Luận án nghiên cứu sự biến đổi hpv dna và tế bào học cổ tử cung ở phụ nữ 18 – 69 tuổi nhiễm hpv tại thành phố cần thơ

1 MỞ ĐẦU Ung thư cổ tử cung loại ung thư có tỷ lệ mắc cao, bệnh đứng hàng thứ ba ung thư phụ nữ nguyên nhân tử vong đứng hàng thứ hai phụ nữ tuổi từ 15 - 44 tuổi [49] Trên giới, tỷ lệ mắc ung thư cổ tử cung khoảng 500.000 người năm, ước tính năm 2020 có khoảng 604.127 trường hợp mắc ung thư cổ tử cung 341.831 trường hợp tử vong bệnh [25], [49], [76] Tỷ lệ tử vong ung thư cổ tử cung phụ nữ giới 51,8%; Mỹ, năm 2019 tần suất mắc ung thư cổ tử cung 6,7/100.000 dân tỷ lệ tử vong 31,6% [38], ước tính số ca mắc ung thư cổ tử cung nước khoảng 13.170 số tử vong khoảng 4.250 [123] Ở nước Châu Phi Châu Á, tỷ lệ mắc ung thư cổ tử cung 23 30/100.000 dân tỷ lệ tử vong 52% [38] Riêng Việt Nam, theo báo cáo trung tâm thông tin ung thư (2019) năm 2018 có khoảng 4.177 phụ nữ mắc ung thư cổ tử cung số tử vong 2.420 phụ nữ, ước tính ngày có khoảng phụ nữ tử vong ung thư cổ tử cung [48] Human papillomavirus (HPV) loại virus gây u nhú da người Dựa vào nguy gây bệnh cho người, type virus chia thành ba nhóm nhóm nguy gây bệnh thấp, nhóm nguy cao nhóm chưa xác định nguy Người nhiễm type HPV thuộc nhóm nguy thấp thường tự giới hạn không dẫn đến ung thư [30], phụ nữ nhiễm type HPV thuộc nhóm nguy cao (như type 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 55, 56, 58, 59, 66 68) thường có liên quan đến phát triển ung thư cổ tử cung [96] Các y văn cho thấy toàn giới khoảng 99% bệnh nhân ung thư cổ tử cung, có dương tính với loại HPV nguy cao [4], [75], [85] Tỷ lệ nhiễm HPV ngày tăng bệnh nhân ung thư biểu mô cổ tử cung, đặc biệt ung thư biểu mô tuyến thời gian gần [20], [40] Ở phụ nữ, hầu hết tình trạng viêm nhiễm HPV tự biến mà khơng có biểu lâm sàng, trường hợp viêm nhiễm với type HPV nguy cao kéo dài, dẫn đến tổn thương tế bào biểu mô cổ tử cung, lúc đầu mức độ thấp, sau tiến triển đến bất thường tiền ung thư cổ tử cung Sự tiến triển thường chậm, kéo dài từ vài năm đến vài chục năm tình trạng thường gặp phụ nữ có độ tuổi từ 40 đến 50 tuổi [117] Một số xét nghiệm với kỹ thuật đơn giản phết tế bào cổ tử cung (PAP: Papanicolaou) thử nghiệm quan sát cổ tử cung sau bôi acid acetic (VIA: Visual Inspection with acetic acid) đưa vào sử dụng tầm soát tổn thương tế bào biểu mô cổ tử cung Tuy nhiên, tỷ lệ phát tổn thương tế bào biểu mô cổ tử cung kỹ thuật thường thấp không đồng Trần Ngọc Dung (2016) thực nghiên cứu mơ tả cắt ngang tình hình nhiễm HPV yếu tố liên quan phụ nữ thành phố Cần Thơ ghi nhận, tỷ lệ nhiễm HPV phụ nữ thấp (6,64%) Các type HPV nhiễm chủ yếu là: HPV 52 (29%), HPV 16 (16%); tỷ lệ phụ nữ có xét nghiệm PAP bất thường 0,47%; tỷ lệ VIA bất thường 8,93% [13] Ngoài ra, nghiên cứu ghi nhận thời điểm nghiên cứu, mối liên quan nhiễm HPV tổn thương tế bào biểu mô cổ tử cung chưa rõ ràng Vấn đề đặt phụ nữ nhiễm HPV có thay đổi HPV-DNA tế bào biểu mô cổ tử cung theo thời gian chúng có liên quan việc gây biến chuyển ác tính tế bào biểu mô cổ tử cung? Đồng thời, mối liên hệ nhân kết HPV-DNA bệnh ung thư cổ tử cung phụ nữ thành phố Cần Thơ chưa quan tâm nghiên cứu Xuất phát từ sở đó, chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu biến đổi HPV-DNA tế bào học cổ tử cung phụ nữ 18 - 69 tuổi nhiễm HPV thành phố Cần Thơ” Đây nghiên cứu đoàn hệ, dựa vào kết nghiên cứu cắt ngang trước đó, với hai mục tiêu sau: Xác định tỷ lệ biến đổi HPV-DNA, type nhiễm HPV, biến đổi tế bào học cổ tử cung mối liên quan biến đổi HPV với biến đổi tế bào học cổ tử cung phụ nữ 18 - 69 tuổi nhiễm HPV thành phố Cần Thơ từ năm 2013 đến năm 2020 Xác định số yếu tố nguy biến đổi HPV-DNA biến đổi tế bào học cổ tử cung phụ nữ 18 - 69 tuổi nhiễm HPV thành phố Cần Thơ từ năm 2013 đến năm 2020 Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Human papillomavirus 1.1.1 Đặc điểm vi sinh Human papillomavirus (HPV) loại virus có cấu trúc DNA thuộc họ Papovaviridae, thuộc nhánh Papillomavirus [32] Papillomavirus chia làm 16 nhóm chính: Alpha, Beta, Gamma, Delta, Epsilon, Zeta, Eta, Theta, Iota, Kappa, Lambda, Mu, Nu, Xi, Omikron, Pi Trong đó, nhóm Alpha chứa khoảng 70 type, nguyên nhân gây nên ung thư cổ tử cung người Trong đó, hai type bật HPV 16 HPV 18, nhóm cịn lại chủ yếu gây nhiễm da niêm mạc Khoảng 30 type gây nhiễm trùng hệ thống sinh dục, tùy vào khả gây ung thư chúng, mà phân nhóm nguy thấp hay nguy cao [66] Hans-Ulrich Bernard (2010) dựa vào khuếch đại gen phụ papillomavirus xếp nhiều chuỗi nucleotide L1 mơ tả 19 nhóm papillomavirus với 189 type papillomavirus, có 120 type phân lập từ người, 64 type phân lập từ động vật có vú, type phân lập từ chim type phân lập từ lồi bị sát Ngồi ra, tác giả mô tả thêm mở rộng phân loại họ Papillomaviridae, với 29 chi hình thành từ 189 type papillomavirus ông đề nghị bổ sung tiếp đầu ngữ “dyo” vào tên nhóm papillomavirus theo bảng chữ Hylap như: dyodelta Như vậy, có khoảng 200 type papillomavirus tìm thấy [73] 1.1.2 Cấu trúc gen chức gen HPV Bộ gen HPV gồm sợi DNA đối xứng, xoắn ốc, khơng có vỏ bao bọc, cuộn lại vỏ protein gồm 72 đơn vị capsomer Mỗi đơn vị pentamer protein cấu trúc L1 (trọng lượng phân tử 54 - 58 kDa) kết hợp với protein cấu trúc L2 (trọng lượng phân tử 68 - 76 kDa) Bộ gen HPV có từ 7800 - 8000 cặp base, chứa khoảng gen sớm (từ E1 - E7) gen muộn (L1, L2) gen cấu trúc, định cho phiên mã dịch mã trình nhân lên virus Các gen nằm sợi DNA bổ sung, có chuỗi gen DNA chuỗi kép, sử dụng làm khuôn mẫu để phiên mã chuỗi mã hóa chứa ba vùng gen, gồm khoảng mười khung đọc mở (ORF) Nhiều protein virus biểu thị từ mRNA [7], [84], [96] Hình 1.1 Cấu trúc phân tử HPV “Nguồn: Ethel - Michele de Villiers, 2004” [66] Khác với loại virus khác, HPV phát triển thực nghiệm khơng có xét nghiệm huyết phát chúng, nên nhận diện định type HPV vào có mặt acid nucleic virus mẫu bệnh phẩm [32], [84] Cấu trúc phân tử HPV phân làm vùng gen sớm E (early region), mã hóa protein trước nhân đơi DNA, vùng gen muộn L (late region) mã hóa vỏ bọc virus vùng khơng mã hóa hay vùng điều hòa ngược (URR: upstreeam regulatory region) Vùng gen sớm vùng gen muộn có cấu trúc đọc mở (ORF) cho việc dịch protein chức [84] Vùng gen sớm (E) chứa tối đa bảy ORF, mã hóa protein điều hòa virus vùng gen muộn (L) mã hóa hai protein capsid virus Mỗi ORF khu vực đầu định E, theo sau chữ số, biểu thị độ dài ORF Vùng thứ ba gen gọi vùng điều khiển dài (LCR), vùng điều hòa ngược dòng (URR) vùng khơng mã hóa (NCR) Vùng gen chứa nguồn gốc chép DNA, trình tự kiểm sốt phiên mã virus [84], [96] - Vùng gen sớm (E1, E2, E4, E5, E6, E7) biểu sớm đời sống virus, có đặc điểm có tính đặc hiệu mơ cao, quan trọng gen E6, E7 có vai trị việc gây ung thư tế bào ký chủ + Gen E1: hai vùng ổn định gen HPV Chức E1 mã hóa cho protein gắn đặc hiệu vào DNA E1 có hoạt động tháo xoắn khơng phụ thuộc ATP, cần thiết cho chép virus + Gen E2: gen mã hóa chủ yếu cho yếu tố phiên mã tế bào Ngoài ra, E2 tương tác với E1, giúp E1 dễ dàng gắn vào điểm khởi động chép bắt đầu chép tăng cường Các thí nghiệm cho thấy nồng độ thấp, E2 tăng cường phiên mã, nồng độ cao, lại ức chế phiên mã Sự chèn DNA virus vào gen vật chủ thường làm gián đoạn gen E2, ảnh hưởng tới khả ức chế biểu protein E6, E7 + Gen E4: gen mã hóa cho protein E4, có vai trị giúp trưởng thành phóng thích HPV khỏi tế bào mà khơng làm ly giải tế bào chủ + Gen E5: gen mã hóa cho protein E5, để xâm nhập tồn tế bào chủ, HPV cần đến sản phẩm protein E5 gen sản xuất, protein E5 tác động giai đoạn đầu xâm nhiễm, chúng tạo phức hợp với thụ thể yếu tố tăng trưởng biệt hóa, từ đó, kích thích phát triển tế bào Mặt khác, protein E5 cịn có vai trị quan trọng việc ngăn chặn chết theo chương trình tế bào, có sai hỏng DNA virus gây + Gen E6: gen mã hóa cho protein E6 Protein E6 gồm 151 acid amin, hình thành cấu trúc Cys-X-X-Cys gắn với phân tử điều hòa, có vai trị quan trọng vai trị gây biến chuyển ác tính tế bào nhiễm HPV, nhiễm type virus HPV xếp vào nhóm nguy cao gây ung thư Chức chủ yếu chức nguy hiểm tế bào vật chủ, số khả sau [84]: Liên kết không liên kết với protein E7, điều có khả kích thích tế bào vật chủ phân bào mạnh mẽ phân chia mãi, tức tế bào vật chủ trở thành tế bào Gắn kết với protein p53, protein ức chế sinh u tế bào vật chủ, làm tăng phân giải p53 hệ thống enzyme tế bào làm giảm khả ức chế sinh khối u protein Liên kết với gen trình hóa Thực nghiệm chuột cho thấy liên kết với gen kích thích phát triển tế bào NIH 3T3 Tế bào trở nên bất tử, đồng thời, kích thích hoạt động chất hoạt hóa E2 Adenovirus + Gen E7: gen mã hóa cho protein E7, gồm 98 acid amin hình thành nên cấu trúc gắn kẽm Gen E7 có vai trị khơng phần quan trọng việc gây ung thư tế bào vật chủ, kích thước gen nhỏ gen E6 Gen E7 tương đồng cấu trúc gắn kèm với E6, cấu trúc Cys-X-X-Cys, góp phần liên kết chặt chẽ với E6 hơn, hỗ trợ tác động lên tế bào vật chủ Nếu gen E6 có chức cản trở trình tự sửa sai tế bào vật chủ, thơng qua liên kết với p53, gen E7 thực vai trị thơng qua liên kết với pRb, protein ức chế sinh khối u, liên kết có lực cao gấp 10 lần type HPV thuộc nhóm nguy cao (so với nhóm nguy thấp) Điều làm giải phóng số lượng lớn yếu tố phiên mã E2F tự do, kích thích q trình phiên mã, kéo dài đời sống tế bào [84] - Vùng gen muộn L, gồm protein L1 protein phụ L2, mã hóa protein vỏ bọc chủ yếu thứ yếu virus Sự biểu gen vùng muộn vùng sớm tìm thấy tế bào keratin trưởng thành lớp biểu mô lát Gen L1 L2 vùng gen cấu trúc Vùng L1 mã hóa cho protein L1, thành phần chủ yếu cấu tạo nên nang Virus Protein L1 có trọng lượng phân tử 56 - 60 kDa, phosphoryl hóa yếu khơng gắn với DNA Protein L2 có trọng lượng phân tử 60 - 69 kDa, phosphoryl hóa cao có khả gắn DNA [84] 1.1.3 Quá trình lây nhiễm Human papillomavirus 1.1.3.1 Nguồn lây HPV gây nhiễm trùng đặc hiệu biểu mô vùng da niêm mạc thể, bao gồm phận sinh dục nam nữ, đường hơ hấp trên, đường tiêu hóa vị trí da Mỗi type HPV có khả gây bệnh khác HPV thường tìm thấy mặt lưng ngón bàn tay lịng bàn chân, HPV 16 lại đặc biệt gây nhiễm trùng niêm mạc CTC [35] Hiện nay, HPV nhà khoa học đặc biệt quan tâm tính chất gây bệnh nghiêm trọng Các nghiên cứu dịch tễ học, huyết học, mô bệnh học đặc biệt sinh học phân tử, khẳng định HPV virus gây ung thư người Đến nay, nghiên cứu dịch tễ học có quy mơ lớn cho thấy 100% type HPV thuộc nhóm nguy cao có liên quan với ung thư cổ tử cung (UTCTC) Ngược lại, type HPV thuộc nhóm nguy thấp tìm thấy phụ nữ bệnh UTCTC [72] 1.1.3.2 Đường lây truyền HPV Đường lây truyền chủ yếu HPV qua đường tình dục người phụ nữ tuổi trẻ [75], [86] Mặt khác, HPV lây truyền qua đường quan hệ tình dục người nam đồng tính, lưỡng tính dị tính [93] Do đó, HPV thường tìm thấy đường sinh dục nam nữ, có khơng có biểu tổn thương lâm sàng [50] Ngồi ra, HPV cịn có khả lây truyền cho thai phụ bị nhiễm HPV sinh qua ngã âm đạo Có 32% trẻ sinh từ mẹ bị nhiễm HPV, có diện HPV khoang miệng trẻ [124] HPV đề kháng với nhiệt bị làm khơ Do đó, ngồi lây truyền qua đường tình dục, HPV dễ lây nhiễm qua cách khác tiếp xúc mật thiết da với da, dùng chung quần áo lót người bị lây nhiễm HPV nhiều ngày trước [136] 1.1.4 Phân loại genotype Human papillomavirus 1.1.4.1 Phân loại genotype theo khả tác động HPV tế bào đích Nhiễm trùng papillomavirus người (HPV) phổ biến DNA virus tìm thấy từ mẫu da, niêm mạc miệng phận sinh dục người [107] Trong 200 types khác virus xác định người, có 45 types khác phát đường sinh dục nữ Dựa mối liên quan tần suất type HPV lây nhiễm xuất ung thư CTC phụ nữ lâm sàng, HPV phân làm nhóm type: nguy thấp, nguy cao chưa xác định nguy [9], [29], cụ thể: - Type HPV nhóm nguy thấp: gồm type 6, 11, 13, 34, 40, 42, 43, 44, 57, 61, 71, 81 Những chủng gây tổn thương mụn cóc phận sinh dục ngồi, khối u lành tính sang thương u nhú đường hơ hấp, mụn cóc bàn tay, gan bàn chân số bệnh lý khác [44] - Type HPV nhóm nguy cao: gồm type 16, 18, 31, 33, 34, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 70 Những chủng có khả tích hợp DNA chúng vào DNA tế bào lây nhiễm người, gây rối loạn phát triển tế bào hình thành khối u ác tính Các type HPV nhóm nguy cao có tỷ lệ gây ung thư cổ tử cung cao phụ nữ, đáng lưu ý type HPV 16, 18, 31, 33, 35, 45 58 [44] Mặc dù có khác biệt tần suất nhiễm type HPV vùng địa lý khác nhau, nhiễm type HPV 16, 18 thường gây ung thư CTC phụ nữ hầu hết nơi giới [60], [68] - Type HPV chưa xác định nguy cơ: gồm đa số type HPV 2a, 3, 7, 10, 13, 27, 28, 29, 30, 32, 34, 55, 57, 62, 67, 69, 71, 74, 77, 83, 84, 85, 86, 87, 90, 91 Chưa minh chứng xác định khả gây ung thư type HPV [84] 1.1.4.2 Phân loại genotype HPV theo vị trí gây bệnh Theo vị trí gây bệnh, HPV chia thành nhóm [50] - Nhóm HPV thích ứng với biểu mơ sừng: HPV nhóm có khả xâm nhiễm biểu mơ da, hình thành u nhú dạng hạt cơm thông thường (các type HPV 2, 4, 26, 27, 29, 57), dạng hạt cơm phẳng (type HPV 1, 2, 4), dạng hạt cơm Butcher (type HPV 7) Tổn thương thường xuất vùng da mặt, cổ, tay chân Đặc biệt, số type HPV nhóm cịn có khả gây loạn sản lớp thượng bì dạng hạt cơm Epidermodysplasia verruciformis (các type HPV 2, 3, 5, 8, 9, 10, 12, 14, 15, 17, 19, 20, 25, 36, 37, 46, 47, 50), dạng bệnh lý có khả dẫn đến ung thư da thường xuất bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch - Nhóm HPV thích ứng với tế bào niêm mạc, khơng phải niêm mạc đường sinh dục: gồm type HPV có khả gây bệnh niêm mạc miệng hầu họng (type HPV 6, 11, 13, 32), gây đa bướu biểu mô gai đường hô hấp tái diễn Một số type HPV nguyên nhân gây khối u lành tính (khối u sùi) gây khối u ác tính (ung thư) vùng hậu môn, phổi (các type HPV 6, 11, 16, 18, 33, 52) - Nhóm HPV thích ứng với tế bào niêm mạc đường sinh dục: nhóm HPV gây bệnh lành tính đường sinh dục sùi mào gà (gồm type HPV 6, 11, 42, 43, 44, 54); gây bệnh ác tính ung thư cổ tử cung, ung thư dương vật, ung thư âm hộ, ung thư âm đạo (gồm type HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82 1.1.5 Kỹ thuật xét nghiệm phát HPV-DNA định type HPV Có nhiều kỹ thuật xét nghiệm phát HPV-DNA định type HPV như: Real-time PCR, kỹ thuật định type phần, xét nghiệm RNA thông tin HPV, xét nghiệm protein E6 HPV, protein p16INK4a, … [9], [18] Trong phạm vi đề cập đến xét nghiệm phát HPV-DNA định type HPV kỹ thuật Real-time PCR 1.1.5.1 Nguyên lý kỹ thuật Kỹ thuật Real-time PCR cho phép khuếch đại định lượng số nhân chu kỳ nhiệt Kết khuếch đại DNA đích hiển thị sau chu kỳ nhiệt, dựa tín hiệu huỳnh quang phát tương ứng với số lượng HPV-DNA tổng hợp [118] 1.1.5.2 Qui trình kỹ thuật Kỹ thuật tiến hành dựa quy trình tách chiết DNA từ mẫu dịch phết cổ tử cung khuếch đại DNA kỹ thuật Realtime-PCR: Sau tách chiết HPV-DNA xong, tiến hành phản ứng khuếch đại HPV-DNA với thành phần PCR hỗn hợp phản ứng chứa cặp mồi đặc hiệu HPV gồm nhóm A7, A9 (kiểu HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 58, 59), HPV nhóm 10 A5 (kiểu HPV 51), HPV nhóm A6 (kiểu HPV 56) gen beta-globin (Internal control) đối chứng nội để kiểm soát chất lượng phản ứng PCR Bộ sinh phẩm sử dụng Tapman probe chất phát huỳnh đặc hiệu cho trình tự gen HPV với bốn kênh màu (FAM-chứng nội tại, HEX-HPV nhóm A9, ROX-HPV nhóm A7, CY5-nhóm A5-A6) (Qui trình kỹ thuật hãng Sacace) Mẫu xử lý sau thu mẫu bảo quản - 80C không 24 trữ -200C Mẫu phân tích sở: kit dựa quy trình chính: tách chiết DNA từ mẫu khuếch đại multiplex real time tubes cho mẫu Mỗi type chứa primer kiểu gen HPV gen beta-globin [18] 1.1.5.3 Diễn giải kết Xét nghiệm thực bệnh phẩm lấy từ dịch phết âm đạo - cổ tử cung nhằm dùng để phát nhóm HPV nguy thấp nguy cao gây bệnh niêm mạc đường sinh dục, gồm 14 type HPV nguy cao với UTCTC với kênh kết xét nghiệm: Kênh 1: 12 type nguy cao: 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 68 Kênh 2: phát HPV 16 Kênh 3: phát HPV 18 Kênh 4: chứng nội beta-globin [10], [18] 1.1.5.4 Tính giá trị kỹ thuật xét nghiệm HPV-DNA sàng lọc UTCTC Xét nghiệm HPV có độ nhạy cao giá trị tiên đốn âm cao Nếu xét nghiệm HPV âm tính gần khơng có nguy hình thành CIN III vịng năm sau Điều cho phép giãn thời gian sàng lọc giảm số lần sàng lọc ung thư cổ tử cung đời người phụ nữ [10] Ước tính độ nhạy độ đặc hiệu để phát CIN II+ xét nghiệm HPV 90,5% 93,0% giá trị tiên đoán âm 99,8% [111] Mojgan (2017) ghi nhận giá trị xét nghiệm HPV khác nhóm tuổi Độ nhạy, độ đặc hiệu, giá trị tiên đoán dương, giá trị tiên đoán âm xét nghiệm HPV CIN II+ nhóm phụ nữ < 35 tuổi là: 84,2%; 95,8%, 84,2%; Mã số: III KẾT QUẢ PAP Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Tính chất bệnh phẩm: - Mẫu bệnh phẩm đạt yêu cầu - Mẫu bệnh phẩm không đạt yêu cầu Kết Tế bào biểu mơ bình thường Tế bào biểu mơ biến đổi lành tính: a Do viêm b Trichomonas c Candida spp d Actinomyces spp Tế bào bất thường * Bất thường tế bào biểu mô gai Tế bào biểu mơ gai khơng điển hình ý nghĩa chưa xác định (ASC-US) Tế bào biểu mơ gai khơng điển hình chưa loại trừ HSIL (ASC-H) Tổn thương tế bào nội biểu mô gai mức độ thấp (LSIL) Tổn thương tế bào nội biểu mô gai mức độ cao (HSIL) Ung thư tế bào biểu mô gai * Bất thường tế bào biểu mô tuyến Tế bào biểu mô tuyến nội mạc tử cung Tế bào biểu mô tuyến không điển hình ý nghĩa chưa xác định (AGc) Tế bào biểu mơ tuyến khơng điển hình liên quan tăng sản ác tính (AGCAIS) Ung thư tế bào biểu mơ tuyến Ung thư tế bào chưa xác định IV KẾT QUẢ MƠ BỆNH HỌC Mơ tả tổn thương Lành tính Dị sản Tổn thương tiền ung thư CIN I CIN II CIN III Condyloma Có Khơng Ung thư Không Ung thư biểu mô Ung thư biểu mô vi xâm nhập Ung thư biểu mô xâm nhập Bác sĩ đọc kết Ký tên Mã số: V KẾT QUẢ DNA-HPV Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Kết DNA-HPV Âm tính Dương tính Loại type HPV (+): Bác sĩ đọc kết Ký tên Phụ lục BẢNG THU THẬP SỐ LIỆU Số thứ tự: Ngày vấn: ………………………………………… I PHỎNG VẤN Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Địa chỉ: số nhà: ……………….…… , ấp/đường…….………………….………, xã/phường……………… … , huyện/quận…………….……., TP Cần Thơ Nghề nghiệp: có thay đổi năm qua khơng: Có khơng Nơng dân Cơng nhân Nội trợ Công nhân viên Buôn bán Khác: ……………………… Nghề nghiệp chồng/ bạn tình: có thay đổi năm qua khơng: Có, không Nông dân Công nhân Tài xế/ thủy thủ Công nhân viên Buôn bán Khác: ……………………… Tình trạng nhân: thay đổi năm qua: Có, khơng Đang sống với chồng Góa Xa cơng việc Độc thân Ly dị Có thay đổi bạn tình: Có chồng khác bạn tình khác có thêm bạn tình Khơng Chồng/ bạn tình có thay đổi bạn tình: có quan hệ thêm bạn tình khác ngồi chị thời gian 2013- 2018 Có Khơng Số lần sinh thêm năm qua Không Sinh đến lần Sinh lần Số lần nạo hút thai năm qua: ………………… lần Không lần ≥ lần 10 Số lần thai lưu năm qua: ……………………… lần Không lần ≥ lần 11 Số lần thai tử cung năm qua: ………………… lần Không lần lần 12 Mắc bệnh phụ khoa năm qua Có: …………Số lần: …………… a Viêm âm đạo b Viêm cổ tử cung c Viêm phần phụ Khơng 13 Mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục năm qua Có (Ghi rõ): ………………………….…… Số lần:…………… Khơng 14 Nếu có tiền sử mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục thời điểm mắc năm tuổi? 15 Tình trạng kinh nguyệt: có thay đổi năm qua Có: - Hành kinh -> tiền mãn kinh/ mãn kinh - Tiền mãn kinh -> mãn kinh Khơng: - Đang cịn kinh - Mãn kinh ≥ năm 16 Trong năm qua có lần bị rối loạn kinh nguyệt Có: - Ra huyết âm đạo bất thường kỳ kinh - Ra huyết sau giao hợp - Kinh nguyệt kéo dài - Ra huyết sau mãn kinh Khơng 17 Trong năm qua có thay đổi phương pháp tránh thai Có: …………………………… thay ……………………… Khơng 18 Có tiêm ngừa vacxin phịng virus HPV/ ung thư cổ tử cung năm qua 1.Có: Thời điểm tiêm năm tuổi? Số mũi tiêm:………………………… Không 19 Tiền sử gia đình có người mắc ung thư cổ tử cung (bà, mẹ, dì, cơ, chị em gái ruột) năm qua Có: ………………………………… Khơng Phụ lục BẢNG THU THẬP SỐ LIỆU Số thứ tự: Ngày vấn: ………………………………………… I PHỎNG VẤN Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Địa chỉ: số nhà: …………….………., ấp/đường…………… .…………….…, xã/phường……………… , huyện/quận…………….……., TP Cần Thơ Nghề nghiệp tại: Nông dân Công nhân Nội trợ Công nhân viên Buôn bán Khác: ……………………… Nghề nghiệp có thay đổi năm qua khơng: Có: ghi rõ…………………… Khơng Ví dụ nghề nghiệp thay đổi: 1 (Nơng dân đổi thành bn bán) Nghề nghiệp có thay đổi năm qua khơng: Có: ghi rõ…………………… Khơng Nghề nghiệp chồng/ bạn tình tại: Nông dân Công nhân Tài xế/ thủy thủ 5.Công nhân viên Buôn bán Khác: ……………………… Nghề nghiệp chồng có thay đổi năm qua khơng (2018-2020) Có: ghi rõ…………………… Khơng Nghề nghiệp chồng có thay đổi năm qua khơng (2013-2020) Có: ghi rõ…………………… Khơng Tình trạng nhân Đang sống với chồng Góa Xa cơng việc Độc thân Ly dị 10 Tình trạng nhân có thay đổi năm qua khơng (2018-2020) Có: ghi rõ……………………… Khơng Ví dụ nhân thay đồi: 1 (sống với chồng đổi thành xa nhau) 11 Tình trạng nhân có thay đổi năm qua khơng (2013-2020) Có: ghi rõ……………………… Khơng 12 Có thay đổi bạn tình năm qua khơng (2018-2020) Có chồng khác bạn tình khác có thêm bạn tình Khơng 13 Có thay đổi bạn tình năm qua khơng (2013-2020) Có chồng khác bạn tình khác có thêm bạn tình Khơng 14 Chồng/ bạn tình có thay đổi bạn tình: có quan hệ thêm bạn tình khác ngồi chị thời gian 2013- 2020 Có (số người): ………… Không 15 Số lần sinh thêm năm qua (2018-2020): …………………lần Không Sinh đến lần Sinh lần 16 Số lần sinh thêm năm qua (2013-2020): Không Sinh đến lần Sinh lần 17 Số lần nạo hút thai năm qua (2018-2020): ………………… lần Không lần ≥ lần 18 Số lần nạo hút thai năm qua (2013-2020): ………………… lần Không lần ≥ lần 19 Số lần thai lưu năm qua (2018-2020): ………………… lần Không lần ≥ lần 20 Số lần thai lưu năm qua (2013-2020): ………………… lần Không lần ≥ lần 21 Số lần thai tử cung năm qua (2018-2020): …………… lần Không lần lần 22 Số lần thai tử cung năm qua (2013-2020): …………… lần lần Không lần 23 Mắc bệnh phụ khoa năm qua (2018-2020): Có: …………… lần a Viêm âm đạo b Viêm cổ tử cung c Viêm phần phụ Không 24 Mắc bệnh phụ khoa năm qua (2013-2020) Có: …………… lần a Viêm âm đạo b Viêm cổ tử cung c Viêm phần phụ Không 25 Mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục năm qua (2018-2020) Khơng Có (Ghi rõ bệnh): ……………………….………… Số lần: ……… 26 Mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục năm qua (2013-2020) Khơng Có (Ghi rõ bệnh): ……………………….………… Số lần:……… 27 Nếu có tiền sử mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục thời điểm mắc năm tuổi? 28 Tình trạng kinh nguyệt: có thay đổi năm qua (2018-2020) Có: - Hành kinh -> tiền mãn kinh/ mãn kinh - Tiền mãn kinh -> mãn kinh Không: - Đang cịn kinh - Mãn kinh năm 29 Tình trạng kinh nguyệt: có thay đổi năm qua (2013-2020) Có: - Hành kinh -> tiền mãn kinh/ mãn kinh - Tiền mãn kinh -> mãn kinh Khơng: - Đang cịn kinh - Mãn kinh năm 30 Trong năm qua có lần bị rối loạn kinh nguyệt Khơng Có: - Ra huyết âm đạo bất thường kỳ kinh - Ra huyết sau giao hợp - Kinh nguyệt kéo dài - Ra huyết sau mãn kinh 31 Trong năm qua có lần bị rối loạn kinh nguyệt Có: - Ra huyết âm đạo bất thường kỳ kinh - Ra huyết sau giao hợp - Kinh nguyệt kéo dài - Ra huyết sau mãn kinh Không 32 Phương pháp tránh thai sử dụng: Thuốc viên tránh thai Thuốc ngừa thai khẩn cấp Bao Cao su Que cấy tránh thai Đặt dụng cụ tử cung Khác: ghi rõ: ……………… Thuốc tiêm tránh thai 33 Trong năm qua có thay đổi phương pháp tránh thai: Có: …………………………… thay ……………………… Khơng 34 Trong năm qua có thay đổi phương pháp tránh thai Có: …………………………… thay ……………………… Không 35 Sử dụng viên thuốc tránh thai đường uống Có: Thời gian sử dụng: ………………… năm a Thường xuyên b Thỉnh thoảng c Hiếm Không 36 Có tiêm ngừa vacxin phịng virus HPV/ UTCTC năm qua Có: Thời điểm tiêm năm tuổi ? Số mũi tiêm: ………………………… Khơng 37 Có tiêm ngừa vacxin phòng virus HPV/ UTCTC năm qua Có: Thời điểm tiêm năm tuổi? Số mũi tiêm: ……… Không 38 Trong năm qua có lần khám phụ khoa để kiểm tra sức khỏe khơng Có: ………………… lần Khơng 39 Tiền sử gia đình có người mắc ung thư cổ tử cung (bà, mẹ, dì, cơ, chị em gái ruột) năm qua Có: (ghi rõ): ………………………………… Không II KHÁM SÀNG LỌC Âm hộ: Bình thường Bất thường: ………………………………………… Tính chất khí hư Bình thường Bất thường a Màu…………………………… b Mùi: α Hôi β Tanh c Số lượng: α Nhiều β Ít Kết khám âm đạo Bình thường Viêm Kết khám cổ tử cung Bình thường Polyp Viêm loét Tổn thương u Lộ tuyến Chảy máu Kết nghiệm pháp VIA Âm tính Dương tính Nghi ngờ ác tính γ Khơng mùi Mã số: III KẾT QUẢ PAP Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Tính chất bệnh phẩm: - Mẫu bệnh phẩm đạt yêu cầu - Mẫu bệnh phẩm không đạt yêu cầu Kết Tế bào biểu mơ bình thường Tế bào biểu mơ biến đổi lành tính: a Do viêm b Trichomonas c Candida spp d Actinomyces spp Tế bào bất thường * Bất thường tế bào biểu mô gai Tế bào biểu mơ gai khơng điển hình ý nghĩa chưa xác định (ASC-US) Tế bào biểu mơ gai khơng điển hình chưa loại trừ HSIL (ASC-H) Tổn thương tế bào nội biểu mô gai mức độ thấp (LSIL) Tổn thương tế bào nội biểu mô gai mức độ cao (HSIL) Ung thư tế bào biểu mô gai * Bất thường tế bào biểu mô tuyến Tế bào biểu mô tuyến nội mạc tử cung Tế bào biểu mơ tuyến khơng điển hình ý nghĩa chưa xác định (AGC) Tế bào biểu mô tuyến không điển hình liên quan tăng sản ác tính (AGCAIS) Ung thư tế bào biểu mô tuyến Ung thư tế bào chưa xác định IV KẾT QUẢ MÔ BỆNH HỌC Mơ tả tổn thương Lành tính Dị sản Tổn thương tiền ung thư CIN I CIN II CIN III Condyloma Có Không Ung thư Không Ung thư biểu mô Ung thư biểu mô vi xâm nhập Ung thư biểu mô xâm nhập Bác sĩ đọc kết Ký tên Mã số: V KẾT QUẢ DNA-HPV Họ tên bệnh nhân: …………………………… Năm sinh: ……………… Kết DNA-HPV Âm tính Dương tính Loại type HPV (+): Bác sĩ đọc kết Ký tên Phụ lục GIẤY ĐỒNG Ý THAM GIA NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI “NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỔI DNA - HPV VÀ TẾ BÀO HỌC CỔ TỬ CUNG Ở PHỤ NỮ 18- 69 TUỔI NHIỄM HPV TẠI TP CẦN THƠ” VÀ ĐỒNG Ý SINH THIẾT CỔ TỬ CUNG ……*-*…… Họ tên: …………………………………………., Năm sinh: …………… Địa chỉ: số nhà: …………….……… , ấp/ đường……… .…………….…, xã/ phường………….… , huyện/quận…………….……., TP Cần Thơ Sau giải thích rõ mục đích, cách tiến hành lợi ích nghiên cứu Tôi tự nguyện tham gia nghiên cứu đồng ý làm sinh thiết cổ tử cung Tôi biết rằng, tơi có quyền từ chối tham gia nghiên cứu lúc muốn thông tin riêng tư tơi ln đảm bảo bí mật TP Cần Thơ, ngày …… tháng … năm ……… Người tham gia nghiên cứu (Ký tên, ghi rõ họ tên) ………………………………………………… * Mọi thắc mắc xin vui lòng liên hệ: Ths Bs CKII Dương Mỹ Linh ĐT: 0918.406.374 Bộ môn Phụ Sản - Khoa Y- Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Khoa Phụ Sản - Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Địa chỉ: 179 Nguyễn Văn Cừ, Phường An Khánh, Quận Ninh Kiều, Thành phố Cần Thơ ... Xác định tỷ lệ biến đổi HPV- DNA, type nhiễm HPV, biến đổi tế bào học cổ tử cung mối liên quan biến đổi HPV với biến đổi tế bào học cổ tử cung phụ nữ 18 - 69 tuổi nhiễm HPV thành phố Cần Thơ từ năm... Khơng: phụ nữ khơng có tình trạng 38 2.2.4.2 Tỷ lệ biến đổi HPV- DNA, type HPV nhiễm, biến đổi tế bào học cổ tử cung mối liên quan biến đổi HPV- DNA với biến đổi tế bào học cổ tử cung phụ nữ thành phố. .. chúng tơi tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu biến đổi HPV- DNA tế bào học cổ tử cung phụ nữ 18 - 69 tuổi nhiễm HPV thành phố Cần Thơ” Đây nghiên cứu đoàn hệ, dựa vào kết nghiên cứu cắt ngang trước đó, với