Luận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệm

Luận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệmLuận văn Thạc sĩ Y học: Đánh giá độc tính và tác dụng chống viêm của bài thuốc viêm họng mạn tính HV trên thực nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM ĐÀO XUÂN KỲ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM ĐÀO XUÂN KỲ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Y học cổ truyền Mã số: 8720115 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Đoàn Quang Huy HÀ NỘI – 2021 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám đốc, Phòng đào tạo Sau đại học, Bộ mơn, Khoa phịng Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam, nơi trực tiếp đào tạo tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, nghiên cứu để hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Đồn Quang Huy - Phó giám đốc Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam theo sát, trực tiếp dạy dỗ, bảo, giúp đỡ cho tơi ý kiến q báu q trình thực hồn thành đề tài Tơi xin bày tỏ lòng tri ân sâu sắc tới thầy, cô Hội đồng cho bảo tận tình trình thiết kế xây dựng đề cương thực nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc, Bộ môn Dược lý – Học viện Quân Y quan tâm, tạo điều kiện tốt cho việc nghiên cứu, thu thập, hoàn thiện số liệu để hoàn thành đề tài Cuối cùng, xin gửi tình cảm yêu thương tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp người bạn Cao học khóa 11 chuyên ngành Y học cổ truyền – Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam cạnh bên nhau, sát cánh giúp đỡ, động viên, chia sẻ niềm vui nỗi buồn suốt năm học trường thân yêu Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi Đào Xuân Kỳ, học viên cao học khóa 11 Học viện Y Dược Học Cổ truyền Việt Nam, chuyên ngành Y học cổ truyền, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Đoàn Quang Huy Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết này./ Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Học Viên Đào Xuân Kỳ DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BTVHMTHV : Bài thuốc viêm họng mạn tính HV NC : Nghiên cứu VHMT : Viêm họng mạn tính VHQP : Viêm họng phát VHXT : Viêm họng xơ teo YHCT : Y học cổ truyền YHHĐ : Y học đại MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 VIÊM HỌNG MẠN TÍNH THEO QUAN ĐIỂM Y HỌC HIỆN ĐẠI 1.1.1 Giải phẫu họng 1.1.2 Sinh lý họng 1.1.3 Viêm họng mạn tính 1.2 VIÊM HỌNG MẠN TÍNH THEO QUAN ĐIỂM Y HỌC CỔ TRUYỀN 1.2.1 Nguyên nhân chế bệnh sinh 10 1.2.2 Phân thể điều trị 10 1.2.3 Một số nghiên cứu sử dụng thuốc YHCT điều trị viêm họng mạn tính 11 1.3 TỔNG QUAN VỀ BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV 12 1.4 MƠ HÌNH NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM MẠN TRÊN THỰC NGHIỆM 22 1.4.1 Mơ hình gây u hạt thực nghiệm 22 1.4.2 Mô hình gây u hạt thực nghiệm amiang 22 1.4.3 Một số mơ hình gây u hạt thực nghiệm khác 23 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 24 2.1.1 Bài thuốc viêm họng mạn tính HV 24 2.1.2.Mẫu thử 24 2.2 TRANG THIẾT BỊ, THUỐC THỬ, ĐỘNG VẬT THÍ NGHIỆM 24 2.2.1 Trang thiết bị 24 2.2.2 Thuốc hóa chất nghiên cứu 26 2.2.3 Động vật nghiên cứu 26 2.2.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu 27 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.3.1 Đánh giá độ an tồn thuốc viêm họng mạn tính HV 27 2.3.2 Đánh giá tác dụng chống viêm thuốc viêm họng mạn tính HV 30 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÍ SỐ LIỆU 31 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐỘ AN TOÀN 32 3.1.1 Kết thử độc tính cấp 32 3.1.2 Kết thử độc tính bán trường diễn 33 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM MẠN THEO MƠ HÌNH GÂY U HẠT TRÊN CHUỘT CỐNG TRẮNG 45 3.2.1 Kết đánh giá trọng lượng u hạt trước sấy khô 45 3.2.2 Kết đánh giá trọng lượng u hạt sau sấy khô 46 Chương BÀN LUẬN 47 4.1 ĐỘC TÍNH CẤP CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV 47 4.2 ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV 49 4.2.1 Tình trạng chung mức tăng trọng lượng 50 4.2.2 Chức tạo máu 50 4.2.3 Chức gan 52 4.2.4 Chức thận 54 4.2.5 Tổn thương đại thể quan 54 4.2.6 Cấu trúc vi thể gan, lách, thận 55 4.3 TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM MẠN CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV 57 KẾT LUẬN 60 KIẾN NGHỊ 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Giải phẫu Họng Hình 1.2 Vịng Waldeyer Hình 1.3 Các khoang quanh họng Hình 2.1 Một số máy móc dụng cụ phục vụ nghiên cứu 25 Hình 2.2 Chuột cống trắng chủng Wistar 26 Hình 3.1 Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột lơ chứng 41 Hình 3.2 Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột lơ trị 41 Hình 3.3 Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột lơ trị 41 Hình 3.4 Hình ảnh vi thể gan chuột lô chứng 42 Hình 3.5 Hình ảnh vi thể gan chuột lô trị 42 Hình 3.6 Hình ảnh vi thể gan chuột lô trị 42 Hình 3.7 Hình ảnh vi thể lách chuột lô chứng 43 Hình 3.8 Hình ảnh vi thể lách chuột lô trị 43 Hình 3.9 Hình ảnh vi thể lách chuột lô trị 43 Hình 3.10 Hình ảnh vi thể thận chuột lơ chứng 44 Hình 3.11 Hình ảnh vi thể thận chuột lơ trị 44 Hình 3.12 Hình ảnh vi thể thận chuột lơ trị 44 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần dược liệu thuốc viêm họng mạn tính HV 12 Bảng 2.1 Số lượng động vật thực nghiệm 27 Bảng 3.1 Độc tính cấp đường uống cao chiết nước BTVHMTHV chuột nhắt trắng 32 Bảng 3.2 Ảnh hưởng BTVHMTHV thể trọng chuột 33 Bảng 3.3 Ảnh hưởng BTVHMTHV lên số lượng hồng cầu hàm lượng huyết sắc tố máu chuột 34 Bảng 3.4 Ảnh hưởng BTVHMTHV lên hematocrit thể tích trung bình hồng cầu máu chuột 35 Bảng 3.5 Ảnh hưởng BTVHMTHV lên số lượng bạch cầu tiểu cầu máu chuột 36 Bảng 3.6 Ảnh hưởng BTVHMTHV hoạt độ AST ALT 37 Bảng 3.7 Ảnh hưởng BTVHMTHV lên số albumin bilirubin toàn phần máu 38 Bảng 3.8 Ảnh hưởng BTVHMTHVlên cholesterol toàn phần máu 39 Bảng 3.9 Ảnh hưởng BTVHMTHV lên hàm lượng creatinin máu chuột 40 Bảng 3.10 Tác dụng giảm trọng lượng u hạt tươi (mg/100g) BTVHMTHV45 Bảng 3.11 Tác dụng giảm trọng lượng u hạt khô (mg/100g) BTVHMTHV 46 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 0.1 Sơ đồ nghiên cứu độc tính cấp 28 Sơ đồ 0.2 Sơ đồ nghiên cứu độc tính bán trường diễn 30 Sơ đồ 0.3 Sơ đồ nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn 31 51 có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Hàm lượng huyết sắc tố máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu hàm lượng huyết sắc tố lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Số lượng hematocrit máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu số lượng hematocrit lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Thể tích trung bình hồng cầu máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu thể tích trung bình hồng cầu lơ trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Số lượng bạch cầu máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu số lượng bạch cầu lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Số lượng tiểu cầu máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu số lượng tiểu cầu lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có 52 khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Như vậy, thuốc viêm họng mạn tính HV khơng làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức tạo máu (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, số lượng tiểu cầu) so với lô chứng 4.2.3 Chức gan Trong thể gan quan đảm nhận nhiều chức quan trọng Khi đưa thuốc vào thể gây độc với gan, làm ảnh hưởng đến chức gan Vì vậy, đánh giá độc tính thuốc, nghiên cứu ảnh hưởng thuốc chức gan cần thiết 4.2.3.1 Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan Để đánh giá mức độ tổn thương tế bào gan, định lượng nồng độ enzym có nguồn gốc gan có huyết Sự tăng nồng độ enzym thường gắn liền với độc tính thuốc hủy hoại tế bào gan ALT enzym có nhiều gan, chúng khu trú bào tương tế bảo nhu mô gan Khi tổn thương hủy hoại tế bào gan, nồng độ ALT tăng cao Khác với ALT, đa số AST khu trú ty thể, 1/3 AST khu trú bào tương tế bào Khi tổn thương tế bào gan mức độ tế bào, AST ty thể giải phóng ngồi Vì vậy, viêm gan thuốc nói chung nồng độ ALT tăng cao AST Hoạt động AST chuột sau uống thuốc: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan hoạt động AST lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Hoạt động ALT chuột sau uống thuốc: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan hoạt động ALT lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) 53 khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Kết cho thấy, thuốc viêm họng mạn tính HV khơng gây hủy hoại tế bào gan (hoạt động AST, hoạt động ALT) so với lô chứng, 4.2.3.2 Nồng độ albumin, bilirubin cholesterol toàn phần Chức gan biểu qua khả tổng hợp khả tiêt chất Chức tổng hợp gan đánh giá qua albumin – loại protein huyết tương tổng hợp gan cholesterol Định lượng albumin máu cịn có vai trị chẩn đốn tiên lượng bệnh gan[34] Mặt khác gan tham gia vào trình tổng hợp chuyển hóa lipid Cholesterol thành phần mật, gan tổng hợp Định lượng cholesterol máu để đánh giá chức tổng hợp lipid gan Nồng độ albumin máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức gan nồng độ albumin lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Nồng độ blirubin toàn phần máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức gan nồng độ blirubin tồn phần lơ trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức gan nồng độ cholesterol lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 54 Như vậy, thuốc viêm họng mạn tính HV không làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức gan (nồng độ albumin, bilirubin toàn phần cholesterol toàn phần máu chuột) so với lô chứng 4.2.4 Chức thận Thận quan tiết thể Nhu mô thận dễ bị tổn thương chất nội sinh ngoại sinh Vì vậy, đưa thuốc vào thể, thuốc gây độc, làm tổn thương thận, từ ảnh hưởng đến chức thận Đánh giá chức thận sau dùng thuốc, thường dùng xét nghiệm định lượng creatinin máu Creatinin thành phần đạm máu ổn định nhất, không phụ thuộc vào chế độ ăn thay đổi sinh lý mà phụ thuộc vào khả đào thải thận Khi cầu thận bị tổn thương, nồng độ creatinin máu tăng sớm ure Creatinin máu tiêu tin cậy quan trọng dùng để đánh giá theo dõi chức thận Nồng độ creatinin máu chuột: Sau 14 ngày 28 ngày uống thuốc viêm họng mạn tính HV, xét nghiệm đánh giá chức thận nồng độ creatinin lô trị (uống BTVHMTHV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày) lô trị (uống BTVHMTHV liều gấp lần lâm sàng 34,86 g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Bài thuốc viêm họng mạn tính HV khơng làm thay đổi kết xét nghiệm nồng độ creatinin máu chuột sau 28 ngày uống thuốc thử liên tục so với lô chứng 4.2.5 Tổn thương đại thể quan Giải phẫu đại thể vi thể gan, lách, thận số bắt buộc đánh giá độc tính bán trường diễn theo hướng dẫn WHO Hơn xét nghiệm vi thể tiêu chuẩn vàng để đánh giá tổn thương quan chịu trách nhiệm chuyển hóa thải trừ thuốc Trên tất chuột thực nghiệm (cả lô chứng lô trị), khơng quan sát thấy có thay đổi bệnh lý mặt đại thể quan tim, phổi, gan, lách, tụy, thận hệ thống tiêu hóa chuột 55 Không gây tổn thương mặt hình thể quan sát đại thể quan chuột so với lô chứng 4.2.6 Cấu trúc vi thể gan, lách, thận 4.2.6.1 Cấu trúc vi thể gan +Lơ chứng: 3/3 mẫu bệnh phẩm gan có cấu trúc bình thường +Lơ trị (uống BTVHMTHV 11,62 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm gan có cấu trúc bình thường +Lô trị (uống BTVHMTHV 34,86 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm gan có cấu trúc bình thường Bài thuốc viêm họng mạn tính HV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày liều gấp liều lâm sàng 34,86 g/kg/ngày không làm ảnh hưởng đến cấu trúc vi thể gan chuột 4.2.6.2 Cấu trúc vi thể lách +Lô chứng: 3/3 mẫu bệnh phẩm lách có cấu trúc bình thường +Lô trị (uống BTVHMTHV 11,62 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm lách có cấu trúc bình thường +Lơ trị (uống BTVHMTHV 34,86 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm lách có cấu trúc bình thường Bài thuốc viêm họng mạn tính HV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày liều gấp liều lâm sàng 34,86 g/kg/ngày không làm ảnh hưởng đến cấu trúc vi thể lách chuột 4.2.6.3 Cấu trúc vi thể thận +Lô chứng: 3/3 mẫu bệnh phẩm thận có cấu trúc bình thường +Lơ trị (uống BTVHMTHV 11,62 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm thận có cấu trúc bình thường +Lơ trị (uống BTVHMTHV 34,86 g/kg/ngày): 3/3 mẫu bệnh phẩm thận có cấu trúc bình thường Bài thuốc viêm họng mạn tính HV liều tương đương lâm sàng 11,62 g/kg/ngày liều gấp liều lâm sàng 34,86 g/kg/ngày không làm ảnh hưởng đến cấu trúc vi thể thận chuột 56 Giải phẫu đại thể vi thể gan, lách, thận số bắt buộc đánh giá độc tính bán trường diễn theo hướng dẫn WHO Hơn xét nghiệm vi tiêu chuẩn vàng để đánh giá tổn thương quan chịu trách nhiệm chuyển hóa thải trừ thuốc Trên tất chuột nghiên cứu, không quan sát thấy có thay đổi bệnh lý mặt đại thể quan Hình ảnh vi thể gan khơng có khác biệt lơ chứng lơ nghiên cứu Hình ảnh vi thể lách khơng có khác biệt lơ chứng lơ nghiên cứu Hỉnh ảnh vi thể thận bình thường tất lơ chuột Điều lý giải tất vị thuốc dùng thuốc nghiên cứu vị thuốc y học cổ truyền sử dụng từ lâu đời, để điều trị nhiều bệnh khác Các vị thuốc sử dụng thực tế cho thấy không gây tác dụng không mong muốn lâm sàng Kết nghiên cứu khẳng định thêm an toàn thuốc nghiên cứu Phí Ngọc Thuận (2012) nghiên cứu tính an tồn thuốc “Hoạt huyết bổ máu Đại Bắc” cho thấy: Không xác định LD50, thuốc không làm thay đổi chức gan, thận cấu trúc vi thể giải phẫu bệnh chuột nghiên cứu[44] Trần Thái Hà (2012) nghiên cứu tính an tồn tác dụng điều trị thuốc Thân thống trục ứ thang điều trị đau thần kinh tọa thoát vị đĩa đệm cho thấy thuốc không xác định độc tính cấp bán trường diễn, khơng gây ảnh hưởng lên cấu trúc vi thể gan thận thỏ thực nghiệm[45] Nguyễn Thị Thanh Tú (2016) nghiên cứu tính an tồn viên nang cứng Hồng Kinh điều trị viêm khớp dạng thấp cho kết quả: Hoàng Kinh liểu 620,25g dược liệu/kg thể trọng chuột (liểu tối đa chuột uống – gấp 64,61 lần liểu dùng người) không xác định LD50 Độc tính bán trường diễn: Hồng Kinh liểu 3,2g 9,6g/kg thể trọng (gấp lần liểu lâm sàng) uống tuần liên tục không gây biến đổi số huyết học, hóa sinh, hình thái đại thể vi thể gan thận thỏ so với lô chứng (p>0,05)[46] Vũ Việt Hằng (2016) nghiên cứu tính an tồn “Giáng tiêu khát linh” cho thấy: Liểu uống tối đa mà chuột chịu 53,57g cốm/1 kg thân trọng thỏ, gấp 24,8 liều dùng người, khơng có độc tính cấp chưa xác định 57 LD50 Giáng tiêu khát linh liểu 0,54g/kg/ngày 1,62 g/kg/ngày, uống liên tục tuần khơng gây độc tính bán trường diễn chức tạo máu, chức hình thái mơ bệnh học gan thận thỏ[47] Nghiên cứu Lai Thanh Hiền (2015) thuốc cốm “Tiền liệt HC” chứng minh thuốc khơng gây độc tính bán trường diễn thỏ liểu uống 8,4g dược liệu/kg/ngày liểu cao gấp lần (25,2g dược liệu/kg/ngày) 12 tuần liên tục[37] Năm 2016, Đỗ Quốc Hương tiến hành đánh giá độc tính bán trường diễn viên nang Lipidan điều trị hội chứng rối loạn lipid máu cho kết quả: Lipidan liểu 0,3g/kg/giờ (liều có tác dụng tương đương người) liều cao gấp lần (1,5g/kg/giờ), uống liên tục tuần không thấy thay đổi tình trạng, chức sinh hóa gan, thận chức tạo máu[23] Trần Minh Hiếu (2016) nghiên cứu độc tính bán trường diễn viên nang Hoạt huyết an não cho kết quả: Thỏ uống liều 0,36g/kg thể trọng (tương đương liều dùng lâm sàng) liều 1,08g/kg thể trọng (gấp lần liều dùng lâm sàng), vịng tuần Hoạt huyết an não khơng gây độc tính bán trường diễn, khơng ảnh hưởng đến quan tạo máu, chức gan thận thỏ Các số cân nặng, tình trạng chung thỏ hồn tồn bình thường[22] Trần Thị Hải Vân (2016) nghiên cứu độc tính bán trường diễn sói rừng thực nghiệm cho thấy: so với nhóm chứng, cốm sói rừng liều 0,6g 3g/kg thể trọng (gấp lần liều lâm sàng) uống tuần liên tục gây biến đổi hình thái vi thể gan thỏ với mức độ khác nhau, làm tăng hoạt động AST, ALT huyết (p0,05)[21] 4.3 TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM MẠN CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV Mơ hình gây u hạt thực nghiệm amiant Meier cộng mô tả, áp dụng từ năm 1950 Ducrot, Julou phát triển hoàn thiện 58 Các tác nhân gây viêm trơ bông, amiant khơng có khả tiêu q trình viêm, thể phản ứng cách tập trung nhiều loại tế bào xung quanh dị vật tạo thành u hạt Khi triệu chứng xuất sớm phản ứng viêm giảm đi, ổ kích ứng bị xâm nhiễm tế bào di động từ máu mô liên kết kề bên tới, tế bào mô lưới Chúng tạo thành khối tế bào non hoạt động làm nhiệm vụ: Nhiệm vụ thực bào tập hợp xung quanh vùng hoại tử vật lạ, chúng gây nên tăng sinh nguyên bào sợi tạo thành mô hạt Tác dụng chống viêm mạn đánh giá mơ hình gây u hạt chuột cống trắng Toàn chuột cấy hạt amiant vơ khuẩn vào da có hình thành tổ chức u hạt (granuloma tissue) bao quanh hạt aminant Mơ hình gây u hạt thực nghiệm xem mơ hình tin cậy để đánh giá tác dụng suy giảm chức đại thực bào hình thành u hạt, dùng cho đánh giá tác dụng thuốc ức chế chống lại hoạt hóa (activation), thâm nhiễm (infiltration) kết tập (aggregation) đại thực bào, chống lại trình hình thành tổ chức u hạt viêm mạn Đây vấn đề có vai trị trung tâm việc hình thành, trì phát triển u hạt nhiều tình trạng bệnh Mơ hình đánh giá u hạt tươi u hạt khô U hạt khô xác định sau sấy u hạt tươi đến khối lượng khơng đổi, loại bỏ hồn tồn yếu tố dịch viêm tổ chức hạt, xác định xác khối lượng viêm xơ tổ chức hạt U hạt tươi, ngồi khối lượng viêm xơ cịn có yếu tố dịch viêm tổ chức hạt, phản ánh phần hoạt hóa (activation), thâm nhiễm (infiltration) kết tập (aggregation) đại thực bào Nhóm nghiên cứu chọn prednisolon thuốc tham chiếu Đây glucorticoid có tác dụng chống viêm thơng qua chế: làm giảm số lượng tế bào lympho, bạch cầu toan, bạch cầu đơn nhân máu ngoại biên giảm di chuyển vào vùng bị viêm, ức chế chức tế bào lympho, đại thực bào mơ Ngồi ra, prednisolon cịn giảm đáp ứng viêm giảm tổng hợp prostaglandin ức chế phospholipase A2, tăng nồng độ lipocortin, giảm tính mao mạch 59 Kết thực nghiệm cho thấy cao chiết nước BTVHMTHV liều 11,62 g/kg/ngày (liều dự kiến có tác dụng) liều 23,24 g/kg/ngày (gấp đơi liều 1) làm giảm khối lượng u hạt so với lô chứng (p 0,05) cần nghiên cứu đánh giá thêm Kết cho thấy cao chiết nước thuốc viêm họng mạn tính HV liều 11,62 g/kg/ngày liều 23,24 g/kg/ngày có tác dụng ức chế phát triển u hạt tương đương với prednisolon liều 5mg/kg/ngày (p > 0,05) Kết phù hợp với đặc tính chống viêm vị thuốc thành phần xem kết phối kết hợp hợp lý vị thuốc thành phần để tạo tác dụng tác dụng chống viêm với hiệu rõ rệt Một số nghiên cứu tác giả công bố khẳng định tác dụng chống viêm dược liệu thành phần Tectorigenin tách chiết từ thân rễ Xạ can có tác dụng giảm đau rõ rệt liều 100 mg/kg cân nặng chuột nhắt Với liều 60 mg/kg cân nặng chuột cống, tectorigenin có tác dụng chống viêm cấp mạn[20] Trầu khơng vị thuốc dân gian dùng để sát trùng, chống lở loét, chống viêm nhiễm [35] Trong nghiên cứu này, tác dụng chống viêm tập trung vào đánh giá tác dụng chống viêm mạn, thể thông qua tác dụng làm tăng khả ức chế tạo u hạt chuột, với mục tiêu đánh giá tác dụng liên quan lâm sàng điều trị viêm họng mạn tính Các biểu chống viêm khác thuốc cần nghiên cứu sâu 60 KẾT LUẬN VỀ TÍNH AN TỒN CỦA BTVHMTHV 1.1 Độc tính cấp: Chưa tìm thấy LD50 thuốc viêm họng mạn tính HV theo đường uống cht nhắt trắng Với liều cao cho chuột uống 249,0 g/kg thể trọng khơng có chuột chết, khơng có biểu độc tính, chứng tỏ thuốc viêm họng mạn tính HV có tính an tồn cao 1.2 Độc tính bán trường diễn Trên lơ chuột cống trắng cho uống cao chiết nước thuốc viêm họng mạn tính HV liều 11,62g/kg/ngày (tương đương liều điều trị quy đổi từ liều người sang liều chuột cống trắng), liều 34,86 g/kg/ngày, liên tục 28 ngày, cho thấy: - Tình trạng chung gồm hoạt động, ăn uống, tình trạng lơng, da, niêm mạc, chất tiết chuột bình thường - Khơng gây ảnh hưởng đến phát triển cân nặng chuột - Không làm thay đổi số huyết học (số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, nồng độ huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu) - Khơng làm thay đổi tiêu sinh hóa máu bao gồm hoạt độ enzym AST, ALT, Bilirubin toàn phần, Albumin, Creatinin Cholesterol tồn phần - Khơng gây tổn thương mô bệnh học gan, lách, thận Như thuốc viêm họng mạn tính HV an tồn mức liều dùng thời gian sử dụng uống 28 ngày liên tục nghiên cứu thực nghiệm chuột cống trắng VỀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM MẠN CỦA BTVHMTHV Cao chiết nước thuốc viêm họng mạn tính HV liều 11,62g/kg/ngày thể tác dụng chống viêm mạn mơ hình gây viêm mạn chuột cống trắng amian, có ý nghĩa thống kê so với lô chứng gây bệnh không dùng thuốc, tương đương so với Prednisolon liều 5mg/kg/ngày Cao chiết nước thuốc viêm họng mạn tính HV liều 23,24g/kg/ngày thể tác dụng chống viêm mạn mơ hình gây viêm mạn chuột cống trắng amian, có ý nghĩa thống kê so với lô chứng gây bệnh không dùng thuốc, tương đương so với Prednisolon liều 5mg/kg/ngày 61 KIẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu thu đưa khuyến nghị tiếp tục nghiên cứu đánh giá sâu tác dụng chống viêm thực nghiệm tiến hành nghiên cứu lâm sàng để qua áp dụng chế phẩm rộng rãi lâm sàng an toàn hiệu TÀI LIỆU THAM KHẢO Ngô Ngọc Liễu (2000), Sinh lý niêm mạc đường hô hấp ứng dụng, Nội san tai mũi họng, tập 1, tr 68 - 74 Ngô Ngọc Liễu (2001), Giản yếu tai mũi họng tập 3, Nhà xuất Y học Nguyễn Nhược Kim (2011), Lý luận Y học cổ truyển, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam Bộ Y Tế, Hướng dẫn chẩn đoạn điều trị số bệnh tai mũi họng, Nhà xuất Y học, tr 159-161 Phạm Xuân Sinh (1988), Góp phần nghiên cứu Cóc mẳn – vị thuốc nam chữa ho, Tạp chí YHCT số 43 Phạm Xuân Sinh cộng (1995), Nghiên cứu phương thuốc cổ truyền”Nhị trần thang gia giảm”, Báo cáo hội nghị khoa học YHCT, tr 79;82 Đỗ Việt Hương (1997), Nghiên cứu tác dụng thuốc khái theo phân loại YHCT ứng dụng lâm sàng, luận văn thạc sỹ y học trường Đại học Y Hà Nội Phạm Khánh Hòa, Tai mũi họng, Nhà xuất giáo dục Việt Nam, tr.99 Trường đại học Y Hà Nội, Bài giảng Mắt – Tai mũi họng, Nhà xuất Y học, tr 190 10 Phan Minh Tuấn, Các bệnh Tai – Mũi Họng, Nhà xuất Thanh Hóa, tr 139 11 Nguyễn Cơng Đức, Phịng chữa bệnh Ngũ Quan, Nhà xuất Văn hóa Thơng tin, tr 122 12 Vũ Hải Long, Tìm hiểu & Phịng trị bệnh Tai Mũi Họng, Nhà xuất Y học,tr 303 13 A-G-LICATREP, Cẩm nang Tai mũi họng, Nhà xuất Y học, tr 54-55 14 Nguyễn Ngọc Dinh, Lâm sàng Tai mũi họng, Nhà xuất Y học, tr 284 15 Trần Thúy, Bệnh ngũ quan Y học cổ truyền, Nhà xuất Y học, tr69 16 Trường đại học Y Hà Nội, Bệnh ngũ quan Y học cổ truyền, Nhà xuất Y học, tr 77 – 80 17 Lê Hòa, Chữa bệnh nhà bệnh Ngoại khoa thường gặp, Nhà xuất Văn hóa thơng tin, tr 165 18 Phùng Minh Lương (2009), Nghiên cứu tỷ lệ viêm mũi họng cộng đồng dân tộc Ê đê – Tây Nguyên, Tạp chí Y học thực hành năm 2009 số tập 675, tr 66 – 68 19 Đỗ Thị Phương (1996), Hiện trạng sử dụng thuốc YHCT số cộng đồng nông thôn miền Bắc Việt Nam, Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học năm 1996 viện YHCT Việt Nam 1996, tr 205 20 Đỗ Thị Thanh Huyền (2016), Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hai lồi sâm đại hành (Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb) Xạ can (Belamcanda chinensis (L.) DC.), Luận án tiến sỹ hóa học, Học viện Khoa học Công nghệ, VAST 21 Trần Thị Hải Vân (2016), Nghiên cứu tính an tồn tác dụng kháng u sarcoma 180 cốm sỏi rừng Sarcandra Glabra (Thunb) Nakai thực nghiệm, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 22 Trần Minh Hiếu (2016), Đánh giá tác dụng viên nang Hoạt huyết an não bệnh nhân nhồi máu não, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 23 Đỗ Quốc Hương (2016), Nghiên cứu độc tính hiệu điều trị viên nang Lipidan điều trị hội chứng rối loạn lipid máu, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 24 Nguyễn Thị Ngọc Dinh (2006), Cẩm nang chữa chứng bệnh tai mũi họng, NXB Y học 25 Nguyễn Quang Trung cs (2006), Tình hình sử dụng thuốc cho bệnh hô hấp cấp nhà thuốc tây quận thành phố Hồ Chí Minh, Y học thực hành, số 26 Hoàng Duy Tân, Trần Văn Như (1995), Tuyển tập phương thang Đông Y, Nhà xuất Đồng Nai 27 Tuệ Tĩnh (1996), Nam dược Thần Hiệu, Nhà xuất Y học, tr 180 28 Lê Hữu Trác (1998), Hải thượng y tông tâm lĩnh, Nhà xuất Y học 29 Đỗ Trung Đàm (1996) Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội 30 Hoàng Bảo Châu Phạm Thị Lý (1995), Đánh giá tác dụng chữa ho trẻ em thuốc “Bổ phế khái lộ” xí nghiệp liên hiệp dược Hà Nam sản xuất, Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học năm 1996, Viện YHCT TƯ, tr 177 – 178 31 Bộ Y tế, Dược điểm Việt Nam, Nhà xuất Y học 32 Trần Văn Ơn, Lê Đình Bích (2007), Thực vật học, Nhà xuất Y học 33 Bộ Y tế, Dược học cổ truyền, Nhà xuất Y học 34 Đào Xuân Vinh (2008), Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hóa, Nhà xuất Y học 35 Đỗ Tất Lợi (2006), Những vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học 36 Phạm Thị Bích Thảo (2007), Góp phần nghiên cứu tác dụng sinh học vị thuốc Xạ can bệnh viêm họng, Khóa luận dược sĩ trường Đại học Dược Hà Nội 37 Lai Thanh Hiền (2015), Nghiên cứu độc tính hiệu cốm “Tiền liệt HC” điều trị tăng sinh lành tính tuyền liệt tuyến, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 38 Nguyễn Trần Thị Giáng Hương (2003), Nghiên cứu độc tính cấp tác dụng dược lý Cốt khí củ, Tạp chí Y học thực hành, 1, 35 – 38 39 Đào Văn Phan, Nguyễn Ngọc Xuân, Nguyễn Thị Bích Thu (2003), Nghiên cứu độc tính bán trường diễn Thổ phục linh (Smilax Glabra Roxb, Lilia) thỏ, Tạp chí nghiên cứu Y học, 24 (4), 15 – 19 40 Bùi Thanh Hà (2012), Nghiên cứu hiệu điều trị bệnh nhân tăng huyết áp nguyên phát thuốc HA-02, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Y học cổ truyền Quân Đội 41 Lương Xuân Hưng (2016), Nghiên cứu độc tính cấp, tác dụng chống viêm giảm đau cao lỏng TK1 thực nghiệm, Luận văn Thạc sĩ Y học, Học viện Y dược học cổ truyền Việt Nam 42 Huỳnh Thanh Ân, Nguyễn Hoàng Ngân, Trần Quốc Bảo (2017), Nghiên cứu độc tính cấp bán trường diễn thuốc “Hạ áp-01’ động vật thực nghiệm, Tạp chí Y dược học quân sự,2 (2017), tr – 16 43 Đỗ Trung Phấn (2013), Kỹ thuật xét nghiệm huyết học truyền máu ứng dụng lâm sàng, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 46 – 49 44 Phí Ngọc Thuận (2012), Đánh giá tác dụng “Hoạt huyết bổ máu Đại Bắc” điều trị thiếu máu não mạn tính, Luận văn Thạc sỹ Y học, Học viện Y dược học cổ truyền Việt Nam 45 Trần Thái Hà (2012), Nghiên cứu thuốc Thân thống trục ứ thang thực nghiệm tác dụng điều trị hội chứng thắt lưng hơng vị đĩa đệm, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 46 Nguyễn Thị Thanh Tú (2016), Nghiên cứu tính an toàn tác dụng viên nang cứng hoàng kinh điều trị viêm khớp dạng thấp, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 47 Vũ Việt Hằng (2016), Nghiên cứu tác dụng chế phẩm ‘Giáng tiêu khát linh” điều trị rối loạn lipid máu động vật đái tháo đường type thực nghiệm, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 48 World Health Organization (2013), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization 49 Tran Ba Huy (1997), ORL, Paris, ellipse 448 – 453 50 D Ayaches (1997), Angines aigues, EMC Oto-rhhino-laryngologie 51 Bonfils (1996), Pathologie ORL et cervico-faciale Paris, ellipse 321 – 329 52 Fuller R.W, Cough in Respiratory medicine, W.B saunderd comany London 1995 volum 1, tr 242,238 53 Boies (1978), Anatomy and physiology of the oral cavity, pharyns and neck, boies’s fundamentals of otolaryngology, W B Saunders company, p.439-444 54 Gerhard Vogel Hans (2012), Drug discovery and evaluation Pharmacological assays, Springer 55 OECD (2001), Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation, acute oral toxicity, Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assessment, No 19 ... cứu độc tính bán trường diễn 2.3.2 Đánh giá tác dụng chống viêm mạn thuốc viêm họng mạn tính HV Tác dụng chống viêm mạn thuốc viêm họng mạn tính HV đánh giá chuột cống trắng g? ?y u hạt thực nghiệm. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM ĐÀO XUÂN KỲ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM CỦA BÀI THUỐC VIÊM HỌNG MẠN TÍNH HV TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Y. .. hong mạn tính HV Đánh giá tác dụng chống viêm mạn thuốc viêm họng mạn tính HV thực nghiệm 3 Chương TỔNG QUAN 1.1 VIÊM HỌNG MẠN TÍNH THEO QUAN ĐIỂM Y HỌC HIỆN ĐẠI 1.1.1 Giải phẫu họng Họng ống