1 CÂU HỎI ÔN TẬP CHUYÊN NGÀNH XÉT NGHIỆM TRONG XÉT TUYỂN VIÊN CHỨC NĂM 2022 1 Hình thái, kích thước khác thường Plasmocyte Nhân và nguyên sinh chất trưởng thành không đồng nhất; như nhân đã trưởng thà[.]
CÂU HỎI ÔN TẬP CHUYÊN NGÀNH XÉT NGHIỆM TRONG XÉT TUYỂN VIÊN CHỨC NĂM 2022 1.Hình thái, kích thước khác thường Plasmocyte Nhân nguyên sinh chất trưởng thành không đồng nhất; nhân trưởng thành mà nguyên sinh chất non, đơi có 2-3 nhân nhân chia múi bất thường gặp hệ liên vòng bị kích thích Trong bệnh u tủy người ta cịn thấy loại plasmocyte với nguyên chát màu đỏ rực lửa bốc cháy Vai trị kính hiển vi điện tử Kính hiển vi điện tử phương tiện tối tân để quan sát tế bào máu hay vi khuẩn, siêu vi, v.v có máy cắt vi thể, chất hóa học nhuộm tinh vi nên kính hiển vi điện tử quan sát chi tiết siêu cấu trúc vật thể nhỏ Nhờ kính hiển vi điện tử mà người ta quan sát biết tường tận màng tế bào máu, chất hạt hay quan nhỏ nguyên sinh chất hay nhân tế bào máu, giúp ích nhiều cho xác định đặc tính Nguyên lý hệ nhóm máu ABO Nhóm máu hệ ABO xác định nhờ có mặt kháng nguyên bề mặt hồng cầu kháng thể huyết Hai thành phần gặp xảy phản ứng ngưng kết đặc hiệu Tương tự vậy, kháng thể chống A chống B gặp hồng cầu mẫu A,B xảy phản ứng ngưng kết hồng cầu đặc hiệu Nhóm máu Kháng nguyên hồng cầu Kháng thể huyết A A Chống B B B Chống A AB Khơng có kháng thể chống A chống B Khơng có kháng ngun A B Có kháng thể chống A B AB O Dụng cụ để định nhóm máu hệ ABO - Máy ly tâm - Kính hiển vi - Pipette Pasteur - Phiến đá 12 x 12cm - Que thủy tinh - Tủ lạnh để sinh phẩm - Bình cách thủy 370C - Kéo - Panh có mấu, khơng mấu - Ống nghiệm tan máu - Lam kính - Quả bóp cao su - Cốc mô thủy tinh - Bông thấm nước - Tủ ấm 370C - Tủ sấy khô - Giấy thấm - Ba cốc thủy tinh 500ml - Bút viết kính Hóa Chất để định nhóm máu hệ ABO: - Huyết mẫu: kháng thể chống A, chống B, chống AB (Được sản xuất theo phương pháp kháng thể đơn dòng) - Hồng cầu mẫu A 10%, 5% - Hồng cầu mẫu B 10%, 5% - Nước muối 9o/oo - Nước cất Cách chuẩn bị mẫu máu để làm xét nghiệm nhóm máu hệ ABO - Một ống nghiệm lấy 5ml máu tĩnh mạch khơng có chống đơng, ống khác lấy 2ml có chống đơng ACD theo tỷ lệ 1/5 thể tích máu Ống máu dùng lấy hồng cầu - Ly tâm tách huyết ống máu không chống đông - Rửa hồng cầu bệnh nhân nước muối 9o/oo lần, pha thành dung dịch hồng cầu 5% nước muối 9o/oo Nguyên lý kỹ thuật đinh nhóm máu phương pháp Gelcard Trong cột gel có buồng phản ứng, có sẵn kháng huyết chuẩn để định nhóm, có viên bi thủy tinh làm màng ngăn đám ngưng kết Nếu có phản ứng kháng nguyên – kháng thể đặc hiệu xảy tạo thành đám ngưng kết hồng cầu tự khơng cịn để lọt qua kẽ viên bi thủy tinh xuống đáy cột gel (phản ứng dương tính), khơng có phản ứng kháng nguyên – kháng thể đặc hiệu xảy ra, hồng cầu lọt qua kẽ viên bi thủy tinh để xuống đáy cột gel (phản ứng âm tính) Biện pháp an tồn phịng thí nghiệm - Tất nhân viên phịng thí nghiệm phải mặc áo choàng - Phải rửa tay kỹ với xà phịng hay dung dịch sát khuẩn (khơng làm hại da) trước sau vận dụng lứa cấy hay mẫu thử - Phải cẩn thận bảo vệ mắt vùng da xước tránh nhiễm khuẩn - Phải lau mặt bàn phịng thí nghiệm, trước sau làm việc, với mẫu thử nhiễm khuẩn, dung dịch diệt khuẩn - Phải vận dụng mẫu thử thật cẩn thận để tránh nhiễm khuẩn - Ngay sau dùng, phải khử khuẩn tất vật dụng nhiễm khuẩn, nồi hấp hay cho vào dung dịch diệt khuẩn - Dùng lồng cấy khuẩn trường hợp vận dụng mẫu thử nhiễm khuẩn độc - Không hút thuốc hay ăn uống phịng thí nghiệm vi khuẫn - Nếu có điều kiện, nên dùng tia tử ngoại để khử khuẩn vùng khơng khí nơi làm việc, lồng cấy, vào ngồi làm việc (vì tia tử ngoại làm hại mắt da ) Khử khuẩn phương pháp Pasteur - Phương pháp dùng để khử khuẩn vài loại môi trường chứa trứng huyết không chịu nhiệt độ 1000C Thời gian khử khuẩn tùy thuộc vào nhiệt độ 620C/30’,720C/20’ 750C/10’ - Phương pháp Pasteur đủ để diệt vi khuẩn không bào tử, loại men nấm, bảo quản tiêu diệt vi khuẩn có bào tử, phải kiểm sốt lại trước dùng 10 Khi sử dụng nồi hấp, cần phải tuân theo quy luật - Không nên cho mơi trường đầy q 2/3 bình hay ống nghiệm - Không nên chất vật dụng khử khuẩn đầy buồng khử, túi khơng khí bị kẹt lại không cho phép đạt nhiệt độ mong muốn - Vài loại môi trường bị thủy phân nhiệt độ cao Vì phải tuyệt đối tuân theo dẫn ghi nhãn môi trường - Phải lấy tất môi trường khỏi nồi hấp sau khử khuẩn xong không hấp khử khuản lại 11 Các lạo hóa chất dung dịch diệt khuẩn thơng dụng Hóa chất sát khuẩn: - dung dịch phenol 5% - Dung dịch formaldehyde 4% (fomol 10%) - Dung dịch formaldehyde 4% (fomol 10%) Khi nồng độ hóa chất diệt khuẩn giảm đỗ chất lỏng nhiễm khuẩn vào phải cho thêm hóa chất điều chế dung dịch Dung dịch sát khuẩn: - cồn Iốt 2% dùng cho vết đứt nhỏ, dùng để sát khuẩn da kỹ thuật cấy máu - Ethanol 70% (cồn etylic 70 độ) dùng để sát khuẩn lấy mẫu thử cần đâm xuyên qua da 12 Nguyên tắc khử khuẩn phương pháp lọc Nguyên tắc phương pháp cho chất lỏng chảy qua màng lọc có lỗ nhỏ li ti, vật vơ tế bào vi khuẩn có tầm vóc lớn hơn, qua lỗ màng lọc giữ lại thế, hiệu phương pháp lọc tùy thuộc vào kích thước lỗ li ti màng lọc Tùy theo cấu tạo màng lọc, ta có nhiều loại lọc Lọc Chamberland: dùng bình trụ bột sứ làm bình bọc Lọc Pyrex: dùng màng thủytinh kết tinh Lọc Seitz: dùng màng lọc giấy đặc biệt Lọc Milipore: dùng màng lọc acetate celluose Lọc Seitz lọc Pyrex hai loại lọc thơng dụng phịng thí nghiệm vi khuẩn học 13 Những cơng việc để hủy diệt vi khuẩn - Các dụng cụ chứa vi khuẩn môi trường cấy khử khuẩn nồi hấp nhiệt độ 1210 C 30 phút, sau dụng cụ nhựa loại bỏ, dụng cụ thủy tinh trút bỏ chất bẩn rữa lại - Các phế vật nhiễm khuẩn xác súc vật thí nghiệm phế vật khác phải hủy diệt cách đốt thành than hỏa lị, Tuyệt đối khơng chơn vùi 14 Rửa dụng cụ để tiêu diệt vi khuẩn - Dụng cụ thủy tinh mới: chứa kiềm tự do, phải rửa kĩ nước nóng tráng nước cất trước dùng - Dụng cụ thủy tinh dùng Sau diệt vi khuẩn trúc bỏ chất bẩn, dụng cụ thủy tinh phải rửa nước cho sạch, xong ngâm vào nước xà phòng 24 giờ, vớt ra, rửa lại thật với nước bàn chải Nếu dụng cụ cịn đục hoặt đóng váng trắng ngâm vào dung dịch sulfocromic 24 Sau vớt rửa Kính đựng vật dùng, đun sôi nước Javel 30 phút, xong rửa thật với nước thường Ngâm phút với HCl 1%, tráng lại nhiều lần với nước thường Sau để khô phải ngâm cồn Etylic 950 C trước dùng 15 Nguyễn tắc dụng cụ để tìm trứng giun kim phương pháp GRAHAM(Phương pháp băng dính trong) a) Nguyên tắc Trứng giun kim thường tìm thấy nếp nhăn hậu mơn, tìm thấy phân Vì vậy, phết hậu mơn keo dính dùng để thu thập trứng giun kim Kỹ thuật phải thực buổi sáng sớm trước trẻ làm vệ sinh hậu môn b) Dụng cụ - Kính hiển vi - Lam kính - Ống nghiệm - Ống hút Pasteur - Băng keo - Cây đè lưỡi muỗng dài 10cm - Bơng - Găng tay 16 Quy trình kỹ thuật tìm trứng giun kim phương pháp GRAHAM (Phương pháp băng dính trong) -Dùng băng keo dán lên lam kính cho hai đầu lam kính phủ đoạn băng keo khoảng 1cm - Đặt miếng lam kính dán băng keo lên đè lưỡi cho cạnh nhỏ lam kính cách bờ đè lưỡi 1/3 chiều dài lam kính - Gỡ băng dính khỏi lam kính cuộn vịng qua đầu đè lưỡi, mặt dính để - Giữ chặt tất bàn tay phải - Tay trái vạch hậu môn trẻ, tay phải cầm đè lưỡi có dán băng keo ấn nhẹ, lật qua lật lại đè lưỡi chung quanh rìa hậu mơn - Dán miếng băng keo lên mặt lam kính, dùng bơng khơ chà nhẹ miết chặt miếng băng keo xuống mặt lam kính - Khảo sát tiêu kính hiển vi Chú ý: Phải ln mang găng tay suốt q trình thao tác, tránh bị nhiễm KST 17 Dụng cụ, hóa chất,quy trình kỹ thuật tìm trứng giun kim phương pháp GRAHAM biến đổi? a) Dụng cụ hóa chất - Kính hiển vi - Lam kính - Lá kính - Ống nghiệm - Ống hút Pasteur - Que tăm - Nước muối NaCl 0,85% - Găng tay b) Quy trình kỹ thuật - Dùng que tăm xoay chung quanh nếp nhăn hậu môn - Cho que tăm vào ống nghiệm có chứa 0,5ml NaCl 0,85%, rửa kỹ que tăm vào dung dịch nước muối - Dùng ống hút Pasteur hút nước muối lam kính, đậy kính khảo sát kính hiển vi Chú ý: Phải mang găng tay suốt trình thao tác, tránh bị nhiễm KST 18 Nơi cư trú tính gây bệnhcủa trực khuẩn Lao? Giống Mycobacterium có nước, đất, thực phẩm vài loại thú Có loại có khả gây bệnh cho người - - Mycobacterium tuberculosis: gây bệnh lao cho người - Mycobacterium bovis: gây bệnh cho bị truyền cho người Trực khuẩn xâm nhập thể đường hô hấp vết lao, gọi củ lao(Tubercles) khỏi tự nhiên tượng hóa sợi hay hóa vơi Đó lao sơ nhiễm Theo sau lao sơ nhiễm, trực khuẩn lao tạo nên tổn thương tiên phát hay thứ phát, chỗ hay lan tràn mô khác theo đường huyết bạch huyết Vi khuẩn gây bệnh lao mô thể, thường lao phổi Trực khuẩn lao dược phân lập từ đàm, chất ngoại tiết, nước dày, nước tiểu hay dịch não tủy 19 Đặc tính hình thể trực khuẩn Lao Trực khuẩn lao gọi trực khuẩn kháng acide khơng thể nhuộm phương pháp thông thường, cần phải kéo dài thời gian tiếp xúc với thuốc nhuộm, đun nóng hay cho thêm chất thấm ướt Sau nhuộm, chúng kháng lai tẩy màu dùng dịch acide cồn Trực khuẩn không di dộng, không bào tử Với phương pháp nhuộm Zeihl Neelsen (nhuộm kháng acide) trực khuẩn lao trực khuẩn màu đỏ bật xanh, từ trực cầu khuẩn (Coccobacilli) đến trực khuẩn dài, thon thẳng hay cong, có kích thước từ 0.8-5µm chiều dài, 0,2-0,6µm chiều ngang, đứng hay cụm nhỏ khơng đều; đơi có hạt mịn hay thơ thân trực khuẩn 20 Đặc tính lứa cấycủa trực khuẩn Lao Tuyệt đốì hiếu khí, tăng trưởng rấtt chậm mơi trường bổ Lowenstein jensen (2 - tuần 37oC) a Mycobacteriumn tuberculosis Khúm vi khuẩn tăng trưởng sung mãn khoảng 10 - 25 ngày Khó làm huyền dịch vi khuẩn chất sáp màng tế bào yếu tố kết thành dây (cord factor) Khúm nhám, mặt khô biên không đều, hình bơng cải có màu ngà b Mycobacterium bovis ... đạt nhiệt độ mong muốn - Vài loại môi trường bị thủy phân nhiệt độ cao Vì phải tuyệt đối tuân theo dẫn ghi nhãn môi trường - Phải lấy tất môi trường khỏi nồi hấp sau khử khuẩn xong không hấp... khuẩn lao trực khuẩn màu đỏ bật xanh, từ trực cầu khuẩn (Coccobacilli) đến trực khuẩn dài, thon thẳng hay cong, có kích thước từ 0.8-5µm chiều dài, 0,2-0,6µm chiều ngang, đứng hay cụm nhỏ khơng đều;... cụ thủy tinh dùng Sau diệt vi khuẩn trúc bỏ chất bẩn, dụng cụ thủy tinh phải rửa nước cho sạch, xong ngâm vào nước xà phòng 24 giờ, vớt ra, rửa lại thật với nước bàn chải Nếu dụng cụ cịn đục hoặt