Luận văn nghiên cứu tạo sản phẩm hương que xua muỗi từ lá cây xoan chịu hạn (azadirachta indica a juss) để phòng chống muỗi

1 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ SỐ VIẾT TẮT Ký hiệu Viết đầy đủ tiếng Anh Viết giải nghĩa tiếng Việt Ae aegypti Aedes aegypti Ae epiroticus Anopheles epiroticus Cây xoan chịu hạn Cây Azadirachta indica A.Juss Cây xoan chịu hạn PTN Phịng thí nghiệm MNTN Mồi người nhà MNNN Mồi người nhà TN Trong nhà WHO World Health Organization Tổ chức Y tế giới DANH MỤC BẢNG Trang Bảng Một số loại hương xua diệt muỗi lưu hành Việt Nam 15 Bảng Thử nghiệm thiết kế theo WHO 2009.3 28 Bảng Hiệu suất tạo bột hương từ Cây xoan chịu hạn tươi 32 Bảng Tổng khối lượng hỗn hợp bột cho que hương 33 Bảng Thành phần hàm lượng Azadirachtin mẫu hương 33 Bảng Thành phần hàm lượng hoạt chất hương que A1, A2, A3, A4 34 Bảng Tỷ lệ cháy tỷ lệ tạo hình 35 Bảng Thời gian cháy hương xua muỗi A1,A2,A3,A4 35 Bảng Thành phần khối lượng cấu phần que hương 36 Bảng 10 Khối lượng trung bình 5cm hương 36 Bảng 11 Độ nhạy cảm muỗi Anopheles epiroticus Aedes aegypti chủng phòng thí nghiệm với giấy tẩm Permethrin 0,75% 38 Bảng 12 Độ nhạy cảm muỗi Culex quiquefasciatus chủng thu thập xã Tân Triều, huyện Thanh Trì 39 Bảng 13 Khả ngã gục loài muỗi Aedes aegypti chủng phịng thí nghiệm hương que (A1,A2,A3,A4) buồng thử Glass - Chamber 70 x 70 x 70 cm 40 Bảng 14 Hiệu lực sinh học hương que xua muỗi muỗi Aedes aegypti (chủng phịng thí nghiệm) buồng thử Glass - Chamber 70 x 70 x 70 (cm) 42 Bảng 15 Hiệu lực sinh học hương que xua muỗi muỗi Anopheles epiroticus (chủng phòng thí nghiệm) buồng thử Glass - Chamber 70 x 70 x 70 (cm) 43 Bảng 16 Hiệu lực sinh học hương que xua muỗi muỗi Culex quiquefasciatus (chủng phịng thí nghiệm) buồng thử Glass – Chamber 70 x 70 x 70 (cm) 44 Bảng 17 Hiệu lực sinh học hương que xua muỗi muỗi Aedes aegypti (chủng phòng thí nghiệm) buồng thử Peet-Grady Chamber 1,8 x 1,8 x1,8 (m) 45 Bảng 18 Hiệu lực sinh học hương xua muỗi muỗi Anopheles epiroticus (chủng phịng thí nghiệm) buồng thử Peet-Grady Chamber 1,8 x 1,8 x1,8 (m) 46 Bảng 19 Kết thử nghiệm hương xua với loài muỗi Culex quiquefasciatus buồng thử Peet - Grady 1,8 x 1,8 x1,8 (m) 47 Bảng 20 Thành phần loài trước triển khai phát hương xua muỗi xã Diên Phú, huyện Diên Khánh, tỉnh Khánh Hòa tháng 7/2018 thôn 48 Bảng 21 Thành phần loài trước triển khai phát hương xua muỗi xã Diên Phú, huyện Diên Khánh, tỉnh Khánh Hòa tháng 7/2018 thôn 49 Bảng 22 Kết nhạy cảm muỗi Aedes aegypti chủng thực địa xã Diên Phú, huyện Diên Khánh, tỉnh Khánh Hòa với giấy tẩm hóa chất Permethrin Deltamethrin 50 Bảng 23 Số lượng muỗi đến chạm vào chân từ 18h30-22h30 51 Bảng 24 Kết số muỗi đậu/giờ/ nhà thực địa hẹp (con/giờ/nhà) 52 Bảng 25 Kết số muỗi đậu/ngày/ người thực địa hẹp (Con/ngày/người) 53 Bảng 26 Kết số muỗi đậu/ngày/ mẫu mẫu hương xua ngày thực địa hẹp (con/ngày/nhà) 54 Bảng 27 Hiệu lực xua muỗi nhà hương xua muỗi từ xoan chịu hạn thôn 1, xã Diên Phú, huyện Diên Khánh, tỉnh Khánh Hòa 54 Bảng 28 Phản ứng phụ hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn người tham gia nặn hương thử nghiệm 56 Bảng 29 Phản ứng phụ hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn người dân tham gia dùng hương xua thử nghiệm 57 Bảng 30 Phản ứng phụ hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn người dân sử dụng 58 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình Hoạt chất Azadirachtin 17 Hình Bộ dụng cụ để thử nhạy cảm 22 Hình Buồng thử Glass - Chamber 70cm x 70cm x 70cm 23 Hình Buồng thử Peet-Grady Chamber 1,8 x 1,8 x1,8 m 25 Hình Kết định lượng hàm lượng Azadirachtin Viện Bảo vệ thực vật 47 MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ SỐ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÌNH HÌNH THẾ GIỚI CỦA VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1.1 Các nghiên cứu tác dụng xoan chịu hạn côn trùng 1.1.2 Các nghiên cứu đánh giá hiệu lực hương xua muỗi từ xoan chịu hạn 10 1.2 TÌNH HÌNH TRONG NƯỚC VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 11 1.2.1 Nguồn nguyên liệu xoan chịu hạn Việt Nam 11 1.2.2 Các nghiên cứu tác dụng xoan chịu hạn côn trùng nước ta 12 1.2.3 Các nghiên cứu đánh giá hiệu lực xua muỗi từ xoan chịu hạn Việt Nam 14 1.2.4 Các loại hương xua muỗi sử dụng việt Nam 15 CHƯƠNG II: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 18 NGHIÊN CỨU 18 2.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM 18 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 18 2.3 VÂT LIỆU NGHIÊN CỨU 18 2.3.1 Vật liệu nghiên cứu tạo sản phẩm hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn 18 2.3.2 Vật liệu nghiên cứu đánh giá hiệu lực xua muỗi hương phịng thí nghiệm thực địa 19 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.4.1 Nghiên cứu tạo hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn 20 2.4.2 Đánh giá hiệu lực diệt hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) với số lồi muỗi phịng thí nghiệm 21 2.4.3 Đánh giá hiệu lực xua muỗi chấp nhận cộng đồng hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) thực địa hẹp 27 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 KẾT QUẢ TẠO SẢN PHẨM HƯƠNG QUE XUA MUỖI TỪ LÁ CÂY XOAN CHỊU HẠN 32 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ HIỆU LỰC XUA MUỖI CỦA HƯƠNG XUA MUỖI TẠI PHỊNG THÍ NGHIỆM 38 3.2.1 Kết thử nhạy cảm muỗi Anopheles epiroticus Aedes aegypti chủng phịng thí nghiệm với giấy tẩm Permethrin 0,75% 38 3.2.2 Kết thử nhạy cảm muỗi Culex quiquefasciatus (chủng xã Tân Triều, Thanh Trì, Hà Nội) với số hóa chất diệt côn trùng 39 3.2.3 Kết đánh giá hiệu lực xua muỗi hương que phòng thí nghiệm40 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ HIỆU LỰC VÀ SỰ CHẤP NHẬN CỦA CỘNG ĐỒNG ĐỐI VỚI HƯƠNG QUE XUA MUỖI TẠI THỰC ĐỊA HẸP 48 3.3.1 Kết đánh giá hiệu lực xua muỗi hương que xua muỗi thực địa hẹp (Diên Phú, huyện Diên khánh, tỉnh Khánh Hòa) 48 3.3.2 Kết chấp nhận cộng đồng với sản phẩm hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) 55 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 4.1 KẾT LUẬN 59 4.2 KIẾN NGHỊ 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 PHỤ LỤC 45 MỞ ĐẦU Hiện nay, nước nhiệt đới nói chung Việt Nam nói riêng, tình trạng dịch sốt xuất huyết, Zika bùng phát mạnh Để phòng chống muỗi truyền dịch bệnh trên, ngành Y tế dự phòng nước ta thường sử dụng biện pháp bảo vệ cộng đồng phun hóa chất tồn lưu tường vách, phun không gian tẩm hóa chất diệt muỗi số biện pháp bảo vệ cá nhân bình xịt muỗi, hương vịng, dung dịch xua muỗi Trên thị trường có nhiều sản phẩm phòng chống muỗi bọ gậy với cách thức sử dụng khác nhau: Hóa chất dùng để phun tồn lưu nhà, phun không gian trừ muỗi, hóa chất dùng để tẩm màn, tẩm hóa chất, dung dịch xua muỗi, máy xua muỗi, vợt điện diệt muỗi, kem xoa xua muỗi, hóa chất diệt bọ gậy… Các khuyến cáo sử dụng chi tiết rõ ràng cách áp dụng để xua, diệt muỗi, nhiên đa phần sản phẩm sử dụng hóa chất nên nhiều có tác dụng không mong muốn người sử dụng, đặc biệt trẻ em tuổi Các hóa chất có ảnh hưởng đến hệ thần kinh, hệ hơ hấp qua tiếp xúc xông sử dụng thường xuyên lâu dài Việc sử dụng rộng rãi hóa chất diệt côn trùng từ năm 1950 dẫn đến quần thể muỗi phát triển tính kháng hóa chất mạnh mẽ toàn giới Vấn đề giải thích nhiều nguyên nhân, nguyên nhân có mặt hoạt chất diệt côn trùng độc hại sử dụng ngày nhiều chưa kiểm soát chặt chẽ nông nghiệp, đô thị hộ gia đình; Từ làm tăng áp lực chọn lọc kháng hóa chất quần thể muỗi Mặt khác, hóa chất cịn gậy ảnh hưởng xấu đến mơi trường sống người nhiều loài sinh vật Do việc nghiên cứu sản phẩm có nguồn gốc từ thiên nhiên, thân thiện môi trường an tồn cho sức khỏe người vật ni cần thiết cấp bách giai đoạn Nhằm hướng tới đa dạng hóa sản phẩm diệt trùng phục vụ mục đích bảo vệ cá nhân hộ gia đình, khai thác nguồn nguyên liệu tự nhiên từ xoan chịu hạn (cây xoan chịu hạn), để tạo sản phẩm hương xua diệt muỗi an tồn với người thân thiện với mơi trường Do chúng tơi tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu tạo sản phẩm hương que xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) để phịng chống muỗi’’ với mục đích : - Tạo sản phẩm hương que xua muỗi từ xoan chịu han - Đánh giá hiệu lực với số loài muỗi chấp nhận cộng đồng hương que xua muỗi từ xoan chiu hạn (Azadirachta indica A.Juss) + Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nghiên cứu Ý nghĩa khoa học - Đây lần nghiên cứu sản xuất sản phẩm hương xua muỗi từ xoan chịu hạn từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) với thành phần hoạt chất Azadirachtin 0,048%w/w phụ gia khác có hiệu lực xua muỗi tốt thời gian - - Sản phẩm hương xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) có hiệu lực xua tốt với số lồi muỗi Anophen epiroticus, Aedes aegypti chủng phịng thí nghiệm lồi muỗi Culex quinquefasciatus chủng thực địa - Sản phẩm hương xua muỗi từ xoan chịu hạn (Azadirachta indica A.Juss) dễ sử dụng, an tồn, khơng gây phản ứng phụ người dân chấp nhận sử dụng Ý nghĩa thực tiễn - Đề tài bước đầu cho việc sàng lọc nguồn nguyên liệu thiên nhiên, thân thiện với mơi trường, có khả xua diệt muỗi Sản phẩm đánh giá hiệu lực công nhận có khả xua diệt muỗi, xem an tồn với người động vật; Từ ứng dụng vào sản xuất công nghiệp, phát triển công nghiệp sản xuất hương xua muỗi từ tự nhiên, giảm thiểu ô nhiễm môi trường, thân thiện với người Các kết nghiên cứu đề tài cho thấy hiệu việc ứng dụng nguồn nguyên liệu sẵn có phong phú Việt Nam để sản xuất hương xua muỗi CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÌNH HÌNH THẾ GIỚI CỦA VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1.1 Các nghiên cứu tác dụng xoan chịu hạn côn trùng Hiện nay, thuốc mà nhà hóa học giới quan tâm hàng đầu xoan chịu hạn có thể trồng với số lượng lớn, có nhiều dược tính quý giá đa dạng Cây xoan chịu hạn có xuất xứ từ Ấn Độ, tên khoa học Azadirachta indica A Juss, họ xoan Meliaceae, trồng đại trà thành rừng khắp nước nguồn lợi lớn cho Ấn Độ Từ năm 1980, xoan chịu hạn tiếng giới từ cành, lá, hạt xoan chịu hạn nhà hóa học trích hoạt chất limonoid để điều chế số thuốc có tác dụng tốt trị bệnh cho người, gia súc, gia cầm thuốc bảo vệ thực vật có hiệu Năm 1975, Bộ Nông nghiệp Mỹ xây dựng kế hoạch trồng xoan chịu hạn khắp nước Mỹ Từ năm 1985, Bộ Nông nghiệp Nhật Bản Bộ Nông nghiệp Trung Quốc đưa xoan chịu hạn trồng; đến họ sản xuất nhiều loại thuốc bảo vệ thực vật thuốc trị bệnh có hiệu Hiện có 300 loại hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học từ xoan chịu hạn, có hoạt chất Azadirachtin hợp chất nghiên cứu kỹ nhất, dịch chiết từ xoan chịu hạn gọi dầu xoan chịu hạn có tính mẫn cảm với 200 lồi trùng Nên xoan chịu hạn cịn gọi “cây giải vấn đề toàn cầu” (A tree for solving global problems) (M.Jacobson, 1992) Có nhiều thành phần hoạt chất xoan chịu hạn, nhiên có số hoạt chất có tác dụng trừ sâu như: Azadirachtin Salannin, Nimbin, Nimbidin, Meliantriol… Azadirachtin tác động đến trùng gây hại cách gây chán ăn, xua đuổi, cản trở lột xác côn trùng ngăn cản đẻ trứng làm giảm khả sinh sản [2] Hạt xoan chịu hạn xoan chịu hạn chứa nhiều hoạt chất diệt côn trùng Những hoạt chất tác động lên hoocmon côn trùng không ảnh hưởng trực tiếp lên hệ thần kinh, hệ tiêu hoá, quan sinh sản loại thuốc hoá học; khó phát triển tính kháng thuốc hệ sau 10 (Dennis,1992); xoan chịu hạn loại thuốc diệt côn trùng phổ rộng, tác động lên 400 - 500 loại côn trùng từ cánh thẳng (châu chấu), cánh giống (rệp rừng, bướm trắng, rệp cây); Thysanoptera (bọ trĩ); cánh cứng (bọ ruồi); cánh vảy (ngài) Theo Isman (2002), có ba nhóm hoạt chất thứ cấp gây chán ăn trùng là: Alkaliod, phenoliod, terpenoid, đặc biệt những triterpenoid Trong limonoid Azadirachta indica quan tâm nghiên cứu đánh giá hiệu việc khống chế côn trùng gây hại + Gây chết ấu trùng trưởng thành + Gây biến dạng + Cản trở hình thành lớp kitin bên thể + Làm gián đoạn cản trở phát triển trứng, ấu trùng, nhộng + Ngăn cản giao phối, giao tiếp quần thể 1.1.2 Các nghiên cứu đánh giá hiệu lực hương xua muỗi từ xoan chịu hạn Apiwat cộng (2002) tiến hành nghiên cứu thực địa hiệu lực xua muỗi ban đêm Thái Lan hương vịng làm từ lồi thực vật nghệ (Curcuma longa), Cây xoan chịu hạn (Azadirachta indica), sả chanh (Cymbopogon nardus), riềng (Alpinia galangal), lưỡi cọp (Boesenbergia pandurata), tiểu đậu khấu (Elettaria cardamomum), muồng đen (Cassia siamea), bạch đàn chanh (Eucalyptus Citriodora) cỏ lào (Eupatorium odoratum) Chín loại thực vật cắt nhỏ, làm khơ nghiền thành bột để tạo hương vịng có nồng độ 25% (w/w) Thành phần hương từ loài thực vật gồm bột (các loại bột trên), xơ dừa, bột keo, bột gỗ Kết nghiên cứu hiệu lực bảo vệ khỏi muỗi đốt 50-71%, hương thường khơng có bột 43% [38] Misbah Rashid et al (2013) nghiên cứu khả diệt bọ gậy Culex pipiens fatigans xoan chịu hạn (Azadirachta indica) Kết cho 51 xã Diên Phú tăng sức chịu đượng với hóa Permethrin 0,75% Deltamethrin 0,05% K Murugan cộng (2014) nghiên cứu thời gian bảo vệ (khả xua) sản phẩm Cây xoan chịu hạn có chứa hoạt chất Azadirachta 0,2% 123 phút - 348 phút nồng độ 0,6% Do hương xua muỗi khơng có thời gian tồn lưu lâu mơi trường có thể bố trí thí nghiệm theo ngày (24h/lần) mà không cần 48h/lần theo WHO Bố trí thí nghiệm: Theo thiết kế WHO lựa chọn người thử nghiệm (2 nam nữ) nhà thử nghiệm Tiến hành thử nghiệm theo bảng 22 Tiến hành đốt hương từ 18h30-19h30 theo liều que hương/10m3, người mồi đếm số lượng muỗi đến chạm vào chân từ 18h30-22h30 Người mồi ngồi cách vị trí đốt hương 1,5m Kết qủa thu sau: Bảng 23 Số lượng muỗi đến chạm vào chân từ 18h30-22h30 Nhà Sản phẩm Giờ Giờ Giờ Giờ TỔNG CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 1 VSR 0 0 ĐC 32 VSR 0 1 ĐC 27 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 ĐC 9 30 CÂY XOAN CHỊU HẠN 1 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 1 CÂY XOAN CHỊU HẠN/ĐC 1/17 0/22 3/26 4/24 8/89 ĐC 7 27 CÂY XOAN CHỊU HẠN 1 VSR 0 1 CÂY XOAN CHỊU HẠN 1 VSR 0 1 ĐC 10 29 52 CÂY XOAN CHỊU HẠN 1 ĐC 11 12 36 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 2 CÂY XOAN CHỊU HẠN/ĐC 2/25 2/16 5/21 6/30 17/92 VSR 0 ĐC 11 10 37 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 ĐC 11 31 CÂY XOAN CHỊU HẠN 1 VSR 0 1 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 1 CÂY XOAN CHỊU HẠN 0 2 ĐC 10 36 CÂY XOAN CHỊU HẠN/ĐC 1/25 1/32 3/23 10/24 16/104 Bảng 24 Kết số muỗi đậu/giờ/ nhà thực địa hẹp (con/giờ/nhà) Giờ thử nghiệm (18 30- 22 30) Nhà thử nghiệm Nhà Nhà Nhà 3 2,88 2,44 3,67 3,22 3,22 3,22 4,44 4,22 Trung bình số muỗi đậu/giờ/ nhà 2,72 3,11 3,49 Theo hướng dẫn WHO 2009.3 kể từ ngày 7-8-9 thử nghiệm tiến hành thử với mẫu hương xoan chịu hạn đối chứng (không sử dụng hương) Còn ngày 1-2-3-4-5-6 tiến hành thử với mẫu hương (hương xua muỗi từ xoan chịu hạn, hương VSR khơng sử dụng hương) Phân tích ANOVA phần mềm SPSS cho thấy kết thử nghiệm nhà khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (P= 0,787> 0,05) Kết 53 cho thấy nhà lựa chọn đảm bảo đồng cấu trúc, sinh cảnh mật độ muỗi thời điểm thử nghiệm Bảng 25 Kết số muỗi đậu/ngày/ người thực địa hẹp (Con/ngày/người) Người thử nghiệm Ngày thử nghiệm Người Người Người 1 32 2 27 3 30 2 4 27 29 36 4 5 37 31 36 2 Trung bình số muỗi đậu/ngày/ người 13 11,2 13,22 Phân tích cho thấy kết thử nghiệm người thử nghiệm khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (P= 0,473> 0,05) Kết cho thấy người thử nghiệm đồng khả thu hút muỗi thời điểm thử nghiệm Kết thử nghiệm không bị ảnh hưởng Như việc chọn ngẫu nhiên nhà người thử nghiệm đạt yêu cầu khẳng định khơng có yếu tố gây nhiều tới kết thử hiệu lực 54 Bảng 26 Kết số muỗi đậu/ngày/ mẫu mẫu hương xua ngày thực địa hẹp (con/ngày/nhà) Ngày thử nghiệm Trung bình số muỗi đậu/ngày/ mẫu Mẫu thử nghiệm Hương xua muỗi Hương từ lá xoan chịu VSR SX hạn 1 2 5 4 3,33 1,67 ĐC 32 27 30 27 29 36 37 31 36 31,67 Kết thử nghiệm suốt ngày cho thấy có khác biệt có ý nghĩa thống kê nhóm thử nghiệm (p