Phát hiện những người có nhóm máu Rhesus âm qua phân tích lần theo phả hệ

ĐẶT VẤN ĐỀ PAGE ĐẶT VẤN ĐỀ Máu rất cần thiết và quan trọng đối với sự sống con người Hiện nay với sự phát triển của y học và khoa học con người đã phát hiện ra trên 30 nhóm máu khác nhau với khoảng 30[.]

ĐẶT VẤN ĐỀ Máu cần thiết quan trọng sống người Hiện với phát triển y học khoa học người phát 30 nhóm máu khác với khoảng 308 kháng nguyên hồng cầu [21] Tần suất xuất kháng nguyên khác tùy chủng tộc Những kháng nguyên có tần suất xuất thấp 0,1% gọi hiếm, kháng nguyên có tần suất xuất 0,01% gọi [22] Khi thể không mang kháng nguyên đó, nhận máu có mang kháng nguyên kích thích thể sinh kháng thể miễn dịch chống lại kháng ngun Vì truyền máu nhiều lần dễ xảy tai biến [5] Việc phát hệ nhóm máu khác giải thích tai biến xảy truyền máu Đây sở đề biện pháp nâng cao chất lượng an toàn truyền máu Trong thực hành truyền máu nước tiến tiến đảm bảo mặt an tồn miễn dịch thực cách triệt để Việc định nhóm máu hệ kháng nguyên nhóm máu ABO, Rhesus, thực phản ứng hòa hợp sàng lọc kháng thể bất thường thực cách đầy đủ thường quy Việc làm hạn chế tối đa tai biến truyền máu Trong thực hành truyền máu Việt Nam hệ nhóm máu ABO Rhesus (D) thực theo quy chế Truyền máu năm 2007 Trong hệ nhóm máu có kháng nguyên có tần suất xuất thấp Hệ nhóm máu Rh có kháng nguyên D đặc trưng, hệ nhóm máu quan trọng thực hành truyền máu sau hệ ABO Tần suất xuất kháng nguyên D người Việt Nam 99,93% người có nhóm máu Rh(D) dương [6] Tỷ lệ người Việt Nam không mang kháng nguyên D 0,07% gọi người có nhóm máu Rh(D) âm [6] Nhóm Rh(D) âm nước ta coi nhóm máu Tương tự nhóm máu ABO hệ nhóm máu khác xuất nhóm máu Các nhóm máu có tần suất xuất thấp gây khó khăn định truyền máu điều trị bệnh máu Đó việc tìm đơn vị máu phù hợp hệ nhóm máu, hịa hợp hệ nhóm máu ABO, Rh nhóm máu khác ( Kell, Kidd, Duffy, Lewis, Lutheran, MNSs, …) [5] Việc phát nhóm máu Rh (D) âm qua xét nghiệm lần theo phả hệ cần thiết Qua xét nghiệm phát người có nhóm máu Rh (D) âm gia đình, dịng họ Đây “ngân hàng máu sống” đảm bảo cung cấp kịp thời máu hịa hợp hệ nhóm máu ABO, Rh (D) cho người thân gia đình bệnh nhân khác cần truyền máu Rh (D) âm Với tầm quan trọng xét nghiệm nhóm máu lần theo phả hệ ý nghĩa đảm bảo an toàn thực hành truyền máu lâm sàng, thực nghiên cứu đề tài với mục tiêu: Phát người có nhóm máu Rhesus âm qua phân tích lần theo phả hệ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ NHÓM MÁU 1.1.1 Kháng nguyên nhóm máu Các kháng nguyên nhóm máu sản phẩm prôtein màng hồng cầu, mà trình tổng hợp prơtein mã hóa gen nằm nhiễm sắc thể, gen tập hợp thành hệ thống Sự phối hợp gen hay nhiều hệ thống (kiểu gen) tạo tính trạng (kiểu hình) nhóm máu Ví dụ người nhóm máu AB có gen A gen B hệ thống nhóm máu ABO [5] Kháng nguyên hồng cầu, bản, kháng nguyên hệ nhóm máu, hệ ABO, hệ Rhesus, hệ Lewis, P, Kell, Duffy, Kidd Phần lớn kháng nguyên hồng cầu thường diện rõ bề mặt hồng cầu, nhiên có số kháng nguyên bình thường bị che lấp màng hồng cầu bộc lộ tác dụng men tiêu đạm Ngoại lệ có số kháng nguyên diện huyết hấp phụ từ huyết lên màng hồng cầu (ví dụ: kháng nguyên hệ Lewis), chí hấp thụ lên số tế bào khác [5], [3] Cấu trúc hóa học chất kháng nguyên hồng cầu: Một phân tử kháng nguyên hồng cầu thường có hai phần: - Phần có chất protein: Đó protein tải (carrier protein) Đây phần cần thiết để có khả sinh kháng thể [5] - Phần có chất glucid lipid, thường có trọng lượng phân tử nhỏ hơn, gọi hapten Nhờ men glycosyltranferase mà phân tử carbonhydrat gắn bổ sung vào chuỗi oligosaccharid, từ tạo khác biệt kháng nguyên nhóm máu hệ ABO, Lewis… Như phần mang tính đặc hiệu kháng nguyên nhóm máu loại kháng thể [5] Thời gian hình thành kháng nguyên hồng cầu không đồng đều: - Kháng nguyên hệ ABH: tạo bào thai 5, tuần tiếp tục hoàn thiện sau sinh - Cịn kháng ngun hệ nhóm máu khác chủ yếu hình thành hồn thiện sau sinh Kháng nguyên hồng cầu thường tồn suốt đời, bị suy yếu già số bệnh lý Di truyền nhóm máu: Về kháng nguyên hồng cầu di truyền theo quy luật Mendel, nghĩa 50% từ bố 50% từ mẹ Các kháng nguyên nhóm máu có mặt màng hồng cầu, có khác cá thể cá thể khác tập hợp thành hệ thống tương ứng với đơn vị di truyền khác Các đơn vị di truyền truyền từ hệ sang hệ khác theo quy luật Menđen [5] Các kháng nguyên nhóm máu có khả kích thích sinh kháng thể [5] Hệ thống kháng nguyên nhóm máu phong phú: − Kháng nguyên hệ nhóm máu ABO phổ biến quan trọng truyền máu Kháng nguyên bản: A, B, H định nhóm máu người Kháng nguyên nhóm: A 1, A2, A3, Ax, Aend, Am, B3, Bm, Bel,…[5] − Kháng nguyên hệ Rhesus: D, E, C, c, e [5] 1.1.2.Kháng thể nhóm máu (hồng cầu) [5] Kháng thể xuất sau miễn dịch khác nhóm, phần lớn IgG hay IgM Đặc biệt kháng thể hồng cầu xuất thường xuyên tồn đặn mà không qua miễn dịch cụ thể gọi kháng thể tự nhiên 1.1.2.1 Kháng thể tự nhiên Là globulin miễn dịch, xuất từ lúc trẻ đời, khơng qua kích thích cụ thể Bản chất kháng thể tự nhiên: thường IgM chống A, chống B, chống AB kháng thể đủ, điều kiện hoạt động tối ưu 40C- 220C (nhưng hoạt động 00C- 370C) môi trường NaCl 0,9% Kháng thể tự nhiên bị hủy 700C 10 phút [5] Kháng thể tự nhiên không qua màng thai Kháng thể tự nhiên làm ngưng kết làm tan máu mạnh hồng cầu mang kháng nguyên tương ứng Hậu gây tan máu trầm trọng lòng mạch, đưa đến tử vong [5] 1.1.2.2 Kháng thể miễn dịch [5] Kháng thể miễn dịch nhóm máu kháng thể tạo q trình đáp ứng miễn dịch rõ ràng Có thai nhiều lần truyền máu nguyên nhân gây kháng thể miễn dịch kháng thể chống Rh, chống Kell, chống Duffy….Kháng thể miễn dịch xuất có q trình kích thích miễn dịch Bản chất kháng thể miễn dịch nhóm máu: Chủ yếu IgG Kháng thể miễn dịch không làm ngưng kết hồng cầu mang kháng nguyên tương ứng môi trường NaCl 0,9% nhiệt độ lạnh nhiệt độ phịng thí nghiệm Trong điều kiện phịng thí nghiệm, kháng thể miễn dịch bám lên bề mặt hồng cầu, người ta gọi tượng hồng cầu bị cảm ứng Muốn phát kháng thể miễn dịch người ta phải dùng số kỹ thuật đặc biệt, sử dụng men tiêu đạm, hay kỹ thuật dùng huyết kháng globulin người Kháng thể miễn dịch IgG không bị hủy 700C 10 phút Kháng thể miễn dịch IgG, có khả chuyển qua tế bào thai cách chủ động, dẫn đến thiếu máu huyết tán trẻ sơ sinh bất đồng nhóm máu mẹ Tai biến truyền máu kháng thể miễn dịch gây thường nhẹ xảy ngồi lịng mạch Tuy nhiên không tiến hành đầy đủ xét nghiệm để phát dẫn đến hậu trầm trọng 1.2 HỆ THỐNG NHÓM MÁU ABO 1.2.1 Lịch sử phát Năm 1900 Landsteiner người phát nhóm máu ABO nhờ đặc điểm là: bề mặt hồng cầu có kháng nguyên A, B huyết có kháng thể tự nhiên chống lại kháng nguyên vắng mặt hồng cầu người Những kháng thể tự nhiên xuất sau sinh tồn suốt đời [5] Nhóm A: hồng cầu có kháng nguyên A bị ngưng kết kháng thể chống A Nhóm B: hồng cầu có kháng nguyên B bị ngưng kết kháng thể chống B Nhóm O: hồng cầu khơng có kháng nguyên Avà B bị ngưng kết kháng thể chống A chống B Năm 1902 Decastello Sturli phát nhóm máu AB với có mặt kháng nguyên A B hồng cầu bị ngưng kết kháng thể chống A chống B [5] Bảng 1.1 Đặc điểm nhóm máu hệ ABO tỷ lệ người Việt Nam [5] Kháng nguyên Kháng thể Tỷ lệ(%) Nhóm hồng cầu huyết A A Chống B 21,2 B B Chống A 30,1 AB A B Không 6,6 O Không Chống A Chống B 42,1 1.2.2 Kháng nguyên hệ nhóm máu ABO Hệ thống ABO có hai kháng ngun A B Sự có mặt chúng màng hồng cầu định tên nhóm máu Nhưng kháng nguyên A B có số biến tướng 1.2.2.1 Kháng nguyên A đa dạng kháng nguyên A - Người có kháng nguyên A bề mặt hồng cầu, huyết khơng có kháng thể tự nhiên chống A - Nhóm A1 A2: Năm 1911, người ta xác định có hai kháng nguyên A A1 A2 ứng với hai alen khác Như nhóm A thực có hai nhóm A1 A2 nhóm AB có hai loại A1B A2B Hồng cầu A bị ngưng kết mạnh với kháng thể chống A huyết người nhóm B hay O Hồng cầu A phản ứng với kháng thể chống A huyết người nhóm B nhóm O Người có nhóm máu A A2B có kháng thể chống A1 tự nhiên song tỷ lệ thấp (khoảng 1% với A2 25% với A2B) hiệu giá thấp, nhận máu A1 tạo miễn dịch gây tai biến truyền tiếp máu A1 lần sau [5] Các kiểu hình A “yếu”: Một số người có hồng cầu thể kháng nguyên A “yếu” ngưng kết yếu với kháng thể chống A Kháng nguyên A “yếu”: A3, Ax, Aend, Am 1.2.2.2 Kháng nguyên B đa dạng kháng nguyên B Các biến tướng yếu kháng nguyên B: B3, Bm, Bel 1.2.2.3 Kháng nguyên H hệ Hh, kiểu hình Bombay Nhóm O khơng có kháng ngun A B bề mặt hồng cầu, có kháng nguyên H hồng cầu Năm 1952, Bombay, Bhende phát người có nhóm máu lạ là: hồng cầu không bị ngưng kết với kháng thể chống A, B, H, huyết có kháng thể chống A, B, H, làm ngưng kết hồng cầu tất nhóm kể nhóm O Sự có mặt kháng nguyên H hệ thống gen Hh, hệ thống độc lập với ABO, người nhóm Bombay có kiểu gen hh 1.2.3 Kháng thể hệ nhóm máu ABO [5]: - 1.2.3.1 Kháng thể tự nhiên (KTTN) Do đặc điểm hệ thống nhóm máu ABO huyết có mặt kháng thể tương ứng với kháng nguyên vắng mặt hồng cầu, có: − Kháng thể chống A người nhóm B − Kháng thể chống B người nhóm A − Kháng thể chống A B người nhóm O − Kháng thể chống A, B, H người nhóm O Bombay − Kháng thể chống A1 người nhóm A2 (1%), A2B (25%) [5] Đó kháng thể tự nhiên tức sinh có, có đặc điểm IgM không qua màng rau thai, thường gây ngưng kết không làm vỡ hồng cầu hồng cầu pha lỗng, nhiệt độ thích hợp cho hoạt động 4oC, bị trung hòa đun nóng 70oC Hiệu giá kháng thể chống A chống B người nhóm O thường cao hiệu giá chống A người nhóm B chống B người nhóm A [5] Các kháng thể chống A, chống B tự nhiên tức không qua miễn dịch cụ thể Kháng thể tự nhiên: xuất sau sinh, tăng dần hiệu giá, đạt cực đại 5-10 tuổi, ổn định giảm dần người già [5] 1.2.3.2 Kháng thể miễn dịch (KTMD) KTMD xuất sau kích thích miễn dịch, điều kiện kích thích miễn dịch gồm có: − Miễn dịch đồng lồi: bất đồng nhóm máu mẹ (khi chuyển số hồng cầu mang kháng ngun mà mẹ khơng có sang máu mẹ gây đáp ứng miễn dịch mẹ) Hoặc truyền máu sai nhóm: ví dụ truyền hồng cầu A, B, AB cho người nhóm máu O Kháng thể miễn dịch xuất 8-15 ngày sau bị kích thích [5] − Miễn dịch khác loài: phổ biến, tiếp xúc sinh phẩm có nguồn gốc từ động vật, huyết (kháng bạch hầu, uốn ván) điều chế từ ngựa giàu chất A thể sinh KTMD chống lại − Tính chất KTMD chống A chống B: chất IgG, qua hàng rào thai Có thể kết hợp với bổ thể gây tan máu Hoạt động tốt 370C, không bị hủy 70oC [5] 1.3 HỆ THỐNG NHÓM MÁU RHESUS 1.3.1 Lịch sử phát [3], [5] Năm 1939 Levine Steton phát kháng thể bất thường huyết sản phụ nhận máu hòa hợp ABO từ người chồng Kháng thể phản ứng mạnh với hồng cầu thai nhi hồng cầu 85% người da trắng nhóm ABO [3] Năm 1940 Landsteiner Wiener lấy máu khỉ Macacus Rhesus tiêm cho thỏ chuột lang thu kháng thể gây ngưng kết hồng cầu khỉ gây ngưng kết hồng cầu 80% người da trắng Những người có phản ứng gọi người nhóm Rh dương, 20% người khơng ngưng kết với kháng thể gọi người có nhóm Rh âm [5] Cũng năm 1940 Wiener Peter thấy số người Rh âm có sinh kháng thể chống Rh dương gây phản ứng truyền máu truyền nhóm máu ABO [5] Sau người ta thấy kháng thể chống hồng cầu người thỏ khác với kháng thể chống Rh người Tuy nhiên người ta giữ tên kháng thể người kháng thể chống Rh [5] 1.3.2 Kháng nguyên hệ nhóm máu Rhesus danh pháp 1.3.2.1 Danh pháp Năm 1943 người ta phát bốn kháng thể chống lại bốn kháng nguyên thuộc hệ Rh, có hai kháng nguyên liên quan (vì cá thể ln có hai kháng nguyên này) đặt tên C c cịn hai kháng ngun khác khơng liên quan, đặt tên D E [5] Năm 1945 Mourant phát kháng thể chống e, e kháng nguyên liên quan với E  Danh pháp Fischer- Race (DCE) Ngay từ năm 1944 sau nghiên cứu kháng nguyên, Fischer giả thiết hệ Rh phức hợp gen liên kết chặt chẽ với gen có alen Đó là: D d alen Alen C c Alen E e: trình tự locus phức hợp gen DCE, locus nằm liền kề nhau, liên kết chặt chẽ di truyền Ví dụ bố có phức hợp Dce con, cháu có phức hợp [5] Sau phát Mourant giả thuyết ủng hộ, nhiên chưa tìm thấy kháng nguyên d kháng thể chống d [3], [5]  Danh pháp Wiener Wiener cho hệ Rh hệ có nhiều alen, alen lại cho phức hợp yếu tố kháng nguyên Ví dụ: alen Rh1 tạo kháng nguyên phức hợp D, C, e [3], [5] Tuy gọi khác liên hệ hai loại danh pháp Bảng 1.2 So sánh danh pháp Ficher- Race với danh pháp Wiener Gen (theo Phức hợp gen Wiener Ficher Wiener) Rh1 Rh0 Rh2 Rhz (Ficher) DCe Dce DcE DCE rh rh’ rh’’ rhy dce dCe dcE dCE 1.3.2.2 Kháng nguyên hệ nhóm máu Rhesus Hệ nhóm máu Rh có năm kháng ngun là: kháng nguyên D, kháng nguyên C c, kháng nguyên E e Người có kháng nguyên D gọi người có nhóm máu Rh (D) dương Người khơng có kháng nguyên D gọi người có nhóm máu Rh(D) âm Người bình thường có kháng ngun D khơng, có kháng ngun E e hai, có kháng nguyên C c hai [5] Bảng 1.3 Tần suất phân bố kháng nguyên hệ Rh [8], [24] Kháng nguyên D C E C e Da trắng (%) Da đen (%) 85 70 30 80 98 93 30 20 96 99 Người Pháp (%) 85 67 31 84 97 Người Việt Nam (%) 100 93 36 48 95 Khi nguời thiếu kháng nguyên nhận máu có kháng ngun đó, tạo miễn dịch gây tai biến truyền máu lần sau Trong số năm kháng ngun kháng ngun D có ý nghĩa có khoảng 50% người Rh âm nhận máu Rh dương sinh kháng thể chống Rh Kháng thể thường IgG ngưng kết môi trường nước muối, phản ứng sinh kháng thể tăng lên tiếp tục tiếp xúc kháng nguyên D [3], [5] Kháng ngun D có vai trị quan trọng bệnh tan máu trẻ sơ sinh: người mẹ có nhóm Rh (D) âm mang thai Rh (D) dương sinh kháng thể chống D Do chuyển hồng cầu vào tuần hồn mẹ kích thích tạo kháng thể gây tan máu cho thai Rh (D) dương lần mang thai sau [5] Ngồi năm kháng ngun hệ nhóm máu Rh cịn có số kháng ngun khác: − Kháng ngun Du: người có nhóm Du hồng cầu có kháng nguyên D, hồng cầu không ngưng kết với tất chống D, 10 ... hệ Rh, có hai kháng ngun liên quan (vì cá thể ln có hai kháng ngun này) đặt tên C c hai kháng nguyên khác không liên quan, đặt tên D E [5] Năm 1945 Mourant phát kháng thể chống e, e kháng nguyên... chế tạo miễn dịch Rhesus, đứa đầu không bị tác động kháng thể chống D Khi mẹ mang thai lần xảy vấn đề mang thai Rh dương: Kháng thể chống Rhesus thể mẹ có từ sau sinh lần đầu phân tử nhỏ, khả xuyên... nhóm máu lần theo phả hệ ý nghĩa đảm bảo an toàn thực hành truyền máu lâm sàng, thực nghiên cứu đề tài với mục tiêu: Phát người có nhóm máu Rhesus âm qua phân tích lần theo phả hệ CHƯƠNG TỔNG