Khảo sát và so sánh hoạt tính kháng khuẩn, kháng viêm của cao vỏ hột với nhân hột xoài (mangifera indica l )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ HÀ CAO THIỆN KHẢO SÁT VÀ SO SÁNH HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN, KHÁNG VIÊM CỦA CAO VỎ HỘT VỚI NHÂN HỘT XOÀI (MANGIFERA INDICA L.) Chuyên ngành: Dược lý – Dược lâm sàng Mã số: 20820510014 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS ĐẶNG DUY KHÁNH TS NGUYỄN NGỌC NHÃ THẢO Cần Thơ – 2022 MỤC LỤC Trang bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục sơ đồ hình vẽ MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chung Xoài hột Xoài 1.2 Tổng quan chung hột Xoài 1.3 Tổng quan mơ hình nghiên cứu kháng khuẩn kháng viêm 10 1.4 Tổng quan cơng trình nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn kháng viêm hột Xoài 17 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Đối tượng nghiên cứu vật liệu nghiên cứu 21 2.2 Phương pháp nghiên cứu 25 2.3 Đạo đức nghiên cứu 32 Chương 3: KẾT QUẢ 33 3.1 Kết nghiên cứu khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao vỏ hột nhân hột Xoài 33 3.2 Kết nghiên cứu khảo sát hoạt tính kháng viêm cao vỏ hột nhân hột Xoài 41 Chương 4: BÀN LUẬN 48 4.1 Tác dụng kháng khuẩn 48 4.2 Hiệu kháng viêm 55 KẾT LUẬN 62 KIẾN NGHỊ 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả luận văn Hà Cao Thiện LỜI CẢM ƠN Em xin trân trọng bày tỏ lòng biết ơn tới TS Nguyễn Ngọc Nhã Thảo, TS Đặng Duy Khánh người thầy cô trực tiếp hướng dẫn em thực luận văn Các thầy ln tận tình bảo, động viên em suốt trình thực luận văn vừa qua Sự thành công luận văn nghiên cứu kết nhiệt tình hướng dẫn thầy cô em Nếu khơng có hướng dẫn giúp đỡ em khơng thể hoàn thành luận văn Em xin trân trọng bày tỏ lịng biết ơn tới thầy mơn Dược lý -Dược lâm sàng nói riêng thầy cô khoa Dược, thầy cô phòng sau đại học Trường Đại học Y Dược Cần Thơ nói chung hết lịng hướng dẫn giúp đỡ em trình học tập trường Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Ban giám hiệu Trường Đại học Y Dược Cần Thơ tạo điều kiện giúp đỡ em trình học Tên tác giả luận văn Hà Cao Thiện DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tiếng Anh DMSO Dimethyl Sulfoxide E coli Escherichia coli EOS Eosinophile M indica Mangifera indica Thạch Mueller-Hinton MHA MIC Tiếng Việt Minimum inhibitory concentration MPO Myeloperoxidase Nhân hột NH P acnes Propionibacterium acnes S aureus Staphylococcus aureus S mutans Streptococcus mutans TSA Tryptic soy agar TSB Tryptone soya broth VH Vỏ hột DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh sách hóa chất dùng nghiên cứu ….… 22 Bảng 2.2 Danh sách vi khuẩn dùng nghiên cứu….… 23 Bảng 2.3 Danh sách thiết bị dùng nghiên cứ….… 23 Bảng 2.4 Các cao thuốc thuốc dùng thử nghiệm kháng viêm …… 29 Bảng 3.1 Định tính khả kháng Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus Escherichia coli 33 Bảng 3.2 MIC cao chiết từ vỏ hột nhân hột Xoài số chủng vi khuẩn thử nghiệm 37 Bảng 3.3 Thể tích bàn chân chuột lô thử nghiệm thời điểm khảo sát (mL) 41 Bảng 3.4 Độ sưng phù bàn chân chuột lô thử nghiệm thời điểm khảo sát (%) 42 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH VẼ Biểu đồ 3.1 Độ sưng phù bàn chân chuột lô sinh lí, lơ chứng bệnh lơ đối chứng (diclofenac) 44 Biểu đồ 3.2 Độ sưng phù bàn chân chuột lơ sinh lí, lơ chứng bệnh, lơ đối chứng (diclofenac) với vỏ hột Xoài liều 500mg/kg 750mg/kg 45 Biểu đồ 3.3 Độ sưng phù bàn chân chuột lơ sinh lí, lơ chứng bệnh, lơ đối chứng (diclofenac) với nhân hột Xoài liều 500mg/kg 750mg/kg 46 Biểu đồ 3.4 Độ sưng phù bàn chân chuột lơ sinh lí, lơ chứng bệnh, lơ đối chứng (diclofenac) với nhân hột Xoài liều 500mg/kg vỏ hột Xoài liều 500mg/kg 47 Biểu đồ 3.5 Độ sưng phù bàn chân chuột lô sinh lí, lơ chứng bệnh, lơ đối chứng (diclofenac) với nhân hột Xoài liều 750mg/kg vỏ hột Xoài liều 750mg/kg 48 Hình 1.1 Cây Xồi (Mangifera indica L) Hình 1.2 Quả Xồi cát hịa lộc Hình 1.3 Hột Xồi cát hịa lộc Hình 2.1 Máy đo độ phù chân chuột 37140 Plethysmometer 24 Hình 2.2 Cách đọc kết kháng khuẩn 26 Hình 2.3 Chân chuột sau tiêm carragreenan 31 Hình 3.1 Định tính khả kháng Propionibacterium acnes 34 Hình 3.2 Định tính khả kháng Staphylococcus aureus 35 Hình 3.3 Định tính khả kháng Escherichia coli 36 Hình 3.4 Kết MIC mẫu cao nhân hột (NH) vi khuẩn Propionibacterium acnes 37 Hình 3.5 Kết MIC mẫu cao nhân hột (NH) vi khuẩn Staphylococcus aureus Escherichia coli 38 Hình 3.6 Kết MIC mẫu cao vỏ hột (VH) vi khuẩn Propionibacterium acnes 39 Hình 3.7 Kết MIC mẫu cao vỏ hột (VH) vi khuẩn Staphylococcus aureus vi khuẩn Escherichia coli 40 MỞ ĐẦU Xồi khơng loại nông sản mang xuất lớn, đem lại hiệu kinh tế cao loại trái giàu chất dinh dưỡng tốt cho sức khỏe Ngoài quả, phận khác Xồi tận dụng để làm dược liệu để chữa bệnh thông thường hiệu chứng minh qua nhiều cơng trình nghiên cứu Hằng năm, nguồn Xồi tiêu thụ lớn nên lượng phế phẩm thải môi trường đáng kể đặc biệt hột Xồi Một phận trước cho khơng có giá trị Tuy nhiên, biết hột Xồi có tác dụng riêng mang lại lợi ích cho sức khỏe mà tận dụng nguồn phế phẩm để tạo chế phẩm có giá trị góp phần hạn chế lượng rác thải môi trường mang lại thêm lợi ích kinh tế cho người sản xuất Cây Xồi có tên khoa học Mangifera indica L (M indica) thuộc họ Đào lộn hột (Anacardiaceae) Theo Đông y, Xồi dùng để trị ho, tiêu hóa khơng bình thường, vỏ dùng trị kiết lỵ, dùng để trị bệnh đường hô hấp ho, viêm phế quản mạn tính hay cấp tính, dùng ngồi trị viêm da, vỏ thân dùng trị ho, đau sưng họng đau răng; nhựa từ vỏ dùng trị kiết lỵ, bệnh da, bạch đới, kinh nguyệt nhiều [3], [10], [19] Hột Xồi chứa nhiều thành phần hóa học protein, phosphat, carbohydrat, magie, natri, canxi thành phần sinh học khác axit béo, phenolic,…[3], [42] Một số cơng trình nghiên cứu giới cho thấy hột Xồi có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm, kháng khuẩn [22], [38], [45] Hột Xồi có hai phận nhân hột vỏ hột Tuy nhiên, nghiên cứu thực hột Xồi nói chung chưa sâu vào xác định rõ công dụng đến từ vỏ hột hay nhân hột chưa cho so sánh hoạt tính phận mạnh Riêng Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC CẦN THƠ – SỐ 51/2022 33 Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá chất lượng sống bệnh nhân u nguyên bào men phẫu thuật Bệnh viện Răng Hàm Mặt thành phố Hồ Chí Minh năm 2021-2022 Trần Quốc Huy Huỳnh Văn Dương 229 34 Tương tác thuốc đơn thuốc điều trị ngoại trú-nội trú yếu tố liên quan Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Cần Thơ năm 2021-2022 Nguyễn Thị Ngọc Diễm Phạm Thành Suôl Nguyễn Thiên Vũ Lữ Thiện Phúc Nguyễn Thị Hữu Hiếu 236 35 Giá trị tiên lượng thang điểm AIMS65 bệnh nhân xuất huyết tiêu hóa vỡ giãn tĩnh mạch thực quản Lưu Trọng Nghĩa Huỳnh Hiếu Tâm 244 36 Nghiên cứu kiến thức, thực hành chăm sóc tiền sản đánh giá kết can thiệp phụ nữ mang thai huyện An Biên, tỉnh Kiên Giang năm 2021 Võ Thị Thúy Nhàn Nguyễn Vủ Trường Giang Cao Đức Trí Trương Ngọc Thiệt Dương Phúc Lam 251 v ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố TÀI LIỆU THAM KHẢO Hà Thị Bảo Đan (2012), Nha chu học - tập 1, Nhà xuất Y học, tr.9-50 Phạm Thị Quỳnh Như (2011), “Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng kết điều trị viêm nướu Metrogyl Denta Bệnh viện Y Dược Huế”, Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Răng Hàm Mặt, trường Đại học Y Huế, tr.1-46 Nguyễn Bích Vân (2021), Nha chu học- tập 1, Nhà xuất Y học, tr.46-250 Maryam Panhwar (2021), “Effectiveness of Chlorhexidine and Metronidazole Gels in the management of gingivitis A clinical trial”, Journal of Pak J Med Science, September - October 2021 Vol 37 No 5, pp.1425-1429 Pradeep A.R., Minal Kumari, Priyanka N (2012), “Efficacy of Chlorhexidine, Metronidazole and Combination Gel in the Treatment of Gingivitis – A Randomized Clinical Trial”, Journal of Intenatinonal Academy of Periodontology, pp.91-96 Pramod Kumar Yadav, Sabyasachi Saha, Sanjay Singh et al (2017), “Oral health status and treatment needs of asthmatic children aged 6-12 years in lucknow”, Jounal of India Association of Pucblic Health Dentistry, 15(2), pp.122-126 Pujan Acharya, Manoj Kumar, Cs Saimbi (2019), “Clinical Evaluation of Topical Metronidazole and Chlorhexidine Gel follwing Scaling and Root Planing in Patients with Chronic Periodontitis”, Journal of Medical Sciences- Nepal, Original Research Article, 15(1), pp.10-17 Sheikh Bilal Badar, Kamil Zafar (2019), “Comparative evaluton of Chlorhexidine, Metronidazole and combination gels on gingivitis: A randomized clinical trial”, International Jounal of Sugery Protocols, Vol.14, pp.30-33 Syed Mustafa Al Hussaini (2016), “A study on the dental problems of school children”, International Jounal of Community Medicine and Public Health, 3(5), pp.1090-1095 10.Seby J Gardens, Abdul-Aziz Abdullah Al Kheraif (2014), “The prevalence of malocclusion and its association with dental caries among 12-18 year-old disabled adolescents”, Jounal of BMC Oral Health, 14(123), pp.44-52 11.Wijnand J Teeuw, Victor E.A Gerdes, Bruno G Loos (2010), “Effect of periodontal treatment on glycemic control of diabetic patient”, Jounal Diabetes Care, 33(2), pp.421-427 (Ngày nhận bài: 15/7/2022 – Ngày duyệt đăng: 09/9/2022) KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CAO VỎ HỘT VÀ CAO NHÂN HỘT XOÀI (MANGIFERA INDICA L.) Hà Cao Thiện, Đặng Duy Khánh, Nguyễn Ngọc Nhã Thảo* Trường Đại học Y Dược Cần Thơ * Email: nnnthao@ctump.edu.vn TÓM TẮT Đặt vấn đề: Xoài (Mangifera Indica L.) dược liệu nghiên cứu từ lâu có tác dụng hạ đường huyết, chống oxy hóa, kháng viêm Tuy nhiên, chưa có cơng trình nghiên cứu tác dụng dược lý hột Xoài trồng Việt Nam Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao nhân hột vỏ hột Xoài (Mangifera Indica L.) Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Cao vỏ hột nhân hột Xoài xác định hoạt tính kháng khuẩn phương pháp khuếch tán thạch MIC phương pháp pha loãng thạch Kết quả: 197 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố Các cao chiết có khả kháng khuẩn vi khuẩn Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus với kích thước vịng vơ khuẩn 23,7mm; 15,0mm Nhân hột Xoài 19,6mm; 12,0mm vỏ hột Xoài nồng độ 200mg/mL, riêng với vi khuẩn E coli vỏ hột Xồi khơng có khả ức chế, nhân hột Xồi tạo vịng vơ khuẩn 17,0mm Giá trị MIC chủng S aureus E coli >5mg/mL Tuy nhiên, chủng P acnes, cao nhân hột Xoài cho kết ức chế vi khuẩn nồng độ thấp cao vỏ hột Xoài (5mg/mL) so với chủng vi khuẩn lại, với giá trị MIC 1,25mg/mL Kết luận: Cao chiết vỏ hột nhân hột Xoài có tác dụng kháng loại vi khuẩn Staphylococcus aureus Propionibacterium acnes Khả kháng khuẩn Escherichia coli có cao nhân hột Xồi Nghiên cứu đóng góp sở thực nghiệm hiệu kháng khuẩn cao chiết vỏ hột nhân hột Xồi Từ khóa: Mangifera indica L, kháng khuẩn, hột Xồi, Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli ABSTRACT EVALUATION OF THE ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF SEED PEEL AND SEED KERNEL EXTRACTS FROM MANGO (MANGIFERA INDICA L.) Ha Cao Thien, Dang Duy Khanh, Nguyen Ngoc Nha Thao* Can Tho University of Medicine and Pharmacy Background: Mango (Mangifera Indica L.) is one of the long-researched medicinal herbs with hypoglycemic, antioxidant, anti-inflammatory effects along with many clinically proven nutritional components However, mango seeds have received little research attention and there have been no studies on the pharmacological effects of mango seeds grown in Vietnam Objective: To investigate the antibacterial activity of the kernels and peels of Mango (Mangifera Indica L.) Materials and methods: Determination of antibacterial activity of mango seed extract and kernel on Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria by agar diffusion method and MIC by agar dilution method Results: At a concentration of 200mg/mL, the extracts of mango seed peel and mango kernel were both antibacterial against Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus bacteria with aseptic ring size of 23.7mm; 15.0mm respectively for mango kernel and 19.6mm; 12.0mm for mango seed peel, especially for E coli bacteria, mango seed peel is not able to inhibit, but get 17.0mm for mango kernel The antibacterial ability of mango kernel extract was almost higher than that of mango seed peel extract on types of bacteria tested The MIC values of both extracts on S aureus and E coli were >5mg/mL However, for P acnes, mango kernel extract was more sensitive to mango seed peel extract (5 mg/mL), with a MIC value of 1.25mg/mL Conclusions: Extracts of mango seed peel and kernel are effective against bacteria Staphylococcus Aureus and Propionibacterium Acnes However, the antibacterial ability on Escherichia coli was only found on mango kernel extract This study contributes to the experimental basis of the antibacterial effect of the extract of the peel and kernel of the mango seed Keywords: Mangifera Indica L, antibacterial, Mango seed, Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli I ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Xồi có tên khoa học Mangifera indica L thuộc họ Đào lộn hột (Anacardiaceae) Theo Đơng y, xồi dùng để trị ho, tiêu hóa khơng bình thường, vỏ dùng trị kiết lỵ, dùng để trị bệnh đường hô hấp ho, viêm phế quản mạn tính hay cấp tính, dùng ngồi trị viêm da, vỏ thân dùng trị ho, đau sưng họng đau răng; nhựa từ vỏ dùng trị kiết lỵ, bệnh da, bạch đới, kinh nguyệt nhiều [1], [2], [3] 198 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố Hột Xồi chứa nhiều thành phần hóa học protein, phosphat, carbohydrat, magie, natri, canxi thành phần sinh học khác axit béo, phenolic… [1], [8] Một số công trình nghiên cứu giới cho thấy hột Xồi có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm, kháng khuẩn [5], [6], [7], [9] Tuy nhiên, nghiên cứu thực hột Xồi nói chung chưa xác định rõ công dụng đến từ vỏ hột hay nhân hột Riêng Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu cơng bố tác dụng hột Xồi Vì vậy, nghiên cứu “Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao vỏ hột nhân hột Xoài (Mangifera indica L.)” đặt với mục tiêu: + Định tính khả kháng khuẩn cao vỏ hột nhân hột Xoài phương pháp khuếch tán thạch + Xác định MIC cao vỏ hột nhân hột Xoài số chủng khuẩn phương pháp pha loãng thạch II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Cao vỏ hột nhân hột Xoài bào chế đạt tiêu chuẩn sở từ mẫu hột Xồi vừa chín vàng thu hái Quận Ninh Kiều, thành phố Cần Thơ từ tháng 2-4/2021 định danh, lưu mẫu Bộ môn Dược liệu – Dược cổ truyền – Thực vật dược, Trường Đại học Y Dược Cần Thơ - Chủng chuẩn thuốc đối chứng: Các chủng vi khuẩn sử dụng thử nghiệm: Propionibacterium acnes ATCC 6919; Staphylococcus aureus ATCC 29213; Escherichia coli ATCC 25922 Thuốc đối chứng dùng thử nghiệm tương ứng với chủng khuẩn levofloxacin (nồng độ 8mg/mL) Staphylococcus aureus Escherichia coli; trimethoprim/sulfamethoxazole tỷ lệ 1:20 (nồng độ 2,5mg/mL) Propionibacterium acnes - Hóa chất mơi trường dùng thử nghiệm: + Môi trường tăng sinh: TSB, TSA Bổ sung 5% máu chủng Propionibacterium acnes + Môi trường thử nghiệm kháng sinh: Thạch Mueller-Hinton (MHA), MHA+5% máu + Dung mơi pha lỗng mẫu: DMSO, Tween 80 (Merck) + Mẫu thử: Cao chiết nhân hột Xoài (NH) cao chiết vỏ hột Xoài (VH) - Địa điểm thực nghiên cứu: Bộ môn Vi sinh – Trường Đại học Y Dược Cần Thơ môn Vi sinh – Trường Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh 2.2 Phương pháp nghiên cứu - Chuẩn bị mẫu cao nhân hột cao vỏ hột Xoài: Cao đặc ethanol nhân hột vỏ hột Xoài xác định độ ẩm cân hồng ngoại đạt yêu cầu dược điển Việt Nam V, bảo quản lọ kín Sấy khơ mẫu cao điều kiện chân không đến khối lượng không đổi pha thành dung dịch mẹ DMSO trước thử nghiệm - Chuẩn bị mơi trường: + Mơi trường hoạt hóa vi khuẩn thử nghiệm: Tryptic Soy Agar (TSA) Bổ sung 5% máu chủng Propionibacterium acnes + Môi trường thử nghiệm: Thạch Mueller - Hinton (MHA), MHA+5% máu 199 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố - Định tính khả kháng khuẩn phương pháp khuếch tán thạch: + Chuẩn bị huyền dịch vi sinh vật thị có mật số 108 CFU/mL: Vi khuẩn S.aureus, E.coli P.acnes tăng sinh qua đêm môi trường TSA có bổ sung 5% máu chủng Propionibacterium acnes Huyền dịch vi sinh vật pha loãng so độ đục với ống chuẩn Mc Faland 0,5, huyền dịch vi sinh vật có độ đục với ống chuẩn, vi sinh vật ống đạt mật số 108 CFU/mL + Mẫu thử pha thành dãy nồng độ 200mg/mL, 100mg/mL, 50mg/mL 25mg/mL Lượng mẫu thử cho vào giếng thạch 60L Nếu có tác dụng kháng khuẩn, mẫu thử ức chế phát triển vi khuẩn thạch Hoạt tính kháng khuẩn xác định cách đo đường kính vịng vơ khuẩn vị trí tương ứng, so sánh với chất đối chiếu levofloxacin trimethoprim/sulfamethoxazole vi khuẩn P.acnes - Xác định MIC phương pháp pha loãng thạch: + Sử dụng phương pháp pha loãng thạch Mẫu thử pha loãng thành dãy nồng độ từ thấp tới cao theo cấp số nhân môi trường nuôi cấy Mỗi nồng độ mẫu thử cấy lượng vi khuẩn định nuôi cấy vòng 18-24 Nồng độ mẫu thử thấp mà ức chế phát triển vi khuẩn (môi trường không đục vi khuẩn không mọc mặt thạch) gọi giá trị MIC + Mẫu thử pha thành dung dịch mẹ DMSO Khi sử dụng pha lỗng mơi trường thử nghiệm pha trực tiếp với môi trường thử nghiệm cho tạo thành giai nồng độ môi trường thử nghiệm (có nồng độ sau ½ nồng độ trước) sau: 5; 2,5; 1,25; 0,625; 0,312mg/mL III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU - Khả kháng khuẩn cao chiết từ vỏ hột nhân hột Xoài phương pháp khuếch tán thạch: Bảng Định tính khả kháng Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli Đường kính vịng kháng khuẩn (mm) Nồng độ chất thử Propionibacterium acnes Staphylococcus aureus Escherichia coli (mg/mL) NH VH NH VH NH VH 200 23,7 19,6 15,0 12,0 17,0 100 24,0 17,4 13,0 10,0 15,0 50 20,7 16,2 11,0 8,0 12,0 25 17,7 12,6 10,0 6,0 10,0 Trimethoprim/ 34,0 sulfamethoxazole Levofloxacin 15,0 18,0 DMSO - 200 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố VH -200 NH-200 VH-100 DMSO KS VH-25 NH-100 DMSO KS VH-50 NH-25 NH-50 Hình Định tính khả kháng Propionibacterium acnes (VH, NH: mẫu vỏ hột, nhân hột; chứng (-): DMSO; chứng (+) Trimethoprim/sulfamethoxazol) Nhận xét: Kết từ hình bảng cho thấy cao nhân hột cao vỏ hột Xồi có tác dụng kháng với vi khuẩn Propionibacterium acnes Khả kháng khuẩn cao nhân hột tốt so với cao vỏ hột (chênh lệch vòng kháng khuẩn từ 4-6mm) Chứng dương có tác dụng mạnh với vòng kháng khuẩn lớn chênh lệch 10mm so với hai loại cao chiết, riêng chứng âm khơng có vịng kháng khuẩn Hình Định tính khả kháng Staphylococcus aureus (VH, NH: mẫu vỏ hột, nhân hột; chứng (-): DMSO; chứng (+) levofloxacin) Nhận xét: Kết từ hình bảng cho thấy cao nhân hột cao vỏ hột Xồi có tác dụng kháng với vi khuẩn Staphylococcus aureus Khả kháng khuẩn cao nhân hột tốt so với cao vỏ hột (chênh lệch vòng kháng khuẩn từ 3-4mm) Chứng dương có tác dụng tương đương với cao chiết nhân hột Xoài nồng độ cao 200mg/mL, riêng chứng âm khơng có vịng kháng khuẩn Hình Định tính khả kháng Escherichia coli (VH, NH: mẫu vỏ hột, nhân hột; chứng (-): DMSO; chứng (+): levofloxacin) 201 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố Nhận xét: Kết từ hình bảng cho thấy có cao nhân hột Xồi có tác dụng kháng với vi khuẩn Escherichia coli Vỏ hột Xồi khơng xuất vịng kháng khuẩn rõ ràng chứng tỏ khơng có tác dụng kháng với vi khuẩn Chứng dương có tác dụng mạnh đơi chút với cao chiết nhân hột Xoài nồng độ cao 200mg/mL, riêng chứng âm khơng có vịng kháng khuẩn - Xác định MIC cao chiết từ vỏ hột nhân hột Xoài số vi khuẩn phương pháp pha loãng thạch: Bảng MIC cao chiết từ vỏ hột nhân hột Xoài số chủng vi khuẩn thử nghiệm Nồng độ MIC chủng thử nghiệm (mg/mL) S aureus E coli P acnes >5 >5 1,25 >5 >5 Mẫu thử NH VH NH – 2,5 mg/ml NH - mg/ml NH – 0,312 mg/ml Chứng P P VH - mg/ml NH – 1,25 mg/ml NH – 0,625 mg/ml Chứng VH – 2,5 mg/ml VH – 1,25 mg/ml P P VH – 0,312 mg/ml P P P (A) VH - mg/ml E S E S VH – 0,312 mg/ml Chứng S E P (B) VH – 2,5 mg/ml E VH – 0,625 mg/ml S VH – 1,25 mg/ml E NH - mg/ml E S VH – 0,625 mg/ml E S E E S NH – 0,312 mg/ml Chứng S NH – 2,5 mg/ml S E S NH – 1,25 mg/ml E S NH – 0,625 mg/ml E S (C) (D) Hình Kết MIC mẫu cao nhân hột (NH) cao vỏ hột Xoài (VH) vi khuẩn Propionibacterium acnes (hình A B); vi khuẩn Staphylococus Aureus (hình C) vi khuẩn Escherichia coli (hình D) Nhận xét: Giá trị MIC cao nhân hột vỏ hột Xoài chủng S.aureus E.coli lớn 5mg/mL Tuy nhiên, chủng P.acnes, cao nhân hột Xoài nhạy với cao vỏ hột Xoài (5mg/mL) so với chủng vi khuẩn lại, với giá trị MIC 1,25mg/mL IV BÀN LUẬN Thành phần hoạt tính cao chiết thực vật chi phối đáng kể qui trình tách chiết loại dung mơi trình tự sử dụng dung mơi q trình 202 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố tách chiết [4], [8] Cao thơ hay cịn gọi cao tổng thu nhận trước tiến hành tách cao phân đoạn cách tiếp cận nhiều nghiên cứu khảo sát hoạt tính sinh học thực vật [3], [6] Cao tổng thu từ ngâm dầm mẫu hỗn hợp nước ethanol với tỉ lệ 96% đánh giá chứa đa dạng hợp chất thực vật methanol, hexane ethyl acetate [8] Về tính an tồn cho mơi trường sức khỏe, ethanol đánh giá cao hexane, methanol, ethyl acetate [8] Do đó, mẫu cao chiết ethanol sử dụng để đánh giá hoạt tính kháng khuẩn Hoạt tính kháng khuẩn cao nhân hột vỏ hột Xoài lên Staphylococcus aureus, Escherichia coli Propionibacterium acnes xác định phương pháp khuếch tán thạch (Bảng Hình 1, 2, 3) Kết chứng tỏ cao nhân hột vỏ hột Xồi có hoạt tính kháng chủng vi khuẩn thử nghiệm (ngoại trừ vỏ hột xồi khơng kháng vi khuẩn E.coli), kháng sinh levofloxacin (S.aureus, E.coli), trimethoprim/sulfamethoxazole (P.acnes) kháng chủng Kết thử nghiệm phương pháp khuếch tán thạch ghi nhận Bảng cho thấy đường kính vịng kháng khuẩn cao nhân hột xoài thay đổi theo nồng độ từ 25mg/mL, 50mg/mL, 100mg/mL 200mg/mL 17,7-27,7mm P.acnes, 10,0-15,0mm S.aureus 10,0-17,0mm E.coli Đường kính vịng kháng khuẩn cao vỏ hột xoài thay đổi theo nồng độ từ 25mg/mL, 50mg/mL, 100mg/mL 200mg/mL 12,6-19,6mm P.acnes, 6,0-12,0mm S.aureus riêng chủng E.coli cao vỏ hột khơng xuất vịng vơ khuẩn Levofloxacin có khả kháng hai chủng vi khuẩn S.aureus E.coli có vịng vô khuẩn là 15,0 18,0mm Trimethoprim/sulfamethoxazole có vịng vơ khuẩn đến 34,0mm chủng vi khuẩn P.acnes Nồng độ MIC cao nhân hột vỏ hột Xoài chủng vi khuẩn thử nghiệm đánh giá phương pháp pha loãng thạch Kết ghi nhận Bảng cho thấy giá trị MIC cao chủng S.aureus E.coli >5mg/mL Tuy nhiên, chủng P.acnes, cao nhân hột Xoài nhạy với cao vỏ hột Xoài (5mg/mL) so với chủng vi khuẩn lại, với giá trị MIC 1,25mg/mL Hoạt tính kháng khuẩn chế phẩm từ nhiều phận khác thực vật vi khuẩn nhiễm trùng báo cáo nhiều nghiên cứu Riêng Xồi giới, có nghiên cứu Pitchaon M.- 2011 tìm cơng dụng chống oxy hóa Xồi [7] hay nghiên cứu tìm tác dụng kháng viêm từ Xồi Worapan Poomanee cộng - 2018 [9] bước đầu tìm tác dụng Xồi Nghiên cứu Amgad A cộng - 2012 công bố khả kháng vi sinh vật thử nghiệm gồm Candida albican Aspergillus niger với đường kính vịng kháng vi sinh vật tử 5mm-18mm với dịch chiết ethanol methanol [5] Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu cơng bố khả kháng khuẩn P.acnes, S.aureus E.coli vỏ hột nhân hột Xồi nói riêng Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn cao nhân hột vỏ hột Xồi góp phần bổ sung vào liệu nghiên cứu loài thực vật Nhằm ứng dụng vai trò chế phẩm chế tạo thuốc bổ sung (complementary medicine) từ thực vật việc phòng trị bệnh nhiễm loại vi khuẩn gây nhiễm trùng, trước nghiên cứu mơ hình in vivo thực 203 ẠP CHÍ Y DƯỢ Ọ ẦN THƠ – Ố V KẾT LUẬN Qua nghiên cứu khả ức chế vi khuẩn P.acnes, S.aureus E.coli hai loại nhân hột vỏ hột Xoài cho thấy hai loại nhân hột vỏ hột có khả ức chế vi sinh vật gây nhiễm trùng phổ biến nồng độ 200mg/mL với vùng vô khuẩn theo thứ tự 23,7mm; 15,0mm 17,0mm Nhân hột xoài 19,6mm; 12,0mm Vỏ hột xồi, riêng với vi khuẩn E.coli vỏ hột Xồi khơng có khả ức chế Nhân hột Xồi có khả ức chế vi khuẩn cao so với vỏ hột Xồi có tác dụng gần tương đương với kháng sinh đối chiếu Thử nghiệm xác định MIC phương pháp pha loãng cho kết ức chế vi khuẩn tốt cao nhân hột Xoài P.acnes với giá trị MIC 1,25mg/mL Kết thu làm sở cho thử nghiệm khả ức chế P.acnes, S.aureus E.coli cao phân đoạn chiết từ nhân hột Xồi, chiết tách tinh khiết hoạt chất có tính kháng khuẩn hột Xồi thử nghiệm lâm sàng TÀI LIỆU THAM KHẢO Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, phần 2, tr.1214-1215 Nguyễn Thị Ái Lan, Lư Thị Lan Thanh, Ninh Khắc Huyền Trân, Đái Thị Xuân Trang, “Hiệu hạ glucose huyết cao chiết xoài non (Mangifera indica L.) chuột bệnh đái tháo đường”, Hội nghị khoa học toàn quốc sinh thái tài nghiên sinh vật lần thứ 7, tr.1290-1295 Lê Huyền Trâm, Nguyễn Văn Thơng; Huyền, Đồn Thị Thu (2020), “Nghiên cứu phân lập hợp chất mangiferin từ xồi”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ 140, tr.61-64 A.C Martin, A.D Pawlus, E.M Jewett, D.L Wyse and C.K Angerhofer, A.D Hegeman (2014), “Evaluating solvent extraction systems using metabolomics approaches”, RSC Advances, vol 4, no 50, pp.26325-26334 Amgad A Awad El-Gied1, Martin R P Joseph2, Ismail M Mahmoud1 et al (2012), “Antimicrobial Activities of Seed Extracts of Mango (Mangifera indica L.)”, Advances in Microbiology, 2, pp.571-576 B C S S N Pellegrini, G G D D R O V Brenna, R B M Bianchi and F Brighenti (2007), “Evaluation of antioxidant capacity of some fruit and vegetable foods: efficiency of extraction of a sequence of solvents”, J Sci Food Agric, vol 87, pp.103-111 M Pitchaon (2011), “Antioxidant capacity of extracts and fractions from mango (Mangifera indica L.) seed kernels”, International Food Research Journal 18, pp 523-528 T.M Rababah, F Banat, A Rababah, K Ereifej, W Yang (2010), “Optimization of extraction conditions of total phenolics, antioxidant activities, and anthocyanin of oregano, thyme, terebinth, and pomegranate”, J Food Sci., Vols 75, no 7, pp.C626-C632 Worapan Poomanee et al (2018), “Antimicrobial susceptibility of anaerobic bacteria In-vitro investigation of anti-acne properties of Mangifera indica L kernel extract and its mechanism of action against Propionibacterium acnes”, Anaeroba, vol 52, pp.64-74 (Ngày nhận bài: 18/7/2022 – Ngày duyệt đăng: 09/9/2022) 204 ... Xoài (Mangifera indica L. )? ?? đặt với mục tiêu: - Khảo sát so sánh hoạt tính kháng khuẩn cao vỏ hột nhân hột Xoài số chủng vi khuẩn - Khảo sát so sánh hoạt tính kháng viêm cao vỏ hột nhân hột Xoài. .. cứu khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao vỏ hột nhân hột Xoài 3.1.1 Khả kháng khuẩn cao chiết từ vỏ hột nhân hột Xoài phương pháp khuếch tán thạch Cao chiết vỏ hột nhân hột xoài xác định khả kháng. .. nhân hột vỏ hột Xoài chủng S aureus E coli l? ??n 5mg/mL Tuy nhiên, chủng P acnes, cao nhân hột Xoài nhạy với cao vỏ hột Xoài (5mg/mL) so với chủng vi khuẩn l? ??i, với giá trị MIC 1,25mg/mL 41 3.2