CURCUMIN VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH

CURCUMIN VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH CURCUMIN VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH GVHD Trần Mai Liên SVTH Dương Ngọc Lan Đài MSSV 10043961 LHP 210415701 ĐỀ TÀI GIỚI THIỆU • Chất curcumin là một[.]

ĐỀ TÀI CURCUMIN VÀ MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH GVHD: Trần Mai Liên SVTH: Dương Ngọc Lan Đài MSSV: 10043961 LHP: 210415701 GIỚI THIỆU • Chất curcumin chất chống oxy hóa tự nhiên, coi hợp chất hữu ích vấn đề sức khỏe, sử dụng điều trị tim mạch bệnh viêm khớp Hiện nay, sử dụng chống viêm, chống oxy hóa chống ung thư • Curcumin sử dụng rộng rãi thuốc thử màu phương pháp so màu xác định hàm lượng vết Bo vật liệu khác Sự hình thành phức sử dụng phương pháp so màu Phương pháp rosocyanin có độ nhạy cao phương pháp rubrocurcumin có độ nhạy thấp tính chọn lọc cao • Việc phân tích định lượng Protein quan trọng nghiên cứu hóa sinh kĩ thuật sinh học Có nhiều phương pháp truyền thống phương pháp Lowry, phương pháp Bradford, phương pháp quang phổ… Người ta phát Protein sodium dodecyl sulphonate (SDS) làm tăng cộng hưởng ánh sáng tán xạ (RLS) curcumin Dựa tính chất người ta phát triển phương pháp định lượng Pro PHẦN A: CƠ SỞ LÝ THUYẾT I.THUỐC THỬ HỮU CƠ CURCUMIN I.1 Công thức, tên gọi Danh pháp IUPAC: (1E,6E)-1,7-bis (4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,6heptadiene-3,5-dione Tên khác: - Curcumin - Diferuloylmethan - C.I 75300 - Natural Yellow CTPT: C21H20O6 M = 368,39 đvC I.2 Ứng dụng Phát ra: B, Ba, Ca, Hf, Mg, Mo, Ti, V, W, Zr Phản ứng đo độ sáng Boron, cách sử dụng xịt lên tờ giấy sắc ký I.3 Tính chất thuốc thử Là bột màu vàng cam, nhiệt độ sôi 1830C, không tan nước, tan ether, dễ tan methanol, ethanol, acetone, acid acetic băng Nó phản ứng với dung dịch kiềm cho màu vàng Mặc dù thuốc thử có β–diketonemoiety cấu trúc nó,nhưng khơng liệu phù hợp cho số phân ly enolic proton Hình minh hoạ phổ hấp thụ Curcumin điều kiện vài dung dịch khác Hình 1: Minh hoạ phổ hấp thụ Curcumin điều kiện vài dung dịch khác II BORON II.1 Công thức, tên gọi, vị trí bảng HTTH Ký hiệu: B Số hiệu nguyên tử Là kim, chu kì II, phân nhóm nhóm Hình 2: Một vài số liệu nguyên tử Boron II.2 Tính chất vật lý Hình 3: Bảng số vật lý Boron III PROTEIN III.1 Giới thiệu chung Protein (Protit hay Đạm): đại phân tử cấu tạo theo nguyên tắc đa phân mà đơn phân axít amin Chúng kết hợp với thành mạch dài nhờ liên kết peptide (gọi chuỗi polypeptide) Các chuỗi xoắn cuộn gấp theo nhiều cách để tạo thành bậc cấu trúc không gian khác protein III.2 Tính chất Axit amin cấu tạo ba thành phần: Một nhóm amin (-NH2) Hai nhóm cacboxyl (-COOH) Cuối nguyên tử cacbon trung tâm đính với nguyên tử hyđro nhóm biến đổi R định tính chất axit amin Người ta phát tất 20 axit amin thành phần tất loại protein khác thể sống Cấu trúc chung Protein Cấu trúc không gian Protein IV SỰ TẠO PHỨC CỦA CURUCUMIN IV.1 Tạo phức với kim loại IV.2 Tạo phức với Boron Có hai dạng sau Rosocyamin Rubrocurcumin V.4 Các yếu tố ảnh hưởng •Acid oxalic Để nghiên cứu ảnh hưởng lượng acid oxalic khác nhau, ta thêm lượng acid oxalic 1ml với 1-4 ml HCl, giọt phenolphthalein, 3ml hỗn hợp Curcumin – acetone Hình 1: Mơ tả rõ ràng ảnh hưởng axit oxalic việc xác định từ đến 50 Y Boron, yếu tố khác không thay đổi Ảnh hưởng acid oxalic tập trung vùng lân cận 2ml dung dịch 5%, kết cho thấy đạt 0,25ml Khác biệt lớn 0.5ml •Acid chlohydric: để xác định ảnh hưởng dư HCl, cho 1ml sodium carbonate 10% cộng với 6ml hỗn hợp: – ml HCl, 1giọt phenolphthalein, 0,25ml acid oxalic 5%, 3ml dung dịch hỗn hợp Curumin – acetone Hình3: Đồ thị cho thấy lượng dư acid HCl 5ml môi trường acid thuận lợi Trong thí nghiệm nên thêm dư 0.5ml dd HCl tốt nhất, việc thêm vào 0.5ml HCl cho phép lượng Boron 10y, kết không tốt lượng Boron lớn 10y •Ảnh hưởng qua lại loại acid Dung dịch chứa 0-0,5 ml dung dịch axit hydrochloric 0-1ml dung dịch axit oxalic khơng đầy đủ tính axit cho kết Dung dịch có chứa ml dd hydrochloric 0,25 ml dung dịch axit oxalic cho kết xác •Currumin Ảnh hưởng lượng curcumin thay đổi kiểm tra với lượng lượng dung dịch curcumin 0.0125% với 1ml acid HCl, giọt phenolphthtalein, 10ml dd acid oxalic 5%, lượng curcumin thay đổi tùy ý theo hình 4, nồng độ acid oxalic cao nồng độ curcumin cho phép Lượng curcumin tối thiểu cho – 10 boron 3ml Hình V.5 Kết luận Sự xác việc xác định Bo phụ thuộc vào hàm lượng mẫu, khoảng từ – 0,2 μg, tổng thể tích mẫu giới hạn 10ml, khoảng từ 0,2 – μg Boron tổng thể tích giới hạn mẫu 25ml, xác đến 0,05 μg, khoảng từ – 25 μg tổng thể tích 25ml, với độ xác 95%, 25 μg, giới hạn 50ml tổng thể tích cho 50 μg Boron 100ml… với độ xác 95% Các kiểm tra cho thấy phgương pháp so màu phương pháp tốt với lượng acid boric thấp khoảng 0- 25 μg, xác khoảng từ 25 – 100 μg, không tốt hàm lượng cao VI.NGHIÊN CỨU SỰ TƯƠNG TÁC CỦA PROTEIN VỚI CURCUMIN VÀ SDS VÀ ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH VI.1 Giới thiệu Gần đây, kĩ thuật RLS trở thành phương pháp thu hút để phân tích lượng nhỏ đại phân tử sinh học, có độ nhạy cao, đơn giản nhanh chóng Việc xác định chủ yếu dựa nhuộm màu đại phân tử sinh học làm tăng mạnh RLS Huang et al, người sử dụng kĩ thuật cộng hưởng ánh sáng tán xạ thiết lập phương pháp xác định DNA, sau kĩ thuật sử dụng để xác định Protein Bài viết giới thiệu phương pháp RLS để xác định Pro Curcumin, chất hoạt động bề mặt anionic, SDS (sodium dodecyl sulphonate) VI.2 Thiết bị dụng cụ - Máy cường độ RLS: Hitachi F-2500 spectrofluorometer (Nhật Bản) - Máy đo phổ UV-4100 (Hitachi, Nhật Bản) - Máy đo nồng độ axit PHS-2F kỹ thuật số (Leici, Thượng Hải) - DXD IImicro dụng cụ điện di