Xây dựng quy trình xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6–Dichlorphenol indophenol

Bài viết Xây dựng quy trình xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6–Dichlorphenol indophenol khảo sát được giá trị tối ưu của một số thông số của máy chuẩn độ điện thế; tìm được dung môi tối ưu là H2C2O4 cho quá trình chiết mẫu và môi trường tối ưu cho phản ứng chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – DPIP (pH 4,0). Mời các bạn cùng tham khảo!

XÂY DỰNG QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH VITAMIN C TRONG TRÁI CÂY BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHUẨN ĐỘ ĐIỆN THẾ SỬ DỤNG THUỐC THỬ 2,6 – DICHLORPHENOL INDOPHENOL Huỳnh Anh Tuấn1, Huỳnh Nguyên Thảo Vy2 Viện Phát triển ứng dụng Email: tuanha@tdmu.edu.vn Trung tâm Tuyển sinh TÓM TẮT Vitamin C có vai trị quan trọng sống hàng ngày chúng ta, tham gia vào trình oxi hố – khử khác thể Thiếu vitamin C thể bị bệnh hoại huyết, ảnh hưởng tiêu cực đến tự vệ thể các bệnh nhiễm trùng khác Ngày có nhiều phương pháp xác định vitamin C, nhiên phương pháp có ưu nhược điểm Bài báo thực nhằm xác định vitamin C trái phương pháp chuẩn độ điện sử dụng thuốc thử 2,6-Dichlorphenol indophenol (2,6-DPIP) Kết khảo sát giá trị tối ưu số thông số máy chuẩn độ điện thế; tìm dung mơi tối ưu H2C2O4 cho quá trình chiết mẫu mơi trường tối ưu cho phản ứng chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – DPIP (pH 4,0) Từ khoá: 2,6- Dichlorphenol indophenol, Chuẩn độ hiệu điện thế, Vitamin C ĐẶT VẤN ĐỀ Vitamin C hay acid ascorbic vitamin tan nước, có thể tìm thấy nhiều hệ sinh học thực phẩm rau tươi trái cây, cụ thể có múi cam, chanh, bưởi,… Nó phân bố rộng rãi tế bào thực vật, nơi đóng nhiều vai trị quan trọng q trình tăng trưởng trao đổi chất Là chất chống oxy hóa mạnh, vitamin C có khả loại bỏ số loại oxy phản ứng khác nhau, giữ cho chất chống oxy hóa a-tocopherol liên kết màng trạng thái khử, hoạt động yếu tố trì hoạt động số enzym (bằng cách giữ ion kim loại trạng thái giảm), dường chất cho trình sinh tổng hợp oxalat tartrat có vai trò việc chống stress (Arrigoni & De Tullio, 2002; Davey, 2000; Klein & Kurilich, 2000) Vitamin C đóng vai trị quan trọng q trình sinh tổng hợp collagen (Shingo Tajima, 1982) , hấp thụ sắt, kích hoạt phản ứng miễn dịch tham gia việc chữa lành vết thương Nó hoạt động chất chống oxy hóa mạnh mẽ chống lại gốc tự gây bệnh Ngoài ra, vitamin C làm tăng sức đề kháng thể, kích thích thượng thận tiết corticosteroid, làm tăng trưởng thành hồng cầu Thiếu vitamin C có thể làm vết thương chậm lành, khiếm khuyết cấu tạo răng, vỡ mao mạch gây xuất huyết da, chảy máu chân (Nguyễn Thị Hiền nnk, 2010) Vitamin C có nhiều loại rau tươi ớt, nước cam, chanh, quýt có hàm lượng cao rau xanh, tiêu, khoai tây, cải brussel, rau cải, cà chua, ớt Tên theo IUPAC Vitamin C: 2-oxo-L-threo-hexono-1,4lactone-2,3-enediol; có cơng thức phân tử: C6H8O6 cơng thức cấu tạo: 184 2,6-Dichlorophenol indophenol (DPIP) hợp chất hóa học sử dụng làm thuốc nhuộm oxi hóa khử Khi bị oxy hóa, DPIP có màu xanh với độ hấp thụ cực đại 600nm; giảm, DPIP không màu DPIP có thể sử dụng để đo tốc độ quang hợp DPIP có công thức phân tử: C12H7NCl2O2 công thức cấu tạo: Hiện nay, có nhiều phương pháp sử dụng để xác định vitamin C bao gồm chuẩn độ, quang phổ, điện hoá, sắc ký, động học… Nhưng hạn chế sẵn có, kỹ thuật (trừ chuẩn độ quang phổ) không thường sử dụng để phân tích thường xuyên Tuy nhiên, phương pháp chuẩn độ điện quan tâm nhiều dễ dàng tiếp cận, chi phí tương đối thấp độ nhạy tương đối, thích hợp cho việc xác định hàm lượng vitamin C nhiều loại thuốc thử Do đó tiến hành khảo sát xây dựng quy trình xác định vitamin C phương pháp chuẩn độ điện sử dụng thuốc thử DPIP (TCVN 6427-2:1998) PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thực nghiệm Hoá chất: Dung dịch acid oxalic 2%, dung dịch CH3COONa 10%, dung dịch Vitamin C 0.002N, dung dịch chuẩn C12H6Cl2NNaO2.2H2O 0.002N, dung dịch NaOH 1M, dung dịch CH3COONa 1M, dung dịch HCl 1M, dung dịch đệm acetate pH = 4.46 Dụng cụ: Máy chuẩn độ điện thế, tủ hút, cân phân tích, dụng cụ thường sử dụng phịng thí nghiệm 2.2 Phương pháp phân tích DPIP thuốc nhuộm oxi hóa khử thường sử dụng tác chất phản ứng quang hoá Phản ứng có tính thuận nghịch, DPIP không màu, có thể bị oxy hoá sang màu xanh (Wikipedia,2015) Nếu có mặt vitamin C, tác nhân khử, thuốc nhuộm từ màu xanh chuyển sang màu hồng môi trường acid bị khử thành hợp chất không màu acid ascorbic DPIP (màu xanh) + H + → DPIPH (màu hồng) DPIPH (màu hồng) + Vitamin C– → DPIPH2 (không màu) 185 Trong trình chuẩn độ, tất acid ascorbic dung dịch sử dụng, không có điện tử có sẵn để khử DPIPH dung dịch màu hồng thừa DPIPH Điểm cuối chuẩn độ dung dịch có màu hồng bền 10 giây nhiều KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát thông số máy chuẩn độ điện Để tối ưu hố thơng số máy chuẩn độ điện thế, tiến hành chuẩn độ mL acid ascorbic 0.002 N dung dịch chuẩn 2,6 – dichlorphenol indophenol 0.002 N môi trường acid oxalic Hiệu chuẩn chế độ MET (monotonic equivalence point) U, MET Ipol MET Upol sử dụng điện cực platin 60431100 điện cực platin 60338100 Các thông số khảo sát Signal.Drift, EPC (end point criterion), I (pol) U (pol) 3.1.1 Kết khảo sát các thông số máy chuẩn độ điện sử dụng điện cực Pt 60431100 Kết khảo sát thông số máy chuẩn độ điện (hình 1) cho thấy sử dụng điện cực Pt 60431100 máy ghi nhận tín hiệu thông tin chuẩn độ sử dụng chế độ MET U, không ghi nhận tín hiệu trường hợp MET Upol MET Ipol 20 U (mV) 0,9 10 0 0,8 0,7 -10 U (mV) 0,6 0,5 -20 0,4 -30 0,3 -40 0,2 -50 0,1 -60 V (mL) 0,5 a MET U 1,5 V (mL) 2,5 3,5 b MET Upol 0,9 0,8 U (mV) 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0,5 1,5 2,5 3,5 V (mL) c MET Ipol (overrange) Hình Đồ thị khảo sát thơng số chế độ MET U, MET Upol MET Ipol với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60431100 Ghi nhận biến đổi theo thể tích dung dịch chuẩn thêm vào, kết đường vi phân ∆E/∆V theo V trung bình thể hình Kết cho thấy điểm tương đương ghi nhận tương ứng V trung bình 4.35 mL 186 150 100 50 ∆U/∆V -50 -100 -150 -200 -250 Hình Đồ thị dạng vi phân máy ghi nhận MET U với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60431100 Bảng Kết khảo sát thông số máy với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60431100 với chế độ MET – U Thông số Signal drift (mV/min) (EPC = 10 mV) Giá trị 10 20 30 40 EPC (Signal drift = 10 mV/min) 10 15 20 VEP (mL) 4,355 4,355 4,355 4,355 0.258 4,355 4,355 4,355 4,355 CAA thực tế (N) 0,0017 0,0017 0,0017 0,0017 0.0001 0,0017 0,0017 0,0017 0,0017 CAA lý thuyết (N) 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 (%) Sai số tương đối 19,05 19,05 19,05 19,05 95,24 19,05 19,05 19,05 19,05 Kết so sánh V tương đương máy theo đồ thị vi phân tương đương nhau, kết so với giá trị có sai số tương đối khoảng 19.05 (%) Ngoài ra, thay đổi thông số signal drift (bảng 1) nhận thấy thông số signal drift không ảnh hưởng đến giá trị V tương đương số điểm tương đương ghi nhận Trong đó, EPC thấp, máy ghi nhận nhiều điểm tương đương, đó nên chọn khoảng EPC phù hợp để giảm sai số Các kết khảo sát cho thấy với điện cực Pt 60431100 thích hợp cho chế độ MET–Uvới thông số Signal.Drift = 10 mV/min EPC = 10 mV 3.1.2 Kết khảo sát các thông số máy chuẩn độ điện sử dụng điện cực Pt 60338100 Kết khảo sát thông số máy chuẩn độ điện (hình 3) cho thấy sử dụng điện cực Pt 60338100 máy ghi nhận tín hiệu thông tin chuẩn độ sử dụng chế độ MET Upol MET Ipol, không ghi nhận tín hiệu trường hợp MET U 1,2 0,9 0,8 0,7 0,8 U (mV) 0,6 U (mV) 0,6 0,5 0,4 0,4 0,3 0,2 0,2 0,1 0 0 0,5 1,5 V (mL) 2,5 -0,2 3,5 a MET U V (mL) b MET Upol 187 U (mV) 800 700 600 500 400 300 200 100 0 V (mL)6 c MET Ipol Hình Đồ thị khảo sát thông số chế độ MET U, MET Upol MET Ipol với với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60338100 Ghi nhận biến đổi theo thể tích dung dịch chuẩn thêm vào, kết đường vi phân ∆E/∆V theo V trung bình thể hình Kết cho thấy điểm tương đương ghi nhận tương ứng V trung bình chế độ MET Upol 4.25 mL (19.05%) MET Ipol 5.25 mL (4.76%) 1500 12 1000 10 500 ∆U/∆V ∆U/∆V -500 -1000 -1500 -2000 0 10 20 30 40 50 60 -2 -2500 -3000 a Đồ thị dạng vi phân máy ghi nhận MET Upol b Đồ thị dạng vi phân máy ghi nhận MET Ipol Hình Đồ thị dang vi phân máy ghi nhận MET Upol MET Ipol với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60338100 Bảng Kết khảo sát thông số máy với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60338100 với chế độ MET – Upol Giá trị Thông số U (pol) - µA (EPC = 0,5 mV) 10 20 Kết máy (mL) 1,157 5,150 5,780 1,157 5,150 5,780 1,157 5,150 5,780 1,157 5,150 CAA thực tế (N) 0,0005 0,0020 0,0023 0,0005 0,0020 0,0023 0,0005 0,0020 0,0023 0,0005 0,0020 188 CAA lý thuyết (N) 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 (%) Sai số tương đối 76,19 4,76 9,52 76,19 4,76 9,52 76,19 4,76 9,52 76,19 4,76 Giá trị Thông số 0.5 EPC – mV (U (pol) = µA) 0.6 0.7 0.8 Kết máy (mL) 5,780 1,157 5,150 5,780 1,157 5,150 5,780 5,780 5,780 CAA thực tế (N) 0,0023 0,0005 0,0020 0,0023 0,0005 0,0020 0,0023 0,0023 0,0023 CAA lý thuyết (N) 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 (%) Sai số tương đối 9,52 76,19 4,76 9,52 76,19 4,76 9,52 9,52 9,52 Bảng Kết khảo sát thông số máy với thuốc thử DPIP sử dụng điện cực Pt 60338100 với chế độ MET – Ipol Thông số Giá trị I (pol) µA (EPC = mV) 10 20 EPC (I(pol) = µA) 10 15 Kết máy (mL) 1,517 5,150 1,517 5,150 1,517 5,150 1,517 5,150 1,517 5,150 5,150 5,150 5,150 CAA thực tế (N) 0,0006 0,0022 0,0006 0,0022 0,0006 0,0022 0,0006 0,0022 0,0006 0,0022 0,0020 0,0020 0,0020 CAA lý thuyết (N) 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 0,0021 (%) Sai tương đối 71,43 4,76 71,43 4,76 71,43 4,76 71,43 4,76 71,43 4,76 4,76 4,76 4,76 số Nhận xét: qua kết khảo sát thông số máy chuẩn độ điện sử dụng điện cực Pt 60338100 thích hợp cho chế độ MET-Upol MET Ipol Ở chế độ MET-Upol, khảo sát giá trị tối ưu hai thông số U (pol) = 1µA EPC = 0.8 mV, chế độ MET Ipol, khảo sát giá trị tối ưu hai thơng số I (pol) = µA EPC = mV Bảng Kết vi phân khảo sát thông số máy với thuốc thử DPIP Chế độ MET U MET Upol MET Ipol Kết vi phân (mL) 4,35 4,25 5,25 CAA thực tế (N) 0,0017 0,0017 0,0022 CAA lý thuyết (N) 0,0021 0,0021 0,0021 (%) Sai số tương đối 19,05 19,05 4,76 Để tối ưu hóa quy trình khảo sát thơng số máy chuẩn độ điện dùng chuẩn độ acid ascorbic dung dịch chuẩn DPIP môi trường acid oxalic, chế độ MET Ipol chọn, chế độ cho kết sai số thấp có độ sai lệch thấp kết máy kết vi phân 3.2 Khảo sát ảnh hưởng pH Để khảo sát ảnh hưởng pH acid ascorbic với 2,6 – dichlorphenol indophenol Hút chính xác mL acid ascorbic vào beacher 250 mL, thêm 100 mL nước cất Sau đó, điều chỉnh pH dung dịch thay đổi từ – 14 chuẩn độ dung dịch chuẩn 2,6 – dichlorphenol indophenol 0.002 N 189 Bảng Kết khảo sát ảnh hưởng pH với thuốc thử DPIP CAA (N) lý thuyết 0,100 N pH đầu 1,17 2,01 3,19 3,89 5,12 6,25 7,1 8,15 9,97 10,94 12,90 pH cuối 1,61 2,38 5,07 6,83 7,14 12,85 7,00 8,00 9,14 10,62 13,01 VDPIP (mL) 1,55 2,25 2,55 2,05 1,55 0,65 0,45 0,25 0,15 0,15 0,15 CAA (N) thực tế 0,0775 0,1125 0,1275 0,1025 0,0775 0,0325 0,0225 0,0125 0,0075 0,0075 0,0075 (%) Sai số tương đối 22,5 12,5 27,5 2,5 22,5 67,5 77,5 87,5 92,5 92,5 92,5 0,14 CAA 0,12 0,1 0,08 0,06 0,04 0,02 0 10 12 pH 14 Hình Kết khảo sát ảnh hưởng pH với thuốc thử DPIP Nhận xét: Từ kết khảo sát, thấy, khoảng pH thích hợp để chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – dichlorphenol indophenol khoảng 4.0 Tại khoảng pH này, nhận thấy sai số tương đối phép chuẩn độ thấp 3.3 Khảo sát quy trình xử lý mẫu Để khảo sát quy trình xử lý mẫu vitamin C thực phẩm (rau, củ quả), tiến hành cân 10 g mẫu rau loại bỏ hạt, nghiền nhỏ, chuyển tất vào bình định mức 100 ml định mức lên nước, CH3COOH 10% C2H2O4 2% Để yên 10 phút cho acid ascorbic mẫu hoà tan hết, đem lọc thu dung dịch qua lọc Sau đó, chuẩn độ dung dịch thu phương pháp chuẩn độ điện sử dụng dung dịch chuẩn DPIP 0.002 N với điều kiện tối ưu Kết quy trình xử lý mẫu thể bảng Nhận xét: Qua kết khảo sát dung môi chiết Ta thấy rằng, sử dụng dung môi chiết H2C2O4 cho hiệu suất thu hồi cao CH3COOH H2O Vì thế, chúng tơi định chọn H2C2O4 làm dung mơi chiết tối ưu cho qui trình xử lý mẫu Bảng Kết khảo sát dung môi chiết không thêm chuẩn với thuốc thử DPIP Loại mẫu Sơ ri Dung môi chiết H2O CH3COOH H2C2O4 m mẫu (g) 10,0065 10,0005 10,0125 CDPIP (N) 0,0020 190 VDPIP (mL) 2,25 3,85 4,25 AA (mg/g mẫu) 1,98 3,39 3,74 Bảng Kết khảo sát dung môi chiết thêm chuẩn với thuốc thử DPIP Loại mẫu Sơ ri Dung môi chiết H2O CH3COOH H2C2O4 m mẫu + m chuẩn (g) 10,0210 + 0,1201 10,0002 + 0,1125 10,0127 + 0,1004 CDPIP (N) 0.0021 VDPIP (mL) 2,35 3,90 4,40 AA (mg/g mẫu) 2,04 3,40 3,83 H% 49,96 88,89 89,64 Nhận xét: Qua kết khảo sát loại dung môi chiết Chúng thấy rằng, sử dụng dung môi chiết H2C2O4 cho hiệu suất thu hồi cao CH3COOH H2O Vì thế, định chọn H2C2O4 làm dung mơi chiết tối ưu cho qui trình xử lý mẫu 3.4 Khảo sát hiệu suất thu hồi phân tích mẫu Để khảo sát hiệu suất thu hồi quy trình, tiến hành thêm acid ascobic vào mẫu ban đầu, xử lý mẫu thêm chuẩn không thêm chuẩn dung dịch chiết thích hợp, dung dịch sau chiết chuẩn dung dịch chuẩn 2,6 – dichlorphenol indophenol 0.002 N với điều kiện tối ưu Từ đó tính hiệu suất thu hồi quy trình Kết hiệu suất thu hồi quy trình thể bảng 9: Bảng Kết khảo sát hiệu suất thu hồi quy trình khơng thêm chuẩn sử dụng thuốc thử DPIP Loại mẫu m mẫu (g) Sơ ri 10,0125 VDPIP (mL) 4,25 4,25 4,35 CDPIP (N) 0,0020 ̅ AA (mg/g) 𝒎 m AA (mg/g) 3,74 3,74 3,91 3,80 ± 0,24 Bảng Kết khảo sát hiệu suất thu hồi quy trình thêm chuẩn với thuốc thử DPIP Loại mẫu m chuẩn + mẫu (g) CDPIP (N) Sơ ri 10,0034 + 0,1029 0,0021 V DPIP (mL) 4,50 4,50 4,50 (mg/g) 3,92 3,92 3,92 AA H% 87,46 87,46 87,46 ̅̅̅% 𝐇 87,46 Nhận xét: Dựa vào bảng kết trên, thấy hiệu suất thu hồi phương pháp sử dụng thuốc thử DPIP tương đối cao (gần 100%) Với hiệu suất ta có thể định lượng chính xác lượng vitamin C với độ tin cậy cao 3.5 Phân tích mẫu Cân - 10 g mẫu cắt nhỏ, cho vào cối sứ 10 mL dung dịch acid oxalic 2%, nghiền nhỏ, lọc gạn phần dịch sang becher 100 mL Cho thêm 10 mL dung dịch acid oxalic, nghiền nhỏ tiếp tục lọc gạn phần dịch sang becher Thêm 10 mL dung dịch acid oxalic 2%, nghiền nhỏ, gộp tất vào bình định mức 100 mL, tráng cối chày sứ dung dịch acid oxalic, cho vào bình định mức định mức định mức đến vạch Để yên 10 phút cho acid ascorbic mẫu hoà tan hết, đem lọc thu dung dịch qua lọc Lưu ý phải loại bỏ vài mL dịch lọc đầu Lấy mL mẫu lọc, mL đệm pH = 4.6 Chuẩn độ 2,6 DPIP ghi nhận thể tích 2,6 DPIP tiêu tốn, vẽ đồ thị xác định hàm lượng vitamin C Công thức tính toán: Hàm lượng Vitamin C, tính miligam, có 100 gam mẫu tính theo công thức: 100 mg ascorbic ⁄100g = (C × V)DPIP × D × F × (mg/100g) m 191 Trong đó: F: hệ số pha loãng D : đương lượng gam acid ascorbic C,V : nồng độ thể tích lượng DPIP tiêu tốn m: khối lượng mẫu (g) Bảng 10 Kết phân tích mẫu với thuốc thử DPIP Loại mẫu m mẫu (g) Sơ ri 10.0075 VDPIP (mL) 5,55 5,45 5,40 1,50 1,55 mAA (mg/100g) 488,39 479,59 475,91 121,20 125,24 ̅ 𝑨𝑨 (mg/100g) 𝒎 481,30 ± 15,92 Từ bảng 10, có thể thấy hàm lượng vitamin C sơ ri nhiều, kết trùng khớp với nhóm tác giả Lê Mỹ Hồng khảo sát hàm lượng vitamin để chế biến nước trái Mezadri nnk, 2006, nói so với loại trái khác sơ ri loại trái có nguồn vitamin C dồi dào, từ 695 đến 4827 mg/100 g trái tươi KẾT LUẬN Nghiên cứu tìm giá trị tối ưu số thông số máy chuẩn độ điện thế; tìm dung mơi tối ưu H2C2O4 cho trình chiết mẫu môi trường tối ưu cho phản ứng chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – DPIP (pH 4,0) TÀI LIỆU THAM KHẢO Arrigoni, O., & De Tullio, M C (2002) Ascorbic acid: Much more than just an antioxidant Biochimica et Biophysica Acta, 1569, 1–9 Davey, M W., Van Montagu, M., Inze´, D., Sanmartin, M., Kanellis, A., Smirnoff, N., et al (2000) Plant L-ascorbic acid: Chemistry, function, metabolism, bioavailability and effects of processing Journal of the Science of Food and Agriculture, 80, 825–860 Klein, B P., & Kurilich, A C (2000) Processing effects on dietary antioxidants from plant foods HortScience, 35(4), 580–584 Lê Mỹ Hồng, Nguyễn Thị Minh Duyên, Võ Ngọc Thúy, Nguyễn Thái Hiếu Hạnh, Q trình chế biến nước trái hỡn hợp (sơ ri, khóm, chanh dây) (2009), Tạp chí Khoa học Đại học Cần Thơ, 2009:11 235-244 Mezadri T, Fernández-Pachón MS, Villo D, García-Parrilla MC, Troncoso AM El fruto de la acerola: composición, características productivas e importancia económica [The acerola fruit: composition, productive characteristics and economic importance] Arch Latinoam Nutr 2006 Jun;56(2):101-9 Spanish Nguyễn Thị Hiền, Từ Việt Phú, Trần Thanh Đại (2010), “Phân tích thực phẩm”, NXB Lao Động Shingo Tajima, Sheldon R Pinnell, Regulation of collagen synthesis by ascorbic acid Ascorbic acid increases type I procollagen mRNA, Biochemical and Biophysical Research Communications, Volume 106, Issue 2, 1982, Pages 632-637, TCVN 6427-2: 1998 “Rau, các sản phẩm rau - Xác định hàm lượng acid ascorbic Phần 2: Phương pháp thông dụng” Wikipedia - https://en.wikipedia.org/wiki/Dichlorophenolindophenol 192 ... thấp độ nhạy tương đối, thích hợp cho vi? ?c x? ?c định hàm lượng vitamin C nhiều loại thu? ?c thử Do đó tiến hành khảo sát xây dựng quy trình x? ?c định vitamin C phương pháp chuẩn độ điện sử dụng thu? ?c. .. đo t? ?c độ quang hợp DPIP có c? ?ng th? ?c phân tử: C1 2H7NCl2O2 c? ?ng th? ?c cấu tạo: Hiện nay, có nhiều phương pháp sử dụng để x? ?c định vitamin C bao gồm chuẩn độ, quang phổ, điện hoá, s? ?c ký, động... hóa quy trình khảo sát thông số máy chuẩn độ điện dùng chuẩn độ acid ascorbic dung dịch chuẩn DPIP mơi trường acid oxalic, chế độ MET Ipol chọn, chế độ cho kết sai số thấp có độ sai lệch thấp