thực trực thể tôn trọng đối tƣợng tham gia vào việc nghiên cứu, bao gồm ngƣời, động vật thí nghiệm môi trƣờng thể trân trọng ghi nhận vai trị, cơng sức đóng góp cộng sự, đồng tác giả, ngƣời trƣớc thực truyền thơng kết nghiên cứu cách có trách nhiệm sử dụng nguồn ngân sách công dành cho việc nghiên cứu cách xác đáng Những quy tắc thực công việc nghiên cứu: Tuân thủ quy định, yêu cầu, chấp thuận đƣợc thông tin đầy đủ đối tƣợng tham gia nghiên cứu Tôn trọng bảo mật riêng tƣ Quản l công bố liệu nghiên cứu 1.6 TAI NẠN THƢỜNG GẶP VÀ CÁCH XỬ Ý Hãy ôn nhớ rằng: Tai nạn đến bất ngờ xảy với Hậu thường thảm khốc Tai nạn bắt nguồn từ chủ quan, hời hợt thiếu nghiêm túc khơng tn thủ dẫn an tồn làm việc Hậu tai nạn nghiêm trọng khơng đủ bình tĩnh để xử lý thiếu ý thức bảo vệ người xung quanh Ph ng ngừ ôn ƣ iên ố ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Việc xử ó i nạn xảy hiệu nắ õ: Vị trí cửa lối hiểm để đến nơi an tồn Vị trí thiết bị chữa cháy, hệ thống rửa mắt/tắm tủ y tế sơ cứu Cách sơ cứu xử lý có tai nạn xảy C i nạn hƣờng gặp ong PTN Ch y n Tiê ệnh chữ h y quy định an tồn phịng cháy chữa cháy dẫn, hƣớng dẫn bƣớc để khắc phục lửa tránh lan rộng giữ an tồn tính mạng cho ngƣời m i có hỏa hoạn Tiê ệnh chữ h y đ ng tiêu chuẩn gồm có bƣớc: hi có xảy cháy nổ phải báo động gấp C p cầu dao điện gặp cháy nổ Dùng bình chữa cháy, cát, nƣớc để dập lửa Gọi điện 114 đến đội phòng cháy chữa cháy chuyên nghiệp Xử : Ngay báo động Tắt hệ thống điện khu vực cháy nổ Cô lập dụng cụ, hệ thống hóa chất với đám cháy Lập tức đƣa ngƣời bị thƣơng khỏi khu vực nguy hiểm sơ cứu cần thiết Sử dụng phƣơng tiện chữa cháy thích hợp để dập lửa Nếu khơng thể kiểm sốt, di chuyển nơi an tồn h trợ ngƣời xung quanh Gọi 114 hay ngƣời có Trách nhiệm tùy mức độ nguy hiểm Chảy vế hƣơng bị cắt Nếu vết thƣơng nhỏ bị dụng cụ có dính hóa chất gây ra: Nếu khơng tự sơ cứu đƣợc gọi trợ gi p ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Cho vết thƣơng chảy máu vài ph t rửa vết thƣơng với nhiều nƣớc Sát trùng vết thƣơng nƣớc oxy già hay cồn y tế Băng vết thƣơng lại đến trạm y tế để kiểm tra (mang theo MSDS) Nếu vết thƣơng lớn, sâu chảy máu nhiều (có hay khơng dính hóa chất) Lập tức kêu gọi gi p đỡ tiến hành cầm máu cách ấn mạnh vào miệng vết thƣơng (nên dùng khăn hay gạc y tế) Băng chặt vết thƣơng nhanh chóng đến trung tâm y tế gần Thông báo trạng hóa chất nhiễm (cùng với MSDS) Bỏng nhiệ ộ cao Rất dễ xảy thao tác với hệ thống có nhiệt độ cao, hay gần lửa, quần áo hay tóc khơng gọn gàng hơng đƣợc sơ cứu kịp thời đ ng cách làm nhiễm trùng, hoại tử hay tử vong, bỏng nặng gây ảnh hƣởng sức khỏe lâu dài Xử : Lập tức tách khỏi nguồn nhiệt, cháy tóc hay quần áo cởi bỏ quần áo dập lửa phƣơng tiện thích hợp Nhanh chóng cởi bỏ vải trang sức quanh khu vực bị bỏng ngâm vết bỏng vào nƣớc mát 10 ph t (không dùng nƣớc đá đặt lên ch bỏng) Băng vết thƣơng gạc y tế đến trung tâm y tế gần Tuyệt đối không bôi thuốc hay kem lên vết thƣơng đƣợc bác sĩ định ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Bỏng hó hất Rất dễ xảy thao tác với hóa chất có khả phá hủy mô sống, hậu nghiêm trọng hóa chất nhiệt độ cao Nếu không đƣợc sơ cứu kịp thời đ ng cách dễ nhiễm trùng, hoại tử hay tử vong, thƣờng gây hậu nghiêm trọng ảnh hƣởng lâu dài đến sức khỏe Xử : Lập tức yêu cầu h trợ cảnh báo ngƣời xung quanh hóa chất gây tai nạn Bản thân hay ngƣời h trợ mang bảo hộ thích hợp xử l Ngay tách phần lớn hóa chất khỏi vết thƣơng Ch hóa chất có phản ứng với nƣớc cần lau vết thƣơng vải khơ trƣớc Sau nhanh chóng rửa vết thƣơng nhiều nƣớc 15-20 ph t Nếu hóa chất dính vào mắt, nhanh chóng rửa mắt 15-20 ph t bồn rửa Nếu hóa chất văng vào thể, cởi bỏ đồ bên dùng vịi tồn thân để rửa thật kỹ Nhanh chóng đến trung tâm y tế gần (cầm theo MSDS) Hó hấ vãi Rất dễ xảy cân, đong, nạp hay di chuyển hóa chất làm vỡ nhiệt kế Gây ảnh hƣởng xấu đến sức khỏe có tác động lâu dài, đặc biệt có khả tác động diện rộng nguyên nhân cho tai nạn khác nhƣ cháy nổ, v.v Xử : Ngay cảnh báo cho ngƣời xung quanh báo cáo cho Ngƣời quản l gần ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Mang bảo hộ xử l Cách ly nguồn lửa, nguồn nhiệt với hóa chất rơi vãi Sơ tán khỏi phịng đóng cửa để lập khu vực l c chờ Ngƣời có nhiệm vụ xử l Đối với chai lọ: nhặt thu gom mảnh vỡ lớn để vào nơi riêng chờ xử l Đối với hóa chất rắn: dùng dụng cụ quét dọn để hốt, dụng cụ đƣợc để riêng xử l Đối với hóa chất lỏng: lập khu vực hóa chất rơi vãi phủ lên khu vực vật liệu thấm h t thích hợp, sau thu dọn h n hợp chất thấm h t hóa chất lỏng tƣơng tự nhƣ hóa chất rắn Đối với thủy ngân vƣơng vãi: sử dụng bột lƣu huỳnh rắc lên ch có thủy ngân, sau dùng miếng bìa để hốt phần lớn thủy ngân cho vào nợi đựng có nắp đậy kín, dùng băng dính để thu dọn phần bột mịn h n hợp thủy ngân – lƣu huỳnh cịn sót lại Giảm bớt đèn rọi đèn pin để kiểm tra xem cịn thủy ngân rơi vãi khơng Thơng gió cho phịng (khơng sử dụng máy điều hịa) Tuyệt đối khơng dùng máy h t hay chổi để dọn thủy ngân rơi vãi Hó hấ i vào hể Rất dễ xảy ăn uống phịng thí nghiệm, dùng chai lọ, hộp đựng thực phẩm để đựng hóa chất Thao tác với hóa chất độc hại dễ bay nhƣng không sử dụng h t hay trang bị mặt nạ, trang, găng tay thích hợp Gây ảnh hƣởng xấu đến sức khỏe mức độ mãn tính hay cấp tính Xử : Khi bị phơi nhiễm hóa chất (đƣờng thực quản, khí quản hay da), đặc biệt nồng độ cao cần đến trung tâm y tế gần để kiểm tra sức khỏe (cầm theo MSDS) Sau thời gian làm việc với hóa chất, có dấu hiệu lạ cần đến trạm y tế gần để kiểm tra (mang theo thơng tin hóa chất thƣờng xuyên làm việc) hi phát có hóa chất phát tán khơng khí, cảnh báo với ngƣời sơ tán khỏi khu vực Báo cho ngƣời có chức cố gắng lập khu vực bị phát tán, hi có cá nhân hít phải hóa chất, cần đƣa họ ch thống khí u cầu h trợ y tế (tùy theo mức độ thông tin từ MSDS) ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM hi phát có hóa chất nhãn hay đựng chai, hộp thƣờng dùng cho thực phẩm cần cảnh báo cho ngƣời, cô lập ch ng lại báo cho ngƣời có chức để xử l hi có cá nhân nuốt phải hóa chất, kiểm tra thông tin MSDS thực sơ cứu đƣợc dẫn, đồng thời đƣa tới trung tâm y tế gần hi phát có chai lọ khơng đậy nắp hay hóa chất rơi vãi, cần cảnh báo ngƣời xung quanh tiến hành cô lập ch ng Bị ngất Rất dễ xảy đột ngột hít phải hóa chất, sức khỏe không đảm bảo, làm việc môi trƣờng ngột ngạt Đột ngột ngất dẫn tới tai nạn khác,nếu không đƣợc sơ cứu kịp thời nguy hiểm Xử : Gọi tên liên tục để kiểm tra tình trạng Ngay đƣa ngƣời bị ngất nơi thống khí Đặt ngƣời bị ngất nằm xuống nới lỏng quần áo Giữ ấm thể ngƣời bị ngất Gọi cấp cứu TIẾP XÚC QUA ĐƯỜNG HÔ HẤP - Các hợp chất độc hại khơng khí - Bụi bặm - Sol khí TIẾP XÚC QUA DA TIẾP XÚC QUA ĐƯỜNG MIỆNG - Phóng xạ - Dung môi - Thực phẩm - Nước uống - Đất bụi bặm ATPTN Lần ban hành: 01 Trang / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM hơng đổ ngƣợc lại vào chai lƣợng hóa chất thừa Xử l chai sau sử dụng hết hóa chất bên hơng để mẫu/hóa chất mặt bàn thí nghiệm hay tủ h t sau thí nghiệm/ phân tích xong Định kỳ kiểm kê hóa chất Xử l hóa chất cũ, hết hạn, không sử dụng hông đƣợc lƣu giữ hóa chất lối hiểm, lối khu vực dành cho trƣờng hợp khẩn cấp Lƣu trữ hóa chất nơi khơ mát, tránh ánh sáng mặt trời chiếu trực tiếp Sử dụng dụng cụ an toàn (xe đẩy, thùng cao su …) vận chuyển hóa chất, vận chuyển bên ngồi khu vực PTN Trưởng phịng thí nghiệm phải chịu trách nhiệm kiểm tra, phân loại hóa chất PTN thực theo quy định Nghị định số 26/2011/NĐ-CP Chính phủ ban hành ngày 8.4.2011 thực công tác quản lý lưu giữ sử dụng nhằm đảm bảo an toàn tối đa có phương án ứng phó, xử lý hiệu có cố hóa chất ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 12 / 24 SỔ TAY AN TOÀN PHỊNG THÍ NGHIỆM 2.5 An ồn dụng thiết bị/ dụng cụ Làm việc PTN phải học tập, kiểm tra nội quy an toàn sử dụng thiết bị, nắm vững quy trình, quy phạm kỹ thuật biện pháp đảm bảo an toàn lao động Tất dụng cụ thùng chứa sử dụng để làm thí nghiệm với hóa chất, vi sinh vật phải đƣợc dán nhãn thích hợp dấu hiệu dễ nhận biết Một số lƣu làm việc với nito lỏng đá khơ: có liên quan tới nguy bị bỏng lạnh ngạt thở thiếu oxy (nhiệt độ N2 lỏng -1960C CO2 -780C) Nồng độ CO2 khoảng 10 -20% gây chết ngƣời An tồn với bình khí nén: độc hại, dễ cháy, oxy hịa tan, ăn mịn, trơ hơng để bình khí nơi có nhiệt độ cao 500C nhiệt độ cao làm thiết tăng áp suất mức hông sử dụng thiết bị điện tay có nƣớc thiết bị bị hỏng hay rị rĩ điện hơng đƣợc để vật liệu dễ cháy nổ gần thiết bị sinh nhiệt 2.6 An oàn hất thải Sinh viên, kỹ thuật viên PTN chủ động phân loại chất thải không nguy hiểm nguy hiểm để xử l riêng Tính tốn lƣợng sử dụng vừa đủ, giảm lƣợng hóa chất dƣ thừa cho nghiên cứu Chất thải không nguy hiểm: Cồn, nƣớc, chế phẩm thực vật, nguyên liệu tự nhiên, giấy, bao bì đựng thực phẩm, mẫu thực phẩm, mỹ phẩm … => rác thải sinh hoạt Chất thải nguy hiểm: dung môi hữu cơ, acid, x c tác, mẫu thí nghiệm, dầu nhờn, muối vô cơ, vi sinh vật … => quy trình xử l phù hợp Chất thải nguy hiểm: Đựng chai/bình đƣợc đậy kín, có dán nhãn thông tin đầy đủ Gom chất thải tƣơng tự, khơng phản ứng vào chai đậy kín ( hơng để hóa chất có Cl với hóa chất khơng có Cl) Chai khơng có hóa chất nên rửa để xử l riêng Để gọn gàng đ ng nơi quy định Xử l tồn hóa chất, mẫu thí nghiệm sau kết th c thời gian nghiên cứu PTN ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 13 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Chƣơng 3: AN TỒN SINH HỌC An tồn sinh học PTN có làm việc đối tƣợng sinh vật việc áp dụng hiểu biết, kỹ thuật phƣơng tiện để ngăn chặn phơi nhiễm cho ngƣời, PTN môi trƣờng trƣớc tác nhân có nguy gây nhiễm Các tác nhân virus, vi sinh vật, nguyên sinh động vật, mô tế bào nuôi cấy, máu… Để đảm bảo an toàn làm việc PTN sinh học, cá nhân phải tìm hiểu thực đ ng qui định, nội quy PTN hƣớng dẫn 3.1 NHĨM NGUY CƠ VÀ CÁC CẤP ĐỘ AN TỒN SINH HỌC CỦA PTN Vấn đề cốt lõi thực hành an toàn sinh học việc đánh giá nguy thí nghiệm, mẫu vật, sinh vật nghiên cứu nhằm lựa chọn, sử dụng trang thiết bị an toàn phù hợp Sử dụng đối tƣợng sinh vật thí nghiệm ln tiềm ẩn nguy gây bệnh cho ngƣời môi trƣờng xung quanh Việc phân loại sinh vật gây bệnh theo nhóm nguy dựa vào yếu tố nhƣ khả gây bệnh sinh vật, phƣơng thức lan truyền bệnh yếu tố vật chủ Các loại sinh vật gây bệnh đƣợc chia thành nhóm nguy cơ: Nhóm nguy 1: Sinh vật thƣờng khơng có khả lây bệnh cho ngƣời động vật Ví dụ: Bacillus subtilis, Naegleria gruberi, Escheria coli … Nhóm nguy 2: tác nhân gây bệnh có khả gây bệnh cho ngƣời động vật, nhƣng không trở thành mối nguy hiểm lớn ngƣời thực thí nghiệm, cộng đồng, vật ni hay mơi trƣờng Có phƣơng pháp dự phòng điều trị hiệu Khả lây trƣờng cộng đồng thấp Nhóm nguy 3: tác nhân gây bệnh thƣờng nặng cho ngƣời động vật, nhiên điều kiện bình thƣờng khơng lây nhiễm từ cá thể sang cá thể khác Có biện pháp điều trị phịng ngừa hiệu Ví dụ: vi khuẩn than, virus c m A/H5N1, virus SARS… Nhóm nguy 4: tác nhân gây bệnh thƣờng gây bệnh cho ngƣời động vật, đồng thời dễ lây truyền từ cá thể sang cá thể khác cách trực tiếp hay gián tiếp Chƣa có biện pháp điều trị phịng ngừa hiệu Ví dụ: Ebola, virus Marburg … 3.2 QUY ĐỊNH KHI ÀM VIỆC TRONG PTN AN TOÀN SINH HỌC CẤP Phần lớn PTN sinh học A1 A2 PTN an toàn sinh học cấp Trƣờng hợp nghiên cứu chuyển gen đối tƣợng có nguy rủi ro cao xảy môi trƣờng đa dạng sinh học, cần thực theo Thông tƣ số 21/2012/TT-B HCN ngày 20/11/2012 Bộ H & CN quy định an toàn sinh học hoạt động nghiên cứu, phát triển công nghệ sinh vật biến đổi gen PTN an toàn sinh học cấp 1: áp dụng cho nghiên cứu giảng dạy đƣợc thực hoạt động nghiên cứu chuyển gen, phân tích phát sinh vật biến đổi gen, mẫu vật ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 14 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM di truyền sản phẩm sinh vật biến đổi gen đánh giá, kiểm định tiêu chuẩn chất lƣợng, rủi ro đối tƣợng khơng xảy mơi trƣờng, đa dạng sinh học sức khỏe ngƣời, vật ni Quy định làm việc PTN an tồn sinh học cấp 1: Đeo găng tay thao tác thí nghiệm để hạn chế tiếp x c với hóa chất vật liệu sinh học Sau sử dụng, tháo bỏ găng tay đ ng cách rửa tay Rửa tay sau tiếp x c với vật liệu sinh học có hoạt tính trƣớc nghỉ giải lao kết th c công việc hông chạm tay vào mặt, đặc biệt mắt, mũi miệng thao tác thí nghiệm Nếu vơ tình đƣa chất lạ vào miệng, phải khạc nhổ s c miệng nƣớc nhiều lần hi làm tràn, đổ vỡ, rơi vãi hóa chất hay có khả phơi nhiễm với vật liệu sinh học lây nhiễm, phải báo cho ngƣời phụ trách PTN để xử l hông đổ vật liệu sinh học có hoạt tính vào đƣờng nƣớc Khử trùng dụng cụ thí nghiệm rác thải trƣớc đƣa bên ngồi Rác thải hóa chất cần đƣợc xử l dƣới giám sát cán phụ trách PTN Vệ sinh dụng cụ, thiết bị thí nghiệm sau sử dụng hơng đƣợc để mặt bàn dụng cụ có nguy lây nhiễm (pipet, kim tiêm, que cấy …) 3.3 TIẾP NHẬN VÀ VẬN CHUYỂN NGUYÊN VẬT LIỆU Tiếp nhận vậ iệ Các vật liệu sinh học mang vào phịng thí nghiệm tình trạng cịn phát triển cịn ngun vẹn đƣợc niêm phong dụng cụ chứa mẫu đƣợc đặt dụng cụ chứa phụ Những tác nhân có khả phát triển đƣợc mở bao gói bên tủ an tồn sinh học phịng thí nghiệm Th dọn / vận h yển vậ iệ Việc vận chuyển vật liệu phải đƣợc cho phép Trƣởng PTN Đối với tiến trình kiểm nghiệm, khử nhiễm an toàn đặc biệt, yêu cầu bệnh phẩm, mô hay mẫu quan vận chuyển từ phịng thí nghiệm đến phịng thí nghiệm khác phải đặt dụng cụ chứa đƣợc định dụng cụ chứa an toàn Mẫu có khả lây nhiễm đƣợc vận chuyển từ phịng thí nghiệm phải đƣợc đặt dụng cụ chứa mẫu đƣợc niêm phong đƣợc đặt dụng cụ chứa phụ Các dụng cụ chứa mẫu cần đƣợc phun thuốc khử trùng thích hợp ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 15 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Đặt dụng cụ chứa mẫu vào dụng cụ chứa phụ vật liệu chống thấm nƣớc Phun thuốc khử trùng thích hợp lên dụng cụ chứa mẫu phụ Chuyển dụng cụ chứa mẫu phụ đến phòng chuẩn bị 3.4 LAU DỌN CHẤT ĐỔ TRÀN GÂY NGUY CƠ SINH HỌC Nhân viên đƣợc đào tạo đƣợc phép thu dọn, khử trùngnvà làm vật liệu có khả lây nhiễm bị đổ tràn Dùng chất khử trùng phù hợp để làm theo thời gian qui định để khử trùng Phải thực theo hƣớng dẫn nhà sản xuất Thiết bị bảo hộ cá nhân cho tiến trình bao gồm áo khốc áo choàng găng tay Ngoài ra, trang bị thêm mặt nạ, giày ống cao, kín hay dụng cụ h trợ hô hấp trƣờng hợp cần thiết Tất cố đổ tràn phải đƣợc báo cáo cho trƣởng PTN 3.5 SỬ DỤNG TỦ AN TOÀN SINH HỌC Tất tiến trình liên quan đến tạo thành khí từ vật liệu có khả lây nhiễm tủ an toàn sinh học thiết bị liên quan khác Các tủ an toàn sinh học phải có xác nhận hàng năm di chuyển nhằm xác minh hiệu suất hoạt động hệ thống thơng khí thích hợp Tủ an tồn sinh học đƣợc chứng nhận nhà kiểm định độc lập đƣợc tiến hành kiểm soát định kỳ 3.6 VẬN HÀNH TRANG THIẾT BỊ PHỊNG THÍ NGHIỆM 3.6.1 Sử dụng n i hấp / khử ùng Chuẩn bị loại bao bì, thùng hấp autoclave, t i thùng hấp … Tách riêng thùng hấp / t i hấp khử trùng phịng thí nghiệm Thêm nƣớc / dung dịch diệt khuẩn - hông dùng nồi hấp đồng vị phóng xạ chất nổ chất dễ bay mà khơng có kiểm tra an tồn xạ, an tồn phịng thí nghiệm an tồn sinh học Nếu có thể, sử dụng nồi hấp chuyên dụng - nồi hấp "bẩn" để khử nhiễm nồi hấp "sạch" dùng cho tiệt trùng hấp mơi trƣờng sinh học Cài đặt thích hợp cho loại chu trình, loại số lƣợng vật liệu Thông tin chi tiết hoạt động cài đặt thích hợp đƣợc thiết lập sẵn thiết bị điều khiển riêng Theo dõi q trình hấp với chu trình thời gian thích hợp Chu trình thời gian hấp phụ thuộc vào vật liệu muốn tiệt trùng hi chu trình hồn tất, cẩn thận mang thiết bị bảo hộ cá nhân thích hợp tn thủ đ ng tiến trình lấy vật liệu ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 16 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Dụng cụ chứa nồi hấp autoclave, vật liệu cần đƣợc khử trùng nên đƣợc mang đến nồi hấp dụng cụ chứa kín Dụng cụ chứa đƣợc sử dụng để giữ vật liệu CHÚ Ý: Việc mở cửa nồi hấp nhanh dẫn đến vỡ thủy tinh / bỏng nƣớc da Các nguyên vật liệu đƣợc khử trùng nên đƣợc làm nguội 10 ph t trƣớc đƣợc đƣa khỏi nồi hấp Những iề ần nh: Tránh việc nƣớc khơng thể xâm nhập vào t i hấp (ví dụ, đóng chặt nắp) nhiệt độ bên t i khí thấp nhiều so với nƣớc bão hịa Tránh gói q khơ, bổ sung thêm nƣớc Để tránh tạo khí dung châm thêm nƣớc, cho nƣớc chảy xuống thành thùng chứa thay đổ nƣớc trực tiếp lên vật liệu thùng Thƣờng xuyên kiểm tra phận nồi hấp iểm tra độ ăn mòn hƣ hỏng chốt đóng cửa nồi hấp ch bịt kín Loại bỏ mảnh vụn từ ống dẫn dƣới đáy khoang hồi hấp lớp cao su cửa đóng Nếu gặp vấn đề, kịp thời thông báo cho ngƣời giám sát không vận hành nồi hấp sửa chữa 3.6.2 Sử dụng y y â Đọc tất hƣớng dẫn bảo dƣỡng sử dụng máy ly tâm Giữ cho tất thiết bị máy ln Tránh sử dụng chất hóa học ăn mịn làm yếu phận máy ly tâm Dùng nƣớc h n hợp thuốc nhuộm không nhiễm khuẩn để kiểm tra phận hay rò rĩ lọ chứa máy ly tâm Đợi mƣời ph t trƣớc mở máy để tránh hít phải khí dung sử dụng máy siêu ly tâm hay máy ly tâm tốc độ cao 3.6.3 Sử dụng vi óng hi nấu chảy thạch phải thực biện pháp sau để ngăn chặn vụ nổ: nới lỏng nắp chai đƣa vào lị vi sóng ngƣời thực phải đeo thiết bị bảo hộ cá nhân thích hợp bao gồm áo phịng thí nghiệm tạp đề, găng tay chịu nhiệt chắn bảo vệ mặt 3.6.4 oại bỏ hiế bị ô nhiễ Bất thiết bị (nhƣ tủ lạnh, tủ âm, tủ ấm, máy ly tâm, tủ an toàn sinh học thiết bị tƣơng tự khác) đƣợc sử dụng thao tác trực tiếp, xử l hay cất giữ vật liệu có tác nhân sinh học nguy hiểm cần phải đƣợc khử nhiễm trƣớc sửa chữa, bảo trì loại khỏi phịng thí nghiệm Xóa k hiệu rủi ro sinh học dán tem “cho phép di chuyển” thiết bị trƣớc đƣợc chuyển 3.7 ỨNG PHĨ SỰ CỐ SINH HỌC Có nhiều cố xảy PTN Những cố sai sót thao tác ngƣời làm thí nghiệm nhƣ bị tràn đổ dung dịch chứa tác nhân gây bệnh, bị vật sắc ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 17 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM nhọn đâm vào tay chân làm việc hay cố điện, thiên tai, hỏa hoạn …Ngƣời thực thí nghiệm phải đƣợc cảnh báo cố xảy đƣợc hƣớng dẫn xử l cố 3.7.1 Chấ hải ỏng Nên sử dụng dụng cụ chứa khơng rị rĩ để chứa chất thải lỏng Các chất thải lỏng đƣợc khử nhiễm cách cho vào chất sát trùng nồng độ 10% thuốc tẩy chuyên dụng khác với nồng độ theo hƣớng dẫn nhà sản xuất Trộn ngâm 15 ph t theo thời gian khuyến cáo nhà sản xuất, hay cách tốt Sau đổ dung dịch khử nhiễm vào chậu tráng rửa với lƣợng nƣớc lớn Các chất thải lỏng khơng tƣơng thích với thuốc tẩy phải đƣợc khử nhiễm cách khử trùng nƣớc (ví dụ: nồi hấp ) trƣớc loại bỏ 3.7.2 Vậ ắ nhọn Quản l cẩn thận ống tiêm vật sắc nhọn khác điều quan trọng Luôn đề phòng dụng cụ sắt nhọn nhƣ: ống tiêm, xilanh có kim tiêm kèm theo, dao mổ, cuộn dây théo, pipette thủy tinh … hông đƣợc uốn cong, làm biến dạng, làm gãy ống tiêm hay đậy nắp khác loại, nắn bóp tay trƣớc loại bỏ loại bỏ ống tiêm dùng lần Những vật sắc nhọn sau dùng phải đƣợc đặt hộp chứa nhựa sớm tốt Dụng cụ chứa vật sắc nhọn phải đƣợc đặt gần nơi vật sắc nhọn đƣợc sử dụng Công đoạn xử l cuối đậy nắp đặt “dụng cụ chứa vật liệu nhiễm bẩn” đầy ¾ bình 3.7.3 Chấ hải ây nhiễ , ng y hại inh họ h y hấ hải y ế Chất thải lây nhiễm cần đƣợc tiêu hủy theo Quyết định số 43/2007/QĐ-BYT ngày 30/11/2007 Bộ Y Tế việc ban hành Quy chế Quản l chất thải y tế Trong PTN, việc khử trùng chất thải thải bỏ ch ng sau có liên quan chặt chẽ với Nguyên tắc hàng đầu tất vật liệu nhiễm trùng phải đƣợc khử trùng, trùng tiêu hủy PTN Cần phải có hệ thống chuyên biệt dùng cho chất thải lây nhiễm dụng cụ chứa Hệ thống phải tuân theo quy định quốc gia quốc tế Sau tóm tắt quy định cần phải thực hiện: Chất thải khơng nhiễm (lây nhiễm) sử dụng tái sinh thải bỏ nhƣ chất thải thông thƣờng Vật sắc nhọn nhiễm trùng nhƣ kim tiêm dƣới da, dao mổ, mảnh thủy tinh vỡ phải thu nhặt lại thùng chứa chống chọc thủng có nắp đậy xử l nhƣ chất thải lây nhiễm nhiễm trùng vật liệu ô nhiễm cách hấp tiệt trùng sau rửa để tái sử dụng tái sinh nhiễm vật liệu ô nhiễm hấp tiệt trùng thải bỏ Trực tiếp tiêu hủy chất thải lây nhiễm ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 18 / 24 ... bị liên quan thí nghiệm Nắm vững cách thức xử l thí nghiệm có cố Lựa chọn thời gian, bố trí thí nghiệm hợp l Dọn dẹp dụng cụ, hóa chất liên quan kết th c thí nghiệm Chỉ tiến hành thí nghiệm đƣợc... Xử l tồn hóa chất, mẫu thí nghiệm sau kết th c thời gian nghiên cứu PTN ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 13 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Chƣơng 3: AN TỒN SINH HỌC An tồn sinh học PTN có làm... hóa chất - Material safety data sheets - MSDS) ATPTN Lần ban hành: 01 Trang 10 / 24 SỔ TAY AN TỒN PHỊNG THÍ NGHIỆM Tìm hiểu nắm vững kỹ thuật thực hành liên quan đến thí nghiệm chuẩn bị Đăng