Tiểu luận Gốc tự chất chống oxy hóa

Trường Đại học Dược Hà Nội Bộ mơn Hóa Đại cương-Vô Tiểu luận Gốc tự chất chống oxy hóa Mã bài: Họ tên: Nguyễn Văn Khanh, Mã HV 1411042, Lớp cao học 19 Hà Nội, tháng 6/2015 I-PHẦN CHỦ ĐỀ BẮT BUỘC Selenium hoạt động bảo vệ chống lại Aflatoxin B1 ảnh hưởng xấu tới Drosophila melanogaster TĨM TẮT Mục đích nghiên cứu để điều tra ảnh hưởng AFB1 AFB1 + Se4+ vào giai đoạn phát triển khác ruồi giấm thường (Drosophila melanogaster) nghiên cứu Cả hai nồng độ khác AFB1 Se4+ kết hợp với AFB1 cho ruồi ăn suốt giai đoạn phát triển chúng (trứng, ấu trùng nhộng) Khi kiểm soát hệ cháu F1 ứng với nhóm so sánh với nhau, AFB1 phát làm tăng trình biến thái giảm tổng số Nhưng, ảnh hưởng bất lợi bị ức chế điều trị với selenium hai nồng độ khác (4,0 8,0 ppm) Những kết cho thấy selenium có hiệu việc ức chế AFB1-gây rối loạn giai đoạn phát triển Drosophila melanogaster MỞ ĐẦU Aflatoxin nhóm sản sinh tự nhiên, mycotoxin độc tính cao có chứa gốc dihydrobisfuran đặc trưng cấu trúc phân tử chúng Các chất chuyển hóa nấm sản xuất chủng, cụ thể Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus, thường tìm thấy chất gây ô nhiễm hàng loạt thực phẩm Hình thức phổ biến độc tố aflatoxin aflatoxin B1 (AFB1), chứng minh tác nhân mạnh gây ung thư gây quái thai số lồi động vật thí nghiệm (Wogan,1973; Garner Martin, 1979; Garner, 1980; Busby Wogan, 1985).Những tác dụng sinh học bất lợi AFB1 biểu sau chuyển hóa dạng hoạt hóa vàtương tác với đại phân tử tế bào (Wogan, 1973; Garner Martin, 1979; Garner, 1980; Essigman et al., 1982).Một số yếu tố tự nhiên thực phẩm tiêu dùng chứng minh làm thay đổi phản ứng quan trọng AFB1, tức kích thích sản xuất kháng thể tương tác với DNA (Bhattacharya et al., 1984) Chúng bao gồm vitamin, nguyên tố vi lượng, acid béo, flavonoid, acid phenolic hợp chất khác Người ta cho chất chống lại tác hại sinh học AFB Một số nghiên cứu chứng minh rằngchế độ ăn uống có selenium cho tác dụng bảo vệ chống lại độc tính AFB1 số lồi động vật.Newberne Conner (1974) có báo cáo cho việc bổ sung selenium lên đến 1.00 Ppm chế độ ăn kiêng làm giảm độc tính AFB1 chuột, tỷ lệ tử vong quan sát lại tăng lên Các nghiên cứu bắt đầu để thử nghiệm ý tưởng cho thấy selenvà số nguyên tố vi lượng có khả đặc biệt để sửa đổi vi thể kích hoạt gây đột biến qua trung gian AFB1 chủng Salmonella typhimurium TA100 TA98 (Francis et al., 1988) Selenium vi chất dinh dưỡng thiết yếu chế độ ăn động vật có vú thiếu hụt nguyên tố vi lượng yếu tố gây nhiều bệnh lý nghiêm trọng (Diplock, 1981) Ngày có nhiều chứng selenium hoạt động tác nhân chống ung thư ức chế khối u khởi phát giai đoạn tiến triển (Horvath Ip, 1983; Darodo et al,.1985; Milner, 1985) Các nghiên cứu dịch tễ học cho thấy mối quan hệ nghịch đảo nguy ung thư chế độ ăn uống mức độ hàm lượng selen bề mặt địa lý Các nghiên cứu động vật thí nghiệm cho thấy selenium mà có hiệu việc ức chế ung thu biểu mô tế bào gan AFB1 gây (Baldwin Parker, 1987; Yu et al, 1988 Lei et al., 1990) Tác dụng bảo vệ chứng minh vài nghiên cứu sau với lợn gà tây (Burguera et al., 1983; Davila et al., 1983) Theo quan điểm chứng minh tác dụng bảo vệ chống lại độc tính cấp AFB1 tác dụng chống ung thư nghiên cứu selenium thực Chen cộng để điều tra ảnh hưởng có selen vitamin E số mặt trao đổi chất AFB1 chuột gà (Chen et al, 1982a; Chen et al, 1982b) Kết họ cho việc kết hợp thiếu hụt vitamin E selenium làm tăng cường aflatoxin liên kết với DNA RNA gan chuột Tuy nhiên, hiệu bảo vệ selenium có tác dụng làm giảm quái thai ảnh hưởng AFB1 số giai đoạn phát triển ruồi giấm thường chưa làm sáng tỏ Mục đích nghiên cứu để xem selenium có tác dụng bảo vệ chống lại tác dụng phụ ảnh hưởng AFB1 lên ruồi giấm thường VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Những ruồi sử dụng thí nghiệm tiểu bang Oregon khu vực hoang dã thuộc chủng ruồi giấm thường Meigen ( Họ: Drosophilidae) Chúng trì qua nhiều năm lọ ni cấy, đó, di truyền biến thể lai giống Mơi trường thí nghiệm mơi trường yeast agar – sugar ( Mẫu môi trường nuôi cấy ruồi giấm: SDM) Những ruồi trưởng thành lâu năm ni cấy chai có chứa SDM Tất thí nghiệmđược thực 25 oC độ ẩm tương đối 4060% Các chất thử nghiệm, aflatoxin B1dạng kết tinh (AFB1, Acros Organics,No:227.340.100, New Jersey,Mỹ), hòa tan dung dịch dimethyl sulfoxide 10% (DMSO, Sigma-Aldrich Laborchemikalies GmbH) Một dung dịch natri selenite (4.0 8.0ppm) chuẩn bị cách thêm Na2SeO3 (Sigma Chemical Co., St Louis, MO) vào nước cất thí nghiệm chúng tôi, hệ cha mẹ ruồi giấm thườngmđược điều trị nhiều nồng độ hai AFB1 (0,2, 0,5 0,8 ppm AFB1 / ml SDM) sodium selenite (4.0 8.0 ppm Se 4+ / ml SDM) Để kiểm tra đáp ứng AFB1 AFB1 + Se4+ phát triển ruồi giấm nuôi cấy môi trường khác nhau, thể Bảng Tất sử dụng thí nghiệm đồng trinh Những ruồi độ tuổi sử dụng cho thí nghiệm bảy cặp giao phối Sau đó, giai đoạn phát triển sau ngày Con tính hàng ngày từ ngày từ chui khỏi trứng kiểu hình bất thường F1 soi kính hiển vi quan sát Phân tích thống kê liệu thực cách sử dụng kiểm định đa khoảng Duncan Bảng 1: Các thành phần môi trường nuôi cấy khác sử dụng cho nghiên cứu KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Ảnh hưởng AFB1 AFB1 + Se4+ giai đoạn phát triển D melanogaster thể Bảng Trong phịng thí nghiệm 25 ± oC, chu kỳ sống (trứng-trưởng thành) ngày (Uysal v Bahỗeci, 1995; Uysal et al, 2002) Trong iu khiển (C), C + DMSO (Medium I) tất nhóm thực nghiệm đẻ trứng quan sát thấy ngày thứ hai giao phối Trong kiểm soát Medium I, trưởng thành chui từ nhộng vào ngày thứ giao phối Nhưng có mặt 0.2, 0.5 0.8 ppm AFB (Medium II, III IV), nhiều giai đoạn bị kéo dài Ở nồng độ AFB đó, đứa F1 phát vào ngày thứ 10, 11, 13 tương ứng Bảng 2- Quá trình phát triển trứng – trưởng thành sau đưa liều AFB1+ Se4+ Mặt khác, kết thú vị thu giai đoạn phát triển D melanogaster quan sát thấy ngày điều kiện (C) cộng với việc ứng dụng Se 4+(Medium VX) Bảng 2, hai 4,0 8,0 ppm Se ngăn cản tác động tiêu cực AFB vào giai đoạn phát triển giai đoạn kết thúc theo pha thông thường ngày Các kết tương tự nghiên cứu trước Ví dụ, Lalor et al., (1976) thấy tốc độ tăng trưởng kênh AFB D.melanogaster gây kéo dài trình trứng-trưởng thành Hiệu ứng độc ấu trùng nhộng AFB gây chứng minh tác giả khác Musca domestica (Beard Walton, 1971) D.melanogaster (Kirk et al., 1971) Bên cạnh đó, theo Chinnici et al., (1979), ấu trùng thứ hai thứ ba dòng A-9 cho thấy tỷ lệ tử vong cao sinh trưởng 0.88 ppm AFB Ở nồng độ 0,88 ppm, dòng A-9 A-11, tỷ lệ tử vong cao với ấu trùng non, ấu trùng A-9 chết nhiều so với ấu trùng A-11 Kết tương tự thu áp dụng mycotoxin rubratoxin B, Patulin diacetoxyscirpenol (Reis, 1975) Tổng số lai (F1 cho hệ cháu) aflatoxin B1 điều trị D.melanogaster bị ảnh hưởng tất nhóm ứng dụng (Medium II, III IV) chất độc (Bảng 3) Tác dụng ức chế tối đa tạo nồng độ độc tố cao (0,8 ppm / ml, Medium IV) Theo bảng khác biệt nhóm dùng (2305) DMSO khơng có ý nghĩa thống kê (P