(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro các giống mía br2, br7515 và qđ 93 159 nhập nội

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHAN ĐÌNH NHÂN Tên đề tài: NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH NHÂN IN VITRO CÁC GIỐNG MÍA BR2, BR7515 VÀ QĐ 93-159 NHẬP NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ sinh học Khoa : Công nghệ sinh học Cơng nghệ thực phẩm Khố : 2010 – 2014 Thái Nguyên, 2014 n ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM PHAN ĐÌNH NHÂN Tên đề tài: NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH NHÂN IN VITRO CÁC GIỐNG MÍA BR2, BR7515 VÀ QĐ 93-159 NHẬP NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : Công nghệ sinh học Cơng nghệ thực phẩm Khố : 2010 – 2014 Giáo viên hướng dẫn : TS Hà Thị Thúy Viện di truyền nông nghiệp Ths Nguyễn Thị Tình Khoa CNSH & CNTP Trường ĐHNL Thái Nguyên Thái Nguyên, 2014 n LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận tốt nghiệp trước hết tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới TS Hà Thị Thúy, phó Viện trưởng Viện Di Truyền Nơng Nghiệp Cô tạo điều kiện thuận lợi tận tình hướng dẫn tơi tồn q trình thực tập hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới cô Th.s Nguyễn Thị Tình khoa CNSHCNTP, trường ĐH Nơng Lâm Thái Ngun hướng dẫn, giúp tơi thực tập hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới chị Đỗ Thị Vân tận tình bảo tơi suốt thời gian thực tập khoa luận trạm thực nghiệm Sinh học Công nghệ cao Văn Giang – Hưng n Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể cô chú, anh chị làm việc trạm thực nghiệm Sinh Học Công nghệ cao, Văn Giang, Hưng Yên; trực thuộc Viện Di Truyền Nông Nghiệp, tạo điều kiện tối đa cho tơi tồn q trình thực tập Tôi xin gửi lời cảm ơn biết ơn sâu sắc tới tập thể thầy cô giảng dạy khoa CNSH – CNTP, Trường ĐH Nông Lâm Thái Nguyên hướng dẫn, giảng dạy suốt q trình học tập trường Cuối tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè ln bên động viên tạo điều kiện giúp hồn thành khóa luận Thái Ngun, ngày 01 tháng 06 năm 2014 Sinh viên Phan Đình Nhân n DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 4.1: Khả tạo chồi chồi ba giống mía Br7515, Br2 QĐ93-159 sau tuần nuôi cấy 29 Bảng 4.2: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus hai giống mía Br2 Br7515 31 Bảng 4.3: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus giống mía QĐ 93-159 32 Bảng 4.4: Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus giống mía BR2 BR7515 35 Bảng 4.5: Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus giống mía QĐ 93-159 35 Bảng 4.6: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi của giống mía Br2, Br7515 sau tuần ni cấy 38 Bảng 4.7: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi của giống mía QĐ93-159 39 Bảng 4.8: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống mía Br2 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) 42 Bảng 4.9: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống mía Br7515 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) 42 Bảng 4.10:Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống QĐ93-159 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) 43 Bảng 4.11: Nghiên cứu ảnh hưởng chất đến tỷ lệ sống vườn ươm 46 n DANH MỤC HÌNH Trang Hình 4.1: Chồi mía mơi trường ni cấy 28 Hình 4.2 Biểu đồ thể Khả tạo chồi chồi ba giống mía Br7515, Br2 QĐ93-159 sau tuần ni cấy 29 Hình 4.3: Chồi tái sinh từ callus sau tuần cấy chuyển 31 Hình 4.4: Biểu đồ thể ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus ba giống mía Br7515, Br2 QĐ93-159 32 Hình 4.5: Ảnh hưởng nồng độ BAP đến trình tái sinh chồi từ callus cau tuần nuôi cấy 34 Hình 4.6: Biểu đồ thể ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus ba giống mía Br2, Br7515 QĐ93-159 36 Hình 4.7: Ảnh hưởng nước dừa đến dự hình thành chồi từ callus sau tuần nuôi cấy 37 Hình 4.8 Biểu đồ thể ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi ba giống mía BR2, QĐ 93-159 BR7515 39 Hình 4.9 Ảnh hưởng BAP kéo dài chồi sau tuần ni cấy 41 Hình 4.10: Biểu đồ thể ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ bất định giống mía Br2, Br7515 QĐ 93-159 tạo hồn chỉnh 43 Hình 4.11: Ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ sau tuần nuôi cấy 45 Hình 4.12: Cây sau rửa mơi trường hóa chất 45 Hình 4.13: Biểu đồ thể ảnh hưởng chất đến tỷ lệ sống vườn ươm 46 Hình 4.14: Mía ni cấy mơ vườn ươm sau 30 ngày 47 n DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BAP : 6- Benzyl Amino Purin IAA : Indol-3-Axetic acid IBA : 3-Indol Butyric acid NAA : α-Naphthyl Axetic acid 2,4 – D : 2,4-Dichlorophenoxy Axetic acid MS : Mura Shige Skoog CTMT : Cơng thức mơi trường TB : Trung bình CT : Công thức CV : Độ tin cậy LSD : Sai số nhỏ có ý nghĩa n MỤC LỤC Trang Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Mục đích nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa đề tài 1.4.1 Ý nghĩa học tập nghiên cứu khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn sản xuất Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật ứng dụng 2.1.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.2.1 Môi trường nuôi cấy 2.1.2.2 Vật liệu nuôi cấy 2.1.2.3 Điều kiện vô trùng 2.1.3 Các hướng ứng dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.3.1 Tạo dòng bệnh 2.1.3.2 Vi nhân giống bảo tồn gen 2.1.4 Các phương pháp vi nhân giống 2.1.4.1 Hoạt hóa chồi nách 2.1.4.2 Phương pháp tạo chồi bất định 10 2.1.4.3 Phương pháp tạo phơi vơ tính 10 2.1.4.4 Các bước nhân giống in vitro 11 2.2 Giới thiệu mía 13 2.2.1 Nguồn gốc, vị trí phân loại mía 13 2.2.2 Đặc điểm hình thái sinh thái mía 13 n 2.2.3 Phân loại giống mía Việt Nam 14 2.2.4 Ý nghĩa kinh tế mía 14 2.2.5 Tình hình sản xuất mía giới Việt Nam 15 2.2.5.1 Trên giới 15 2.2.5.2 Việt Nam 16 2.2.6 Tình hình nhân giống mía phương pháp in vitro giới 17 2.2.7 Tình hình nhân giống mía phương pháp in vitro Việt Nam18 Phần 3: ĐỐI TƯỢNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 19 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành 19 3.3 Hóa chất thiết bị 19 3.3.1 Hóa chất 19 3.3.2 Thiết bị 19 3.4 Nội dung nghiên cứu 20 3.5 Phương pháp nghiên cứu 20 3.5.1 Phương pháp nghiên cứu nội dung 20 3.5.2 Phương pháp nghiên cứu nội dung 21 3.5.3 Phương pháp nghiên cứu nội dung 24 3.5.4 Phương pháp nghiên cứu nội dung 24 3.6 Chỉ tiêu theo dõi, đánh giá 25 Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng vật liệu nuôi cấy chồi đỉnh chồi nách đến khả tái sinh chồi giống mía Br7515, Br2 QĐ93-159 28 4.2 Ngiên cứu ảnh hưởng chất đến trính tái sinh nhân nhanh chồi mía 30 n 4.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus ba giống mía Br7515, Br2 QĐ93-159 30 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus ba giống mía Br2, Br7515 QĐ93-159 34 4.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi ba giống mía BR2, QĐ 93-159 BR7515 38 4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ bất định giống mía Br2, Br7515 QĐ 93-159 tạo hoàn chỉnh 41 4.4 Giai đoạn vườn ươm 45 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.2 Đề nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 I Tài liệu tiếng Việt 49 II Tài liệu tiếng nước 50 n Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Mía tên gọi chung số lồi thuộc chi mía (Saccharum), chúng lồi sống lâu năm, thuộc tơng Andropogoneae họ hịa thảo (Poacea) Thân mía to mập, chia đốt, chứa nhiều đường, cao từ 2- 6m Hầu hết vùng trồng mía dùng để cung cấp nguyên liệu cho nhà máy sản xuất đường Năm 2007, Thủ tướng Chính phủ phê duyệt Quy hoạch phát triển ngành Mía đường đến năm 2010, định hướng đến năm 2020 với tiêu chủ yếu đến năm 2010 diện tích mía 300.000 ha; suất mía bình qn 65 tấn/ha; sản lượng mía nước 19,5 triệu tấn; tổng sản lượng đường sản xuất 1,5 triệu (trong sản lượng đường cơng nghiệp đạt 1,4 triệu tấn) Định hướng đến năm 2020 tổng diện tích khoảng 300, 000 ha, suất bình qn đạt 80 tấn/ha, tổng sản lượng đạt 24 triệu Tuy nhiên tất tiêu đặt cho ngành mía đường khơng đạt kế hoạch Vụ mía đường 2012 - 2013 kết thúc với thống kê, tổng sản lượng đường đạt 19, triệu Công suất chế biến nhà máy đạt 72,5%74,4% so với thiết kế Các tiêu thực tế năm 2013đạt là: Diện tích mía 298.200 ha; suất mía bình qn 63, tấn/ha (vẫn chưa đạt mức dự kiến đặt năm 2010) Để tăng suất mía mà diện tích reo trồng giữ nguyên đòi hỏi phải cải tiến kĩ thuật canh tác cải tiến chất lượng giống Việc nghiên cứu nhân nhanh giống mía phương pháp ni cấy mơ phục vụ cho sản xuất mía đường Việt Nam giới hướng nhằm tạo giống nhanh có chất lượng,cũng nguồn cung cấp giống đồng bệnh cho vùng sản xuất Chính chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống in vitro giống mía Br2, Br7515 QĐ 93-159 nhập nội” n ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1BR75 3/ 6/14 1: :PAGE kha nang tai sinh choi cua giong Br7515 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TY LE GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 115.00 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.488 5.7735 5.0 0.0251 | | | | Giống QĐ 93-159 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TY LE FILE TN1QD 3/ 6/14 1: :PAGE kha nang tai sinh choi cua giong QD 93-159 VARIATE V003 TY LE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 266.667 266.667 8.00 0.048 * RESIDUAL 133.333 33.3333 * TOTAL (CORRECTED) 400.000 80.0000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1QD 3/ 6/14 1: :PAGE kha nang tai sinh choi cua giong QD 93-159 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 TY LE 116.667 103.333 SE(N= 3) 3.33333 5%LSD 4DF 13.0659 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1QD 3/ 6/14 1: :PAGE kha nang tai sinh choi cua giong QD 93-159 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TY LE GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 110.00 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.9443 5.7735 5.2 0.0478 n | | | | Bảng 4.2: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus hai giống mía Br2 Br7515 Giống Br2 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HE SO FILE TN2BR2 3/ 6/14 1:30 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop voi kinetin 0,2(mg/l) doi voi VARIATE V003 HE SO LE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 16.1400 3.22800 129.12 0.000 * RESIDUAL 12 300001 250001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 16.4400 967059 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2BR2 3/ 6/14 1:30 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop voi kinetin 0,2(mg/l) doi voi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 HE SO 3.50000 4.50000 4.90000 6.60000 4.40000 4.30000 SE(N= 3) 0.912872 5%LSD 12DF 0.281287 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2BR2 3/ 6/14 1:30 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop voi kinetin 0,2(mg/l) doi voi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HE SO GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 4.7000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.98339 0.15811 3.4 0.0000 | | | | Giống Br7515 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE BKBR75 3/ 6/14 1:43 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop vs kinetin 0,2 (mg/l)den tai s VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 12.6850 2.53700 69.19 0.000 * RESIDUAL 12 440001 366667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 13.1250 772059 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BKBR75 3/ 6/14 1:43 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop vs kinetin 0,2 (mg/l)den tai s MEANS FOR EFFECT CT$ - n CT$ NOS 3 3 3 HS 4.10000 5.40000 6.30000 6.80000 5.60000 5.50000 SE(N= 3) 0.110554 5%LSD 12DF 0.340655 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BKBR75 3/ 6/14 1:43 :PAGE anh huong cua BAP o nong khac ket hop vs kinetin 0,2 (mg/l)den tai s F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 5.6167 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.87867 0.19149 3.4 0.0000 n | | | | Bảng 4.3: Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin(0, 2mg/l MT) lên trình tái sinh chồi từ callus giống mía QĐ93159 Giống QĐ 93-159 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HS FILE BKQĐ 3/ 6/14 1:51 :PAGE anh huong cua BAP o cac nong ket hop voi kinetin 0,2 (mg/l) den kha nang VARIATE V003 HS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 15.9850 3.19700 68.51 0.000 * RESIDUAL 12 559999 466666E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 16.5450 973235 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BKQĐ 3/ 6/14 1:51 :PAGE anh huong cua BAP o cac nong ket hop voi kinetin 0,2 (mg/l) den kha nang MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 HS 3.40000 4.50000 5.10000 6.50000 4.50000 4.30000 SE(N= 3) 0.124722 5%LSD 12DF 0.384310 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BKQĐ 3/ 6/14 1:51 :PAGE anh huong cua BAP o cac nong ket hop voi kinetin 0,2 (mg/l) den kha nang F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HS GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 4.7167 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.98653 0.21602 4.6 0.0000 n | | | | Bảng 4.4: Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus giống mía BR2 BR7515 Giống Br2 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE NDBR2 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den so choi tai sinh tu calus giong Br2 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 11.9640 2.99100 149.55 0.000 * RESIDUAL 10 200000 200000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 12.1640 868857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDBR2 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den so choi tai sinh tu calus giong Br2 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 HSN 1.60000 1.80000 2.20000 4.10000 2.70000 SE(N= 3) 0.816497 5%LSD 10DF 0.257281 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDBR2 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den so choi tai sinh tu calus giong Br2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.4800 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.93213 0.14142 5.7 0.0000 | | | | Giống Br7515 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE NDBR75 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den hinh choi tu callus giong Br7515 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 18.9840 4.74600 107.86 0.000 * RESIDUAL 10 440000 440000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 19.4240 1.38743 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDBR75 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den hinh choi tu callus giong Br7515 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS HSN 2.20000 n 3 3 2.80000 4.40000 5.30000 4.20000 SE(N= 3) 0.121106 5%LSD 10DF 0.381610 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDBR75 3/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den hinh choi tu callus giong Br7515 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.7800 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.1779 0.20976 5.5 0.0000 n | | | | Bảng 4.5: Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus giống mía QĐ 93-159 Giống QĐ 93-159 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE NDQĐ 4/ 6/14 1:40 :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den tai sinh choi tu callus giong Qd93-159 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10.2840 2.57100 128.55 0.000 * RESIDUAL 10 200000 200000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 10.4840 748857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDQĐ 4/ 6/14 1:40 :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den tai sinh choi tu callus giong Qd93-159 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 HSN 1.70000 1.90000 2.20000 4.00000 2.80000 SE(N= 3) 0.816497 5%LSD 10DF 0.257281 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDQĐ 4/ 6/14 1:40 :PAGE anh huong cua nong nuoc dua den tai sinh choi tu callus giong Qd93-159 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.5200 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.86537 0.14142 5.6 0.0000 n | | | | Bảng4.6: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi của giống mía Br2, Br7515 sau tuần nuôi cấy Giống Br2 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BABR2 4/ 6/14 1:57 :PAGE anh huong cua BAP den keo qua trinh nhan choi giong Br2 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 37.0114 6.16857 359.84 0.000 * RESIDUAL 14 239997 171427E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 37.2514 1.86257 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BABR2 4/ 6/14 1:57 :PAGE anh huong cua BAP den keo qua trinh nhan choi giong Br2 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 3 HSN 1.00000 1.10000 2.60000 3.50000 4.00000 4.80000 2.30000 SE(N= 3) 0.755925E-01 5%LSD 14DF 0.229289 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BABR2 4/ 6/14 1:57 :PAGE anh huong cua BAP den keo qua trinh nhan choi giong Br2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 2.7571 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.3648 0.13093 4.7 0.0000 | | | | Giống Br7515 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BABR751 4/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi mia Br7515 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 39.4714 6.57857 328.93 0.000 * RESIDUAL 14 280000 200000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 39.7514 1.98757 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BABR751 4/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi mia Br7515 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 HSN 1.10000 1.30000 2.70000 3.80000 4.30000 n 3 5.00000 2.50000 SE(N= 3) 0.816497E-01 5%LSD 14DF 0.247662 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BABR751 4/ 6/14 2: :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi mia Br7515 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 2.9571 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4098 0.14142 4.8 0.0000 n | | | | Bảng4.7: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi của giống mía QĐ93-159 Giống QĐ 93-159 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BAQD93 4/ 6/14 2:11 :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi Qd93-159 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 40.1314 6.68857 312.13 0.000 * RESIDUAL 14 300005 214289E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 40.4314 2.02157 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAQD93 4/ 6/14 2:11 :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi Qd93-159 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 HSN 1.00000 1.10000 2.30000 3.70000 4.90000 4.00000 2.20000 SE(N= 3) 0.845162E-01 5%LSD 14DF 0.256356 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAQD93 4/ 6/14 2:11 :PAGE anh huong cua BAP den qua trinh nhan choi Qd93-159 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 2.7429 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4218 0.14639 5.3 0.0000 n | | | | Bảng 4.8: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống mía Br2 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLS FILE NAABR2 4/ 6/14 2:50 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de Br2 VARIATE V003 TLS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 7953.50 1988.38 615.72 0.000 * RESIDUAL 10 32.2936 3.22936 * TOTAL (CORRECTED) 14 7985.80 570.414 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAABR2 4/ 6/14 2:50 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de Br2 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLS 25.3333 71.3333 94.0000 80.3333 67.4000 SE(N= 3) 1.03752 5%LSD 10DF 3.26927 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAABR2 4/ 6/14 2:50 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de Br2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 67.613 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 23.883 1.7970 2.7 0.0000 n | | | | Bảng 4.9: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống mía Br7515 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLS FILE NAABR75 4/ 6/14 3:35 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua Br7515 VARIATE V003 TLS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 7512.00 1878.00 640.21 0.000 * RESIDUAL 10 29.3342 2.93342 * TOTAL (CORRECTED) 14 7541.33 538.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAABR75 4/ 6/14 3:35 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua Br7515 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLS 32.0000 86.6667 96.6667 82.0000 76.0000 SE(N= 3) 0.988841 5%LSD 10DF 3.11588 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAABR75 4/ 6/14 3:35 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua Br7515 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 74.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 23.209 1.7127 2.3 0.0000 n | | | | Bảng 4.10:Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình hình thành rễ của giống QĐ93-159 sau tuần ni cấy (tính theo tỷ lệ %) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLS FILE NAAQĐ 4/ 6/14 2:56 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua QD 93-159 VARIATE V003 TLS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 7854.40 1963.60 613.62 0.000 * RESIDUAL 10 32.0004 3.20004 * TOTAL (CORRECTED) 14 7886.40 563.314 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAAQĐ 4/ 6/14 2:56 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua QD 93-159 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLS 26.3333 72.3333 93.3333 80.0000 66.0000 SE(N= 3) 1.03280 5%LSD 10DF 3.25440 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAAQĐ 4/ 6/14 2:56 :PAGE anh huong cua NAA den kha nang de cua QD 93-159 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 67.200 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 23.734 1.7889 2.7 0.0000 n | | | | Bảng 4.11: Nghiên cứu ảnh hưởng chất đến tỷ lệ sống vườn ươm BALANCED ANOVA FOR VARIATE TY LE FILE TN6N 4/ 6/14 3:56 :PAGE anh huong cua gia the de ty le song cua cay ngoai vuon uom VARIATE V003 TY LE LE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1944.72 486.181 96.49 0.000 * RESIDUAL 10 50.3868 5.03868 * TOTAL (CORRECTED) 14 1995.11 142.508 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6N 4/ 6/14 3:56 :PAGE anh huong cua gia the de ty le song cua cay ngoai vuon uom MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TY LE 63.6000 77.3667 85.9667 90.9667 95.9667 SE(N= 3) 1.29598 5%LSD 10DF 4.08368 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6N 4/ 6/14 3:56 :PAGE anh huong cua gia the de ty le song cua cay ngoai vuon uom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TY LE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 82.773 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 11.938 2.2447 2.7 0.0000 n | | | | Phụ lục 2: Môi trường Table 1: Preparation of modified Murashige AND Skoog’s MS medium Stock Bottle Component Solution (g/l) I II III preparation (ml) Final concentratic (mg/ l) 82,5 KNO3 95 MgSO4 7H2O 37,0 MgSO4 4H2O 2,23 ZnSO4 7H2O 1,058 CuSO4 5H2O 0,0025 0,025 CaCl2.2H2O 44,0 440,0 KI 0,083 CoCl2.6H2O 0,0025 H3BO3 Na2MoO4.2H2O V take NH4NO3 KH2PO4 IV Amount to 0,62 0,025 2,784 Na2EDTA 2H2O 3,724 mg/100ml 100 100 100 100 1.650,0 1.900,0 370,0 10 10 22,3 10,6 0,83 0,025 17,0 FeSO4 7H2O 170,0 10 6,2 0,25 10 37,25 Inositol Sucrose 30.000,0 Agar 8.000,0 PH 5,8 n 0,5 2,0 0,1 0,5 27,85 0,5 2,0 0,1 0,5 100,0 Vitamin Nicotinic acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl 20 ... tài: ? ?Nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống in vitro giống mía Br2, Br7515 QĐ 93- 159 nhập nội? ?? n 1.2 Mục tiêu nghiên cứu - Xác định ảnh hưởng chồi đỉnh chồi nách đến khả tái sinh giống mía Br7515, ... ĐÌNH NHÂN Tên đề tài: NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH NHÂN IN VITRO CÁC GIỐNG MÍA BR2, BR7515 VÀ QĐ 93- 159 NHẬP NỘI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ sinh... tái sinh chồi giống mía Br7515, Br2 Q? ?93- 159 - Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình nhân nhanh chồi giống mía Br2, Br7515 QĐ 93- 159 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến trình