Bé Y TÕ 1 PHÇN I §Æt vÊn ®Ò Vµng ®¾ng lµ mét c©y thuèc quý hiÕm, mäc hoang chñ yÕu ë c¸c níc vïng nhiÖt ®íi,ë níc ta c©y mäc phæ biÕn ë miÒn §«ng nam bé, Nam trung bé, T©y nguyªn Ngoµi ra cßn thÊy mäc[.]
PHầN I Đặt vấn đề Vàng đắng thc q hiÕm, mäc hoang chđ u ë c¸c níc vùng nhiệt đới,ở nớc ta mọc phổ biến miền Đông nam bộ, Nam trung bộ, Tây nguyên Ngoài thấy mọc nhiều Trung Hạ Lào, Campuchia Vàng đắng thu hái hầu nh quanh năm, thu hoạch thái mỏng, phơi hay sấy khô không chế biến khác Ngời ta đà tìm thấy rễ thân vàng đắng giàu Berberin Berberin hoạt chất nhiều nh : Hoàng liên gai (Berberis sp.), Hoàng liên ô-rô (Mahonia sp.), nhiều thuộc chi Coptis, Hoàng bá (Phellodendron amurense) Trong thân rễ vàng đắng hàm lợng Berberin cao, nớc ta nguồn nguyên liệu quý để chiết xuất Berberin Trong nhân dân, ngời ta dùng vàng đắng chữa lị, đau mắt,viêm ruột Trong y học dùng Berberin làm thuốc chữa lị, đau mắt, viêm ruột, dùng làm thuốc chữa ung th [7] Ngoài ra, ngời ta dùng làm thuốc cầm máu phụ khoa sau sinh nở, chữa viêm túi mật, đặc biệt tác dụng tốt với bệnh sỏi mËt [20] Trong kü nghƯ ngêi ta cßn dïng Berberin để tạo chất màu làm thuốc nhuộm, làm chất tạo màu gia vị đồ uống có cồn [18] lĩnh vực khác Đà có nhiều tài liệu nghiên cứu phơng pháp chiết xuất Berberin từ vàng đắng nh phơng pháp chiết Phạm Viết Trang [11], phơng pháp chiết Berberin áp lực nóng Nguyễn Liêm [8] có nhiều quy trình khác Nhng quy trình chiết số nhợc điểm nh : kéo dài thời gian, tốn nhiều dung môi, hoá chất Với mong muốn đóng góp phần nhỏ việc cung cấp thông số phơng pháp chiết xuất Berberin nói chung chiết từ vàng đắng nói riêng Do đà thực đề tài : Góp phần nghiên cứu phơng pháp chiết xuất Berberin từ vàng đắng Coscinium usitatum Pierre Với nội dung đề tài nhằm giải vấn đề sau : -Khảo sát số điều kiện chiết xuất Berberin đạt suất, chất lợng cao -Dự kiến quy trình chiết xuất Berberin điều kiện Việt Nam.Trên sở kết hoàn thiện quy trình chiết xuất Berberin để đa vào sản xuất PHầN II Tổng quan tài liệu nguồn nguyên liệu chiết xuất berberin Berberin alcaloid đợc phát khoảng 150 loài thuộc nhiều họ thực vật khác nhau: Họ Mao lơng (Ranunculaceae), họ Hoàng liên (Berberidaceae), họ TiÕt dª (Menispermaceae), hä Cam (Rutaceae) Theo Muraviova, Berberin thờng có thuộc chi Berberis : - Berberis aristata DC - B buxifolia Lam - B canadonsis Mill - B glauca H.B.K - B licium Roile - B noranensis Schult - B sinosis Desf - B amurensis Rupr Có hàm lợng Berberin 0.15% - 3% , vỏ rễ đến 1% [21] Karbovic Bespalova Berberis cho r»ng berberin cã vulgaris L vµ B.amurensis Rupr với hàm lợng alcaloid không dới 0.6% [20] Còn theo Orekhop Berberis heteropoda có chứa alcaloid có berberin [23] Trong Từ điển thuốc Võ Văn Chi đà cho biết thân rễ Hoàng liên gai (Berberis wallichiana D C ) có chứa berberin [2] Bên cạnh thuộc chi Berberis cho berberin có khác cho berberin nh thuộc chi Coptis: - Coptis teeta Wall - C chinensis Franch - C teetoides C.Y Cheng - C deltoidea C.Y Cheng et Hsiao [1] víi hàm lợng không 4% [3] Ngoài berberin có thuộc chi Mahonia với hàm lợng cao : - M annamica Gagnep [19] - M nepalensis D.C.[2] - M bealei Carr [2] Ngoài Berberin đợc tìm thấy vỏ nh: Hoàng bá (Phellondendron amurense Rupr P chinense Schneider.), với tỷ lệ 1,6% [2], Thổ hoàng liên ( Thalictrum foliosolum D.C.) có chừng 0,35% [1], Vàng đắng (Coscinium fenestratum Colebr.) với hàm lợng không 1,5% [3] Tuy nhiên ngời ta thờng dùng vàng đắng để đa vào sản xuất Berberin, hàm lợng Berberin thân rễ cao, nguồn nguyên liƯu nhiỊu, dƠ thu h¸i, cã ë nhiỊu vïng Việt Nam, biên giới Việt Lào, Campuchia Do ngời ta coi vàng đắng nguồn nguyên liệu số mét ®Ĩ chiÕt xt Berberin Chi Coscinium: Chi Coscinium chi nhỏ họ Tiết dê ( Menispermaceae) phân bố chủ yếu vùng núi miền Đông Nam Bộ, Nam Trung Bộ, Tây Nguyên, thấy mọc hoang nhiều trung hạ Lào, Campuchia Theo Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt Nam đà mô tả loài Coscinium là:[4] - C fenestratum Colebr - C.blumeanum Miers - C colaniae Gagn ph©n bè ë vùng Tây nguyên, Lục tỉnh Theo Bài Giảng Dợc liệu tập II đà mô tả loài: - C fenestratum Colebr - C usitatum Pierre ph©n bè vïng nói miỊn Đông Nam Bộ, Tây Nguyên Cây Vàng Đắng: 3.1 Những nghiên cứu thực vật: Theo Trần Công Khánh đà mô tả: vàng đắng hay gọi vang đằng, vàng giang, tơ-rơn.[6] Cây vàng đắng loại dây leo, thân gỗ to, sống lâu năm dài tới 10 m nữa, đờng kính thân từ 5-10cm Thân cành hình trụ, mặt màu vàng xám, có nếp nhăn mờ hay nhẵn Cành nhỏ đầu có lông màu nâu, sau lông, đổi thành trắng, mang vết sẹo cuống hình đĩa Mặt cắt thân cành có màu vàng tơi; mặt cắt rễ có màu vàng sẫm, nhìn rõ dÃy mạch gỗ toả tròn nh hình nan hoa bánh xe, chất nớc chảy từ mặt cắt có màu vàng Lá đơn nguyên , mọc so le, phiến mỏng dài, thờng hình trứng rộng hình trứng dài11-33cm, rộng 8-23cm, gốc phiến tròn, thẳng hay hình tim nông, thuôn nhọn, mặt lông, khô thờng nhẵn, gân gân lõm xuống; mặt dới có lông trắng, nhìn rõ 5-7 gân xoè nh hình chân vịt 1-2 đôi gân mép cùng, nh hệ gân hình mạng lới nhỏ Cuống mảnh, dài 3-16 cm, đầu có lông nâu, thờng phồng đầu, đầu đính cách mép phiến từ 0,20,8 cm, đầu dới cong gập lại nh đầu gối Cụm hoa: hoa đính đầu hình cầu; đờng kính 6-7mm có cuống nhỏ dài 10-30mm, đợc xếp chùm dài 5-11cm nách hay đoạn thân già không mang lá; cụm hoa đứng đơn độc hay tụ họp vài một, trục nhánh cụm hoa mảnh, có lông tơ màu nâu, bắc dạng dùi, dài 4-5mm Hoa đực gần nh không cuống, bao hoa có 6-9 phận hình bầu dục gần nhau, mặt có lông, mặt nhẵn; 3-6 phận phía dài 1,5-2mm, phận nhỏ dài1-1,5mm, đính thấp Bộ nhị có nhị xếp thành vòng; vòng gồm nhị rời, dài 1mm, nhị vòng dính liỊn ë phÝa díi Hoa c¸i cã bao hoa giống nh hoa đực, nhị lép hình chuỳ dài 1mm, nhụy gồm noÃn dài 2mm, có lông dày, vòi hình sợi, uốn cong Chùm dài 10-15cm, mang 20-30 hạch hình cầu, đờng kính 2,5-3cm, mặt có lông màu nâu đến vàng cam, thịt màu vàng, vị đắng; vỏ tạo thành hạch cứng, dày tới 3mm Năm 1999, Đỗ Tất Lợi [10] đà mô tả vàng đắng khác với Trần Công Khánh: Là leo to, có phân nhánh, mọc bò mặt đất leo lên gỗ cao Thân non màu trắng bạc, thân già màu ngà, xù xì, có vết tích rụng Cắt ngang thân có hình bánh xe, có vòng lõi tuỷ xốp Lá mặt xanh, mặt dới màu trắng nhạt, có gân ( gân rõ) Hoa màu trắng phớt tím, mọc thành xim kẽ Rễ hình trụ, đầu thuôn hình nón, mặt màu trắng nhạt, mặt màu vàng Theo Võ Văn Chi mô tả [2]: Vàng đắng loại dây leo to, th©n réng 5-7cm cã thĨ tíi 15-20cm ë gốc già; gỗ màu vàng, vỏ thân nứt nẻ màu xám trắng; nhánh, mặt dới lá, cụm hoa có lông màu trắng bạc Lá mọc so le, phiến to đến 25cm, gân gốc 5; màu trắng mốc mặt dới; cuống phình cong góc, dính vào phiến Hoa nhỏ mọc thành chụm tán thân già, hoa đực có nhị, hoa có nhị lép, noÃn có lông Quả hạch tròn, đờng kính cỡ 2,5cm Riêng Phạm Hoàng Hộ [4] lại mô tả vàng đắng với loài khác nhau: - Coscinium fenestratum Colebr ( Dây vàng đắng) Dây leo to, thân rộng 5-7cm, gỗ vàng; nhánh, mặt dới lá, phát hoa trái có lông the quắn, trắng, phiến to đến 25cm, có gân xuất phát từ đáy, trắng mốc mặt dới, cuống phù cong đáy Chụm mang tán thân già; hoa đực có tiểu nhuỵ, hoa có tiểu nhuỵ lép, tâm bì có lông cho trái tròn, to 2,5cm - C blumeanum Miers ( Vàng đắng Blume) Dây leo, thân to Lá có phiến xoan hay xoan tròn dài, to 12-35cm, rộng 620cm, không lông Lúc nhỏ nh mặt bọt, mặt dới mốc trắng, có lông dày, gân đáy 7, gân phụ 2-5 cặp, Cuống dài 620cm, gắn cách bìa 1,5-2cm Hoa đầu to 10-13cm; hoa đực có 3-6 đài, tiểu nhuỵ Hoa có dài, tâm bì Quả nhẵn cứng xoan, có lông, to 2,5cm - C colaniae Gagn 3.2 Những nghiên cứu thành phần hoá học: *.Theo nghiên cứu nớc ngoài: Trong rễ vàng đắng C.fenestratum Colebr có số alcaloid thứ yếu nh Berlambine, noroxyhydrastinine vµ dihydroberlambine [14] Ngoµi rƠ C fenestratum Colebr có alcaloid mới, là: 12, 13-dihydro-8-oxo-berberin (I), cịng cã t¸c dơng tèt nh berberin O O N H O OMe OMe (I) Bªn cạnh có oxyberberin, tetrahydroberberin ( canadin), sitosterol, stigmasterol [15] Các tác giả khác cho rằng: Berberin đợc tổng hợp thân rễ vàng đắng C.fenestratum Colebr [16] * Theo nghiên cứu nớc: Trong thân rễ vàng đắng có chứa Berberin với tỉ lệ từ 1,5-3% Ngoài có palmatin, jatrorrhizin [1] Theo Đỗ Tất Lợi[10]: Trong vàng đắng có nhiều alcaloid dẫn xuất isoquinolein, chủ u lµ Berberin, tû lƯ Berberin chiÕm tõ 1,5-2%, cã đến 3% Võ Văn Chi[2] lại cho rằng: thành phần hoá học chủ yếu vàng đắng Berberin, saponin; thân chứa Berberin có tỷ lệ tới 3,5% Ngoài có Ceryl alcohol, hentriacontane, sitosterol, acid palmitic acid oleic, glycosid sitosterol, saponin vµ vµi chÊt nhùa ë nớc ta thân rễ vàng đắng có alcaloid berberin víi tØ lƯ 1,5-3% Ngun liªm [9] đà xác định thành phần hoá học vàng đắng Berberin chiếm 82% so với alcaloid toàn phần, phần lại palmatin, jatrorrhizin Ngoài ra, luận án tiến sĩ [9], Nguyễn Liêm đà khảo sát kỹ vàng đắng hàm lợng alcaloid protoberberin phận khác Kết thân già có 2-3%, cành nhỏ 1-1,5%, 0,10,7%, vỏ thân 5%, phần thân gỗ 0,85% Điều kiện bảo quản có ảnh hởng lớn đến chất lợng nguyên liệu Độ ẩm cao làm giảm nhanh hàm lợng alcaloid hết giảm từ 3% xuống 0,13% 3.3 Những nghiên cứu ứng dụng vàng đắng y học: * Theo Đỗ Tất Lợi (1999) [10]: -Nhân dân thờng dùng thân rễ làm thuốc hạ nhiệt, chữa sốt rét, chữa lỵ, ỉa chảy, đau mắt Dùng dạng thuốc bột hay thuốc viên, ngày uống 4-6(g) -Dùng làm nguyên liệu để chiết xuất Berberin Berberin hydroclorid dùng để chữa lỵ, ỉa chảy, đau mắt Ngày uống 0,02-0,20 g dới dạng thuốc viên Ngời ta dùng để chữa bệnh gan, mật, vàng da, ăn uống khó tiêu; pha dung dịch 0,5-1% dùng để nhỏ mắt, chữa mắt đau, hay để rửa mắt * Theo Võ Văn Chi [2]: Vàng đắng nguồn nguyên liệu chiết xuất Berberin Thờng dùng chữa ỉa chảy, lỵ trực khuẩn, viêm ruột, vàng da, sốt, sốt rét, tiêu hoá Ngày dùng 6-10g dạng thuốc sắc, ... thực đề tài : Góp phần nghiên cứu phơng pháp chiết xuất Berberin từ vàng đắng Coscinium usitatum Pierre Với nội dung đề tài nhằm giải vấn đề sau : -Khảo sát số điều kiện chiết xuất Berberin đạt... - Chiết phơng pháp chiết nguội 1.2.3 Phơng pháp chiết xuất Berberin vàng đắng: - Khảo sát nồng độ muối NaCl: tìm nồng độ NaCl suất chiết xuất tối u - Tìm nồng độ H2SO4 cho hiệu suất chiết xuất. .. quy trình chiết xuất Berberin điều kiện Việt Nam.Trên sở kết hoàn thiện quy trình chiết xuất Berberin để đa vào sản xuất PHầN II Tổng quan tài liệu nguồn nguyên liệu chiết xuất berberin Berberin