Hiểu Biết Về Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics (Lợi Khuẩn

Hệ Vi Khuẩn Pro-/Prebiotics Makrides M, Ochoa JB, Szajewska H (eds): The Importance of Immunonutrition Nestlé Nutr Inst Workshop Ser, vol 77, pp 75–90, (DOI: 10.1159/000351388) Nestec Ltd., Vevey/S Karger AG., Basel, © 2013 Hiểu Biết Về Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics (Lợi Khuẩn) Bruno Pot ã Benoợt Folignộ ã Catherine Daniel ã Corinne Grangette Phịng thí nghiệm vi khuẩn acid lactic tính miễn dịch niêm mạc, Trung tâm nghiên cứu nhiễm khuẩn miễn dịch Lille, Viện Pasteur de Lille, INSERM U1019 - CNRS UMR 8204 - Đại học Lille Nord de France, Lille, Pháp Tóm Tắt Hệ vi sinh vật đường ruột biết đến động lực cho phát triển trì hệ miễn dịch Trong thay đổi quan trọng thành phần hệ vi sinh ảnh hưởng đến tính miễn dịch thời gian dài, thay đổi khơng thường xun ngắn hạn nhận thấy Việc nhận thay đổi ngắn hạn mở triển vọng lớn cho việc sử dụng can thiệp dinh dưỡng, hướng đến việc điều chỉnh tính miễn dịch theo hướng mong muốn Probiotics thảo luận cách khả thi để đạt mục tiêu Có vẻ tác động không đặc trưng cho chủng chuyên biệt, mà phụ thuộc vào nhiều yếu tố môi trường làm cho hệ thống miễn dịch dễ tiếp nhận không bị ảnh hưởng việc đưa vào chủng probiotic Các tương tác probiotic, mặt khác tương tác probiotic tế bào ruột tế bào miễn dịch, tác động qua lại phức tạp, qua trung gian chế đơn lẻ Vì thế, điều hịa miễn dịch thông qua dinh dưỡng tượng phức tạp cần có xem xét cẩn thận, cần tìm hiểu tính miễn dịch, biết rõ chế hoạt động probiotic Chỉ đạt điều sau thực thử nghiệm lâm sàng thích hợp, với liệu thiết lập thích hợp, để chứng minh tính hiệu chủng/hỗn hợp riêng biệt Bản quyền thuộc Nestec Ltd 2013, Vevey/S Karger AG, Basel Mở Đầu Các tác động probiotic cho hoạt tính hệ vi sinh, trao đổi chất miễn dịch Mặc dù hầu hết tác động nghiên cứu phịng thí nghiệm, chúng bị ảnh hưởng nặng nề điều kiện môi trường (ở miệng, ruột, âm đạo), lối sống (thuốc, chế độ ăn uống, stress, vệ sinh) tình trạng vật chủ (cơ sở di truyền, trẻ sơ sinh so với người trưởng thành cao tuổi; khỏe mạnh hay bệnh tật) Do đó, việc sàng lọc phịng thí nghiệm (in vitro) chủng có đặc tính probiotic mong muốn cần kiểm định thể (in vivo) phân tích cuối thử nghiệm lâm sàng nhằm hướng tới dân số xác định rõ ràng Vì việc kiểm định lâm sàng tốn thời gian, việc lựa chọn chủng thích hợp vào giai đoạn nguồn chọn chủng quan trọng Tầm Quan Trọng Việc Điều Hòa Miễn Dịch Viêm, nhiều trường hợp, phản ứng tự phát tức thời tổn thương hay nhiễm trùng cấp tính thể Tuy nhiên, nhiều dạng khác tình trạng viêm mạn tính mô tả gây bị gây bệnh lý khác Kể từ lúc triệu chứng ban đầu thường gặp chưa xuất lâm sàng, giai đoạn đầu bệnh hầu hết không ý; thời gian dài vậy, tình trạng viêm mức thấp dẫn đến rối loạn chuyển hóa nghiêm trọng, bệnh qua trung gian miễn dịch chí vấn đề tim hay tâm thần Trong 50 năm qua, chứng kiến gia tăng kinh khủng dạng bệnh lý mạn tính,1 quan sát có liên quan đến thiếu hụt tiếp xúc đầy đủ hệ miễn dịch giai đoạn đầu đời (giả thuyết vệ sinh) [2] Song song với đó, dự án nghiên cứu gần MetaHit [3,4] Dự án Quần thể vi khuẩn Người (http://commonfund.nih.gov/hmp/) cho thấy tầm quan trọng hệ vi sinh nhiều khía cạnh sức khỏe bệnh tật người Nghiên cứu tập trung vào số lượng (nhiều gấp 10 lần số tế bào gấp 150 lần số gien có thể người), [5] chất lượng đa dạng hay khả phục hồi hệ vi sinh6 IBD, đái tháo đường tuýp béo phì Kết là, thành phần hệ vi sinh có liên kết rộng rãi với rối loạn qua trung gian miễn dịch, tương tự suy luận trước giả thuyết vệ sinh Nhiều khả làm ảnh hưởng đến chất lượng hệ vi sinh thông qua dinh dưỡng, trị liệu chí cấy phân mở nhiều triển vọng cho nghiên cứu sâu hơn, không tập trung vào thành phần đa dạng hệ vi sinh, mà vào tiềm điều hòa miễn dịch can thiệp xem xét Vì vậy, việc sử dụng phương pháp chống viêm khả thi, khía cạnh can thiệp vào chế độ ăn uống, gây nhiều ý Một can thiệp bao gồm chủng probiotic thích hợp Trong chương này, tập trung vào số nguồn sàng lọc sẵn có có ích để phân tách chủng có tiềm điều hịa miễn dịch khác nhau, để hỗ trợ việc đưa chế giải thích cho khác biệt quan sát thấy 76 Pot · Foligné · Daniel · Grangette Các Cơ Chế Tham Gia Như đề cập trên, hệ thống miễn dịch động vật có vú bao gồm hoàn chỉnh tế bào miễn dịch phân tử truyền tín hiệu tương tác với vi sinh vật kháng nguyên xung quanh Vì có đến 1014 vi khuẩn, ruột phát triển thành quan miễn dịch Do đó, khơng cịn nghi ngờ cho ruột quan dễ tiếp nhận, thích hợp cho can thiệp dinh dưỡng nhằm thay đổi điều chỉnh đáp ứng miễn dịch vật chủ Dưới đây, mô tả ngắn gọn số chế biết có liên quan đến tương tác vật chủ hệ vi sinh vật Nhiều đánh giá rộng q trình tìm thấy nghiên cứu Delcenserie cộng [7] Lebeer cộng [8] – Khả miễn dịch bẩm sinh cho phép phản ứng nhanh chóng triệt để với kích thích gây tác nhân lây nhiễm Các đáp ứng phản ứng viêm tự nhiên chủ yếu gồm tế bào thực bào (các đại thực bào, bạch cầu trung tính, tế bào giết tự nhiên) – Hệ thống đáp ứng miễn dịch, sau hoạt hóa tế bào trình diện kháng nguyên, huy động tế bào T B đặc hiệu, thông qua việc sản xuất phân tử truyền tín hiệu đặc hiệu (các cytokine, chemokine), hỗ trợ điều chỉnh phản ứng miễn dịch, tự nhiên thích nghi Các tế bào B tiết kháng thể (tạo miễn dịch thể dịch), tế bào T chia thành tế bào T giúp đỡ (CD4+, gọi Th) tế bào T gây độc (CD8+) Vì tế bào trình diện kháng nguyên niêm mạc ruột tiếp tục lấy mẫu kháng nguyên lòng ống ruột, thách thức hệ thống miễn dịch ruột phải liên tục cân qua phòng vệ với dung nạp: lựa chọn để hoạt hóa tế bào T đáp ứng để tăng cường phòng vệ chống lại tác nhân gây bệnh, thúc đẩy biệt hóa thành loại tế bào T điều hịa khác để tạo khả dung nạp Các chế cho phép dung nạp phải bảo vệ vật chủ khỏi phản ứng viêm mức trình nhiễm trùng, giúp tái cân lại hệ thống miễn dịch bị rối loạn Vì thế, tế bào miễn dịch bẩm sinh cần phải liên tục xác định “bản thân” so với “không thân” cách sử dụng dấu bề mặt đặc hiệu Bảng liệt kê loại phân tử liên quan đến vi sinh vật tác nhân gây bệnh vi khuẩn phổ biến nhất, với thụ thể nhận dạng tương ứng chúng (PRRs) tìm thấy tế bào miễn dịch Được biết đến nhiều thụ thể giống Toll có bề mặt, thụ thể giống NOD (protein chứa vùng oligome hóa gắn kết với nucleotide) có nhân tế bào miễn dịch Trong số kháng nguyên tìm thấy, lipopolysaccharides (LPS) thành tế bào vi khuẩn gram âm thuộc nhóm làm tăng phản ứng viêm mạnh mẽ LPS cho tham gia vào tình Các Tác Động Điều Hịa Miễn Dịch Của Các Probiotics 77 Bảng Các kháng nguyên vi khuẩn nấm với thụ thể miễn dịch tương ứng chúng PAMPs MAMPs vi khuẩn Lipopolysaccharide Lipoteichoic acid Peptidoglycan Triacyl lipopeptides Diacyl lipopeptides Glycan ligands (surface layers) Porins Flagellin Fimbriae (mannose glycoproteins) CpGDNA Unknown PAMPs or MAMPs in fungi Zymosan Phospholipomannan Mannan O-linked mannosyl residues β-Glucans TLR/PRR Các loại TLR4 TLR2 TLR2-NOD1 or NOD2 TLR1 or TLR2 TLR2 or TLR6 DC-SIGN TLR2 TLR5 TLR4 TLR TLR11 Vi Khuẩn Gram âm Vi khuẩn Gram dương Hầu hết vi khuẩn Hầu hết vi khuẩn Mycoplasma spp many bacteria Neisseria Salmonella Typhimurium Escherichia coli Tất vi khuẩn Vi khuẩn gây bệnh Đ.tiểu TLR2 or TLR6 TLR2 TLR4 TLR4 TLR2 Saccharomyces cerevisiae Candida albicans C albicans C albicans C albicans PAMPs = Các loại phân tử liên quan đến tác nhân gây bệnh; MAMPs = Các loại phân tử liên quan đến vi sinh vật; TLR = thụ thể giống Toll trạng viêm sinh lý mạn tính, gặp điển hình bệnh nhân béo phì.9 Ngược lại, peptidoglycans (PGNs) từ vi khuẩn Gram dương (như lactobacilli) tham gia vào hoạt tính chống viêm probiotic [10] – Các tác động probiotic truyền thơng qua tương tác chúng với PRRs tế bào tua (DCs) tế bào biểu mô ruột DCs, hoạt hóa probiotic, tạo cytokine biểu phân tử kích thích; đồng thời cho phép phân cực tế bào T khiết (nạve) theo hướng biệt hóa thành tế bào T điều hòa (Tregs), đáng ý Tregs CD4+CD25+FoxP3, [10, 11] tế bào kích thích Th112 sản xuất cytokine tiền viêm interferon-γ (IFN-γ), yếu tố gây hoại tử khối u α (TNF-α) interleukin-2 (IL-2) IL-12 Do đó, tế bào Th1 kích thích thực bào giúp chống lại vi khuẩn gây bệnh, chúng có liên quan đến bệnh lý qua trung gian miễn dịch, viêm khớp đa xơ cứng Các kháng ngun khơng phải probiotic phân tế bào T theo hướng biệt hóa thành tế bào Th2, tạo cytokine IL-4, IL-5, IL-6 IL-13, giúp chống lại ký sinh ngoại bào, phát phản ứng dị ứng Vì hai loại tế bào Th1 Th2 có tác động trái ngược nhau, cân việc sản xuất cytokine 78 Pot · Foligné · Daniel · Grangette Th1 Th2 xác định chiều hướng phản ứng miễn dịch Trong trình này, tế bào Treg tế bào T giúp đỡ tuýp (các tế bào Th3) can thiệp Các tế bào Treg có đặc tính điều hịa miễn dịch qua trung gian IL-10 TGF-β, [13] tế bào Th3 chủ yếu tiết TGFβ.14 Các cytokine IL-10 TGF-β, với hỗ trợ tế bào T CD4+ từ GALT thúc đẩy biệt hóa tế bào B thành tế bào tiết kháng thể IgA huyết Các tế bào niêm mạc ruột tiết kháng thể IgA vào lòng ống ruột non, nơi chúng bất hoạt kháng nguyên tác nhân gây bệnh (các virus, vi khuẩn, độc tố) [15] – Một nhóm khác gồm tế bào Th Cd4+, tế bào Th17, đặc trưng việc sản xuất chủ yếu IL-17 (ngoài IL-21 IL-22) biệt hóa cytokine TGF-β IL-6,16 có liên quan vào phục hồi bạch cầu trung tính đại thực bào mô bị nhiễm – Các tế bào biểu mô chuyên biệt, chẳng hạn tế bào Paneth nếp nhăn ruột non, sản xuất defensin, tế bào hình ly (globlet) sản xuất chất nhầy để bảo vệ biểu mô Các defensin họ lớn gồm peptide kháng khuẩn góp phần bảo vệ bề mặt niêm mạc cách gắn vào màng tế bào vi sinh vật, nơi chúng tạo thành các cấu trúc giống lỗ rỗng, làm khiếm khuyết màng tế bào vi khuẩn IL-22 tiết tế bào Th17 khơng làm tăng tiết β-defensin β-defensin [3,17] hỗ trợ trực tiếp việc bảo vệ chống lại nhiễm trùng vi khuẩn, mà cịn thơng qua đường truyền tín hiệu cytokine liên kết (và phối hợp?) với nhánh khác hệ thống phòng vệ vật chủ Ảnh Hưởng Probiotic Trên Hệ Miễn Dịch Trong nhiều thập kỷ qua, hàng trăm nghiên cứu tìm kiếm diện rộng tiềm chủng probiotic (tiềm năng) để tương tác với loạt tế bào miễn dịch cách dùng vô số mô hình in vitro, in vivo ex vivo (ngồi thể sống) Bảng liệt kê báo chọn có liên quan, xuất từ tháng đến tháng 10 năm 2012, nghiên cứu đánh giá chế khả thi việc điều hòa miễn dịch probiotic Sự đa dạng liệu, mơ hình sinh vật phản ánh rõ nét phức tạp loại nghiên cứu Tính miễn dịch chủng dùng người phụ thuộc vào môi trường, vào hệ vi sinh vật xung quanh (các vi sinh vật hội sinh, tác nhân gây bệnh, thực khuẩn, độc tố) Do đó, việc kiểm định cuối cho chủng chọn xuyên suốt thử nghiệm lâm sàng người, khẳng định hiệu dân số mục tiêu định Vì việc kiểm định lâm sàng tốn kém, hiểu biết chế khả thi yếu tố có giá trị việc xác định bối cảnh thử nghiệm lâm sàng để cân nhắc điểm kết thúc Dưới ví dụ cách tiếp cận khả thi, bắt đầu việc sàng lọc lượng (lớn) chủng kết thúc phân tử tinh khiết chịu trách nhiệm cho hiệu chống viêm quan sát thấy chủng chọn Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics 79 Bảng Các Tài Liệu Được Chọn Có Liên Quan Đã Được Cơng Bố Từ Tháng 01 Đến Tháng 10 Năm 2012, Đã Nghiên Cứu Hoặc Đánh Giá Các Cơ Chế Khả Thi Việc Điều Hòa Miễn Dịch Ở Probiotic Phương pháp Cách đánh giá tiếp cận Sinh vật (Probiotic) Mục tiêu Streptococcus thermophilus and Lactobacillus delbrueckii DC người so với PBMC in vitro Sự sản xuất dấu bề mặt Cd86 HLA-DR Cytokine Các Probiotics, sống, DNA CpG-ODN phản ứng r dị ứng in vivo ↗ Các tế bào Treg CD4+CD25 + cao , hàng rào [35] ruột, TLR-9 mRNA, hoạt tính NF-KB, pIKP-α 12 chủng Lactobacillus Nhiễm E coli in vitro Phóng thích CXCL8 từ tế bào lót bên đường tiểu (urothelial cell) người [36] Các Probiotic Khỏe mạnh phòng ngừa bệnh Đánh giá lại Sự điều hòa ruột trình viêm [37] L. casei Shirota, L. rhamnosus GG, L. plantarum NCIMB 8826 and L. reuteri NCIMB 11951, B. longum SP 07/3 Bi dobacterium bi dum MF 20/5 hoạt hóa tế bào giết tự nhiên (NK) PBMC người in vitro ↗ tỷ lệ CD69+ tế bào lympho, tế bào T, tập hợp tế bào T tế bào NK, ↗ tỷ lệ Cd25+, chủ yếu tế bào lympho NK; ↗ IL-1β, IL-6, IL-10, T NF-α, yếu tố kích thích-tập trung đại thực bào-bạch cầu hạt protein viêm 1α đại thực bào; không ảnh hưởng việc sản xuất IL-2, IL-4, IL-5 TNF-β; chuyển biến chủng cụ thể IL-10, IFN-γ, TNF-α, IL-12p70, IL-6 protein-1 đơn bào [38] L. plantarum NCIMB8826 VSL#3 Mơ hình TNBS in vivo ↗hình thái học đại tràng dịng CD11b+ [39] nhỏ tế bào thích nghi CD4+/CD8+ niêm mạc ruột và↘ IFN- γ, IL-17, IL-1β, MCP-1; thay đổi đặc tính biểu gien phía kiểm sốt tình trạng khỏe mạnh (các gien liên quan đến tế bào mast peptide kháng khuẩn; ức chế gien chemokine) L rhamnosus GG bất hoạt nhiệt L delbrueckii subsp bulgaricus Các DC người in vitro LGG ↘ p38, L delb ↘I-κB; thay đổi biểu [40] miRNA: LGG ↘ biểu miR-146a (điều hòa âm đáp ứng miễn dịch hướng đến mục tiêu NF-κB), miR-155 L. acidophilus NCFM Mơ hình chuột có khối u in vivo ↘ tăng trưởng thể tích khối u đến 50.3%,↘độ [41] nặng ung thư đại tràng (mức độ xâm lấn vào đại tràng cấu trúc bất thường biểu mô/tổn thương nếp nhăn),↘ chết theo chương trình; ↘biểu CXCR4 mRNA đại tràng, MLN mơ ngồi ruột, có nghĩa số huỳnh quang MHC nhóm I (H-2Dd, -Kd -Ld) phân tích đếm dịng TB Các chất chuyển hóa Bacillus coagulans 30 < 3, 3-30, 30-200 kDa Sự trưởng thành thực bào đơn nhân in vitro ↘ tế bào tiền viêm CD14+CD16+ (phần có trọng lượng phân tử cao); tế bào CD-14mờ: ↗ biểu CD80 CD86, tương phản với ↗biểu CD86 có chọn lọc tế bào CD14sáng (có vai trị việc trình bày kháng ngun cho tế bào T, hỗ trợ biệt hóa tế bào T giúp đỡ, tạo tế bào T điều hòa) 80 Tài liệu tham khảo ↘ [34] [42] Pot · Foligné · Daniel · Grangette Bảng Tiếp theo Phương pháp Cách đánh giá tiếp cận Sinh vật (Probiotic) Mục tiêu E coli Nissle 1917 so với E coli W536 (các tế bào nguyên vẹn so với lysates ) biểu gien PBMC người đo vi sóng in vitro [43] ↗ IL- 12p40 hai phân tử LPS, ↗ IL- 10 phụ thuộc vào liều hai lysates; ↘ CL24 (eotaxin) lysates (đặc biệt EcN so với LPS chưa đột biến) Bi dobacterium lactis bị bất hoạt nhiệt AD011, B.Bi dum BGN4, L casei IBS041, L acidophilus AD031 DC (±IEC) chuột in vitro ↗ BB LC (nuôi cấy riêng lẻ) DC I-Ad, [44] CD86 CD40; tất probiotic ↗IL-6, TNF-α; LC LA (trong nuôi cấy đồng thời)↘ biểu I-Ad; khơng có probiotic làm↗ IL-6, TNF-α; LC (nuôi cấy đồng thời ngược),↘ biểu CD40; tất probiotic ↘ IL-6; BL↗IL-10; LC LA↗TGF- β Bacillus cereus var Toyoi Tá dược tiềm in vivo để cải tiến vaccine BoNV-5 (tác nhân ↘ gây bệnh gia súc) Các chủng L reuteri DSM 17938 ATCC PTA 4659 NEC chuột sơ sinh Tài liệu tham khảo ↗phản ứng kháng thể IgG theo hướng Th1, ↗ lượng mRNA IFN-γ, IL-12 IL-10 [45] in vivo ex vivo ↗ tỷ lệ sống ↘ tỷ lệ mắc độ nặng NEC, IL- 10; ex vivo in vivo↘pI-kB LPS đường ruột [46] Bi dobacterium animalis mơ hình tiêm ngừa đối ssp lactis BB-12 tượng khỏe mạnh Lactobacillus paracasei ssp paracasei 431 Thử nghiệm lâm sàng người ↗ IgG vaccine chuyên biệt huyết tương, IgG1 IgG3;↗số đối tượng đạt gia tăng đáng kể IgG chuyên biệt; ↗ trung bình số lần gia tăng cho việc tiết IgA theo vaccine chuyên biệt nước bọt tổng nồng độ kháng thể; khơng có khác biệt cytokine huyết thông số miễn dịch bẩm sinh [47] Bi dobacterium breve UCC2003 (EPS+), UCC2003– EPSdel (EPS−), UCC2003:Bbr_0430 (EPS−) điều trị chuột với chủng EPS+ EPS- in vivo Các hỗ trợ EPS bề mặt kiên trì dài hạn, trung gian lẫn tránh miễn dịch, tránh đáp ứng tế bào B; cư trú chuột với chủng EPS+, không chủng EPS -, bảo vệ sau nhiễm Citrobacter rodentium [48] VSL# môi trường ni cấy có điều kiện mơ hình chuột bị viêm gan nhiễm mỡ xơ vữa động mạch in vivo Đảo ngược tình trạng đề kháng insulin, ngăn ngừa phát triển đặc tính mơ học tình trạng viêm mô mỡ mạc treo, gan nhiễm mỡ ↘ diện tích mảng động mạch chủ; mơi trường ni cấy có điều kiện: chuyển đổi hoạt hóa trực tiếp PPAR-γ, thụ thể Farnesoid X thụ thể vitamin D [49] Probiotic chế độ ăn uống T cell (Treg) homeostasis Đánh giá Các Treg CD4+CD25+FoxP3+ có giá trị để kiểm sốt tình trạng viêm mạn tính trực tiếp ảnh hưởng đến ruột (IBD, bệnh Crohn) ảnh hưởng gián tiếp đến tình trạng viêm mạn tính mơ khác (T1D, MS RA) [50] Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics 81 Bảng Tiếp theo Sinh vật (Probiotic) Mục tiêu Phương pháp Cách đánh giá tiếp cận L reuteri ATCC PTA 6475 nhận dạng hợp chất in vitro đột biến khối phổ NMR HI-LIC-HPLC Enterococcus faecalis CECT7121 L. acidophilus Lafti-L10, L. casei CRL-431, L. plantarum WCFS1 L. rhamnosus GG dị ứng lòng trắng trứng biểu gien vật chủ in vitro đánh giá lại Tài liệu tham khảo Histamine kích thích tăng nồng độ cAMP, điều ức chế truyền tín hiệu MEK/ERK MAPK xi dịng qua protein kinase A với ức chế sản xuất TNF việc điều hòa phiên mã ↗ nồng độ IgE chuyên biệt, ↗ nồng độ IgG2a kháng OVA, không thay đổi nồng độ IgG kháng OVA IgG1, ↘tỷ lệ gia tăng tế bào trí nhớ,↘các cytokine Th2 IL-4, IL-5 IL-13, khơng thay đổi tiết IL-10, IL-12 IFN-γ [32] [51] [52] Các tình trạng ống tiêu hóa chế độ ăn vật chủ ảnh hưởng đến biểu gien vi khuẩn có liên quan đến tổng hợp sửa đổi phân tử vi sinh vật với liên quan rõ ràng với việc truyền tín hiệu vật chủ, bao gồm gien có chức việc tổng hợp CPS, d-alanyl hóa LTA sản xuất protein biểu bề mặt tế bào Cách Sàng Lọc Để Có Probiotic Tốt Hơn Trong năm 2007, Foligné cộng sự18 mô tả nét tương đồng xét nghiệm sàng lọc in vitro đơn giản sử dụng tế bào đơn nhân máu ngoại vi (PBMCs) người phương pháp in vivo sử dụng mơ hình chuột bị viêm đại tràng acid trinitrobenzen sulfonic (TNBS) [18] Trong hầu hết chủng cho thấy có trùng hợp lớn hai phương pháp, thay đổi đáng kể tìm thấy hầu hết chi LAB nấm men tiềm tạo IL-10 (chỉ dấu kháng viêm) IL-12 (chỉ dấu tiền viêm) chúng [18-22] Sự thay đổi minh họa hình 1a, chủng LAB khác so sánh tỷ lệ IL-10:IL-12 Các chủng Lactobacillus salivarius, Lactobacillus rhamnosus Lactobacillus casei có đặc tính kháng viêm tiềm ẩn (tỷ lệ cytokine > 15), hai chủng Lactobacillus plantarum rõ ràng khơng có tiềm (tỷ lệ cytokine khoảng 5) Các chủng nghiên cứu Lactobacillus acidophilus, Lactococcus lactis Streptococcus gordonii hồn tồn khơng có tác dụng kháng viêm, đặc tính cytokine chúng PBMCs người có xu hướng bình thường tiền viêm (tỷ lệ cytokine < 5) Nhìn chung, chủng có tỷ lệ IL-10:IL-12 cao có khả kháng viêm, thích hợp cho ứng dụng thể sống có nhu cầu làm giảm phản ứng viêm; chủng làm tăng cytokine tiền viêm nhiều 82 Pot · Foligné · Daniel · Grangette IL-10:IL-12 20 a 15 10 Khả bảo vệ (%) 80 60 40 *** *** *** ** ** * *** ** * * * 20 –20 b 50 * * ** 25 ii on S go rd ct la L hi L ac id op ru ta an pl L is s lu m m ru ta an pl L L r sa liv ar iu s m no su s L ca se i –25 c *** L Khả bảo vệ (%) 75 Hình a Tỷ lệ cytokine IL-10:IL-12 thu PBMCs người Dữ liệu kết trung bình người hiến máu khỏe mạnh khác b, c Tác động bảo vệ chủng vi khuẩn acid lactic chống lại viêm đại tràng TNBS chuột BALB/c Các cột đại diện cho tỷ lệ phần trăm khả bảo vệ (giảm điểm trung bình thang điểm viêm Wallace quan sát chuột điều trị vi khuẩn so với điểm trung bình nhóm chuột TNBS chứng, n = 10) Chỉ số viêm đại tràng đánh giá 48 sau định TNBS Mỗi cột đại diện cho thí nghiệm độc lập Các so sánh nhóm TNBS chứng nhóm BMDCs khơng điều trị tương ứng (DC) tính tốn cách sử dụng kiểm định Mann-Whitney U (*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001) b Các tác động điều trị cách uống vi khuẩn acid lactic sống viêm đại tràng cấp tính TNBS chuột BALB/c c Các tác động điều trị IP Các thử nghiệm IP thiếu chủng L casei L plantarum Để biết chi tiết thử nghiệm tham khảo nghiên cứu MachoFernandez cộng [10] Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics 83 quan tâm để hoạt hóa hệ thống miễn dịch, để chống số loại nhiễm trùng định [12] Để kiểm định chất kháng viêm chủng, chủng nghiên cứu sâu mơ hình in vivo động vật bị viêm đại tràng Mơ hình viêm đại tràng TNBS18 sử dụng Việc sử dụng ngày liên tiếp tạo mức bảo vệ định chống lại phản ứng viêm gây TNBS Sự bảo vệ đo điểm số quan sát được, [23] điểm số mô học [24] thông số miễn dịch khác (myeloperoxidase ruột, nồng độ murine IL-6 protein amyloid A huyết thanh) Myeloperoxidase thành phần hạt tế bào chất bạch cầu trung tính; đó, đo hoạt tính cách để đo trực tiếp diện bạch cầu trung tính số gián tiếp tình trạng viêm mơ Trong hình 1b, kết thu mơ hình viêm đại tràng TNBS biểu thị cho chủng nghiên cứu trước với mơ hình PBMC Sự bảo vệ quan sát thấy ghi nhận, thể phần trăm điểm số Wallace trung bình 10 chuột điều trị TNBS không bảo vệ, khẳng định ba nhóm chủng khác xác định cách sử dụng mơ hình PBMC người [18] Các cột khác hình 1b trình bày thí nghiệm lặp lại Mặc dù mơ hình quan tâm công cụ sàng lọc ban đầu, chúng không cho thấy thông tin chế khả thi có tham gia Câu hỏi mà cố gắng trả lời có liên quan tới chất tế bào miễn dịch tham gia việc truyền tín hiệu Do đó, bốn số vi khuẩn từ mơ hình trước định tiêm vào màng bụng (IP) chuột tiêm TNBS, thay sử dụng ống thơng dày Kết thử nghiệm này, thể hình 1c, cho thấy việc sử dụng đường IP tạo mức độ bảo vệ giống hệt chuột, xảy khoảng thời gian không Điều đưa khả DCs tham gia vào bảo vệ [25] Để kiểm tra giả thuyết này, chủng L salivarius (LS33) L.acidophilus NCFM (được in đậm hình 1) chọn làm chủng có đặc tính điều hịa miễn dịch trái ngược so sánh kỹ nghiên cứu chế Trong thử nghiệm tiếp theo, DCs tủy xương nguyên sơ (BMDCs) phân lập từ tủy xương chuột BALB/c khỏe mạnh kích thích 16 in vitro LAB tương ứng Sau đó, DCs mơi trường có probiotic rửa tiêm lại vào chuột qua đường IP Sau đó, thực trị liệu với TNBS, mức độ bảo vệ đo cách sử dụng liệu truyền thống đề cập Các kết đạt khẳng định phát trước đó: BMDCs kích thích với chủng LS33 bảo vệ chuột khỏi viêm đại tràng (bảo vệ 58%), BMDCs kích thích với chủng NCFM khơng [25] Tiếp theo, cách sử dụng chuột loại bỏ gien Nod2-/-, thấy việc bảo vệ cần có truyền tín hiệu Nod2, chủng LS33 khơng bảo vệ chuột này, trái ngược với chuột WT [10] 84 Pot · Foligné · Daniel · Grangette 6 5 ** *** * 1 a Điểm số Ameho Điềm số Wallace PBS 50 μg 200 μg LS33 PGN 50 μg 200 μg NCFM PGN b PBS LS33 PGN NCFM PGN 200 μg Hình Các điểm Wallace (a) Ameho (b) quan sát chuột điều trị TNBS tiêm PGN qua màng bụng chủng L salivarius LS33 L acidophilus NCFM Dựa quan sát này, sau đó, chúng tơi đưa giả thuyết PGN bề mặt vi khuẩn chịu trách nhiệm cho việc bảo vệ [10] Phối hợp với C Hermann (Đại học Konstanz, Đức), PGN hai chủng cô lập tinh chế Việc sử dụng PGN tinh khiết tiêm qua đường IP mơ hình viêm đại tràng TNBS lần tạo kết tương tự điều đạt với chủng không bị biến đổi, lại phụ thuộc vào liều lượng (hình 2) Việc so sánh cuối HPLC thành phần hóa học PGN chủng LS33 NCFM, thực phối hợp với Ivo Boneca (Viện Pasteur, Paris, Pháp), tạo đỉnh khác biệt đáng kể, xác định hóa tổng hợp Bằng việc sử dụng cấu trúc hóa học tinh khiết đơn phân GlcN-MurNAcL-Ala-γ-D-isoGln-L-Lys, khoảng 10% tổng lượng muropeptides LS33 phóng thích ra, điều mơ cho tác động probiotic chủng L salivarius LS33 sống chuột [26] Hơn nữa, nghiên cứu chế sâu xác nhận rằng, khả bảo vệ probiotic lactobacilli chọn lọc phụ thuộc vào NOD2 có tương quan với việc sản xuất IL-10 chỗ, cảm ứng DCs điều hòa CD103+ tế bào T điều hòa DCs CD103+ cho thấy ưu tiên hướng dẫn tế bào T điều hòa CD4+Foxp3+, đặc biệt thông qua đường phụ thuộc indoleamine [2,3] -dioxygenase (IDO) ; vậy, đóng vai trị định cân nội môi ruột Sự biểu IDO thực thấy làm điều hòa lên DCs ruột kết CD11c+ tinh chế từ hạch bạch huyết màng treo ruột chuột điều trị PGN [10, 26] Trong rõ ràng kết cần phải tiếp nối thử ngiệm lâm sàng thích hợp với chủng probiotic phân tử tinh khiết, kiến thức chế có tác động lớn Việc sử dụng phương pháp tiếp cận ví dụ khơng khuyến cáo cho bệnh nhân mắc bệnh Crohn Vì chế probiotic phụ thuộc vào NOD2, đột biến gien Nod2 có liên quan Các Tác Động Điều Hịa Miễn Dịch Của Các Probiotics 85 tính nhạy cảm bệnh Crohn, nên kết cục tích cực nghiên cứu lâm sàng không đảm bảo đầy đủ Phát dường xác nhận cho quan sát trước số chủng probiotic có đặc tính tốt khơng thể kết cục lâm sàng mong đợi bệnh nhân mắc bệnh Crohn Các Cơ Chế Khác Đang Được Nghiên Cứu Các chế khác có liên quan đến hoạt tính kháng viêm Sokol cộng sự27 cho thấy Faecalibacterium prausnitzii có liên quan cao tới nguy tái phát bệnh Crohn hồi tràng sau phẫu thuật Trong tế bào Caco-2 chuyển nạp gien thị hoạt tính NF-κB, F prausnitzii khơng có tác dụng, chất bề mặt loại bỏ hoạt tính NF- κB Sự kích thích PBMCs F prausnitzii làm giảm đáng kể nồng độ IL-12 IFN-γ làm tăng IL-10 Sử dụng đường uống chủng chất bề mặt bảo vệ chuột khỏi bệnh viêm đại tràng TNBS gây Hiện nay, khơng rõ hợp chất phóng thích có bề mặt chịu trách nhiệm cho tác động Bifidobacteria chứng minh có tác động kháng viêm Ivanov cộng sự28 mô tả serpin từ chủng Bifidobacterium longum, loại vi khuẩn Gram dương yếm khí cư trú tự nhiên ống tiêu hóa người Serpin B longum thấy ức chế hiệu protease giống elastase sinh vật có nhân thật Khi ức chế elastase bạch cầu trung tính, bạch cầu tham gia vào trình viêm cấp ruột, chủng tác nhân kháng viêm mạnh mẽ.29 Một chủng L lactis tái tổ hợp biểu mức serpin bifidobacteria cho thấy làm giảm đáng kể tình trạng viêm mơ hình chuột TNBS [Arigoni cộng trao đổi Hội nghị lần thứ vi khuẩn acid lactic, từ 28/08 đến 01/09 năm 2005, Egmond aan Zee, Hà Lan] Một chủng Bifidobacterium breve phóng thích yếu tố hịa tan làm giảm tiết cytokine tiền viêm tế bào miễn dịch.30 Sự tiết chemokine TNF-α (CXCL8), thay đổi đường truyền tín hiệu NFκB AP-1 khẳng định chủng môi trường tự không nằm tế bào (CFM) gây ức chế tiết CXCL8 tế bào biểu mô, phụ thuộc vào thời gian liều lượng, bao gồm đường phiên mã AP-1 NF-κB Hơn nữa, chủng CFM thể khả bảo vệ mơ hình chuột bị viêm đại tràng TNBS Tác động tương tự đạt DCs điều trị với CFM Những kết cho thấy chủng B breve điều hịa xuống tiến trình gây viêm cấp độ biểu mơ cách ức chế q trình phosphoryl hóa tham gia vào trình viêm, việc điều hòa khả bảo vệ DCs Một lần dường khơng phải tế bào, mà yếu tố hòa tan tiết ra, chịu trách nhiệm cho tác động Các yếu 86 Pot · Foligné · Daniel · Grangette tố rõ ràng góp phần tích cực việc cân nội mơi ruột cách làm giảm sản xuất chemokine Một ví dụ cuối yếu tố hịa tan khơng xác định với tiềm kháng viêm mô tả Jones Versalovic [31] cho chủng Lactobacillus reuteri Những phần bề mặt lấy từ màng sinh học L reuteri thêm vào tế bào bạch cầu đơn nhân THP-1 người điều kiện có khơng có LPS LPS kích thích sản xuất TNF-α tiền viêm tế bào THP1 Các chủng L reuteri ATCC PTA 6475 ATCC PTA 5289, hai chủng khác loài, ức chế khả sản xuất TNF-α nuôi cấy màng sinh học Các tác giả lưu ý khả tương đối để ức chế TNF-α người tế bào bạch cầu đơn nhân có tương quan trực tiếp với khả tương đối để tổng hợp hình thành màng sinh học bề mặt polystyrene Gần đây, có ý kiến đề nghị [32] histamine sản xuất chủng ATCC PTA 6475 kích thích gia tăng nồng độ cAMP, ức chế tín hiệu xi dịng MEK/ERK MAPK thơng qua protein kinase A, ức chế sản xuất TNF sau điều hòa phiên mã Các khảo sát lại lần cho thấy phức tạp điều kiện khả thi thúc đẩy ức chế tác động kháng viêm, nhấn mạnh tầm quan trọng thử nghiệm lâm sàng thiết kế tốt dân số mục tiêu kiểm soát tốt, với sản phẩm kiểm soát tốt Kết Luận Hệ vi sinh vật đường ruột tham gia phần lớn vào phát triển trì hệ miễn dịch Một hệ thống “cân miễn dịch" khơng tồn tại, hệ vi sinh, với tất thành phần biến đổi ruột, tương tác liên tục với hệ miễn dịch Trong thời gian dài, hệ thống miễn dịch biểu phản ứng khác với kháng nguyên đặc biệt kết hợp nhiều kháng nguyên Ví dụ, người hiến máu khỏe mạnh phản ứng khác theo thời gian PBMCs họ tiếp xúc với tập hợp vi khuẩn (dữ liệu khơng trình bày) Do đó, việc trì giám sát khả kháng viêm điều hòa hệ thống miễn dịch đường ruột quan trọng Các yếu tố bên ngồi, bao gồm yếu tố dinh dưỡng, ảnh hưởng đến chế điều hòa miễn dịch Trong chương này, tập trung vào vài chế khả thi, bao gồm tế bào điều hòa, cytokine, chemokine, defensin, số tác nhân khác kiểm soát phản ứng miễn dịch, chống lại nhiễm trùng độc tố, gây bất thường qua trung gian miễn dịch Khi chế kiểm soát thất bại, can thiệp từ bên cần thiết Các probiotic có tiềm hỗ trợ q trình Trong vài chế làm sáng tỏ, cịn có nhiều thứ cần làm rõ Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics 87 Mặc dù việc hiểu biết đầy đủ chế cần thiết, khơng probiotic, phức tạp tất tác nhân môi trường, mang lại giải pháp cho tất bệnh lý qua trung gian miễn dịch Hơn nữa, khơng probiotic phục hồi hệ miễn dịch bị “tổn hại nghiêm trọng” Các kết tốt đạt trẻ nhỏ, phát triển hệ miễn dịch cho phép thay đổi thời gian dung nạp qua đường uống miễn dịch phát triển Điều trở nên khó khăn độ tuổi lớn Dù vậy, không cịn nghi ngờ nữa, hiểu biết chế cho phép chọn chủng tốt hơn, thiết kế thí nghiệm lâm sàng hiệu hơn, với liệu phù hợp với tác động mong muốn dân số mục tiêu Điều có nghĩa vi khuẩn khác, lactobacilli bifidobacteria truyền thống, có khả trở nên quan trọng, đặc biệt bối cảnh điều trị Thuật ngữ dược vi sinh (pharmabiotics) đặt [33] tiếp tục xây dựng tương lai để bao gồm chủng bị giết nhiệt chiếu xạ, vi khuẩn bị biến đổi di truyền hay trao đổi chất Các chủng bị biến đổi di truyền hay trao đổi chất làm tối ưu việc sử dụng nghiên cứu chế, để cung cấp hiểu biết sở phân tử cho tác động mong muốn Khơng cịn nghi ngờ nữa, tương lai *- vi sinh (*-biotics) khả quan Tuyên Bố Công Khai Các tác già tun bố khơng có xung đột lợi ích cho báo Tài Liệu Tham Khảo Bach JF: The effect of infections on susceptibility to autoimmune and allergic diseases N Engl J Med 2002;347:911–920 Guarner F, Bourdet-Sicard R, Brandtzaeg P, et al: Mechanisms of disease: the hygiene hypothesis revisited Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol 2006;3:275–284 Qin J, Li R, Raes J, et al: A human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing Nature 2010;464:59–65 Arumugam M, Raes J, Pelletier E, et al: Enterotypes of the human gut microbiome Nature 2011;473:174–180 Zhu B, Wang X, Li L: Human gut microbiome: the second genome of human body Protein Cell 2010;8:718–725 88 Lozupone CA, Stombaugh JI, Gordon JI, et al: Diversity, stability and resilience of the human gut microbiota Nature 2012; 489: 220–230 Delcenserie V, Martel D, Lamoureux M, et al: Immunomodulatory effects of probiotics in the intestinal tract Curr Issues Mol Biol 2008;10:37–54 Lebeer S, Vanderleyden J, De Keersmaecker SCJ: Host interactions of probiotic bacterial surface molecules: comparison with commensals and pathogens Nature Rev Microbiol 2010;8:171–184 Delzenne NM, Cani PD: Interaction between obesity and the gut microbiota: relevance in nutrition Ann Rev Nutr 2011; 31:15–31 Pot · Foligné · Daniel · Grangette 10 Macho-Fernandez E, Valenti V, Rockel C, et 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 al: Anti-inflammatory capacity of selected lactobacilli in experimental colitis is driven by NOD2-mediated recognition of a specific peptidoglycan-derived muropeptide Gut 2011;60:1050–1059 Kwon H-K, Lee C-G, So J-S, et al: Generation of regulatory dendritic cells and CD4+Foxp3+ T cells by probiotics administration suppresses immune disorders Proc Natl Acad Sci USA 2010;107:2159–2164 Mohamadzadeh M, Olson S, Kalina WV, et al: Lactobacilli activate human dendritic cells that skew T cells toward T helper polarization Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:2880–2885 Lavasani S, Dzhambazov B, Nouri M, et al: A novel probiotic mixture exerts a therapeutic effect on experimental autoimmune encephalomyelitis mediated by IL-10 producing regulatory T cells PLoS One 2010;5:e9009 Weiner HL: Oral tolerance: immune mechanisms and the generation of Th3-type TGFbeta-secreting regulatory cells Microbes Infect 2001;3:947–954 Lefrancois L, Puddington L: Intestinal and pulmonary mucosal T cells: local heroes fight to maintain the status quo Ann Rev Immunol 2006;24:681–704 Korn T, Bettelli E, Oukka M, Kuchroo VK: IL-17 and Th17 cells Ann Rev Immunol 2009;27:485–517 Kreymborg K, Becher B: IL-22 vs IL-22: the tissue matters Open Autoimmun J 2010; 2: 181–186 Foligné B, Nutten S, Grangette C, et al: Correlation between in vitro and in vivo immunomodulatory properties of lactic acid bacteria World J Gastroenterol 2007;13:236–243 Cousin JF, Deutsch S-M, Perez Chaia A, et al: Interactions between probiotic dairy propionibacteria and the intestinal epithelium Curr Immunol Rev 2012;8:216–226 Foligné B, Dewulf J, Vandekerckove P, et al: Probiotic yeasts: anti-inflammatory potential of various nonpathogenic strains in experimental colitis in mice World J Gastroenterol 2010;16:2134–2145 Foligné B, Dewulf J, Breton J, et al: Probiotic properties of non-conventional lactic acid bacteria: immunomodulation by Oenococcus oeni Int J Food Microbiol 2010;140:136–145 22 Li CY, Lin HC, Lai CH, et al: Immunomodulatory effects of Lactobacillus and Bifidobacterium on both murine and human mitogenactivated T cells Int Arch Allergy Immunol 2011;156:128–136 23 Wallace JL, MacNaughton WK, Morris GP, Beck PL: Inhibition of leukotriene synthesis markedly accelerates healing in a rat model of inflammatory bowel disease Gastroenterology 1989;96:29–36 24 Ameho CK, Adjei AA, Harrison EK, et al: Prophylactic effect of dietary glutamine supplementation on interleukin and tumour necrosis factor alpha production in trinitrobenzene sulphonic acid induced colitis Gut 1997;41:487–493 25 Foligné B, Zoumpopoulou G, Dewulf J, et al: A key role of dendritic cells in probiotic functionality PLoS One 2007;2:e313 26 Macho Fernandez E, Pot B, Grangette C: Beneficial effect of probiotics in IBD Are peptidogycan and NOD2 the molecular key effectors? Gut Microbes 2011;2:1–7 27 Sokol H, Pigneur B, Watterlot L, et al: Faecalibacterium prausnitzii is an anti-inflammatory commensal bacterium identified by gut microbiota analysis of Crohn disease patients Proc Natl Acad Sci USA 2008;105:16731–16736 28 Ivanov D, Emonet C, Foata F, et al: Serpin from the gut bacterium Bifidobacterium longum inhibits eukaryotic elastase-like serine proteases J Biol Chem 2006;281:17246– 17252 29 Sanchez B, Urdaci MC, Margolles A: Extracellular proteins secreted by probiotic bacteria as mediators of effects that promote mucosa-bacteria interactions Microbiology 2010;156:3232–3242 30 Heuvelin E, Lebreton C, Grangette C, et al: Mechanisms involved in alleviation of intestinal inflammation by Bifidobacterium breve soluble factors PLoS One 2009;4:e5184 31 Jones SE, Versalovic J: Probiotic Lactobacillus reuteri biofilms produce antimicrobial and anti-inflammatory factors BMC Microbiol 2009;9:35 32 Thomas CM, Hong T, van Pijkeren JP, et al: Histamine derived from probiotic Lactobacillus reuteri suppresses TNF via modulation of PKA and ERK signaling PLoS One 2012; 7:e31951 33 Colin H: Probiotics and pharmabiotics Bioeng Bugs 2010;1:79–84 Các Tác Động Điều Hòa Miễn Dịch Của Các Probiotics 89 34 Tiscornia I, Sanchez-Martins V, Hernandez A, Bollati-Fogolin M: Human monocyte-derived dendritic cells from leukoreduction system chambers after platelet pheresis are functional in an in vitro co-culture assay with intestinal epithelial cells J Immunol Methods 2012;384:164–170 35 Zhong Y, Huang J, Tang W, et al: Effects of probiotics, probiotic DNA and the CpG oligodeoxynucleotides on ovalbumin-sensitized Brown-Norway rats via TLR9/NF-κB pathway FEMS Immunol Med Microbiol 2012; 66:71–82 36 Karlsson M, Jass J: Lactobacilli differently regulate expression and secretion of CXCL8 in urothelial cells Benef Microbes 2012;3: 195–203 37 Rupa P, Mine Y: Recent advances in the role of probiotics in human inflammation and gut health J Agric Food Chem 2012;60:8249– 8256 38 Dong H, Rowland I, Yaqoob P: Comparative effects of six probiotic strains on immune function in vitro Br J Nutr 2012;108:459– 470 39 Mariman R, Kremer B, van Erk M, et al: Gene expression profiling identifies mechanisms of protection to recurrent trinitrobenzene sulfonic acid colitis mediated by probiotics Inflamm Bowel Dis 2012;18:1424–1433 40 Giahi L, Aumueller E, Elmadfa I, Haslberger AG: Regulation of TLR4, p38 MAPkinase, IκB and miRNAs by inactivated strains of lactobacilli in human dendritic cells Benef Microbes 2012;3:91–98 41 Chen CC, Lin WC, Kong MS, et al: Oral inoculation of probiotics Lactobacillus acidophilus NCFM suppresses tumour growth both in segmental orthotopic colon cancer and extra-intestinal tissue Br J Nutr 2012;107: 1623–1634 42 Benson KF, Redman KA, Carter SG, et al: Probiotic metabolites from Bacillus coagulans GanedenBC30TM support maturation of antigen-presenting cells in vitro World J Gastroenterol 2012;18:1875–1883 43 Güttsches AK, Löseke S, Zähringer U, et al: Anti-inflammatory modulation of immune response by probiotic Escherichia coliNissle 1917 in human blood mononuclear cells Innate Immun 2012; 18:204–216 90 44 Kim JY, Park MS, Ji GE: Probiotic modulation of dendritic cells co-cultured with intestinal epithelial cells World J Gastroenterol 2012;18:1308–1318 45 Roos TB, de Lara AP, Dummer LA, et al: The immune modulation of Bacillus cereus var Toyoi in mice immunized with experimental inactivated bovine herpesvirus type vaccine Vaccine 2012;30:2173–2177 46 Liu Y, Fatheree NY, Mangalat N, Rhoads JM: Lactobacillus reuteri strains reduce incidence and severity of experimental necrotizing enterocolitis via modulation of TLR4 and NFκB signaling in the intestine Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2012;302:G608– G617 47 Rizzardini G, Eskesen D, Calder PC, et al: Evaluation of the immune benefits of two probiotic strains Bifidobacterium animalis ssp lactis, BB-12® and Lactobacillus paracasei ssp paracasei, L casei 431® in an influenza vaccination model: a randomised, doubleblind, placebo-controlled study Br J Nutr 2012;107:876–884 48 Fanning S, Hall LJ, Cronin M, et al: Bifidobacterial surface-exopolysaccharide facilitates commensal-host interaction through immune modulation and pathogen protection Proc Natl Acad Sci USA 2012;109:2108–2113 49 Mencarelli A, Cipriani S, Renga B, et al: VSL#3 resets insulin signaling and protects against NASH and atherosclerosis in a model of genetic dyslipidemia and intestinal inflammation PLoS One 2012;7:e45425 50 Issazadeh-Navikas S, Teimer R, Bockermann R: Influence of dietary components on regulatory T cells Mol Med 2012;18:95–110 51 Castro MS, Azpiroz MB, Molina MA, et al: Preliminary studies on the prevention of the ovalbumin-induced allergic response by Enterococcus faecalis CECT7121 in mice Int Arch Allergy Immunol 2012;157:11–20 52 Bron PA, van Baarlen P, Kleerebezem M: Emerging molecular insights into the interaction between probiotics and the host intestinal mucosa Nat Rev Microbiol 2011;10:66– 78 Pot · Foligné · Daniel · Grangette