Nghiên cứu tác dụng điều trị viêm loét dạ dày của cao chiết lá Sanchezia nobilis Hook.F trên thực nghiệm

Bài viết Nghiên cứu tác dụng điều trị viêm loét dạ dày của cao chiết lá Sanchezia nobilis Hook.F trên thực nghiệm trình bày việc đánh giá tác dụng điều trị viêm loét dạ dày và tác dụng giảm đau của Sanchezia nobilis Hook.F trên động vật thực nghiệm.

TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ VIÊM LOÉT DẠ DÀY CỦA CAO CHIẾT LÁ SANCHEZIA NOBILIS HOOK.F TRÊN THỰC NGHIỆM Bùi Thị Xuân1,2,, Trần Minh Ngọc3 Trần Thanh Hà2, Đặng Thị Thu Hiên4 Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội Viện Dược liệu Bộ Y tế Trường Đại học Y Hà Nội Lá Khôi đốm (Sanchezia nobilis Hook.F) sử dụng dân gian vị thuốc điều trị viêm loét dày Nghiên cứu sử dụng dịch chiết cồn toàn phần Khôi đốm để đánh giá tác dụng điều trị viêm loét dày giảm đau thực nghiệm Mô hình thắt mơn vị tiến hành theo phương pháp Shay chuột cống trắng chủng Wistar mức liều 450 mg/kg; 150 mg/kg 50 mg/kg Nghiên cứu tác dụng giảm đau mâm nóng máy đo ngưỡng đau mức liều 300 mg/kg 900 mg/kg chuột nhắt trắng chủng Swiss Kết cho thấy với mức liều 450 mg/kg/ngày 150 mg/kg/ngày, dịch chiết toàn phần Sanchezia nobilis Hook.F làm giảm số điểm loét, số loét, độ acid, giảm thể tích dịch vị, làm tăng pH, cải thiện hình ảnh tổn thương đại thể, vi thể so với lô mơ hình Liều 50 mg/kg khơng làm thay đổi số so với lơ mơ hình Liều 300 mg/kg/ngày 900 mg/kg/ngày chưa ghi nhận tác dụng giảm đau rõ mơ hình mâm nóng ngưỡng đau Kết luận: Dịch chiết cồn Khôi đốm xu hướng có tác dụng điều trị viêm loét dày mơ hình thực nghiệm Cả mức liều 300 mg/kg/ngày 900 mg/kg/ngày chưa thấy thể tác dụng giảm đau mơ hình mâm nóng máy đo ngưỡng đau Từ khóa: Sanchezia nobilis Hook.F, mơ hình Shay, mâm nóng, máy đo ngưỡng đau I ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm loét dày tá tràng bệnh lý phổ biến giới Việt Nam Theo nghiên cứu gần có khoảng 8,4% dân số giới bị loét dày tá tràng.1 Có nhiều nguyên nhân dẫn đến viêm loét dày tá tràng vi khuẩn Helicobacter Pylori, stress, chất kích thích hay sau dùng số loại thuốc chống viêm Viêm loét dày tái phát nhiều lần để lại nhiều biến chứng nguy hiểm thủng dày, viêm teo niêm mạc dày, ung thư dày… Hiện nay, có nhiều thuốc điều trị loét dày, nhiên điều trị kéo dài có gặp nhiều tác dụng khơng muốn Bệnh nhân có xu hướng tìm kiếm nguồn dược liệu có khả điều trị bệnh, an tồn, sử dụng lâu dài Sanchezia nobilis Hook.F Việt Nam có tên gọi Xăng xê, Khơi đốm, Sàng xê, ngũ sắc Lá Sanchezia nobilis Hook.F từ lâu người dân sử dụng cho thấy có hiệu điều trị viêm loét dày Trên Tác giả liên hệ: Bùi Thị Xuân giới, Sanchezia nobilis dân gian dùng điều trị chống co giật, an thần, ho có đờm, lao ung thư.2 Loại sử dụng rộng rãi Ấn Độ Bangladesh bị rắn cắn, sốt rét, kiết lỵ, tiêu chảy, rối loạn chức Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội Email: xuanbt.ump@vnu.edu.vn Ngày nhận: 19/09/2022 Ngày chấp nhận: 03/10/2022 278 TCNCYH 160 (12V1) - 2022 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC gan hỗ trợ sinh sản nam giới.3 Ngồi ra, Thái Lan, Khơi đốm sử dụng loại thức ăn có tác dụng an thai, bổ máu, điều trị đau bụng kinh, rễ dùng để điều trị liệt dương làm tăng cường ham muốn tình dục Ở Trung Quốc, Sanchezia nobilis dùng diều trị gẫy xương.4-6 Để có chứng khoa học làm sáng tỏ kinh nghiệm sử dụng Khôi đốm dân gian, nghiên cứu thực nhằm mục tiêu: Đánh giá tác dụng điều trị viêm loét dày tác Chuột cống trắng chia ngẫu nhiên thành lô, lô 10 con: - Lô (chứng sinh học, n = 10): uống dung môi pha thuốc, ml/100g - Lô (Mơ hình, n = 10): uống dung mơi pha thuốc, ml/100g - Lô (Chứng dương, n = 10): Ranitidin 50 mg/kg/ngày, uống ml/100g - Lô (Mẫu cao tổng, n = 10): uống mẫu cao tổng liều 450 mg/kg, uống 1ml/100g - Lô (Mẫu cao tổng, n = 10): uống mẫu cao dụng giảm đau Sanchezia nobilis Hook.F động vật thực nghiệm tổng liều 150 mg/kg, uống ml/100g - Lô (Mẫu cao tổng, n = 10): uống mẫu cao tổng liều 50 mg/kg, uống ml/100g Chuột lô uống dung môi pha thuốc/mẫu thử liên tục thời gian ngày Chuột để nhịn đói 18 - 24 cho uống nước trước gây mơ hình Ngày thứ nghiên cứu, sau uống thuốc lô chuột từ lô đến lô tiến hành gây viêm loét dày phương pháp thắt môn vị Gây mê chuột, mở ổ bụng bộc lộ môn vị dày chuột Dùng phẫu thuật thắt môn vị (tránh thắt vào động mạch tạng), khâu đóng thành bụng Chuột đặt vào chuồng sạch, khơng có thức ăn, uống nước tự do, sau thắt môn vị, gây mê chuột, mở ổ bụng, bộc lộ dày Thu dịch vị dày chuột từ lơ đến lơ 6, li tâm 3000 vịng 20 phút đo thể tích, lấy phần dịch tiến hành xác định độ acid NaOH 0,1N Dạ dày mở dọc theo bờ cong lớn, rửa nước muối sinh lý, thấm bề mặt dày formaldehyd 5%, cố định dày Niêm mạc dày soi kính lúp có độ phóng đại gấp 10 lần để đánh giá mức độ tổn thương Các số đánh giá - Tỉ lệ chuột có loét dày lô Mức độ tổn thương: đánh giá mức độ loét theo Szelenyi Thiemer (1978)10,11: + Tổn thương độ I: phù, sung huyết II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng Lá Sanchezia nobilis Hook.F thu hái tỉnh Nam Định, phơi sấy khô Lá khô (3,8 kg) ngâm ethanol 80 độ ngày, lọc lấy dịch chiết Ngâm chiết lần Gộp dịch chiết cô cất thu hồi dung môi làm khô đến khối lượng không đổi Cao thu gọi cao tổng Đây dạng cao dùng nghiên cứu đánh giá tác dụng Động vật nghiên cứu Chuột nhắt trắng chủng Swiss, giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 20 ± 2g Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột cống trắng chủng Wistar, hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 180 - 250g trung tâm cung cấp động vật thí nghiệm Đan Phượng - Hà Nội cung cấp Động vật thí nghiệm ni ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu điều kiện phịng thí nghiệm với đầy đủ thức ăn nước uống Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội Phương pháp Nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dày Nghiên cứu tiến hành theo phương pháp Shay cộng (1945) cách thắt môn vị chuột cống trắng.7-9 TCNCYH 160 (12V1) - 2022 279 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC chấm xuất huyết2: Codein phosphat 20mg/kg 10 18,71 ± 3,72 25,98 ± 2,87*** < 0,001 TCNCYH 160 (12V1) - 2022 285 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Lơ chuột n Thời gian phản ứng với nhiệt độ (giây) Trước Sau % thay đổi so với chứng Lô 3: Cao tổng liều 300mg/kg/ ngày ↑ 32,3 10 19,14 ± 2,99 20,65 ± 4,55 % thay đổi so với chứng Lô 4: Cao tổng liều 900 mg/kg/ ngày ptrước-sau > 0,05 ↑ 5,1 10 19,75 ± 4,70 21,21 ± 4,04 % thay đổi so với chứng > 0,05 ↑ 8,0 Khác biệt so với lô chứng sinh học (lô 1): *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 Kết bảng cho thấy: Codein có tác dụng kéo dài rõ rệt thời gian phản ứng với nhiệt độ chuột so với lô chứng sinh học (p < 0,001) Mẫu cao tổng liều 300 900 mg/kg/ ngày tác dụng kéo dài thời gian phản ứng với nhiệt độ (p > 0,05) Nghiên cứu tác dụng giảm đau cao tổng máy đo ngưỡng đau Dynamic Plantar Aesthesiometer Bảng Ảnh hưởng mẫu cao tổng lên thời gian phản ứng đau máy đo ngưỡng đau Lô chuột (n = 10) Thời gian phản ứng đau (giây) Trước Sau Lô 1: Chứng sinh học 6,29 ± 1,41 6,53 ± 1,06 Lô 2: Codein phosphat 20mg/ kg 6,54 ± 1,07 % thay đổi so với chứng Lô 3: Cao tổng liều 300 mg/kg/ ngày 286 Lực gây đau 3,45 ± 0,87 Sau > 0,05 6,29 ± 1,41 6,53 ± 1,06 > 0,05 8,79 ±1,38*** < 0,001 6,54 ± 1,07 8,79±1,38*** < 0,001 4,00 ± 1,06 ↑ 34,6 > 0,05 6,15 ± 1,44 ↑ 8,7 3,53 ± 0,83 ptrước-sau Trước ↑ 34,6 % thay đổi so với chứng Lô 4: Cao tổng liều 900 mg/kg/ ngày ptrước-sau 3,93 ± 1,16 7,05 ± 1,76 > 0,05 ↑ 8,0 > 0,05 6,28 ± 1,38 6,95 ± 1,93 > 0,05 TCNCYH 160 (12V1) - 2022 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Lô chuột (n = 10) Thời gian phản ứng đau (giây) Trước % thay đổi so với chứng Sau ptrước-sau Lực gây đau Trước ↑ 6,8 ptrước-sau Sau ↑ 6,4 Khác biệt so với lô chứng sinh học (lô 1): *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 Kết bảng 5: Codein có tác dụng làm kéo dài rõ rệt thời gian đáp ứng với đau làm tăng rõ rệt lực gây phản xạ đau máy đo ngưỡng đau chuột so với lô chứng sinh học (p < 0,001) Mẫu cao tổng liều 300 900 mg/kg/ngày chưa thể tác dụng kéo dài thời gian đáp ứng với đau lực gây đau với chuột so với lô chứng sinh học (p > 0,05) IV BÀN LUẬN Viêm loét dày bệnh đường tiêu hóa phổ biến ảnh hưởng đến dân số toàn giới.1 Thuốc có nguồn gốc dược liệu chứng minh có triển vọng điều trị loét dày tá tràng với tác dụng khơng mong muốn Hiện nay, Việt Nam có nhiều loại dược liệu sử dụng dân gian để điều trị loét dày tá tràng nhiên cần có chứng khoa học để làm sáng tỏ sàng lọc tác dụng thành phần hoạt chất chứa loại thảo dược Chính vậy, cần phải có mơ hình thực nghiệm đáng tin cậy sử dụng để sàng lọc dược liệu điều trị viêm loét dày tiềm Thắt môn vị số phương pháp phổ biến để gây mơ hình viêm loét dày chuột Cơ chế gây tổn thương viêm, loét dày thông qua kích thích lên thụ thể histamine-2 (H2R) dẫn đến tăng tiết acid hydrocloric bên dày, tăng độ acid dịch vị thay đổi pH dày, đồng thời phá vỡ hàng rào bảo vệ gây tổn thương niêm mạc dày dẫn đến bệnh lý đường tiêu hóa bao gồm loét xuất huyết.10,16 Kháng histamine-2 số TCNCYH 160 (12V1) - 2022 loại thuốc ức chế khả tiết acid dịch vị dày sử dụng phổ biến với hiệu chứng minh mơ hình.17 Cao tổng đem làm khơ đến khối lượng không đổi, xác định độ ẩm cao Hiệu suất chiết Sanchezia nobilis Hook.F khoảng 8%, liều dùng khô khoảng 12 g/ngày, kết hợp với hệ số ngoại suy sang chuột cống trắng 6, mức liều cao sử dụng chuột cống để tương đương liều dược liệu khô người khoảng 150 mg/kg/ngày Do đó, nghiên cứu lựa chọn mức liều để đánh giá tác dụng chống lt dày mơ hình thắt mơn vị Shay chuột cống trắng 50 mg/ kg/ngày; 150 mg/kg/ngày 450 mg/kg/ngày Kết cao tổng cho thấy với mức liều 150 mg/kg/ngày (tương đương với mức liều dùng người) liều gấp 450 mg/ kg/ngày xu hướng có tác dụng chống viêm loét dày thông qua việc giảm số điểm loét, số loét, độ acid toàn phần, độ acid tự do, pH dịch vị thể tích dịch vị Kết góp phần minh chứng cho kết sử dụng Sanchezia nobilis Hook.F dân gian Triệu chứng đau bệnh lý viêm loét dày triệu chứng xuất sớm, chế đau chưa rõ ràng, có giả thuyết cho nguyên nhân đau do tác động acid dịch vị niêm mạc rối loạn hoạt động co bóp dày Mơ hình mâm nóng sử dụng phổ biến để đánh giá tác dụng giảm đau trung ương thuốc thử Bàn chân chuột nhắt nhạy cảm với nhiệt độ 287 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC mà nhiệt độ chưa gây tổn thương da Trên mơ hình nghiên cứu tác dụng giảm đau máy đo ngưỡng đau, lực tăng dần tác động lên bàn chân phải chuột Khi đạt ngưỡng đau, chuột phản ứng cách co rút chân khỏi vị trí gây đau Với mức liều 300 mg/ kg/ngày 900 mg/kg/ngày mức liều tương đương liều dùng dự kiến lâm sàng liều gấp lần sử dụng hệ số ngoại suy chuột nhắt, đem đánh giá tác dụng giảm đau mơ hình, nhiên chưa làm thay đổi có ý nghĩa thống kê số nghiên cứu Qua nghiên cứu, thấy cao tổng Sanchezia nobilis Hook.F mức liều có tác dụng cải thiện số đánh giá tình trạng viêm loét dày Tuy tác dụng sử dụng đơn lẻ chưa cao, dược liệu hứa hẹn cho hiệu trường hợp nhẹ, sau điều trị đợt cấp thuốc tân dược hay dùng kết hợp với mục đích giảm tác dụng không mong muốn dày số thuốc Các nghiên cứu sâu nghiên cứu phân đoạn có tác dụng tốt để tăng hiệu điều trị Sanchezia nobilis Hook.F V KẾT LUẬN Trên tác dụng chống viêm loét dày cao tổng Sanchezia nobilis Hook.F mơ hình Shay cho thấy mức liều từ 150 mg/kg/ ngày (tương đương liều dược liệu người) liều 450 mg/kg/ngày làm giảm số điểm loét trung bình, số loét, độ acid tự do, độ acid toàn phần, giảm thể tích dịch vị, đồng thời làm tăng pH dịch vị có cải thiện hình ảnh đại thể vi thể so với lơ mơ hình Liều 50 mg/ kg chưa cải thiện số so với lơ mơ hình Cả mức liều 300 mg/kg/ngày 900 mg/ kg/ngày chưa thấy thể tác dụng giảm đau mơ hình mâm nóng máy đo ngưỡng đau 288 TÀI LIỆU THAM KHẢO Salari N, Darvishi N, Shohaimi S, et al The global prevalence of peptic ulcer in the world: A systematic review and meta-analysis Indian J Surg Published online December 2, 2021 Ellah AEA, Mohamed KM, Backheet EY, Mohamed MH Matsutake alcohol glycosides from Sanchezia nobilis Chem Nat Compd 2013;48(6):930-933 Shamsuzzoha M Antifertility effect in mice of medicinal plant of family acanthaceq The Lancet 1978;312(8095):900 Srithi K, Trisonthi C, Wangpakapattanawong P, Balslev H Medicinal plants used in Hmong women’s healthcare in northern Thailand J Ethnopharmacol 2012;139(1):119-135 Da Cheng Hao, Xiao-Jie Gu, Pei Gen Xiao Phytochemical and biological research of Polygoneae medicinal resources Medicinal Plants 2015;465-529 doi: 10.1016/B978-0-08100085-4.00012-8 Zheng XL, Xing FW Ethnobotanical study on medicinal plants around Mt.Yinggeling, Hainan Island, China J Ethnopharmacol 2009;124(2):197-210 Szelenyi I, Thiemer K Distention ulcer as a model for testing of drugs for ulcerogenic side effects Arch Toxicol 1978;41(1):99-105 Mitra P, Ghosh T, Mitra PK Anti-peptic ulcer activity of TLC separated fractions of root extract of astilbe rivularis in rats Eur J Biotechnol Biosci 2013;1(1):47-52 Mitra P, Ghosh D, Ghosh T, Mitra P Anti peptic ulcer activity of the leaves of amaranthus spinosus L in rats Mintage Journal of Pharmaceutical and Medical Sciences 2013;52-53 10 Adinortey MB, Ansah C, Galyuon I, Nyarko A In vivo models used for evaluation of potential antigastroduodenal ulcer agents TCNCYH 160 (12V1) - 2022 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Ulcers 2013;2013:e796405 11 V sangli Ashokan, Kurane MM, Pillai MM Effect of ovariectomy and of estrogen administration upon duodenal ulceration induced by cysteamine, IUFS journal of Biology IUFS J Biol Turk 2010;68:7-16 12 Vogel HG, Vogel WH, Schölkens BA, Sandow J, Müller G, Vogel WF Analgesic, anti-inflammatory, and anti-pyretic activity1 In: Vogel HG, Vogel WH, Schölkens BA, Sandow J, Müller G, Vogel WF, eds Drug Discovery and Evaluation: Pharmacological Assays Second Completely Revised, Updated, and Enlarged Edition Springer; 2002:670-773 13 Patel PK, Sahu J, Chandel SS A detailed review on nociceptive models for the screening of analgesic activity in experimental animals Int J Neurol Phys Ther 2017;2(6):44 14 Funai Y, Pickering AE, Uta D, et al Systemic dexmedetomidine augments inhibitory synaptic transmission in the superficial dorsal horn through activation of descending noradrenergic control: An in vivo patch-clamp analysis of analgesic mechanisms Pain 2014;155(3):617-628 15 Nirogi R, Goura V, Shanmuganathan D, Jayarajan P, Abraham R Comparison of manual and automated filaments for evaluation of neuropathic pain behavior in rats J Pharmacol Toxicol Methods 2012;66(1):8-13 16 Zaghlool SS1, Shehata BA2, Abo-Seif AA, El-Latif HAA Comparison between the protective effects of famotidine, ginger and marshmallow on pyloric ligation-induced peptic ulcer in rats Journal of J Bioequivalence & Bioavailability 2015;7(4) 17 Onwudiwe T, Ughachukwu P, Unekwe P, Ogamba J Evaluation of antiulcer properties of ethanolic and hot aqueous stem extracts of synclisia scabrida on experimentally induced ulcer models in Albino mice Ann Med Health Sci Res 2012;2(2):134-139 Summary STUDY ON ANTI-PEPTIC ULCER EFFECT OF THE EXTRACT FROM THE SANCHEZIA NOBILIS HOOK.F LEAVES Sanchezia nobilis Hook.F has been used as a traditional precious medicine to cure gastritis The ethanol extract (total extract) of the Sanchezia nobilis Hook.F leaves was evaluated for its effects on peptic ulcers Pyloric ligation model was conducted by Shay method on Wistar rats at doses of 450 mg/kg, 150 mg/kg and 50 mg/kg Study on analgesic effect on hot plate and pain threshold meter at doses of 300 mg/kg and 900 mg/kg was conducted in Swiss mice The results showed that both dose of 450 mg/kg and 150 mg/kg of the whole leaf extract decreased the mean ulcer score, ulcer index, free acidity, total acidity, the gastric volume; increased the pH and improved in macroscopic and microscopic images were also observed; however, there was no change in these parameters with the 50 mg/kg dose when compared with the model group With both doses of 300 mg/kg/day and 900 mg/kg/day, no analgesic effect was observed on the hot plate model and the pain threshold meter In conclusion, Sanchezia nobilis Hook.F had potential effect against gastric ulcers in experimental rats, however at both doses of 300 mg/kg/day and 900 mg/kg/day, there was no analgesic effects in the mouse hot-plate and pain threshold test Keywords: Sanchezia nobilis Hook.F, Shay model, hot plate, pain threshold meter TCNCYH 160 (12V1) - 2022 289 ... giảm tác dụng khơng mong muốn dày số thuốc Các nghiên cứu sâu nghiên cứu phân đoạn có tác dụng tốt để tăng hiệu điều trị Sanchezia nobilis Hook.F V KẾT LUẬN Trên tác dụng chống viêm loét dày cao. .. Sanchezia nobilis dùng diều trị gẫy xương.4-6 Để có chứng khoa học làm sáng tỏ kinh nghiệm sử dụng Khôi đốm dân gian, nghiên cứu thực nhằm mục tiêu: Đánh giá tác dụng điều trị viêm loét dày tác. .. lấy dịch chiết Ngâm chiết lần Gộp dịch chiết cô cất thu hồi dung môi làm khô đến khối lượng không đổi Cao thu gọi cao tổng Đây dạng cao dùng nghiên cứu đánh giá tác dụng Động vật nghiên cứu Chuột