Nghiên cứu khoa học cơng nghệ NGHIÊN CỨU TÌNH HÌNH NHIỄM VI RÚT VIÊM GAN HBV, HCV, HDV VÀ ĐẶC ĐIỂM DI TRUYỀN PHÂN TỬ CỦA HBV TRÊN ĐỐI TƯỢNG THANH NIÊN Ở HAI TỈNH THÁI NGUYÊN, ĐÀ NẴNG CỦA VIỆT NAM LICHNAIA E V (1), BÙI THỊ THANH NGA (2), PHẠM THỊ HÀ GIANG (2), STARKOVA D (1), BÙI THỊ LAN ANH (2), TRẦN THỊ NHÀI (2), VÕ VIẾT CƯỜNG (2), PHẠM NGỌC QUANG (2), DMITRIEV A V (3), KALININA O V (1,4) ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh viêm gan vi rút B, C D (HBV, HCV, HDV) bệnh truyền nhiễm phổ biến gây hậu nghiêm trọng sức khỏe dẫn đến tử vong biến chứng nguy hiểm suy gan cấp, xơ gan ung thư gan Theo ước tính Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) năm 2019 có khoảng 354 triệu trường hợp nhiễm HBV HCV mạn tính [1] Tỷ lệ lưu hành HDV giới khoảng 5% số người dương tính với HBsAg [2] Hàng năm giới có khoảng 000 000 trường hợp tử vong có liên quan đến viêm gan vi rút (chiếm khoảng 2,7% tổng số trường tử vong) [3] Tháng 6/2016, WHO ban hành Chiến lược Toàn cầu Viêm gan vi rút giai đoạn 2016 - 2021 với tầm nhìn giới khơng cịn lây truyền vi rút viêm gan, tất bệnh nhân tiếp cận với chăm sóc điều trị an toàn, hiệu hướng tới mục tiêu loại trừ bệnh viêm gan vi rút mối đe dọa sức khỏe cộng đồng vào năm 2030 [4] Để đạt mục tiêu cần tăng cường chiến dịch tiêm chủng viêm gan B, tạo chế phẩm kháng vi rút có hiệu HCV, cải tiến phương pháp xét nghiệm chẩn đoán vi rút viêm gan nâng cao nhận thức cộng đồng Ở khu vực châu Á có khoảng 180 triệu người dương tính với HBsAg 31 triệu người nhiễm HCV [5] Việt Nam nước có tỷ lệ mắc HBV cao, có khoảng 8,6 triệu người nhiễm HBV Tỷ lệ nhiễm HBV mạn tính chiếm khoảng 8,8% phụ nữ 12,3% nam giới [6] Năm 2015, Bộ Y tế Việt Nam công bố Kế hoạch hành động Quốc gia Phòng chống bệnh viêm gan vi rút giai đoạn 2015-2019, ước tính tỷ lệ nhiễm HBV 8-25% HCV 2,5-4,1% Tỷ lệ nhiễm HDV số bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính lên tới 10-15% [7] Vi rút viêm gan B đặc trưng chu trình chép gen phức tạp dẫn đến tỷ lệ đột biến cao Tùy thuộc vào vị trí đột biến gen S, vi rút khỏi miễn dịch vắc-xin, dẫn đến kết âm tính giả chẩn đoán Các đột biến vùng PreCore/Core dẫn đến giảm ngừng hoàn toàn việc sản xuất HBeAg [11] Hiện nay, HBV chia mười nhóm kiểu gen (genotype) từ A - J; kiểu gen A - D, F, H I phân nhỏ thành phân tuýp (sub-genotype) ký hiệu chữ số Ả Rập Tất HBsAg mang vùng định kháng nguyên “a” kháng nguyên tuýp (subtype) đặc hiệu d y w r (adw, ayw, adr, ayr ) Hiện có tuýp huyết (serotypes) HBV xác định giới: ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adw2, adw4, adrq+, adrq- [8] Đối với HBV, kiểu gen khác có chung huyết 64 Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 Nghiên cứu khoa học cơng nghệ Chính vậy, tiến hành nghiên cứu cắt ngang để đánh giá tỷ lệ nhiễm viêm gan siêu vi B, C D đặc điểm di truyền phân tử HBV đối tượng niên tỉnh Thái Nguyên Đà Nẵng năm 2018 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Mẫu huyết thu thập từ 1248 sinh viên khỏe mạnh độ tuổi từ 18 đến 29 tuổi (tuổi trung bình: 20,3 ± 1,4) Thái Nguyên Đà Nẵng năm 2018 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Sàng lọc mẫu dương tính với HBV, HCV, HDV miễn dịch học Các xét nghiệm huyết học bao gồm: HBsAg, anti-HBs, anti-HBc tổng số để phát HBV, anti-HCV, anti-HDV để phát HCV HDV Các xét nghiệm thực sinh phẩm thương mại: Vecto-HBsAg antigen; DS-ELISAANTI-HBsAg; DS-ELISA-ANTI-HBc; DS-ELISA-ANTI-HCV; DS-ELISA-ANTIHDV (hãng Vector Best - LB Nga) lồi 2.2.2 Giải trình tự gen preS/S giải tồn gen, phân tích phát sinh Các đoạn DNA khuếch đại PCR với cặp mồi đặc hiệu công bố Zhang Q nghiên cứu trước [9] Các đoạn mồi chọn để khuếch đại toàn hệ gen: HBV-DF1 'caacttacaaggcctttc-3', HBV-DF3 'cacttcgcttcacctct -3', HBV-DR2 'agtaagacaggaaatgtga-3' Sản phẩm PCR giải trình tự phương pháp Sanger, sử dụng kít BigDye terminator V3.1, hệ thống máy ABI3500 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, USA) Cây phát sinh loài xây dựng phương pháp Maximum-Likelihood kết hợp NeibourgJoining, giá trị bootstrap 1000, kèm theo trình tự tham chiếu chuẩn từ Cơ sở liệu trực tuyến vi rút viêm gan Các phần mềm sử dụng bao gồm Mega 6.0 SimPlot 3.5.1 2.2.3 Phân tích liệu thống kê Phân tích liệu thống kê thực STATA phiên 14 (Statacorp LLC, Texas, Hoa Kỳ), p < 0,05 coi có ý nghĩa thống kê 2.3 Đạo đức nghiên cứu Nghiên cứu phê duyệt Hội đồng đạo đức nghiên cứu y sinh học Trung tâm Nhiệt đới Việt - Nga với mã số 02/2018/VREC KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Tỷ lệ nhiễm HBV, HCV HDV đối tượng nghiên cứu hai tỉnh Thái Nguyên, Đà Nẵng Trong nghiên cứu này, tỷ lệ phát kháng nguyên HBsAg 3,5% (44/1248; 95% CI, 2,6-4,7), anti-HBc tổng số 24,9% (311/1248; 95% CI, 22,6-27,4), khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê địa điểm Thái Nguyên Đà Nẵng Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 65 Nghiên cứu khoa học công nghệ (bảng 1) Kết cho thấy tỷ lệ cao so với nghiên cứu tác giả Phạm Thị La cộng nhóm người 18-30 tuổi, giai đoạn 2003 - 2006 tỉnh Thái Nguyên, với HBsAg+ 2,2% (2003), 0,8% (2004), 0,25% (2006) [10] Theo nghiên cứu Trần Thị Thanh Thảo cộng khảo sát 866277 người hiến máu tình nguyện, xác định tỷ lệ người hiến máu dương tính với HBsAg 1,43% giai đoạn 2016-2020 [11] Như quần thể nghiên cứu chúng tôi, tỷ lệ HBsAg+ có xu hướng cao nghiên cứu tương tự thời điểm, cần tiến hành thêm nghiên cứu để làm rõ khác biệt Bảng Tần suất phát marker HBV đối tượng tham gia nghiên cứu Địa điểm Thái Nguyên, n (%) Đà Nẵng, n (%) 3,5% (44/1248) 2,8 % (19/669) 4,3 % (25/579) 29,4% аnti-HBs 28,1 % (188/669) 30,9 % (179/579) (367/1248) 24,9% аnti-НВс 25,5 % (171/669) 24,2 % (140/579) (311/1248) аnti-HBs + 18,5% 18,2 % (122/669) 18,8 % (109/579) аnti-HBc (231/1248) Marker HBV HBsAg Tổng, n/N p p=0,1580 p=0,2766 p=0,5738 p=0,7891 Nghiên cứu phát anti-HBs với tỷ lệ 29,4% (367/1248; 95% CI, 27,032,0) tổng số mẫu nghiên cứu, có 10,9% (136/1248; 95% CI, 9,312,8) sinh miễn dịch sau tiêm chủng, lại 18,5% (231/1248; 95% CI, 16,520,8) phát anti-HBs anti-HBc, đặc điểm miễn dịch sau nhiễm HBV (bảng 1) Phát 3% (37/1248; 95% CI, 2,2-4,1) số mẫu dương tính với anti-HBc cho biết nhiễm HBV thể tiềm ẩn nhiễm trước Theo số liệu thơng tin vấn, có 23,4% (292/1248; CI 95%, 21,1-25,8) số người khảo sát cho biết có tiêm vắc xin phịng bệnh viêm gan B, nhiên, thông tin tiêm chủng ghi lại lời nói mà khơng cung cấp giấy chứng nhận tiêm chủng Tại Thái Nguyên, số người cho biết có tiêm vắc xin phịng bệnh viêm gan B cao lần (n = 233) so với Đà Nẵng (n = 59) Trong số nhóm người khai tiêm chủng, phát 3,8% (11/292; 95% CI, 2,1-6,6) dương tính với HBsAg 24,0% (70/292; 95% CI, 19,4-29,2) phát anti-HBc, điều cho thấy họ khơng rõ tình trạng tiêm chủng họ bị nhiễm thể tiềm ẩn Theo nghiên cứu cắt ngang Nguyễn Thị Thùy Linh năm 2020, số 2000 sinh viên y khoa năm thứ thứ (từ 21 đến 30 tuổi) từ tám trường đại học y khoa miền Bắc, miền Trung miền Nam Việt Nam, cho thấy có 19,9% số người khảo sát có mức độ nhận thức tốt khả ngăn ngừa kiểm soát lây lan nhiễm HBV [12] Đồng thời, 83,9% người tham gia cho biết tiền sử tiêm vắc-xin mà khơng có chứng tài liệu, 84,2% xét nghiệm HBsAg, 4,9% cho kết dương tính với HBsAg Trong số người khảo sát, số nam nữ 266 (21,3%) 982 (78,7%) (bảng 2) 66 Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 Nghiên cứu khoa học công nghệ Bảng Phân bố đối tượng tham gia nghiên cứu theo giới tính Tỉnh/ Thành phố Thái Nguyên Nam, n (%) 159 (23,8 %) Nữ, n (%) 510 (76,2 %) Tổng 669 Đà Nẵng 107 (18,5 %) 472 (81,5 %) 579 Tổng cộng 266 (21,3 %) 982 (78,7 %) 1248 HBsAg 3,8% (10/266) 3,5% (34/982) 3,5% (44/1248) аnti-HBs 30,8% (82/266) 29,0% (285/982) 29,4% (367/1248) аnti-НВс 22,2% (59/266) 25,7% (252/982 24,9% (311/1248) Nghiên cứu tỷ lệ phát HBsAg, anti-HBs anti-HBc theo giới tính cho thấy tần suất phát kháng nguyên HBsAg nam giới 3,8% (10/266; 95% CI, 2,0-6, 8) nữ giới 3,5% (34/982; KTC 95%, 2,5-4,8); Anti-HBs phát nam nữ 30,8% (82/266; 95% CI, 25,6-36,6) 29,0% (285/982; 95% CI, 26,3-31,9); anti-HBc phát nam 22,2% (59/266; 95% CI, 17,627,6) 25,7% (252/982; 95% CI, 23,0-28,5) nữ Kết cho thấy khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê tỷ lệ marker HBV theo giới tính nhóm tuổi (χ2 = 0,0543, p = 0,8157; χ2 = 1,3559, p = 0,2442; χ2 = 0,3284, p = 0,5666) Tỷ lệ phát anti-HCV 0,4% (5/1248; KTC 95%, 0,2-0,9) tổng số mẫu nghiên cứu Thái Nguyên 0,6% (4/669; KTC 95%, 0,2-1,5), Đà Nẵng 0,2% (1/579; KTC 95%, 0,03-1,0), không phát RNA-HCV Kết phù hợp với kết xét nghiệm sàng lọc sở truyền máu tồn quốc tác giả Nguyễn Chí Tuyển 0,75% người hiến máu tình nguyện Thái Nguyên (2003-2007) tác giả Phạm Thị La 0,42% [10, 13], điều cho thấy tình hình nhiễm bệnh HCV qua năm chưa có thay đổi đáng kể Theo nghiên cứu trước đó, Việt Nam tỷ lệ phát HDV bệnh nhân nhiễm HBV mạn tính lên tới 10 -15% [7], nhiên nghiên cứu không phát ca nhiễm HDV Tỷ lệ âm tính với marker HBV, HCV HDV 64,0% (799/1248; 95% CI, 61,3-66,6) 3.2 Đặc điểm sinh học phân tử HBV Kết phân tích phát sinh lồi dựa gen vùng preS/S (hình 1) cho thấy có lưu hành hai kiểu gen B (tất thuộc phân tuýp B4) C (tất thuộc phân tuýp C1) tỉnh Thái Nguyên Đà Nẵng Tỷ lệ HBV thuộc phân tuýp B4 78,9%, có 21,1% thuộc phân tuýp C1 Kết tương tự với công bố tác giả Bùi Thị Thanh Thảo năm 2017 với kiểu gen B 72,6% kiểu gen C 27,4% Từ kết phát sinh loài tác giả Junko Matsuo nghiên cứu tỉnh Bình Thuận cho thấy có 44 mẫu HBV phân tuýp B4 (91,7%) có mẫu phân tuýp C1 (8,3%) Như vậy, B C kiểu gen đặc trưng chiếm ưu Việt Nam [14, 15] Phân tích phát sinh loài cho thấy quần thể vi rút HBV thuộc phân tuýp B4 Thái Nguyên Đà Nẵng khơng có đồng nhất, điều cho thấy chúng có nguồn lây nhiễm khác khơng có lây nhiễm HBV người tham gia nghiên cứu (hình 1) Tạp chí Khoa học Cơng nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 67 Nghiên cứu khoa học công nghệ tn c1 Vie 6.1| 699 | F 04 | |gb |A AB166 192.1 | 070 150 56|d bj| AB20 6581 1| gi|3 bj| 12 12 13 irus 197 711|d j|AB 0565 le BV gi|5 B titis 67 ho |db ia epa oliv gi|662 86 00 |dbj|A 46 w hole 013 1| ey h FB a 48 onk 88 TN 41 w ng 25 han i|38 256 o lly m E G sia g Woo TN g K 205 hole le 15 n B us gi| A Ho j|A w who DR b US G 26 |d 17 15 DN N13 P0 796 D fK re i|60 g am C1 C1 G er Ph ma ilip ny g pi ne i|3 al I C awi s g 892 g i| KF reco i|22 125 77| 33 85 em m 42 55 JQ 56 b 41 28 11| |AJ A F 57 g C | FR 2414 hin 08 dbj| b|M 012 a 71 A 44 09 V A C Vie B0 576 207 93 ie t N 6 ref I1 A Chin t Na G re am 67 3.2 | m | c e B5 62 X C 20 om 200 1| AF2 HQ23 63 V reco rec 009 414 188 iet mb om N 07 Vie Chin am 2010 tnam a reco G 20 07 n 10 000 M A2 A1 A1 12 20 m 201 ole Na wh iet r alia t V us N5 A le e q D 643 604 who le.s ho 200 | nd LC Q34 N18 w hole 25.1 J T N01 w ole Thail a 126 12 D N13 wh 463 AB2 s D 432 85 Nam 88|dbj| a f | DN GQ Viet 59.1 036 am 20 1177 B4 67 630 N j|AB ref 0637 am gi| Viet 9|db LC Vietn 36829 115269 B4 B4 AB dia gi|4 ref ambo ole 11 B C N465 wh lia 20 D 2008 Austra mbodia 1596 JQ34 GQ855338 Ca B4 ref le who 024 DN bodia 2003 AB115551 Cam j|AB205121.1| B1 Japan gi|60279596|db b1 ref AB602818 Japan 2005 b1 ref AB828708 Japan 2012 B1 Japan gi|56 0062|dbj|D23678 b1 ref AB 1| B2 Viet 900112 Japan 201 B2 Vi nam gi|6692 KX76 etnam gi|669 488|gb|AF1212 49.1| 2489|g ref B 5856 Th b|AF12 KC JN60 ailand 1250 | JQ 31532 4187 U 016 JX634155 Thaila SA We st n 2011 b6 Ho d 20 14 12 b6 ref 83 C ng K b6 ref JN79 hina ong 20 11 B re KP 290 201 B I n f KP 659 Ca na B I 65 25 da B x C ndo nes 922 C B5 x C hin nes ia g A anad 2009 Ph hi n a g ia g i|282 liask a 20 ili p a g i|55 i|28 92 a 20 14 05 pi i|55 97 29 971 ne 89 s 78 62 71 |gb| gi |9 968 |gb| 7|gb GQ3 50 |g A |G Q 814 07 b|A Y80 5.1 78 Y | 5| 800 391 814 6.1 db j|A 92 1| | B2 1| 41 11 1| 05 20 200 ne a pi siy 00 ilip a la a 00 Ph M lasi ia 13 26 45 Ma ays 94 46 40 Mal esia n 21 9 B Q 24 60 00 n I A f G Q 13 nd b5 re ef G Q9 41 200 aila d 200 b r f G P3 aos Th ilan 1| b re f K L 536 Tha 997 b re 13 330 | b9 023 GQ 554 and |gb|EU 10 FJ f B3 GQ8 hail 8236 U3 re B3 38 T 9427 58 |gb|E 05 6.1| ref 3153 gi|1 27 82 sia 1109 P KC China gi|194 Indone |dbj|A B6 Chin a 58152 2179 B6 f GQ3 gi|25182 b9 re donesia nesia 2009 | 00331.1 B9 In 1095 Indo 99|dbj|D AP01 nesia gi|2214 1999 B3 Indo 3554 Indonesia b3 AB03 36 Indonesia 200 b3 ref GQ3581 2009 ref B3 GQ924675 Malasia b3 ref KP341009 Indonesia 2013 b7 ref KP341012 Indonesia 2013 b7 ref GQ3581 41 Indonesia 2005 B7 Indone sia gi|282929 ref B3 699|gb|GQ 358143.1| b3 re GQ924663 M b3 re f GQ 924641 alasia 2009 Malas b3 re f AB976 ya 2007 LC3 f AB71 562 Indon 68 In 532 Ind esia 20 14 on n e sia esia 20 13 B3 01 c1 mb c1 D od ref Q0 ia G gi | Q3 978 c 11 8 H C1 c1 re 26 154 on In fK g r e fJ K M 94 I n ne Q8 99 |db d on on sia j g gi| KC3 0152 990 | AB1 esia 20 c2 15 95 C ref JN3 841 340 Tha hina 775 007 T h ila n 8.1 70 157 C2 a |d c d il bj| Jap a ref 13 | an AB South AB5 n d 009 C2 90 Chin gi|120 604 0115 Kore 0583 07 a gi| 33|d Jap a 20 1| 602 796 bj| an 03 c2 A 05|dbj|AAB049 2014 Y2 B20 609.1 c2 re C8 Indo f HQ62 382 Chin 5123.1 | nesia gi | 20 a |2 95 00 518222 C8 Indo 19|dbj Brazil 201 nesia gi| |A P011 251822 10 234|dbj| C9 Indone AP0111 4.1| sia gi|2 518 07.1| 22239|db j|AP 011 C3 Polynesia gi|45 10 2641|emb|X756 8.1| 56.1| C3 Polynesia gi|452622|emb|X75 665.1| C11 Indonesia gi|315539206|dbj|AB554020.1| 1|dbj|AB554019.1| 53920 gi|315 sia C11 Indone b|GQ358155.1|| gi|282929769|g B560661.1 C6 Indonesia 2303|dbj|A sia 2007 ne n gi|31203 157 Indo sia 2007 C12 Japa 58 Q3 G In done 54018.1| ref C6 57 81 j|AB5 es 2008 GQ35 b f |d re 96 c6 in 14 55391 Philipp alia 20 00 gi|31 tr ref C Aus alia 013 nesia Indo str 35 C12 F87 704 Au stralia 200 12 K f u m c4 re AB048 28 A t Na os 20 13 ie c4 873 11 V HIV p C5 2014 1| F K ref F241 from ysia ine 080 07 | c4 A ala ilip p 410 20 9.1 | C5 33 M Ph |EU sia 10 0.1 27 178 992 |gb ala 41 58 JN KJ7 999 78 M B 26 |A KM 94 46 bj AB ref 675 92 5|d bj| c5 gi|1 GQ 774 5|d f s e r 85 e pin c5 i|95 48 g 38 ilip s Ph gi| ne pi sia C5 p i il us Ph R C5 A2 Ca KC315318 Thailand 2007 DN521 whole ref B4 AY03307 Net herlands DN129 wh 2001 ole TN370 D N28 whole TN699 whole LC0 wh FJ0 60789 V ole 23 33 ie t Nam 2013 b4 DN16 Laos JQ ref G who 2008 34 le Q9 DN 1588 2462 Ma K DN 436 Aus lasi re P34 22 wh trali a J f B 10 w ole a 201 200 re N6 K 10 hol LC f B 042 P3 Vie e 06 J 410 t Na N6 US 10 m 77 04 A Vi 01 Vi 221 blo et N od et a N US m am A no 01 S r ou f 12 th 006 as 20 11 Đáng ý rằng, người bị nhiễm HBV kiểu gen B có nguy phát triển ung thư biểu mơ tế bào gan thấp so với người bị nhiễm HBV kiểu gen C Trong nghiên cứu Nghiêm Xn Hồn cộng năm 2011, phân tích tỷ lệ lưu hành kiểu gen HBV số 205 bệnh nhân viêm gan B mạn tính tỉnh phía Bắc Việt Nam điều trị Bệnh viện Trung ương Quân đội 108 từ năm 2018-2019, có 21 người (tuổi trung bình 45 [39-59] tuổi) chẩn đoán sơ gan, 69 người (tuổi trung bình 61 [53-67] tuổi) chẩn đốn mắc bệnh ung thư biểu mô tế bào gan (HCC) [16] Mặc dù kết nghiên cứu khơng tìm thấy mối liên hệ cụ thể kiểu gen HBV mức độ nghiêm trọng bệnh, đặc biệt với phát triển HCC, người ta lưu ý HCC phổ biến người trẻ tuổi bị nhiễm HBV kiểu gen C [16] Hình Cây phát sinh loài từ chủng HBV phân lập, xây dựng dựa đoạn gen preS/S Ghi chú: Màu đỏ chủng phân lập từ Đà Nẵng; Màu xanh chủng phân lập từ Thái Nguyên 68 Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 Nghiên cứu khoa học công nghệ Dựa vùng định kháng nguyên “a” gen S từ 21 mẫu dương tính DNA /HBV xác định ba tuýp huyết thanh: ayw1, adr, adrq- (bảng 3) Tất mẫu phân tuýp B4 thuộc tuýp huyết ayw1, mẫu phân tuýp C1 thuộc tuýp huyết adr mẫu thuộc tuýp huyết adrq-, kết cho thấy quần thể HBV lưu hành nhóm sinh viên Việt Nam khơng đồng Bảng Đặc điểm vị trí axit amin vùng định huyết “a” protein S 21 mẫu HBV Thái Nguyên Đà Nẵng năm 2018 Typ huyết Tổng số mẫu HBV HBV Các vị trí axit amin quan trọng vùng định huyết "a" protein S 122 127 140 159 160 177 178 ayw1 16 R P T A K V P adr K P T A R V P adrq- K P T A R A P Tại vùng định kháng nguyên “a” vùng preS/S gen có mẫu Thái Nguyên xác định đột biến thay gặp G145K thuộc đột biến liên quan đến trốn miễn dịch vắc-xin (vaccine escape mutation) [17] Ở Việt Nam biến thể HBV mang đột biến trốn miễn dịch vắc xin G145R, D144A, G145A xác định bệnh nhân viêm gan B mạn tính bệnh nhân ung thư tế bào gan [18] Khơng tìm thấy đột biến bổ sung vị trí E164 I195 mẫu nghiên cứu, có đột biến vùng core promotor T1753C Trong số 21 mẫu huyết nghiên cứu khơng có mẫu có thay axit amin liên quan đến đột biến kháng thuốc, nhiên, có mẫu xuất hai đột biến BCP A1762T G1762A, mẫu có đột biến A1762T Tại Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Thành phố Hồ Chí Minh, số mẫu huyết từ bệnh nhân viêm gan mạn tính có 30,6% mang phân tuýp B4 có đột biến điểm G1896A vùng precore 78,4% mẫu mang phân tuýp C1 có đột biến điểm A1762T và/hoặc G1764T vùng core promoter gen có liên quan đến ung thư tế bào gan [16] Nghiên cứu Nguyễn Văn Dũng cộng 52 bệnh nhân viêm gan vi rút B mạn tính đủ tiêu chuẩn điều trị thuốc kháng vi rút bệnh viện Bạch Mai cho thấy đột biến PC/BCP thường gặp gồm BCP A1762T/ G1764A PC G1896A có tỷ lệ xuất 40,1% 32,7% Đột biến PC/BCP có liên quan với kiểu gen HBV, đột biến PC G1896A xuất nhiều kiểu gen B (35,7%), đột biến BCP A1762T/G1764A gặp nhiều kiểu gen C (87,5%) Đột biến PC/BCP làm ảnh hưởng tới tổng hợp HBeAg, tỷ lệ đột biến cao (57,9%) nhóm bệnh nhân có xét nghiệm HBeAg (-) Đột biến PC G1896A ức chế q trình nhân lên vi rút, tải lượng ADN HBV bệnh nhân có đột biến thấp chủng vi rút tự nhiên [19] Tạp chí Khoa học Cơng nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022 69 Nghiên cứu khoa học cơng nghệ Nghiên cứu tiến hành giải trình tự toàn hệ gen HBV 19 mẫu với kích thước 3215 bp Trình tự gen phân tích phần mềm SimPlot 3.5.1 cho thấy có 15 (78,9%) số 19 mẫu thuộc phân tuýp B4 nằm vùng preS/S có tái tổ hợp vùng preC/C thuộc kiểu gen C (hình 2) Nghiên cứu tác giả Junko Matsuo tỉnh Bình Thuận xác định biến thể HBV tái tổ hợp tương tự B4/C, số có 13,6% đột biến vùng promotor G1613A 6,3% đột biến chèn đoạn ins1673-1697 vùng gen X [15] Hình Phân tích mẫu HBV DN010 thu thập từ Đà Nẵng phần mềm SimPlot Ghi chú: Kiểu gen hệ bố mẹ biểu thị kiểu gen B kiểu gen C1 Kiểu gen H HBV sử dụng nhóm ngồi Độ tin cậy Bootstrapping 1000 70 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ nhiệt đới, Số 27, 12 - 2022