Đang tải... (xem toàn văn)
VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ VINACOMIN TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP PHÒNG THÍ NGHIỆM HÓA HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG. XÁC ĐỊNH COLIFORM ECOLI FECAL COLIFORM SMEWW XÁC ĐỊNH COLIFORM ECOLI FECAL COLIFORM SMEWW XÁC ĐỊNH COLIFORM ECOLI FECAL COLIFORM SMEWW XÁC ĐỊNH COLIFORM ECOLI FECAL COLIFORM SMEWW
VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 1/14 QUY TRÌNH W37: QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH Tổng coliform; Coliform chịu nhiệt (Fecal) Escherichia coli giả định (E.coli) SOẠN THẢO Họ tên Chữ ký Nguyễn Thị Kiều Linh PHÊ DUYỆT Họ tên Chữ ký Nguyễn Thị Kiều Linh VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 2/14 MỤC LỤC MỤC LỤC 2 THEO DÕI SỬA ĐỔI TÀI LIỆU 3 DANH SÁCH PHÂN PHỐI 4 MỤC ĐÍCH, PHẠM VI ÁP DỤNG: TÀI LIỆU THAM KHẢO: .4 THUẬT NGỮ, ĐỊNH NGHĨA VÀ KÝ HIỆU: GIỚI THIỆU CHUNG VỀ PHƯƠNG PHÁP: LẤY MẪU VÀ BẢO QUẢN MẪU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG: 10 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ: 11 HĨA CHẤT/MƠI TRƯỜNG: .6 12 QUY TRÌNH PHÂN TÍCH: 13 KẾT QUẢ .9 14 KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG (QC): 10 15 TÀI LIỆU LIÊN QUAN 11 VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 3/14 THEO DÕI SỬA ĐỔI TÀI LIỆU Ngày Mục/trang 20/4/2022 Tất Tóm tắt nội dung sửa đổi Ban hành lại lần Ghi VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 4/14 DANH SÁCH PHÂN PHỐI Bản số Đơn vị phân phối 01 Phó Viện trưởng kiêm Giám đốc Trung tâm- Nguyễn Thu Hiền 02 Phòng thí nghiệm Hóa học Mơi trường MỤC ĐÍCH, PHẠM VI ÁP DỤNG: Mục đích: Quy định phương pháp xác định tổng coliform, coliform chịu nhiệt (Fecal), E.coli nước Phịng thí nghiệm Hóa học Mơi trường - Trung tâm Thử nghiệm Kiểm định Công nghiệp -Viện Cơ khí Năng lượng Mỏ - Vinacomin Phạm vi: Quy trình quy định phương pháp để phát đếm số lượng vi khuẩn coliform, coliform chịu nhiệt (Fecal) escherichia coli (E.coli) có nước sạch, nước mặt, nước ngầm, nước thải phương pháp nhiều ống Giới hạn phát hiên MPN/100ml TÀI LIỆU THAM KHẢO: - SMEWW 9221B:2017- Standard Total Coliform Fermentation Technique - SMEWW 9221C:2017- Estimation of Bacterial Density - SMEWW 9221E:2017 - E.Thermortolerant (Fecal) coliform Procedure - SMEWW 9221G:2017 - Other Escherichia Coli Procedure - Thông tư 10/2021/TT-BTNMT: Quy định kỹ thuật quan trắc môi trường quản lý thông tin, liệu quan trắc chất lượng môi trường THUẬT NGỮ, ĐỊNH NGHĨA VÀ KÝ HIỆU: 6.1 Vi khuẩn coliform: Là sinh vật có khả sinh trưởng hiếu khí nhiệt độ 350C ÷ 370C ± 0.50C mơi trường ni cấy có lactoza thể lỏng, kèm theo việc tạo thành axit sinh khí vịng 48 h 6.2 Các vi khuẩn coliform chịu nhiệt (Fecal): Là vi khuẩn coliform mô tả mục 6.1, có đặc tính lên men vịng 24 h, nhiệt độ 44,50C ± 0,50C 6.3 Escherichia coli giả định (E.coli): Là vi khuẩn coliform chịu nhiệt mô tả mục 6.2 mà sinh indol vòng 24 h, 44 0C ± 0.250C 44,50C ± 0.250C 6.4 Phương pháp nhiều ống để phát đếm số lượng vi khuẩn coliform, coliform chịu nhiệt Escherichia coli giả định có nước phương pháp ni cấy mẫu VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 5/14 nước môi trường lỏng hệ gồm nhiều ống nghiệm tính tốn “số có xác xuất cao nhất” chúng có mẫu thử (MPN/100ml) GIỚI THIỆU CHUNG VỀ PHƯƠNG PHÁP: Kỹ thuật tiến hành theo phương pháp MPN sử dụng bảng số MPN để tính kết Tổng số coliform, coliform chịu nhiệt E Coli giả định có 100ml mẫu thử xác định số ống dương tính (đục sinh ống duham) sau nuôi cấy vào ống canh thang nồng độ đơn nồng độ kép môi trường tăng sinh chọn lọc Lauryl tryptose broth 24 ± 2h nhiệt độ 35 ± 0,5 o C cấy chuyển sang môi trường khẳng định BGBL nuôi môi trường khẳng định 24 ± 2h 48 ± 3h nhiệt độ 35 ± 0,5 oC để phát vi khuẩn coliform Khi muốn tìm Coliform chịu nhiệt ni cấy mơi trường EC, 44,5 ± 0,2oC khoảng 24 ± 2h để phát loại coliform chịu nhiệt (fecal.coli) Xác định E.coli phản ứng sinh hóa tạo thành indol mơi trường trypton 44,5 ± 0,2oC khoảng 24 ± 2h LẤY MẪU VÀ BẢO QUẢN MẪU Lấy mẫu từ nguồn nước bảo quản mẫu theo HD-LM-W07: Hướng dẫn kỹ thuật lấy mẫu nước phân tích vi sinh…( TCVN 8880:2011) Mẫu lấy dụng cụ lấy mẫu, chai chứa đựng được khử khuẩn theo phương pháp tương ứng với loại nước Bảo quản mẫu nhiệt độ 2÷ 5oC CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG: Việc vệ sinh dụng cụ lấy mẫu chai, bình đựng mẫu thao tác lấy mẫu, vệ sinh, diệt khuẩn, q trình phân tích gây nhiễm chéo ảnh hưởng đến kết phân tích Điều loại bỏ thực yêu cầu quy trình 10 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ: 10.1 Nồi hấp LS-35HD 10.2 Nồi hấp Jibimed 10.3 Tủ ấm DH 3600II 10.4 Tủ ấm 303-1A 10.5 Tủ cấy an toàn sinh học cấp II - Biobase – Trung Quốc 10.6 Cân phân tích số lẻ XT220A- Thụy Sỹ VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 6/14 10.7 Tủ sấy UN110 - Memmert - Đức 10.8 Máy đo pH 10.9 Máy lắc Dlab 10.10 Micopipet 10.11 Đèn cồn 10.12 Ống nghiệm có nắp vặn, giá để ống nghiệm, ống Durham, dụng cụ thủy tinh thơng thường phịng thí nghiệm (Pipet, bình định mức, bình nón, ống đong, cốc…) 11 HĨA CHẤT/MƠI TRƯỜNG: 11.1 Mơi trường Lauryl tryptose broth Sử dụng sản phẩm môi trường chế biến sẵn thị trường (LPB/LTB): Môi trường nồng độ đơn: - Lactose peptone Borth 35g/l Môi trường nồng độ kép: - Lactose peptone Borth 105g/l Đun nóng để hịa tan mơi trường Chia vào ống nghiệm chứa ống Durham lộn ngược, hấp vô trùng 121oC 15 phút Bảo quản ngăn mát tủ lạnh (nhiệt độ 2÷80C) Hạn sử dụng: tuần 11.2 Môi trường canh thang mật lactoza lục sáng (BGBL) - Môi trường BGBL (Brillant Green Bile Lactose): 40g/lít Đun nóng để hịa tan mơi trường Chia vào ống nghiệm chứa ống Durham úp ngược, hấp vô trùng 121oC 15 phút Bảo quản ngăn mát tủ lạnh (nhiệt độ 2÷80C) Hạn sử dụng: tuần 11.3 Môi trường canh thang EC Both: - Mơi trường EC borth: 37g/lit Đun nóng để hịa tan môi trường Chia vào ống nghiệm chứa ống Durham lộn ngược, hấp vô trùng 121oC 15 phút Bảo quản ngăn mát tủ lạnh (nhiệt độ 2÷80C) Hạn sử dụng: tuần 11.4 Mơi trường Tryton (thử phản ứng sinh indol) - Trypton: 20g - NaCl: 5g - Nước: thành 1000ml Hịa tan mơi trường Chia vào ống nghiệm, hấp vô trùng 121 oC 15 phút Bảo quản ngăn mát tủ lạnh (nhiệt độ 2÷80C) Hạn sử dụng: tuần 11.5 Thuốc thử kovac để thử indol VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CƠNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI - Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 7/14 P- dimethylamino g Cồn amylic 75 ml Axit clohidric (ρ = 1.18 g/l) 25 ml Hoà tan P- dimethylamino cồn amylic Cẩn thận bổ sung axit đặc vào Bảo quản: Đựng lọ tối màu bảo quản 40C Có thể dùng thuốc thử kovax dung dịch bán sẵn thị trường 12 QUY TRÌNH PHÂN TÍCH: 12.1 Pha lỗng mẫu Trước tiến hành xét nghiệm, lắc mẫu thật kỹ cách khuấy mạnh nhằm làm cho vi khuẩn phân bố đồng mẫu nước Dựa vào chất mẫu nước ước đốn số lượng vi khuẩn có mẫu mà pha loãng mẫu nước đậm độ khác Pha lỗng cách hút vơ khuẩn xác ml mẫu nước nguyên chất cho vào ống chứa ml dung dịch pha lỗng để có đậm độ pha loãng 10-1 Hút trộn lên xuống 20- 25 lần để hịa trộn mẫu Từ đậm độ pha lỗng 10 -1 hút xác 1ml cho vào ống chứa ml dung dịch pha lỗng, để có đậm độ pha loãng 10 -2, hút lên trộn xuống 20-25 lần để hòa trộn mẫu (hoặc vortex 15 giây) Tiếp tục làm tương tự để có dung dịch mẫu thử 10-3, 10-4, 10-5 Mỗi đậm độ pha loãng cần thay pipet Độ pha loãng mẫu phụ thuộc vào độ bẩn mẫu thử 1ml 1ml 1ml 9ml Dung dịch pha 10-1 9ml Dung dịch pha loãng 9ml Dung dịch pha loãng loãng Mẫu nước 1ml 10-2 10-3 Sơ đồ pha loãng dung dịch mẫu thử 12.2 Giai đoạn giả định: Cấy mẫu môi trường tăng sinh chọn lọc 10-4 VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CƠNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 8/14 - Lấy ống nghiệm môi trường canh thang lactoza (LPB) nồng độ kép Dùng pipet vô trùng chuyển 10ml mẫu nước vào ống nghiệm (nồng độ 101) Lắc - Lấy ống nghiệm môi trường LPB nồng độ đơn Dùng pipet vô trùng chuyển 1ml mẫu nước vào ống nghiệm (nồng độ 100) Lắc - Làm lặp lại với đậm độ pha loãng (nồng độ 10-1 , 10-2, 10-3, ) - Nuôi môi trường nồng độ kép nồng độ đơn cấy mẫu tủ ấm 35 ± 0,50C/24h± 2h Nếu giai đoạn khơng sinh khí mờ đục/màu vàng mơi trường ủ đến 48h± 3h - Xác định số ống dương tính độ pha lỗng (Lắc nhẹ, ống dương tính ống sinh khí/làm đục mơi trường/màu vàng) 12.3 Cấy chuyển 12.3.1 Khẳng định có mặt vi khuẩn Coliform - Từ ống dương tính mơi trường LPB, dùng micropipet hút khoảng 0,2 ml từ ống dương tính tương ứng sang ống canh thang BGBL Lắc đều, nuôi 35 ± 0,50C /24h ± Nếu giai đoạn không sinh đục/ màu vàng ủ đến 48± 3h - Xác định số ống dương tính độ pha lỗng (Lắc nhẹ, ống dương tính ống sinh khí/làm đục mơi trường/màu vàng) - Tra bảng MPN để tính kết Coliform 12.3.2 Khẳng định có mặt vi khuẩn Coliform chịu nhiệt (Fecal) - Từ ống dương tính mơi trường BGBL, dùng micropipet hút khoảng 0,2 ml từ ống dương tính tương ứng sang ống môi trường EC both Lắc đều, nuôi 44,5 ± 0,20C 24 ± 2h kiểm tra - Xác định số ống dương tính độ pha lỗng (Lắc nhẹ, ống dương tính ống sinh khí/làm đục mơi trường/màu vàng) - Tra bảng MPN để tính kết Coliform chịu nhiệt 12.3.3 Khẳng định có mặt vi khuẩn E.coli VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 9/14 Có thể cấy trực tiếp dịch ni cấy từ ống dương tính mơi trường BGBL từ ống dương tính mơi trường EC để ni cấy khẳng định có mặt vi khuẩn E.coli - Dùng micropipet hút khoảng 0,2ml từ ống dương tính vào ống mơi trường trypton, lắc đều, ni 44,5 ± 0,20C/24h kiểm tra - Thêm 0,2ml-0,3ml thuốc thử kovac vào ống nuôi cấy Nếu xuất màu đỏ sau lắc nhẹ chứng tỏ có mặt Indol - Xác định ống dương tính đậm độ ni cấy (ống dương tính ống có vành đỏ ống nghiệm ni cấy vi khuẩn) - Tra bảng MPN để tính kết E.coli 12.4 Xác định coliform, fecal Coli, E.Coli mẫu nước sạch, nước ngầm, mẫu có hàm lượng thấp Đối với mẫu nước không chứa coliform, fecal Coli, E.Coli thực hút 20 ml mẫu vào ống LPB nồng độ kép 10 ml mẫu vào 10 ống LPB nồng độ kép Thực quy trình ni cấy phần 13 KẾT QUẢ 13.1 Đối với mẫu nước sạch, nước ngầm mẫu có hàm lượng thấp Tra bảng Phụ lục (9221:II - SMEWW 9221C:2017) trường hợp cấy 20 ml mẫu/ống vào ống môi trường LPB kép Tra bảng Phụ lục (9221:III - SMEWW 9221C:2017) trường hợp cấy 10 ml mẫu/ống vào 10 ống môi trường LPB kép 13.2 Đối với mẫu nước khác Tra bảng Phụ lục (9221:IV- SMEWW 9221C:2017) Trường hợp có nhiều nồng độ pha lỗng chọn giá trị MPN bảng tính tốn kết sau; MPN/100ml = (MPN/100 ml – tra bảng) * 10/V Hoặc: MPN/100ml = (MPN/100 ml – tra bảng)*k Trong đó: V thể tích phần mẫu thử độ pha loãng chọn thấp k = độ pha lỗng 14 KIỂM SỐT CHẤT LƯỢNG (QC): VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 10/14 14.1 Mẫu lặp Thực phân tích mẫu lặp, tính mức độ sai lệch (%) lần phân tích theo cơng thức: Độ sai lệch (%) = (X1-X2)/((X1+X2)/2) (X1, X2 nồng độ thu sau lần tính) Nếu độ sai lệch 20% cần thực lại phương pháp phân tích Tần suất kiểm tra ≥ 5% số lượng mẫu 14.2 Kiểm tra độ vô trùng môi trường nuôi cấy Kiểm tra độ vô trùng mẫu mơi trường sau q trình hấp khử trùng cách sử dụng đối chứng âm (ống môi trường khơng cấy vi khuẩn) nhiệt độ 35 ÷ 0,50C) song song mẫu phân tích Mơi trường âm tính (không bị chuyển màu/đục/sinh hơi) đạt 14.3 Kiểm tra chất lượng chủng chuẩn Nuôi cấy ống đối chứng dương (cấy chủng chuẩn E.Coli) với loại môi trường song song với mẫu phân tích Mơi trường dương tính (bị chuyển màu/đục/sinh hơi) đạt 14.4 Kiểm tra vi sinh vật khơng khí 1.1.1 Kiểm tra vi sinh vật hiếu khí Yêu cầu: Tổng số vi khuẩn hiếu khí ≤ 15CFU 1.1.2 Kiểm tra E.coli bề mặt: Kiểm tra E.coli bề mặt khu chuẩn bị mẫu, cấy mẫu, tủ nuôi cấy Yêu cầu: Số lượng KPH + Tần suất thực hiện: Thực việc kiểm sốt:1 lần/1 đợt phân tích mẫu tuần/ lần phân tích liên tục 14.5 Kiểm tra thử nghiệm hoàn thành Thử nghiệm hoàn thành khuyến nghị QC kết thử nghiệm không chắn, thực mẫu nước uống, nước sinh hoạt khơng có mẫu dương tính vịng q + Tần suất thực hiện: Thực việc kiểm soát 01 quý /1lần với số lượng mẫu kiểm tra ≥10% tổng số lượng mẫu khơng có mẫu dương tính VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CÔNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 11/14 15 TÀI LIỆU LIÊN QUAN - HD-37-02: Hướng dẫn kiểm tra phân tích vi sinh - BM-W37-01: Biên thử nghiệm phân tích coliform, fecal, E.coli - BM-W37-02: Nhật ký pha môi trường - BM-W37-03: Kiểm tra hiệu môi trường - BM-12-01: Theo dõi điều kiện môi trường - BM-02-08: Nhật ký theo dõi tủ ấm - BM-02-09: Nhật ký vận hành nồi hấp môi trường - BM-02-08: Nhật ký vận hành nồi hấp hủy VIỆN CƠ KHÍ NĂNG LƯỢNG VÀ MỎ - VINACOMIN Số hiệu: SOP-W37 TRUNG TÂM THỬ NGHIỆM KIỂM ĐỊNH CƠNG NGHIỆP Lần ban hành/sửa đổi: PHỊNG THÍ NGHIỆM HĨA HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG 03.22/0 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH COLIFORM, FECAL, E.COLI Ngày ban hành: 20/4/2022 Trang: 12/14 PHỤ LỤC I: 9221.II - Giá trị MPN/100 mL mẫu mức tin cậy 95 % (đối với kết hợp khác tất kết dương tính âm tính sử dụng thể tích mẫu vào ống 20ml Số ống dương tính (5 ống, 20ml mẫu/ống) MPN/ 100 mL < 1,1 1,1 2,6 4,6 8,0 >8,0 Độ tin cậy 95% Thấp Cao 3,5 0,051 5,4 0,40 8,4 1,0 13 2,1 23 3,4 - PHỤ LỤC II: 9221.III - Giá trị MPN/100 mL mẫu mức tin cậy 95 % (đối với kết hợp khác tất kết dương tính âm tính sử dụng thể tích mẫu vào ống 10ml Số ống dương tính (5 ống, 10ml mẫu/ống) 10 MPN/ 100 mL < 1,1 1,1 2,2 3,6 5,1 6,9 9,2 12 16 23 >23 Độ tin cậy 95% Thấp Cao 3,4 0,051 5,9 0,37 8,2 0,91 9,7 1,6 13 2,5 15 3,3 19 4,8 24 5,8 34 8,1 53 1,3 - PHỤ LỤC 3: BẢNG 9221:IV - Giá trị MPN/100 ml mẫu mức tin cậy 95% kết hợp khác kết dương sử dụng phần mẫu thử ống với dung tích 10mL, 1mL 0,1mL Mức tin cậy Cách kết hợp kết dương tính MPN/ 100 mL Thấp 0-0-0 1600 52 70 70 36 58 70 100 100 150 70 100 150 220 400 700 400 400 400 400 400 440 710 710 1100 710 1100 1700 2600 4600 - ... - SMEWW 9221B:2017- Standard Total Coliform Fermentation Technique - SMEWW 9221C:2017- Estimation of Bacterial Density - SMEWW 922 1E: 2017 - E. Thermortolerant (Fecal) coliform Procedure - SMEWW. .. mặt Indol - Xác định ống dương tính đậm độ ni cấy (ống dương tính ống có vành đỏ ống nghiệm ni cấy vi khuẩn) - Tra bảng MPN để tính kết E. coli 12.4 Xác định coliform, fecal Coli, E. Coli mẫu nước... ÁP DỤNG: Mục đích: Quy định phương pháp xác định tổng coliform, coliform chịu nhiệt (Fecal) , E. coli nước Phịng thí nghiệm Hóa học Mơi trường - Trung tâm Thử nghiệm Kiểm định Công nghiệp -Viện