(Luận văn tốt nghiệp) nghiên cứu khả năng tái sinh cây hoàn chỉnh từ đoạn thân trầu tiên yên tử (asarum glabrum merr ) có nguy cơ tuyệt chủng ngoài tự nhiên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ ANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TÁI SINH CÂY HOÀN CHỈNH TỪ ĐOẠN THÂN TRẦU TIÊN YÊN TỬ (Asarum glabrum Merr.) CĨ NGUY CƠ TUYỆT CHỦNG NGỒI TỰ NHIÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Ngành : Cơng nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2017 - 2021 Thái Nguyên - năm 2021 Luan van ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ ANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TÁI SINH CÂY HOÀN CHỈNH TỪ ĐOẠN THÂN TRẦU TIÊN YÊN TỬ (Asarum glabrum Merr.) CĨ NGUY CƠ TUYỆT CHỦNG NGỒI TỰ NHIÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Ngành : Cơng nghệ sinh học Lớp : K49 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2017 - 2021 Họ tên người hướng dẫn : ThS Nguyễn Thị Tình Thái Nguyên - năm 2021 Luan van i LỜI CẢM ƠN Trang đầu tiên của khoá luận này em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm cùng các thầy cô giáo Khoa đã tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới giáo ThS Ngũn Thị Tình, giảng viên khoa Cơng nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm đã tận tình chỉ bảo, giúp đỡ và hướng dẫn em thời gian thực hiện đề tài Em xin cảm ơn thầy cô giáo anh chị kỹ thuật viên tại phịng thí nghiệm ni cấy mơ tế bào thực vật, Khoa CNSH & CNTP đã tạo điều kiện giúp đỡ em q trình làm khóa ḷn tốt nghiệp Em xin cảm ơn gia đình bạn bè bên cạnh ủng hộ, khuyến khích, động viên tạo động lực để em hồn thành khóa ḷn Trong q trình làm khóa ḷn khơng tránh khỏi sai sót, em mong nhận được sự đóng góp quý báu từ phía thầy bạn bè để em làm tốt Lời cuối em xin kính chúc các thầy, cô giáo nhà trường, khoa Công nghệ Sinh học và Công nghệ thực phẩm, cùng các bạn đồng nghiệp sức khoẻ, thành công sống Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, 01 ngày 06 tháng năm 2021 Sinh viên thực Phạm Thị Anh Luan van ii DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT B5 : Gamborg cs, 1976 BA : 6-Benzyl amino purine CS : Cộng sự CT : Công thức CV : Coeficient of Variation – Hệ số biến động Đ/C : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indole-3-butyric acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Singnificant DifferenceTest MS : Murashighe Skoog, 1962 MT : Môi trường NAA : α-Napthalene acetic acid THT : Than hoạt tính TN : Thí nghiệm WPM : Woody Plant Medium – Lioyd Mc Cown, 1980 NĐ – CP : Nghị Định - Chính Phủ VU : Sẽ nguy cấp – Vulnerable EU : nguy cấp - Endangered Luan van iii DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 16 Bảng 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ, thời gian của chất khử trùng của HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng loài Trầu tiên Yên Tử (sau ngày) .19 Bảng 4.1.Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ, thời gian khử trùng của HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) .26 Bảng 4.2 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của số môi trường đến khả tái sinh chồi loài Trầu tiên Yên Tử (sau 30 ngày nuôi cấy) 27 Bảng 4.3 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả tái sinh chồi loài Trầu tiên Yên Tử (sau 20 ngày nuôi cấy) 29 Bảng 4.4 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chời lồi Trầu tiên n Tử (sau 20 ngày nuôi cấy) .31 Bảng 4.5 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh chời lồi Trầu tiên Yên Tử 33 (sau 20 ngày nuôi cấy) 33 Bảng 4.6 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ NAA đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử (sau 30 ngày nuôi cấy) 35 Bảng 4.7 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử (sau 40 ngày nuôi cấy) 37 Luan van iv DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Hình ảnh về hoa Trầu tiên Yên Tử (Asarum glabrum Merr.) tại nhà lưới khoa CNSH&CNTP Hình 4.1: Một số hình ảnh mẫu cấy trước tạo vật liệu vơ trùng 27 Hình 4.2 Hình ảnh ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng đến khả tái sinh chời lồi Trầu tiên n Tử (sau 30 ngày nuôi cấy) 28 Hình 4.3 Hình ảnh ảnh hưởng của nờng độ BA đến khả nhân nhanh chời lồi Trầu tiên Yên Tử (sau 20 ngày nuôi cấy) 30 Hình 4.4 Hình ảnh nghiên cứu ảnh hưởng của BA tốt kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chời lồi Trầu tiên Yên Tử (sau 20 ngày nuôi cấy) .32 Hình 4.5 Hình ảnh ảnh hưởng của BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử (sau 20 ngày nuôi cấy) 34 Hình 4.6 Hình ảnh ảnh hưởng của NAA đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử (sau 30 ngày nuôi cấy) 36 Hình 4.7 Hình ảnh ảnh hưởng của NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử (sau 40 ngày nuôi cấy) 38 Luan van v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT ii DANH MỤC BẢNG iii DANH MỤC HÌNH iv MỤC LỤC v Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu của đề tài .2 1.2.1 Mục tiêu tổng quát 1.2.2 Mục tiêu cụ thể 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.3.1 Ý nghĩa khoa học của đề tài 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn của đề tài .3 Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 2.1 Cây Trầu tiên 2.1.1 Chi Asarum L 1753 2.1.2 Đặc điểm nhận dạng 2.1.3 Sinh học sinh thái 2.1.4 Phân bố: .5 2.1.5 Giá trị: .5 2.1.6 Phân hạng: 2.1.7 Biện pháp bảo vệ: 2.2 Cơ sở khoa học của nuôi cấy mô tế bào 2.2.1 Tính toàn của tế bào thực vật 2.2.2 Sự phân hoá tế bào 2.2.3 Sự phản phân hoá tế bào 2.3 Một số ́u tố ảnh hưởng đến q trình ni cấy mô tế bào thực vật Luan van vi 2.3.1 Vật liệu nuôi cấy .7 2.3.2 Điều kiện và môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.4 Tình hình nghiên cứu về ni cấy mơ lồi Trầu tiên thế giới nước 13 2.4.1 Tình hình nghiên cứu về ni cấy mơ lồi Trầu tiên thế giới 13 2.4.2 Tình hình nghiên cứu về ni cấy mơ lồi Trầu tiên nước 14 Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Vật liệu, hoá chất và thiết bị nghiên cứu 16 3.1.1 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu 16 3.1.2 Hoá chất sử dụng .16 3.1.3 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 16 3.2 Phạm vi, địa điểm và thời gian nghiên cứu 17 3.2.1 Phạm vi nghiên cứu 17 3.2.2 Địa điểm nghiên cứu .17 3.2.3 Thời gian nghiên cứu 17 3.3 Nội dung nghiên cứu 17 3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của chất khử trùng đến khả tạo vật liệu vô trùng đoạn thân Trầu tiên Yên Tử 17 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu thành phần môi trường dinh dưỡng đến khả tái sinh chồi Trầu tiên Yên Tử 17 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của số chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi Trầu tiên Yên Tử 17 3.3.4 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử 17 3.4 Phương pháp nghiên cứu 18 3.4.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy in vitro 18 3.4.2 Phương pháp nghiên cứu 18 3.4.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 18 3.5 Các phương pháp xử lý số liệu 23 3.5.1 Thu thập số liệu .23 Luan van vii 3.5.2 Các chỉ tiêu theo dõi 23 3.5.3 Phương pháp xử lý số liệu .24 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 4.1 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ, thời gian chất khử trùng đến khả tạo vật liệu vô trùng đoạn thân Trầu tiên Yên Tử .25 4.2 Kết quả nghiên cứu thành phần môi trường dinh dưỡng khoáng đến khả tái sinh chồi Trầu tiên Yên Tử 27 4.3 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của số chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi Trầu tiên Yên Tử 28 4.3.1 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BA đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử 29 4.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử 31 4.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng của BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử 32 4.4 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của NAA than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử 34 4.4.1 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh của Trầu tiên Yên Tử 34 4.4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của NAA kết hợp với than hoạt tính (THT) đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử 36 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .39 5.1 Kết luận 39 5.2 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC Luan van Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Việt Nam nước có ng̀n tài ngun thực vật hết sức đa dạng phong phú, được đánh giá 16 trung tâm đa dạng sinh học bậc thế giới Nguồn tài nguyên đã góp phần tích cực việc phát triển kinh tế chăm sóc sức khỏe cho người dân Đặc biệt người điều kiện kinh tế gặp nhiều khó khăn, tiếp xúc với thuốc tây y Tuy nhiên điều kiện kinh tế khó khăn, nhận thức của nhân dân chưa đầy đủ, khâu quản lý yếu việc quản lý nguồn tài nguyên thuốc nên dẫn tới việc khai thác ồ ạt, thiếu sự kiểm sốt đã làm cho ng̀n tài ngun bị suy giảm nhanh chóng, số lồi thuốc q có nguy biến hồn tồn Vậy để khai thác hợp lý bền vững thách thức không nhỏ Trầu tiên (Asarum glabrum Merr.) gọi Hoa tiên, Dầu tiên, Đại hoa tế tân hay Trà tiên thảo dược quý, loài thân thảo, cao 20-30 cm, sống lâu năm, thuộc chi Hoa tiên (Asarum), họ Mộc hương nam (Aristolochiaceae) Cây đặc biệt ưa ẩm, ưa bóng, thường mọc đất nhiều mùn dọc theo hành lang khe suối, dưới tán rừng kín thường xanh ẩm ở độ cao 1.000-1.600 m Trong tự nhiên, loài phân bố ở số nơi thuộc vùng núi phía Bắc Lai Châu, Lào Cai, Quảng Ninh… Sinh trưởng điều kiện khắc nghiệt, trầu Yên Tử có tác dụng kỳ diệu trị cảm, nhức đầu, sát khuẩn nên được mệnh danh Trầu tiên Trầu tiên phát triển nhiều vào mùa hè, có tinh dầu tốt được thu hoạch nhiều vào 2-3 tháng mùa đông Trong y học cổ truyền, người ta thường sử dụng thân rễ của Trầu tiên làm thuốc chữa bệnh ho, viêm phế quản, hen suyễn, phong hàn, tê thấp; hoa vị thuốc bổ dùng để ngâm rượu uống Nghiên cứu của Trần Huy Thái cộng sự (2010) cho thấy, thân thân rễ khơ Trầu tiên có chứa 0,36% tinh dầu, tỷ lệ thay đổi theo mùa nơi thu hái Hoạt chất chủ yếu tinh dầu Trầu tiên safrol (42,24%), apiole (27,11%) myristicin (6,13%) [11] Luan van 41 11 Trần Huy Thái, Nguyễn Thị Hiền, Đỗ Thị Minh, Nguyễn Anh Tuấn (2010), “Thành phần hóa học của tinh dầu hoa tiên (Asarum Glabrum Merr.) ở Hà Giang”, Việt Nam, Tạp chí Sinh học, 32(1), Tr 94-96 12 Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo trình Công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 13 Trần Minh Hợi, 2004, “Thành phần hoá học của tinh dầu thổ tế tân (Asarum caudigerum Hance) ở Hương Sơn (Hà Tĩnh)”, Tạp chí Sinh học, 26(4): 59-60 TIẾNG ANH 14 Chang-Tse LU and Jenn-Che WANG, 2009, Three new species of Asarum (section Heterotropa) from Taiwan, Taiwania, 50: 229-240 15 Zhang S X., Tani T., Yamaji, Ma C M., Wang M C., Zhao Y Y., 2003 Glycosyl flavonoid from the roots and rhiromes of Asarum longerhizomatosum J Asian Nat Prod Res., 5(1): 25-30 Peking University, Beijing 100083, China 16 Tsukasa Iwashina, Junichi Kitajima (2000), Chacone and flavon glucosides from Asarum canadense, Tsukuba botanical garden, National science museum, Japan Luan van PHỤ LỤC 1: MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY Bảng 1: Thành phần môi trường MS (Murashige & Skoog) Stock Bottle Component Solution (g/l) I II III IV V Amount to take preparation (ml) Final concentratic (mg/l) NH4NO3 82,5 KNO3 95 MgSO4.7H2O 37 MnSO4.4H2O 2,23 ZnSO4.7H2O 1,058 CuSO4.5H2O 0,0025 0,025 CaCl2.2H2O 44 440,0 KI 0,083 CoCl2.6H2O 0,0025 0,025 KH2PO4 17 170,0 H3BO4 0,62 Na2MoO4.2H2O 0,025 FeSO4.7H2O 2,784 Na2EDTA.2H2O 3,724 20 1.650,0 1.900,0 370,0 10 10 10 22,3 10,6 0,83 6,2 0,25 10 27,85 37,25 mg/100ml Vitamin Nicotinic acid 100 0,5 0,5 Glycine 100 2,0 2,0 Thiamine acid 100 0,1 0,1 Pyridocine HCl 100 0,5 0,5 Sucrose 30.0000,0 Agar 5.500,0 pH 5,6 - 5,8 Luan van Bảng 2: Thành phần môi trường B5 (Gamborg cs, 1976) Đa lượng Vi lượng Các chất hữu Muối khống Nờng dộ (mg/l) (NH4)2SO4 134 CaCl2.2H2O 150 MgSO4.7H2O 246 KNO3 2.258 MnSO4.2H2O 10 KI 0.75 Na2MoO4.2H2O 0.25 Na2H2PO4.2H2O 150 ZnSO4.7H2O 2.0 Na2EDTA.2H2O 37.2 H3BO3 CoCl2.6H2O 0.025 CuSO4.5H2O 0.025 FeSO4.7H2O 27.8 Myo- inositol 100 Nicotinic acid Pyrodoxine HCl Thiamine 10 Đường 30 Luan van Bảng 3: Thành phần môi trường WPM (Woody Plant Medium Lloyd McCown, 1980) Vi lượng Đa lượng Các chất hữu Muối khống Nờng độ (mg/l) CuSO4.5H2O 0.25 Na2EDTA.2H2O 37.2 H3BO3 6.20 MnSO4.H2O 22.30 FeSO4.7H2O 27.8 ZnSO4.7H2O 8.6 CaCl2.2H2O 96 Ca(NO3)2.4H2O 556 KH2PO4 170 K2SO4 990 MgSO4.7H2O 370 NH4NO3 400 NaMoO4.2H2O 0.25 Myo – inositol 100 Pyridoxine HCl 0.5 Glycine 2.0 Nicotinic acid 0.5 Thiamine HCl 1.0 Agar Đường 30 Luan van PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng nờng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE C1 8/ 6/** 21:22 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 12202.3 1355.81 350.67 0.000 R 11.8371 5.91853 1.53 0.242 18 69.5937 3.86632 * RESIDUAL * TOTAL (CORRECTED) 29 12283.8 423.578 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMSN FILE C1 8/ 6/** 21:22 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng VARIATE V004 TLMSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 24429.0 2714.33 835.68 0.000 R 15.5511 7.77556 2.39 0.118 18 58.4652 3.24806 * RESIDUAL * TOTAL (CORRECTED) 29 24503.0 844.932 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE C1 8/ 6/** 21:22 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng Luan van VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 8845.91 982.879 171.86 0.000 R 15.5378 7.76890 1.36 0.282 18 102.945 5.71915 * RESIDUAL * TOTAL (CORRECTED) 29 8964.40 309.117 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE C1 8/ 6/** 21:22 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng MEANS FOR EFFECT T T NOS TLMS TLMSN TLMC 0.000000 100.000 0.000000 11.1100 85.5567 3.33000 3 32.2200 62.2200 5.55667 38.8900 42.2200 18.8900 36.6667 48.8900 14.4433 48.8900 30.0000 21.1100 55.5567 23.3300 21.1100 58.8900 27.7800 13.3300 68.8900 22.2200 11.1100 10 31.1100 4.44333 64.4433 SE(N= 3) 1.13524 1.04052 1.38072 5%LSD 18DF 3.37297 3.09155 4.10232 MEANS FOR EFFECT R R NOS TLMS TLMSN TLMC 10 37.3340 45.0000 17.6650 10 38.6670 45.3320 16.3330 10 38.6660 43.6660 17.9990 Luan van SE(N= 10) 5%LSD 18DF 0.621797 0.569918 0.756251 1.84745 1.69331 2.24693 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE C1 8/ 6/** 21:22 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 30) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |T % |R | | | | | | | | | TLMS 30 38.222 20.581 1.9663 5.1 0.0000 0.2425 TLMSN 30 44.666 29.068 1.8022 4.0 0.0000 0.1181 TLMC 30 17.332 17.582 2.3915 13.8 0.0000 0.2821 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chời lồi Trầu tiên n Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE A22 8/ 6/** 19:53 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi loài Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 2822.22 1411.11 380.62 0.000 R 51.9038 25.9519 7.00 0.051 * RESIDUAL 14.8296 3.70739 * TOTAL (CORRECTED) 2888.96 361.119 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE A22 8/ 6/** 19:53 PAGE Luan van Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi loài Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T T NOS TLTS 66.6667 46.6667 3 23.3333 SE(N= 3) 1.11166 5%LSD 4DF 4.35749 MEANS FOR EFFECT R R NOS TLTS 43.3300 44.4467 3 48.8900 SE(N= 3) 1.11166 5%LSD 4DF 4.35749 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE A22 8/ 6/** 19:53 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi loài Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTS GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 9) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 19.003 1.9255 45.556 Luan van C OF V |T % |R | | | | | | | | | 4.2 0.0003 0.0508 Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE C2 8/ 6/** 21:43 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 4.982627 245657 R 2.253333E-03.126666E-03 * RESIDUAL 8.321324E-02.401656E-03 611.61 0.000 0.32 0.741 * TOTAL (CORRECTED) 14.986093 704352E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE C2 8/ 6/** 21:43 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T T NOS HSNC 0.210000 0.680000 3 0.980000 0.810000 0.656667 SE(N= 3) 0.115709E-01 5%LSD 8DF 0.377315E-01 MEANS FOR EFFECT R - Luan van R NOS HSNC 0.662000 0.668000 0.672000 SE(N= 5) 0.896276E-02 5%LSD 8DF 0.292267E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE C2 8/ 6/** 21:43 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 15 0.66733 0.26540 C OF V |T % 0.20041E-01 |R | | | | | | | | | 3.0 0.0000 0.7409 Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE A4 8/ 6/** 20: PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 4.197333 493333E-01 40.66 0.000 R 2.196000E-02.980000E-03 0.81 0.482 * RESIDUAL 8.970666E-02.121333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14.209000 149286E-01 - Luan van TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE A4 8/ 6/** 20: PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T T NOS HSNC 0.966667 1.10000 3 1.23333 1.16667 0.933333 SE(N= 3) 0.201108E-01 5%LSD 8DF 0.655793E-01 MEANS FOR EFFECT R R NOS HSNC 1.06400 1.08600 1.09000 SE(N= 5) 0.155778E-01 5%LSD 8DF 0.507975E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE A4 8/ 6/** 20: PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi loài Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 15 1.0800 0.12218 C OF V |T % 0.34833E-01 Luan van |R | | | | | | | | | 3.2 0.0001 0.4821 Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE TN66 16/ 6/21 10:10 :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.827027 206757 614.12 0.000 R 2.124000E-02.620000E-03 1.84 0.219 * RESIDUAL 8.269337E-02.336672E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14.830960 593543E-01 -TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN66 16/ 6/21 10:10 :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 HSNC 1.02000 1.35667 1.74333 1.48000 1.32000 SE(N= 3) 0.105936E-01 5%LSD 8DF 0.345446E-01 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 HSNC 1.39400 1.37200 1.38600 SE(N= 5) 0.820575E-02 5%LSD 8DF 0.267581E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN66 16/ 6/21 10:10 :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng BA, Kinetin tốt kết hợp với GA3 đến khả nhân nhanh loài Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.3840 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.24363 0.18349E-01 1.3 0.0000 Luan van |R | | | 0.2193 | | | | Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLCRR FILE C6 8/ 6/** 21:54 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 TLCRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= T 3484.64 871.160 223.82 0.000 R 5.91409 2.95704 0.76 0.502 * RESIDUAL 31.1379 3.89224 * TOTAL (CORRECTED) 14 3521.69 251.549 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE C6 8/ 6/** 21:54 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T T NOS TLCRR 14.4433 41.1100 3 58.8900 45.5567 27.7800 SE(N= 3) 1.13904 5%LSD 8DF 3.71430 MEANS FOR EFFECT R R NOS TLCRR Luan van 38.0000 36.6680 38.0000 SE(N= 5) 5%LSD 8DF 0.882297 2.87708 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE C6 8/ 6/** 21:54 PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLCRR GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 15.860 1.9729 15 37.556 C OF V |T % |R | | | | | | | | | 5.3 0.0000 0.5019 Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính (THT) đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMRR FILE TN9 16/ 6/21 11: :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính (THT) đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử VARIATE V003 TLMRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 614.785 153.696 21.85 0.000 R 10.3896 5.19481 0.74 0.511 * RESIDUAL 56.2771 7.03463 * TOTAL (CORRECTED) 14 681.452 48.6751 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN9 16/ 6/21 11: :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính (THT) đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử MEANS FOR EFFECT T - Luan van T NOS 3 3 TLMRR 57.7800 62.2200 76.6667 67.7800 63.3333 SE(N= 3) 1.53130 5%LSD 8DF 4.99341 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMRR 64.6660 65.3340 66.6680 SE(N= 5) 1.18614 5%LSD 8DF 3.86788 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN9 16/ 6/21 11: :PAGE Nghiên cứu ảnh hưởng NAA kết hợp với than hoạt tính (THT) đến khả rễ loài Trầu tiên Yên Tử F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 65.556 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.9768 2.6523 4.0 0.0003 Luan van |R | | | 0.5110 | | | | ... THÁI NGUY? ?N TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM THỊ ANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TÁI SINH CÂY HOÀN CHỈNH TỪ ĐOẠN THÂN TRẦU TIÊN YÊN TỬ (Asarum glabrum Merr. ) CĨ NGUY CƠ TUYỆT CHỦNG NGỒI TỰ NHIÊN... trên, chúng đã tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu khả tái sinh hoàn chỉnh từ đoạn thân Trầu tiên Yên Tử (Asarum glabrum Merr. ) có nguy tuyệt chủng ngồi tự nhiên? ?? 1.2 Mục tiêu đề tài 1.2.1 Mục... chung lồi Trầu tiên (Asarum glabrum Merr. ) chủ ́u cơng trình nghiên cứu phân loại Merril (194 2) hay cơng trình nghiên cứu về hóa sinh như: Tsukasa Iwashina, Junichi Kitajima (200 0) [16]; Zhang