BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HƢƠNG NGHIªN CøU §éT BIÕN GEN CDH1 (E cadherin) TR£N BÖNH NH¢N UNG TH¦ D¹ DµY LAN TáA DI TRUYÒN LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HƢƠNG NGHIªN CøU §éT BIÕN GEN CDH1 (E - cadherin) TR£N BƯNH NHÂN UNG THƯ Dạ DàY LAN TỏA DI TRUYềN LUN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI *** NGUYỄN TH THANH HNG NGHIêN CứU ĐộT BIếN GEN CDH1 (E - cadherin) TRÊN BệNH NHÂN UNG THƯ Dạ DàY LAN TáA DI TRUN Chun ngành : Hóa sinh y học Mã số : 62720112 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Đặng Thị Ngọc Dung HÀ NỘI - 2020 LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập thực luận án nhận nhiều giúp đỡ, bảo tận tình quan, đơn vị, Thầy cơ, đồng nghiệp, bạn bè, bệnh nhân gia đình thân u Trước hết, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Đặng Thị Ngọc Dung, người thầy tận tình hướng dẫn, truyền đạt cho kiến thức, phương pháp nghiên cứu khoa học vô quý báu, người giúp đỡ, động viên tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình thực luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành đến: - Ban Giám hiệu, phòng Quản lý Đào tạo Sau đại học – Trường Đại học Y Hà Nội, Ban Giám đốc BV Phụ sản TW tạo điều kiện, giúp đỡ để học tập hoàn thành luận án - GS TS Tạ Thành Văn, Hiệu trưởng, Trưởng mơn Hóa sinh – Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện cho tơi q trình học tập thực luận án - TS Nguyễn Thúy Hương, Bộ môn Giải phẫu bệnh – Trường Đại học Y Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận án - Tập thể cán nhân viên khoa Sinh hóa – BV Phụ sản TW chia sẻ, động viên tạo điều kiện cho tơi q trình công tác học tập - Tập thể cán nhân viên Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng – Xét nghiệm Y học, thầy mơn Hóa sinh trường Đại học Y Hà Nội giúp đỡ suốt trình làm nghiên cứu - Các em học viên bác sĩ nội trú Hóa sinh: Trần Đức Anh, Ngô Diệu Hoa, Đặng Thị Nga, Lê Thị Yến, Hàn Thị Thanh Thủy giúp đỡ, đồng hành với tơi q trình nghiên cứu - Tơi xin gửi lời cảm ơn đến bệnh nhân gia đình họ tin tưởng, giúp đỡ hợp tác với tơi q trình làm nghiên cứu để tơi hồn thành luận án - Xin cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp giúp đỡ q trình học tập, cơng tác nghiên cứu - Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc, tình cảm u q đến bố mẹ tơi, bố mẹ chồng, anh chị em gia đình ln u thương, động viên chia với thời gian qua Cảm ơn chồng yêu quý, người hi sinh nhiều cho nghiệp tôi, chỗ dựa vững động lực vơ to lớn để tơi hồn thành nhiệm vụ Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Nguyễn Thị Thanh Hƣơng LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Thị Thanh Hương, nghiên cứu sinh khóa 35, Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Hóa sinh Y học, xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn cô PGS.TS Đặng Thị Ngọc Dung Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Ngƣời viết cam đoan Nguyễn Thị Thanh Hƣơng DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt AJCC APC CDH1 EC EGFR EMT GAPPS GSK-3 GTT HMMD H.Pylori IGCLC MLPA NST Nu PCR SHPT SIFT SNP TNM UICC UTBM UTDD WHO Tên tiếng Anh American joint committee on cancer Adenomatous polyposis coli Cadherin-1 Extracellular Cadherin Epidermal growth factor receptor Tên tiếng Việt Ủy ban ung thư Hoa Kỳ Tiểu phần ngoại bào Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì Epithelial – mesenchymal transitions Chuyển đổi biểu mô-trung mô Ung thư tuyến dày hội chứng polyp đại tràng dày Glycogen synthase kinase 3 Giải trình tự Hóa mơ miễn dịch Vi khuẩn Helicobacter Pylori International Gastric Cancer Linkage Hiệp hội liên kết ung thư dày giới Consortium Multiplex ligation-dependent probe amplification Nhiễm sắc thể Nucleotide Phản ứng chuỗi polymerase Polymerase Chain Reaction Sinh học phân tử Thuật tốn xếp khơng Sorting Intolerant from Tolerant dung nạp từ dung nạp sai Đa hình đơn nucleotide Single Nucleotide Polymorphisms Khối u nguyên phát - Hạch Tumor – Nodes – Metastasis bạch huyết - Di Hiệp hội kiểm soát ung thư Union for international cancer quốc tế control Ung thư biểu mô Ung thư dày Tổ chức y tế giới World Health Organization MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Ung thư dày lan tỏa di truyền 1.1.1 Lịch sử phát dịch tễ học 1.1.2 Các yếu tố nguy 1.1.3 Đặc điểm lâm sàng 12 1.1.4 Giải phẫu bệnh 13 1.1.5 Chẩn đoán ung thư dày lan tỏa di truyền 17 1.1.6 Chẩn đoán giai đoạn ung thư dày 18 1.1.7 Điều trị tiên lượng 20 1.2 Vai trò gen CDH1 ung thư dày lan tỏa di truyền 22 1.2.1 Cấu trúc chức gen CDH1 22 1.2.2 Cơ chế gây bệnh gen CDH1 ung thư dày lan tỏa di truyền 25 1.2.3 Đặc điểm di truyền ung thư dày lan tỏa di truyền 28 1.2.4 Tình hình nghiên cứu ung thư dày lan tỏa di truyền đột biến gen CDH1 giới Việt Nam 30 1.2.5 Quản lý bệnh ung thư dày lan tỏa di truyền đột biến gen CDH1 32 1.3 Các phương pháp phát đột biến gen CDH1 36 1.3.1 Khuếch đại gen kỹ thuật PCR 37 1.3.2 Kỹ thuật giải trình tự gen theo phương pháp Sanger 37 1.3.3 Dự đoán khả gây bệnh đột biến gen CDH1 phần mềm phân tích tin sinh học 38 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Đối tượng nghiên cứu 40 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 41 2.3 Phương pháp nghiên cứu 41 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu: 41 2.3.2 Cỡ mẫu nghiên cứu 41 2.3.3 Phương pháp thu thập mẫu 42 2.3.4 Các biến số nghiên cứu 43 2.3.5 Sơ đồ nghiên cứu 45 2.3.6 Phương tiện nghiên cứu 46 2.3.7 Quy trình kỹ thuật phân tích đột biến gen CDH1 48 2.3.8 Thử nghiệm Clo-Test chẩn đốn nhiễm H Pylori 51 2.3.9 Quy trình kỹ thuật nhuộm hóa mơ miễn dịch 52 2.4 Xử lý phân tích số liệu 53 2.5 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 53 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 55 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 55 3.1.1 Đặc điểm tuổi, giới, tiền sử bệnh yếu tố nguy 55 3.1.2 Đặc điểm lâm sàng 58 3.1.3 Đặc điểm tổn thương dày qua nội soi 60 3.1.4 Phân loại giai đoạn bệnh theo TNM 61 3.2 Kết phân tích gen CDH1 đối tượng nghiên cứu 61 3.2.1 Kết tách chiết DNA phản ứng PCR khuếch đại exon gen CDH1 61 3.2.2 Kết phát đột biến SNP gen CDH1 62 3.2.3 Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng đối tượng nghiên cứu mang đột biến SNP gen CDH1 72 3.3 Xác định đột biến gen CDH1 thành viên gia đình bệnh nhân mang đột biến gen CDH1 79 3.3.1 Phả hệ kết phát đột biến gen CDH1 thành viên gia đình 79 3.3.2 Đặc điểm phả hệ thành viên gia đình mang đột biến gen CDH1 87 Chƣơng 4: BÀN LUẬN 91 4.1 Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu 91 4.2 Đột biến gen CDH1 bệnh nhân UTDD lan tỏa di truyền 101 4.3 Đột biến gen CDH1 thành viên gia đình bệnh nhân mang đột biến gen CDH1 120 KẾT LUẬN 134 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại mô bệnh học ung thư biểu mô dày Tổ chức Y tế Thế giới năm 2010 so sánh với phân loại Lauren 15 Bảng 1.2 Phân loại TNM ung thư dày theo AJCC 8th 2017 19 Bảng 1.3 Phân loại giai đoạn bệnh UTDD theo TNM 20 Bảng 1.4 Ý nghĩa phương pháp đánh giá đột biến gen CDH1 37 Bảng 2.1 Thành phần phản ứng PCR 49 Bảng 2.2 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR 49 Bảng 2.3 Thành phần phản ứng PCR cho giải trình tự 50 Bảng 2.4 Chu trình nhiệt phản ứng PCR cho giải trình tự 50 Bảng 2.5 Quy trình xử lý tiêu hóa mơ miễn dịch 52 Bảng 3.1 Phân loại đối tượng nghiên cứu theo tiêu chuẩn IGCLC 2015 55 Bảng 3.2 Phân bố tuổi giới bệnh nhân tham gia nghiên cứu 56 Bảng 3.3 Mối liên quan tuổi phát bệnh với giới tính 56 Bảng 3.4 Tiền sử cá nhân, gia đình số yếu tố nguy 57 Bảng 3.5 Lý vào viện đối tượng nghiên cứu 58 Bảng 3.6 Thời gian xuất triệu chứng đến vào viện 59 Bảng 3.7 Đặc điểm tổn thương dày qua nội soi 60 Bảng 3.8 Phân loại giai đoạn bệnh theo TNM 61 Bảng 3.9 Các SNP tìm thấy nghiên cứu 63 Bảng 3.10 Đột biến SNP gen CDH1 tìm bệnh nhân UTDD lan tỏa di truyền 64 Bảng 3.11 Dự đoán khả gây bệnh đột biến sai nghĩa 70 Bảng 3.12 Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân mang đột biến gen CDH1 73 Bảng 3.13 Đặc điểm nội soi mô bệnh học bệnh nhân mang đột biến 74 Bảng 3.14 Phân bố SNP bệnh nhân tham gia nghiên cứu 77 Bảng 3.15 Đặc điểm lâm sàng số yếu tố nguy 77 Bảng 3.16 Đặc điểm phả hệ mang đột biến gen nghiên cứu 87 Bảng 3.17 Tỷ lệ mang đột biến gen CDH1 phả hệ gia đình 88 Bảng 3.18 Đặc điểm nội soi mô bệnh học thành viên gia đình mang đột biến gen CDH1 89 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 (A) Ung thư biểu mơ tế bào nhẫn chỗ: tuyến với màng nguyên vẹn lót tế bào hình nhẫn (B) Sự xâm nhập tế bào hình nhẫn bên biểu mô (đầu mũi tên) (C) Ung thư biểu mô tế bào nhẫn xâm lấn giai đoạn T1a 16 Hình 1.2 Hình ảnh gen CDH1 nằm nhánh dài NST 16, gồm 16 exon mã hóa cho vùng protein tương ứng 23 Hình 1.3 Vị trí E-cadherin vai trị kết dính tế bào 24 Hình 1.4 Các đường sinh ung thư liên quan đến E-cadherin 25 Hình 1.5 Phức hợp cadherin-catenin protein APC 26 Hình 1.6 Con đường Rho-GTPase 27 Hình 1.7 Sơ đồ phả hệ 29 Hình 1.8 Vị trí phân loại dạng đột biến gen CDH1 UTDD lan tỏa di truyền công bố 30 Hình 3.1 Kết PCR exon (A) exon 13 (B) gen CDH1, (-): chứng âm, (+): chứng dương, M: ladder thang chuẩn 100 bp 62 Hình 3.2 Kết giải trình tự đoạn gen mang đột biến 65 Hình 3.3 Kết giải trình tự đoạn gen mang đột biến 66 Hình 3.4 Kết giải trình tự đoạn gen mang đột biến 67 Hình 3.5 Kết giải trình tự đoạn gen mang đột biến 68 Hình 3.6 Phân bố đột biến SNP gen CDH1 69 Hình 3.7 Hình ảnh minh họa sử dụng cơng cụ Polyphen dự đốn khả gây bệnh đột biến sai nghĩa 71 Hình 3.8 Hình ảnh minh họa sử dụng công cụ Mutation Taster xác định khả gây bệnh đột biến 72 Hình 3.9 Ảnh vi thể UTDD thể lan tỏa bệnh nhân B4 75 Hình 3.10 Ảnh vi thể UTDD thể lan tỏa bệnh nhân B732 75 Hình 3.11 Ảnh vi thể UTDD thể lan tỏa bệnh nhân B532 76 Hình 3.12 Ảnh vi thể UTDD thể lan tỏa bệnh nhân B151 76 Hình 3.13 Phả hệ kết phân tích gen CDH1 gia đình bệnh nhân B4 79 Hình 3.14 Hình ảnh giải trình tự gen CDH1 vị trí mang đột biến thành viên gia đình B4 80 Hình 3.15 Phả hệ kết phân tích gen CDH1 gia đình bệnh nhân B732 81 Hình 3.16 Hình ảnh giải trình tự gen CDH1của thành viên gia đình B732 mang đột biến 82 Hình 3.17 Phả hệ kết phân tích gen CDH1 gia đình bệnh nhân B15183 Hình 3.18 Hình ảnh giải trình tự gen CDH1 thành viên gia đình B151 mang đột biến 84 Hình 3.19 Phả hệ kết phân tích gen CDH1 gia đình bệnh nhân B532 85 Hình 3.20 Hình ảnh giải trình tự gen CDH1của thành viên gia đình B532 mang đột biến 86 Hình 4.1 Bản đồ phân bố đột biến gen CDH1 104 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư dày (UTDD) loại ung thư thường gặp, có ảnh hưởng to lớn đến sức khỏe cộng đồng Theo thống kê Globocan 2018, UTDD loại ung thư phổ biến thứ nguyên nhân gây tử vong thứ hai giới [1] Hầu hết UTDD không di truyền, nhiên khoảng 10% trường hợp UTDD có tính chất gia đình, UTDD lan tỏa di truyền chiếm 1-3% [2] Ung thư dày lan tỏa di truyền bệnh lý di truyền gặp, đặc trưng mô bệnh học tế bào ung thư biệt hóa, xâm lấn lan tỏa lớp niêm mạc nên khó phát sớm Biểu lâm sàng UTDD lan tỏa di truyền bệnh thường khởi phát tuổi cịn trẻ (tuổi trung bình phát 38), tiến triển nhanh, tiên lượng xấu tỷ lệ tử vong cao, nhiên phát bệnh giai đoạn sớm tỷ lệ sống năm tăng lên 90% [3] Trong chế bệnh sinh UTDD lan tỏa việc kiểm sốt độ bám dính tính di động tế bào yếu tố quan trọng trình tạo thành tiến triển khối u Gen CDH1 quy định tổng hợp protein E-cadherin có vai trị quan trọng việc bám dính liên kết tế bào phụ thuộc canxi, trì phân hóa kiến trúc bình thường biểu mơ [4] Khi xảy đột biến gen CDH1, dẫn đến suy giảm chức E-cadherin làm giảm khả bám dính tế bào, gây nên hình thái bất thường cấu trúc biểu mô phân cực tế bào Nhiều nghiên cứu rằng, việc bám dính tế bào với tế bào điều kiện tiên dẫn đến xâm lấn di tế bào ung thư [5] Đột biến gen CDH1 phát vào năm 1998 Guilford, thơng qua phân tích đột biến thành viên mắc UTDD lan tỏa khởi phát sớm gia đình người Maori (New Zealand) [6] Mặc dù, có vài nghiên cứu giới số gen có liên quan đến UTDD lan tỏa di truyền CTNNA1, BRCA2, MAP3K6…tuy nhiên, vai trò đột biến gen nói chưa chắn số lượng mẫu nghiên cứu không đủ để xác định mức độ phổ biến mức độ thâm nhập gen [7] Tỷ lệ phát đột biến gen CDH1 chiếm 30 – 40% gia đình chẩn đốn UTDD lan tỏa di truyền [6] Vì vậy, việc xác định đột biến gen UTDD lan tỏa di truyền giới hạn gen CDH1 Đặc điểm di truyền bệnh theo chế di truyền gen trội nhiễm sắc thể thường, cá thể gia đình có bố mẹ mang đột biến gen có 50% hội nhận đột biến gen từ bố mẹ Vì vậy, việc sàng lọc phát sớm thành viên gia đình bệnh nhân mang đột biến gen CDH1 chưa biểu bệnh cần thiết Từ đó, có biện pháp phòng bệnh đưa can thiệp điều trị sớm hiệu Tại Việt Nam, nghiên cứu đột biến gen CDH1 bệnh nhân UTDD lan tỏa di truyền, xác định đột biến thành viên gia đình có nguy cao mẻ Với lý đề tài “Nghiên cứu đột biến gen CDH1 (E-cadherin) bệnh nhân ung thư dày lan tỏa di truyền” thực với mục tiêu: Phân tích đột biến gen CDH1 đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân ung thư dày lan tỏa di truyền Xác định đột biến gen CDH1 thành viên gia đình bệnh nhân ung thư dày lan tỏa di truyền mang đột biến gen CDH1 3 Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Ung thƣ dày lan tỏa di truyền 1.1.1 Lịch sử phát dịch tễ học Hiệp hội tiêu hóa Mỹ báo cáo vào năm 1994 gia đình có thành viên bị UTDD xảy lứa tuổi từ 31 – 65 tuổi, vòng hệ [8] Gia đình có cặp sinh đơi giống nhau, hai bị chết UTDD Kết giải phẫu bệnh thành viên gia đình thấy tế bào ung thư hình nhẫn niêm mạc dày Đây báo cáo gia đình có thành viên bị UTDD, sở di truyền tượng chưa biết rõ vào thời điểm Năm 1998, Guilford cộng xác định đột biến gen CDH1 nguyên nhân chủ yếu gây ung thư dày lan tỏa di truyền [9] Nghiên cứu thực ba gia đình người Maori New Zealand, với nhiều trường hợp khởi phát ung thư dày sớm, đa hệ Phân tích di truyền cho thấy có liên quan đáng kể với E-cadherin, protein mã hố gen CDH1, có vai trị quan trọng việc bám dính tế bào trì tồn vẹn biểu mơ Phát giúp xác định đột biến gen CDH1 gia đình có nhiều thành viên bị UTDD lan tỏa [10] Một nghiên cứu thực gia đình bị chi phối ung thư dày lan tỏa ung thư vú thùy Các đột biến dị hợp tìm thấy gen CDH1 phân bố rải rác khắp gen Các bệnh nhân bị đột biến gen CDH1 thường khơng có triệu chứng thời điểm chẩn đoán, tế bào ung thư phát triển âm thầm niêm mạc dày, khơng hình thành khối u nên khó phát sớm, chẩn đoán thường muộn [10] Khoảng 10 – 30% trường hợp UTDD cho thấy có tính chất gia đình, có – 3% gây hội chứng ung thư dày lan tỏa di truyền [11] Trong đánh giá 439 gia đình có người mắc UTDD, đột biến gen CDH1 ưu tiên quan sát thấy gia đình có đầy đủ tiêu chuẩn lâm sàng UTDD lan tỏa di truyền chiếm 36,4% [12] Trong ung thư dày gia đình, tần số đột biến dịng mầm gen CDH1 thấp nhiều (12,5%) [12] Đột biến gen CDH1 chưa tìm thấy gia đình khơng có tiền sử UTDD Tuy nhiên, tỷ lệ đột biến lên đến 10% mô tả cá nhân tiền sử gia đình chẩn đốn bệnh độ tuổi < 35 tuổi, từ quần thể với tỷ lệ thấp UTDD [13] Không phải tất mang đột biến gen CDH1 phát triển thành ung thư dày lan tỏa di truyền Ở người có đột biến gen CDH1, nguy mắc UTDD lan tỏa ước tính 67 – 70% nam giới 56 – 83% nữ giới độ tuổi 80 [14] Nguy tích lũy ung thư vú nữ giới có đột biến gen CDH1 khoảng 39 – 52% sau 80 tuổi [14] Một điều lưu ý khác có tương quan nghịch tần số đột biến gen CDH1 tỉ lệ mắc UTDD Cụ thể, nước có tỷ lệ UTDD thấp, tần số đột biến gen gia đình UTDD lan tỏa di truyền >40%, nước có tỷ lệ trung bình cao bệnh UTDD tỷ lệ đột biến gen CDH1 khoảng 20% [15] Mặc dù tỷ lệ mắc bệnh UTDD cao Nhật Bản, Hàn Quốc, tỷ lệ mắc UTDD lan tỏa di truyền nước lại thấp hơn, hầu hết đột biến gen CDH1 lại phát nhiều quần thể người châu Âu châu Mỹ Có thể nhận định tỷ lệ mắc UTDD mức trung bình cao nước có liên quan với yếu tố nguy môi trường (lối sống, chế độ ăn uống), yếu tố di truyền đóng góp phần nhỏ 1.1.2 Các yếu tố nguy Cơ chế bệnh sinh UTDD trình phức tạp nhiều yếu tố gây nên Đó kết hợp yếu tố có nguồn gốc từ mơi trường biến đổi gen di truyền Các yếu tố có nguồn gốc mơi trường nghiên cứu nhiều tình trạng nhiễm H.pylori, hút thuốc lá, uống rượu chế độ ăn uống Trong năm gần hiểu biết chế bệnh sinh UTDD mức độ phân tử ngày mở rộng Các kết nghiên cứu biến đổi di truyền nguyên nhân phát triển UTDD bật UTDD lan tỏa di truyền, nhiên trình diễn phức tạp nhiều khoảng trống hiểu biết người Nghiên cứu biến đổi cấp độ phân tử hứa hẹn cho việc phát triển dấu ấn chẩn đoán, điều trị, tiên lượng, phịng bệnh UTDD nói chung UTDD lan tỏa di truyền nói riêng 1.1.2.1 Các yếu tố có nguồn gốc môi trường Lối sống chế độ ăn uống - Hút thuốc lá: Hút thuốc cho yếu tố nguy nhiều loại ung thư có UTDD Hút thuốc làm tăng nguy UTDD lên 1,56 lần [16] Theo Gonzalez, có xấp xỉ 18% trường hợp UTDD quy cho hút thuốc Nguy UTDD tăng theo thời gian hút thuốc giảm sau 10 năm cai thuốc [17] Trong nghiên cứu tổng hợp Ladeiras (2008), mối quan hệ hút thuốc ung thư dày cho thấy có mối liên quan hành vi hút thuốc liều lượng sử dụng thuốc ngày [18] Đã có nhiều giả thuyết chế tình trạng hút thuốc làm tăng nguy mắc UTDD Một số nghiên cứu đưa giả định việc tạo gốc tự thúc đẩy trình chết theo chương trình tế bào hút thuốc, điều gây biến đổi tiền ung thư niêm mạc dày [19] Hút thuốc làm tăng nguy loạn sản dị sản ruột tổn thương tiền ung thư [20] Hút thuốc làm tăng nguy mắc UTDD thể ruột cao thể lan tỏa vị trí tâm vị cao so với không tâm vị Nghiên cứu Sasazuki (2002) cho thấy có mối liên quan hút thuốc với UTDD thể ruột vị trí khơng tâm vị [21] Tuy nhiên chưa có nhiều nghiên cứu tác động hút thuốc ung thư dày lan tỏa di truyền 6 - Uống rượu: Mối liên quan sử dụng rượu với UTDD đề cập đến nhiều nghiên cứu dịch tễ học với kết không quán Trong nghiên cứu Duell (2011), 444 trường hợp ung thư biểu mô dày nguyên phát cho thấy có mối liên quan tiêu thụ nhiều rượu (>60g/ ngày) làm tăng nguy mắc ung thư dày 1,6 lần so với người không sử dụng rượu [22] Một số nghiên cứu khác cho khơng có mối liên quan việc tiêu thụ rượu với nguy mắc ung thư dày [23] , [24] Nghiên cứu Hansson (1994) [23] , nghiên cứu Sjodahl (2007) [25] cho thấy uống rượu kết hợp với hút thuốc làm tăng nguy ung thư dày, uống rượu có xu hướng làm tăng nguy sử dụng thuốc - Chế độ ăn uống: Bài tổng quan tác giả Wang cho thấy có mối tương quan mạnh mẽ lượng muối tiêu thụ với tỷ lệ UTDD [26] Nghiên cứu đánh giá mối tương quan lượng muối natri niệu 24 với tỷ lệ tử vong UTDD nam giới vùng địa lý Nhật Bản, cho thấy mối tương quan chặt chẽ tỷ lệ tử vong UTDD tiết muối [27] Một nghiên cứu khác Nhật Bản thực bảng câu hỏi tần suất ăn uống 38 loại thực phẩm cho 634 nam vợ 373 người số thành phố Nhật Bản, hệ số tương quan tử vong ung thư dày với lượng tiêu thụ rau muối 0,36 [28] Mối quan hệ hợp lý mặt sinh học, nồng độ muối cao làm tổn thương lớp niêm mạc bảo vệ dày Thức ăn nhiều nitrate loại cá, thịt chế biến sẵn, loại thức ăn xơng khói làm tăng nguy UTDD [29] Ngược lại, ăn nhiều rau xanh, trái cây, vitamin C làm giảm nguy mắc UTDD Những chứng nhấn mạnh tầm quan trọng chế độ ăn uống UTDD Tuy nhiên, chưa có nhiều nghiên cứu ảnh hưởng chế độ ăn UTDD lan tỏa di truyền 7 Trực khuẩn Helicobacter Pylori Vào năm 1983, Marshall Warren phân lập trực khuẩn Helicobacter Pylori (H pylori) từ mảnh sinh thiết biểu mô dày H pylori tác nhân quan trọng nhất, gặp 90% bệnh nhân UTDD [30] H pylori có khả thích nghi đặc biệt để sống môi trường acid dày, cư trú H pylori thể làm tổn thương niêm mạc, viêm niêm mạc dày sau gây dị sản, loạn sản ung thư Tuy nhiên, có điều đặc biệt tỷ lệ UTDD tương đối thấp nước châu Phi tỷ lệ nhiễm H pylori lại cao [31] Nghiên cứu sau việc đồng nhiễm giun sán H pylori chuyển đáp ứng hệ miễn dịch từ tế bào T helper sang T helper dạng gây tổn thương giải thích phần cho tượng [32] Hút thuốc làm tăng tác dụng gây ung thư vi khuẩn H pylori [33] Trong ung thư dày thể lan tỏa vai trị H pylori cịn gây nhiều tranh cãi, từ có phác đồ điều trị vi khuẩn H pylori tỷ lệ mắc UTDD giảm Tuy nhiên, tỷ lệ mắc ung thư dày thể lan tỏa giữ nguyên tăng châu Á, Hoa Kỳ châu Âu chiếm 35 – 45% trường hợp UTDD nghiên cứu gần [34] Tỷ lệ mắc bệnh tăng gấp 10 lần từ năm 1970 đến năm 2000 [35] Do đó, vai trị yếu tố nguy ung thư dày thể lan tỏa cần nghiên cứu thêm 1.1.2.2 Biến đổi gen di truyền ung thư dày lan tỏa di truyền Đột biến gen Ung thư dày có tính chất gia đình chiếm khoảng 10%, – 3% UTDD lan tỏa di truyền Đột biến gen CDH1 chứng minh nguyên nhân gây bệnh ung thư dày lan tỏa di truyền Tỷ lệ phát đột biến gen CDH1 chiếm 30 – 40% gia đình chẩn đốn ung thư dày lan tỏa di truyền [6] , khoảng 60% trường hợp UTDD lan tỏa di truyền lại nguyên nhân chưa biết rõ Đã có vài ... chức gen CDH1 22 1.2.2 Cơ chế g? ?y bệnh gen CDH1 ung thư d? ?y lan tỏa di truyền 25 1.2.3 Đặc điểm di truyền ung thư d? ?y lan tỏa di truyền 28 1.2.4 Tình hình nghiên cứu ung thư d? ?y lan tỏa di. .. bệnh nhân ung thư d? ?y lan tỏa di truyền Xác định đột biến gen CDH1 thành viên gia đình bệnh nhân ung thư d? ?y lan tỏa di truyền mang đột biến gen CDH1 3 Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Ung thƣ d? ?y lan tỏa. .. lan tỏa di truyền Đột biến gen CDH1 chứng minh nguyên nhân g? ?y bệnh ung thư d? ?y lan tỏa di truyền Tỷ lệ phát đột biến gen CDH1 chiếm 30 – 40% gia đình chẩn đốn ung thư d? ?y lan tỏa di truyền [6]