(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước

(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước(Đồ án tốt nghiệp) Khảo sát thành phần hóa học cây an xoa (Helicteres Hirsuta Lour) thu hái tại tỉnh Bình Phước

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY AN XOA (HELICTERES HIRSUTA LOUR) THU HÁI TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC MÃ SỐ KHĨA LUẬN: HC.19.18 SVTH: LÊ ĐĂNG KHOA MSSV: 15128031 GVHD: TS HOÀNG MINH HẢO Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY AN XOA (HELICTERES HIRSUTA LOUR) THU HÁI TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC MÃ SỐ KHÓA LUẬN: HC.19.18 SVTH: LÊ ĐĂNG KHOA MSSV: 15128031 GVHD: TS HỒNG MINH HẢO Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 TÓM TẮT ĐỀ TÀI Hiện nay, phƣơng thuốc bắt nguồn từ thiên nhiên ngày đƣợc quan tâm, đặc biệt phƣơng thuốc chữa bệnh nan y Ung thƣ số bệnh nan y chƣa có thuốc đặc trị, việc tìm phƣơng thuốc nguồn gốc thiên nhiên có khả ức chế tế bào ung thƣ việc có ý nghĩa y học Từ xƣa, lồi thuộc chi Helicteres đƣợc ngƣời xƣa dùng để chữa bệnh, gần An Xoa (Helicteres hirsuta Lour) đƣợc nhiều ngƣời truyền tai khả chữa bệnh ung thƣ gan, số nghiên cứu cao chiết từ lồi Helicteres hirsuta L có hoạt tính ức chế dòng tế bào Hep-G2, nhiên An Xoa Xã Bù Nho, Huyện Phƣớc Long, Tỉnh Bình Phƣớc chƣa đƣợc nghiên cứu Mục tiêu luận án: chiết tách, điều chế loại cao, cô lập xác định số hợp chất hữu từ loài Helicteres hirsutar L, cụ thể mẫu An Xoa đƣợc tách làm hai phần: thân lá, nguyên liệu đƣợc xử lý thành dạng bột khô, bột khô đƣợc ngâm dung mơi ethanol 96° nhiệt dộ phịng, cô quay thu đƣợc cao ethanol, phân loại cao ethanol đơn dung môi, phân đoạn cao đƣợc tinh chế số kỹ thuật nhƣ sắc ký cột, kết tinh, thu đƣợc hợp chất HC-A, HC-B, HC-C, HC-D Độ tinh khiết cấu trúc hợp chất cô lập đƣợc xác định kỹ thuật: sắc ký lớp mỏng, đo nhiệt độ nóng chảy phƣơng pháp phổ nghiệm nhƣ: phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR), phổ khối (MS) i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận, ngồi cố gắng, kiên trì thân tơi cịn nhận đƣợc giúp đỡ từ nhiều cá nhân tập thể Đầu tiên, tơi xin chân thành cảm ơn TS Hồng Minh Hảo - Giảng viên Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học - Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm trƣờng Đại học Sƣ phạm Kỹ thuật Tp Hồ Chí Minh, thầy kim nam cho đƣờng nghiên cứu hợp chất tự nhiên ngƣời thầy tận tâm hỗ trợ giúp đỡ suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn đến giảng viên Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học - Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm trƣờng Đại học Sƣ phạm Kỹ thuật Tp Hồ Chí Minh ln giúp đỡ, đƣa góp ý giúp tơi hồn thiện khóa luận Tôi xin cảm ơn cô Nguyễn Thị Mỹ Lệ - Chun viên phịng thí nghiệm Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học giúp đỡ phƣơng diện thiết bị, dụng cụ, số hóa chất suốt q trình làm thực nghiệm phịng thí nghiệm Hóa Hữu Cơ Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn với gia đình, cha mẹ, bạn bè ln động viên tinh thần, giúp đỡ tài để tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 Tác giả Lê Đăng Khoa ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi, số liệu, kết đạt đƣợc hoàn toàn trung thực có sở rõ ràng, số liệu chƣa đƣợc công bố nghiên cứu khác Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 Tác giả Lê Đăng Khoa iii MỤC LỤC TÓM TẮT ĐỀ TÀI i LỜI CẢM ƠN ii LỜI CAM ĐOAN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CÁC BẢNG .vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT viii MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.1 Giới thiệu chi Helicteres .2 1.1.2 Loài Helicteres hirsuta L 1.1.3 Ứng dụng chữa bệnh loài thuộc chi Helicteres 1.2 Những nghiên cứu loài thuộc chi Helicteres .4 1.2.1 Thành phần hóa học lồi Helicteres angustifolia L 1.2.2 Thành phần hóa học lồi Helicteres isora L 1.3 Những nghiên cứu hoạt tính sinh học lồi thuộc chi Helicteres 1.3.1 Hoạt tính sinh học loài Helicteres angustifolia L 1.3.2 Hoạt tính sinh học lồi Helicteres isora L 1.4 Tình hình nghiên cứu loài Helicteres hirsuta L 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc .10 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Hóa chất thiết bị 17 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 18 2.2.1 Phƣơng pháp trích ly 18 2.2.2 Phƣơng pháp thử nghiệm độ tinh khiết 18 2.2.3 Phƣơng pháp cô lập hợp chất 18 iv 2.2.4 Phƣơng pháp nhận danh giải đoán cấu trúc 19 2.3 Xử lý nguyên liệu 19 2.4 Điều chế cao tổng 19 2.5 Điều chế cao phân đoạn từ cao ethanol 19 2.6 Khảo sát phân đoạn 20 2.6.1 Khảo sát phân đoạn cao HTC 20 2.6.2 Khảo sát phân đoạn cao HTE 22 2.6.3 Khảo sát phân đoạn cao HLH 23 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất HC-A 24 3.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất HC-B 26 3.3 Khảo sát cấu trúc hợp chất HC-C 29 3.4 Khảo sát cấu trúc hợp chất HC-D 31 KẾT LUẬN KIẾN NGHỊ 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC 38 v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Hoạt tính gây độc tế bào hợp chất Bảng 1.2 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào dịng Hep-G2 .9 Bảng 1.3 Tóm tắt kết cô lập hợp chất từ An Xoa thu hái Hịn Sơn .9 Bảng 1.4 Hoạt tính gây độc tế bào chất tinh khiết đƣợc cô lập từ Helicteres hirsuta L 10 Bảng 2.1 Kết phân loại cao từ cao tổng 20 Bảng 2.2 Thực nghiệm sắc ký cột cao HTC 20 Bảng 2.3 Thực nghiệm sắc ký cột phân đoạn HC2 21 Bảng 2.4 Thực nghiệm sắc ký cột phân đoạn HC5 22 Bảng 2.5 Thực nghiệm sắc ký cột cao HLH 23 Bảng 3.1 So sánh tín hiệu stigmasterol & β-sitosterol HC-A (CDCl3) 25 Bảng 3.2 So sánh tín hiệu 3β-hydroxyolean-12-en-28-oic acid HC-B (CDCl3) 28 Bảng 3.3 So sánh tín hiệu β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranose HC-C (DMSO) 30 Bảng 3.4 So sánh tín hiệu adian-5-en-3β-ol HC-D (CDCl3) 33 vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây An Xoa Hình 1.2 Cấu trúc số hợp chất steroid cô lập từ chi Helicteres 11 Hình 1.3 Một số triterpenoid cô lập từ chi Helicteres 12 Hình 1.4 Một số ketone lập từ Helicteres 13 Hình 1.5 Cấu trúc hợp chất lignan phenyl pronanoid lập từ chi Helicteres .14 Hình 1.6 Cấu trúc số hợp chất flavonoid cô lập từ chi Helicteres 15 Hình 1.7 Cấu trúc hợp chất khác cô lập từ chi Helicteres .16 Hình 3.1 Stigmast-5,22-dien-3β-ol stigmast-5-en-3β-ol (HC-A) .25 Hình 3.2 3β-Hydroxyolean-12-en-28-oic acid (HC-B) 27 Hình 3.3 β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranose (HC-C) .30 Hình 3.4 Adian-5-en-3β-ol (HC-D) 32 vii DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT HEX, CH, EA, n - hexane, chloroform, ethyl acetate, methanol, MeOH, AC, EtOH, acetone, ethanol, dimethyl sulfoxide DMSO ABTS•+ 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) BHA Butylated hydroxy anisole NMR Nuclear Magnetic Resonance - Cộng hƣởng từ hạt nhân MS-CI Mass Spectrocopy-Chemical Ionization Khối phổ Kỹ thuật ion hóa hóa học HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation - Tƣơng quan dị nhân qua liên kết HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation - Tƣơng quan dị nhân qua nhiều liên kết J (Hz), δ (ppm) Hằng số ghép (đơn vị Herzt), độ dịch chuyển hóa học (phần triệu) br, s, d, t, dd, m Broad (mũi giãn rộng), singlet (mũi đơn), doublet (mũi đôi), triplet (mũi ba), doublet of doublet (mũi đôi đôi), multiplet (mũi đa) TLC, Rf Thin Layer Chromatography - Sắc ký lớp mỏng, Retention factor Lu1 Human lung cancer viii PHỤ LỤC Phụ lục Phổ 1H-NMR HC-A 38 Phụ lục Phổ 13C-NMR HC-A 39 Phụ lục Phổ 1H-NMR HC-B 40 Phụ lục Phổ 13C-NMR HC-B 41 Phụ lục Phổ MS HC-B 42 Phụ lục Phổ 1H-NMR HC-C 43 Phụ lục Phổ 13C-NMR HC-C 44 Phụ lục Phổ MS HC-C 45 Phụ lục Phổ 1H-NMR HC-D 46 Phụ lục 10 Phổ 13C-NMR HC-D 47 Phụ lục 11 Phổ DEPT HC-D 48 Phụ lục 12 Phổ MS HC-D 49 Phụ lục 13 Phổ HSQC HC-D 50 Phụ lục 14 Phổ HMBC HC-D 51 S K L 0 ... TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KỸ THU? ??T TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY AN XOA (HELICTERES HIRSUTA LOUR) THU HÁI TẠI TỈNH BÌNH PHƢỚC MÃ SỐ... tài: ? ?Khảo sát thành phần hóa học An Xoa (Helicteres hirsuta Lour.) thu hái tỉnh Bình Phƣớc” Mục tiêu luận văn: Nghiên cứu chiết tách số hợp chất từ phân đoạn cao thân An Xoa (Helicteres hirsuta. .. trung vào nghiên cứu thành phần hóa học An xoa đƣợc thu hái Xã Bù Nho, Huyện Phƣớc Long, Tỉnh Bình Phƣớc Để góp phần tìm hiểu nhận danh số hợp chất có thành phần An Xoa Helicteres hirsuta Lour tiến