Một số hợp chất triterpenoid saponin và xanthone glucoside từ cây viễn chí nhật (polygala japonica houtt )

Tạp chí Hóa học, 2018, 56(1), 86-93 Bài nghiên cứu DOI: 10.15625/vjc.2018-0010 Một số hợp chất triterpenoid saponin xanthone glucoside từ viễn chí nhật (Polygala japonica Houtt.) Trần Hồng Quang1,2, Phạm Thành Công2, Dương Thị Hải Yến1, Nguyễn Xuân Nhiệm1, Phạm Hải Yến1, Nguyễn Thị Thanh Ngân3, Phan Văn Kiệm1,2* Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Viện Nghiên cứu hệ gen, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Đến Tòa soạn ngày 17-11-2017; Chấp nhận đăng 10-02-2018 Abstract Phytochemical study of the roots of Polygala japonica Houtt resulted in the isolation of four oleanane triterpenoid saponins, tenuifolin (1), polygalasaponin XXVIII (2), polygalasaponin XLVII (3), fallaxsaponin A (4) and a Cglucosylxanthone, 7-O-methylmangiferin (5) Their chemical structures were characterized by extensive spectroscopic analyses, including 1D and 2D-NMR spectra and MS in comparison with the data reported in the literature Keywords Polygala japonica, Polygalaceae, saponin, xanthone THỰC NGHIỆM Cây viễn chí Nhật (Polygala japonica Houtt.), thuộc họ Polygalaceae, loại thảo mộc hàng năm, phân bố rộng rãi Trung Quốc, Nhật Bản, Philippin Việt Nam Trong y học cổ truyền Việt Nam, P japonica sử dụng để điều trị viêm phế quản, trí nhớ, biếng ăn, có ảnh hưởng tốt đến thận.[1] Trong y học cổ truyền Trung Quốc, P japonica sử dụng thuốc long đờm, kháng viêm, kháng khuẩn, giảm đau, thuốc an thần.[2] Cây thuốc sử dụng để điều trị số chứng viêm, viêm amiđan, viêm họng, viêm tủy, viêm thận.[3] Các nghiên cứu trước cho thấy P japonica nguồn cung dồi hợp chất saponin[4-8], số saponin có tác dụng an thần[8], kháng viêm[3,9], bảo vệ tế bào thần kinh [10] Ngoài ra, số hợp chất xanthone [11, 12] phenolic glycoside[13] phân lập từ rễ P japonica Với mục đích tìm hiểu sâu thành phần hóa học từ thuốc quý này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học lồi Polygala japonica Trong nghiên cứu này, chúng tơi thông báo kết phân lập xác định cấu trúc hợp chất triterpenoid saponin hợp chất xanthone glucoside từ dịch chiết metanol rễ viễn chí Nhật 86 Wiley Online Library 2.1 Mẫu thực vật Rễ viễn chí Nhật (P japonica) thu hái Ninh Bình vào tháng năm 2014 Tên khoa học xác định TS Nguyễn Thế Cường, Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Mẫu tiêu lưu giữ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Viện Hóa sinh biển 2.2 Hóa chất thiết bị Sắc ký lớp mỏng (TLC): Thực mỏng tráng sẵn DC-Alufolien 60 F254 (Merck 1,05715), RP18 F254S (Merck) Sắc ký cột (CC): Được tiến hành với chất hấp phụ silica gel pha thường pha đảo (C18) chất lọc gel Sephadex LH-20 Silica gel pha thường có cỡ hạt 0,040-0,063 mm (240-430 mesh) silica gel pha đảo RP-18 (150 m, Fuji Silysia Chemical Ltd.) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR): Đo máy Bruker AM500 JEOL JNM ECP-400 Phổ khối lượng (ESIMS): Đo máy AGILENT 1100 series 2.3 Phân lập hợp chất Mẫu rễ khô viễn chí P japonica (2 kg) © 2018 Vietnam Academy of Science and Technology, Hanoi & Wiley-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, Weinheim Tạp chí Hóa học chiết MeOH (3 lần x L) điều kiện siêu âm nhiệt độ phòng Dịch chiết lọc qua giấy lọc loại dung môi áp suất giảm thu cặn chiết MeOH (190 g) Cặn chiết MeOH phân bố nước cất chiết phân lớp với CH2Cl2, EtOAc, BuOH, thu dịch chiết phân lớp CH2Cl2, EtOAc, BuOH, nước Phân lớp EtOAc (PJE, 10 g) phân tách qua cột silica gel pha đảo (RP) C18, rửa giải với MeOH-H2O (1:1, v/v) thu phân đoạn PJE.1-PJE.3 Phân đoạn PJE3 phân tách cột silica gel pha đảo C18, sử dụng hệ dung môi rửa giải MeOH:H2O (1:1, v/v) thu phân đoạn PJB3-1 - PJB3-5 Phân đoạn PJB3-5 phân taahcs sắc ký cột silica gel pha thường, rửa giải với hệ dung mơi CH2Cl2:MeOH:H2O (5:1:0,1, v/v/v), sau tinh chế qua cột silica gel pha đảo C18, với hệ dung môi rửa giải MeOH:H2O (1:1, v/v) thu hợp chất (7 mg) Phân lớp BuOH (PJB, 50 g) phân cắt qua cột silica gel pha thường, rửa giải với CH2Cl2-MeOH (20:1-1:1, v/v) thu phân đoạn PJB.1-PJB.5 Phân đoạn PJB.4 phân tách sắc ký cột RP C18, rửa giải gradient với MeOH-H2O (1:3-2:1, v/v) thu phân đoạn nhỏ PJB.4.1PJB.4.5 Phân đoạn PJB.4.2 phân tách qua cột Sephadex LH-20, rửa giải với MeOH-H2O (1:1, v/v), sau tinh chế sắc cột silica gel pha thường, rửa giải với CH2Cl2-MeOH-H2O (2.5:1:0,1, v/v/v) thu hợp chất (5 mg) Tiến hành phân tách phân đoạn PJB.4.2 sắc ký cột pha đảo RP C18, với hệ dung môi rửa giải MeOHH2O (15:10, v/v) thu hợp chất (5 mg) Bằng phương pháp tương tự, hợp chất (4 mg) (10 mg) phân lập từ phân đoạn PJB.4.4 sắc ký cột silica gel pha thường, với hệ dung môi rửa giải CH2Cl2-MeOH-H2O (3:1:0,1, v/v/v) Tenuifolin (1): Bột vơ định hình màu trắng ESIMS: m/z 681 [M+H]+ Cơng thức phân tử C36H56O12 (M = 680) 1H NMR (DMSO-d6, 500 MHz): H 4,11 (br s, H-2), 3,91 (d, J = 3,5 Hz, H-3), 5,39 (br s, H-12), 1,22 (s, H3-24), 1,16 (s, H3-25), 0,64 (s, H3-26), 3,52 (br d, J = 11,5 Hz, Ha-27), 3,41 (br d, J = 11,5 Hz, Hb-27), 0,85 (s, H3-29), 0,87 (s, H3-30), 5,11 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ), 3,63 (br d, J = 11,0 Hz, Ha-6 ), 3,41 (br d, J = 11,0 Hz, Hb-6 ) 13C NMR (DMSO-d6, 125 MHz), xem bảng Polygalasaponin XXVIII (2): Bột vơ định hình màu trắng ESIMS: m/z 1105 [M+H]+ Công thức phân tử C53H84O24 (M = 1104) 1H NMR (CD3OD, 500 MHz): H 4,32 (br d, J = 3,0 Hz, H-2), 4,12 (d, J = 3,5 Hz, H-3), 5,66 (br s, H-12), 1,40 (s, H3-24), 1,28 (s, H3-25), 0,76 (s, H3-26), 3,77 (br d, J = 12,0 Hz, Ha-27), 3,52 (br d, J = 12,0 Hz, Hb-27), 0,93 (s, Phan Văn Kiệm cộng H3-29), 0,97 (s, H3-30), 4,37 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ), 5,39 (d, J = 8,0 Hz, H-1 ), 3,87 (dd, J = 8,0, 9,0 Hz, H-2 ), 1,25 (d, J = 6,5 Hz, H3-6 ), 5,46 (d, J = 1,5 Hz, H-1 ), 3,53 (H-4 ), 1,31 (d, J = 6,0 Hz, H36 ), 4,46 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ) 13C NMR (CD3OD, 125 MHz), xem bảng Polygalasaponin XLVII (3): Bột vô định hình màu trắng; ESIMS: m/z 829 [M+H]+; Cơng thức phân tử C42H68O16 (M = 828); 1H NMR (CD3OD, 500 MHz): H 3,63 (dd, J = 4,5, 11,5 Hz, H-3), 5,68 (br s, H12), 3,53 (br d, J = 3,0 Hz, Ha-23), 3,32 (Hb-23), 0,72 (s, H3-24), 0,97 (s, H3-25), 0,81 (s, H3-26), 3,81 (br d, J = 12,5 Hz, Ha-27), 3,49 (br d, J = 12,5 Hz, Hb-27), 3,57 (br d, J = 9,5 Hz, Ha-29), 3,29 (br d, J = 9,5 Hz, Hb-29), 1,04 (s, H3-30), 4,39 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ), 3,51 (dd, J = 7,5, 9,0 Hz, H-2 ), 4,65 (d, J = 8,0 Hz, H-1 ); 13C NMR (CD3OD, 125 MHz), xem bảng Fallaxsaponin A (4): Bột vơ định hình màu trắng ESIMS: m/z 651 [M+H]+ Công thức phân tử C35H54O11 (M = 650); 1H NMR (C5D5N, 400 MHz): H 4,82 (br s, H-2), 4,71 (br d, J = 4,0 Hz, H-3), 2,01/0,99 (H2-12), 2,81 (dd, J = 3,2, 12,4 Hz, H-18), 1,95 (s, H3-24), 1,41 (s, H3-25), 1,00 (s, H3-26), 0,97 (s, H3-29), 1,00 (s, H3-30), 5,12 (d, J = 8,0 Hz, H-1 ), 4,48 (dd, J = 2,0, 11,6 Hz, Ha-6 ), 4,28 (dd, J = 6,0, 11,2 Hz, Hb-6 ); 13C NMR (C5D5N, 100 MHz), xem bảng 7-O-Methylmangiferin (5): Bột vơ định hình màu vàng cam ESIMS: m/z 437 [M+H]+; Công thức phân tử C20H20O11 (M = 436); 1H NMR (DMSO-d6, 500 MHz) 13C NMR (DMSO-d6, 125 MHz), xem bảng 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ột vô đị trắng Công thức phân tử hợp chất xác định C36H56O12 thông qua xuất ion phân tử [M + H]+ m/z 681 phổ khối lượng ESIMS, cho thấy có liên kết đôi tương đương Dữ liệu 1H NMR cho thấy tín hiệu singlet đặc trưng nhóm methyl bậc ba H 1,22 (H3-24), 1,16 (H3-25), 0,64 (H3-26), 0,85 (H3-29) 0,87 (H3-30) tín hiệu proton olefin cộng hưởng H 5,39 (H-12) (bảng 1) Phổ 1H NMR ghi nhận tín hiệu tín hiệu proton anome H 5,11 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ) cho thấy hợp chất có đơn vị đường phân tử Phổ 13C NMR ghi nhận tín hiệu 36 cacbon, có 30 tín hiệu cacbon phần aglycone cacbon đơn vị Hợp © 2018 Vietnam Academy of Science and Technology, Hanoi & Wiley-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, Weinheim www.vjc.wiley-vch.de 87 Bài nghiên cứu Một số hợp chất triterpenoid saponin… Hình 1: Cấu trúc hố học hợp chất 1-5 từ rễ Polygala japonica đường Tiến hành phân tích phổ 13C NMR HSQC cho thấy phần aglycone bao gồm metyl (CH3), 10 metylen (CH2) [bao gồm nhóm mang oxy C 63,6 (C-27)], metin (CH) [bao gồm nhóm mang oxy C 68,9 (C-2) 83,4 (C-3) metin olefin C 125,3 (C-12)], carbon không liên kết với hydro [bao gồm hai carbon carbonyl C 179,2 (C-23) 178,8 (C-28)] (bảng 1), cho gợi ý hợp chất thuộc lớp chất oleanane triterpenoid [14] Tín hiệu dịch chuyển trường thấp carbon metin C 83,4 (C-3) gợi ý có mặt liên kết glycosit Trên phổ 13C NMR ghi nhận tín hiệu cacbon đơn vị đường bao gồm: cacbon anome 102,8 (C-1 ), carbon methine, cacbon methylene 61,0 (C-6 ) gợi ý có mặt đường glucose Với số bắt cặp lớn (J = 7,5 Hz) proton anome, đường monosacarit xác định -glucose Tiến hành so sánh kiện phổ 1H 13C NMR hợp chất với số liệu hợp chất triterpenoid biết (tenuifolin) cho kết hoàn tồn tương đồng (bảng 1), cho phép dự đốn hợp chất có cấu trúc tương tự [15] Cấu trúc hóa học hợp chất khẳng định thêm thơng qua phân tích phổ chiều HSQC HMBC (hình 2) Trên phổ HMBC, tương tác tín hiệu proton anome H 5,11 (H-1 ) với C 83,4 (C-3) cho phép xác định vị trí đường -glucose vị trí C-3 Các tương tác HMBC tín hiệu H 1,22 (H3-24) với 83,4 (C3) 179,2 (C-23) cho phép xác định vị trí nhóm carbonyl (C-23) nhóm metyl (C-24) Tương tác HMBC H 3,52 3,41 (H2-27) với C 39,8 (C-8) 21,9 (C-15) cho phép xác định vị trí nhóm oxymetylen (C-27) aglycone Ngồi ra, tương tác HMBC tín hiệu proton nhóm methyl bậc với cacbon liền kề cho phép khẳng định cấu trúc hợp chất (hình 2) Từ phân tích phổ nêu trên, hợp chất xác định tenuifolin Hợp chất thu dạng bột vơ định hình màu trắng Trên phổ khối lượng ESIMS xuất tín hiệu ion giả phân tử [M+H]+ m/z 1105 cho phép dự đốn cơng thức phân tử hợp chất C53H84O24 (M = 1104) So sánh kiện phổ 1H 13 C NMR hợp chất với hợp chất thấy tương đồng, cho thấy hợp chất thuộc lớp chất oleanane triterpenoid saponin Điểm khác biệt hợp chất thể vùng tín hiệu nhánh đường Cụ thể, phổ 1H NMR hợp chất xuất thêm tín hiệu proton anome H 5,39 (d, J = 8,0 Hz, H-1 ), 5,46 (d, J = 1,5 Hz, H-1 ), 4,46 (d, J = 7,5 Hz, H-1 ) cho thấy hợp chất có nhiều đơn vị đường phân tử so với hợp chất Phân tích chi tiết tín hiệu thuộc vùng đường phổ 13C NMR hợp chất cho dự 88 Bài nghiên cứu Một số hợp chất triterpenoid saponin… Bảng 1: Dữ kiện phổ 13C NMR hợp chất và hợp chất tham khảo C C 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 a #1 44,1 70,2 86,0 52,8 52,3 21,2 34,2 40,9 49,4 37,0 24,0 127,7 139,8 46,5 24,7 24,0 48,2 41,8 45,7 30,9 33,5 33,2 180,6 14,0 17,3 18,7 64,6 180,0 33,2 23,8 a,b C 43,5 68,9 83,4 51,13 50,9 19,9 32,6 39,8 47,9 35,9 22,8 125,3 139,4 46,7 21,9 23,3 45,3 40,7 44,7 30,3 33,3 32,1 179,2 13,4 16,4 18,0 63,6 178,8 32,8 23,4 125 MHz, bđo DMSO-d6, cCD3OD, #1 #2 C C 44,6 71,0 85,9 53,3 52,9 21,7 34,2 41,7 50,1 37,5 23,9 128,9 139,3 49,0 24,7 24,9 47,8 42,7 46,2 31,6 34,6 32,9 181,9 14,2 17,6 18,9 64,9 178,0 33,4 24,2 C 6 tenuifolin C5D5N [15], #2 đốn có mặt đường fucose [ C 95,3 (C1 ), 74,0 (C-2 ), 76,7 (C-3 ), 73,7 (C-4 ), 72,7 (C5 ), 16,5 (C-6 )], đường rhamnose [ C 101,1 (C-1 ), 71,9 (C-2 ), 72,3 (C-3 ), 84,5 (C-4 ), 68,6 (C-5 ), 18,2 (C-6 )] đường xylose [ C 107,1 (C-1 ), 76,1 (C-2 ), 78,3 (C-3 ), 71,0 (C4 ), 67,2 (C-5 )] Hằng số tương tác lớn proton anome đường fucose (J = 8,0 Hz) đường xylose (J = 7,5 Hz) cho phép xác định đường có cấu hình Bên cạnh đó, cấu hình đường rhamnose xác định thông qua so sánh độ dịch chuyển hóa học vị trí C-3 C-5 với số liệu đồng phân - and rhamnopyranoside [16] Cấu trúc nhánh đường khẳng định thông qua tương tác phổ HSQC HMBC (hình 2) Trên phổ HMBC, tương tác HMBC tín hiệu proton anome đường #1 C 44,3 70,3 86,0 52,9 52,5 21,4 33,6 41,2 49,4 37,1 23,6 127,9 138,9 48,0 24,6 24,1 46,9 42,0 45,4 30,8 33,8 32,4 180,8 13,7 17,5 18,8 64,5 176,7 33,1 24,1 C a,c 105,1 75,2 78,2 71,7 78,2 62,8 C a,b C 102,8 73,6 76,4 70,1 76,8 61,0 #2 C 105,4 75,3 78,4 71,6 78,4 62,7 94,8 74,0 76,7 73,2 72,5 16,9 101,2 71,8 72,5 85,1 68,3 18,6 107,4 76,2 78,8 70,9 67,5 a,c C 104,9 75,2 77,8 71,1 77,8 62,3 95,3 74,0 76,7 73,7 72,7 16,5 101,1 71,9 72,3 84,5 68,6 18,2 107,1 76,1 78,3 71,0 67,2 polygalasaponin XXVIII C5D5N [7] xylose H 4,46 (H-1 ) với tín hiệu cacbon metin dịch chuyển trường thấp C 84,5 (C-4 ) cho phép xác định vị trí đường xylose vị trí C-4 đường rhamnose thơng qua liên kết ete Tương tác HMBC proton anome đường rhamnose H 5,46 (H-1 ) với tín hiệu cacbon metin C 74,0 (C-2 ) cho thấy đường rhamnose liên kết với vị trí C-2 đường fucose thơng qua liên kết glycosit Ngồi ra, tương tác HMBC proton anome đường fucose H 5,39 (H-1 ) với tín hiệu cacbon carbonyl 178,0 (C-28) cho phép xác định nhánh đường trisacarit liên kết với vị trí C-28 alycone Từ phân tích trên, kết hợp với phù hợp hoàn toàn so sánh số liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất với hợp chất saponin biết, cấu trúc hóa học hợp chất xác định 3O- -D-glucopyranosyl presenegenin 28-O- -D89 Bài nghiên cứu Một số hợp chất triterpenoid saponin… xylopyranosyl(1 4)- -L-rhamnopyranosyl(1 2)-D-fucopyranosyl ester, tên polygalasaponin XXVIII Hợp chất phân lập dạng bột vơ định hình màu trắng, với cơng thức phân tử C42H68O16 (M = 828) xác định thơng qua tín hiệu [M+H]+ Bảng 2: Dữ kiện phổ 13C NMR hợp chất và hợp chất tham khảo C C 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 #1 38,5 27,6 73,6 42,7 48,7 18,6 33,3 40,4 48,7 37,3 24,1 127,8 139,5 47,8 24,3 23,8 46,8 40,8 40,3 35,6 29,1 a,b C 39,3 27,4 74,1 43,3 49,0 19,2 33,7 41,1 49,7 38,1 25,0 129,2 139,7 47,8 24,7 24,0 46,8 41,7 40,7 36,3 29,3 #2 C 44,9 71,8 76,0 54,0 52,0 18,5 39,5 38,4 57,3 37,2 21,1 24,0 130,7 137,0 21,9 31,9 45,3 39,9 41,9 30,9 34,6 C 22 23 24 25 26 27 28 29 30 6 a C m/z 829 phổ khối lượng ESIMS Phân tích so sánh số liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất với hợp chất thấy tương đồng, cho thấy hợp chất hợp chất oleanane triterpenoid saponin Trên phổ 1H NMR hợp chất xuất thêm tín hiệu proton anome H 4,65 (d, J = 8,0 Hz, H-1 ) so với hợp chất cho thấy hợp chất có đơn vị đường phân tử Phân tích chi tiết tín hiệu cacbon số tương tác lớn proton anome (J1,2 > 7,0 Hz) cho phép xác định có mặt đường -glucose Tín hiệu cacbon dịch chuyển trường thấp C 82,6 (C-2 ) cho dự đoán nhánh đường oligosacarit -D-glucopyranosyl(1 2)- -D-glucopyranosyl Điều khẳng định thông qua tương tác HMBC H 4,65 (H1 ) với 82,6 (C-2 ) phổ HMBC (hình 2) Ngồi ra, tín hiệu proton singlet nhóm metyl bậc ba hợp chất thay tín hiệu proton broad doublet H 3,57 3,29 (H2-29) hợp chất cho thấy xuất nhóm oxymetylen hợp chất Tương tác HSQC H 3,57 3,29 #1 C 44,2 70,6 86,5 53,1 52,4 18,7 39,7 38,6 57,4 37,3 21,4 24,2 130,9 137,1 21,7 32,1 45,5 40,1 42,0 31,1 34,8 125 MHz, bđo CD3OD, c100 MHz, dđo C5D5N, #1 senegenic acid đo C5D5N [17] C c,d 32,4 68,3 13,0 16,3 18,8 64,4 180,1 81,1 19,9 103,4 83,7 78,5 71,3 77,9 62,8 106,3 76,9 78,2 71,5 77,9 62,6 a,b C 32,9 67,7 12,6 16,6 19,2 64,9 178,3 81,8 20,2 103,5 82,6 78,0 71,5 77,8 62,7 104,9 76,2 78,3 71,7 77,7 62,9 #2 c,d C C 32,2 180,8 13,4 18,1 20,8 180,2 32,7 25,1 polygalasaponin XLVII đo C5D5N [13], #2 32,4 180,8 14,1 18,2 21,1 180,5 32,9 25,3 105,6 75,4 78,6 71,7 78,6 62,9 C với tín hiệu cacbon metylen trường thấp C 81,8 (C-29) cho phép dự đốn có mặt liên kết glycosit Điều khẳng định thông qua tương tác HMBC proton anome đường glucose H 4,39 (H-1 ) với tín hiệu oxymetylen C 81,8 (C-29) Ngồi ra, tín hiệu nhóm cacbonyl hợp chất thay tín hiệu nhóm oxymetylen [ H 3,53 (br d, J = 3,0 Hz, Ha-23), 3,32 (Hb-23)/ 67,7 (C-23)] hợp chất Sự thay đổi khẳng định thông qua tương tác HMBC H 0,72 (H3-24) C 67,7 (C-23) Cấu trúc hóa học hợp chất khẳng định thêm phù hợp hoàn toàn so sánh kiện phổ 1H 13C NMR hợp chất với hợp chất biết [13] Do đó, hợp chất xác định polygalasaponin XLVII Hợp chất có dạng bột vơ định hình màu trắng Trên phổ khố lượng ESIMS hợp chất xuất tín hiệu ion giả phân tử [M+H]+ m/z 651 [M+H]+, cho phép xác định công thức phân tử C35H54O11 (M = 650) So sánh số liệu phổ 1H 13C NMR 90 Tạp chí Hóa học Phan Văn Kiệm cộng hợp chất với hợp chất cho kết tương đồng, cho thấy cấu trúc hợp chất tương tự nhau, ngoại trừ dịch chuyển liên kết đơi vị trí 12,13 hợp chất sang vị trí 13,14 thơng qua xuât tín hiệu C 24,2 (C-12), 130,9 (C-13), 137,1 (C-14) phổ 13C NMR hợp chất Cùng với tín hiệu nhóm oxymetylen (C-27) hợp chất so với hợp chất Điều chứng minh thông qua tương tác HMBC H 1,00 (H3-26) với C 137,1 (C14), H 2,81 (H-18) với C 130,9 (C-13), 137,1 (C-14) phổ HMBC (hình 2) So sánh số liệu phổ 1H 13C NMR phần aglycone hợp chất với hợp chất triterpenoid biết senegenic acid thấy hoàn toàn phù hợp, cho thấy hợp chất hợp chất senegenic acid glucoside [17] Vị trí đường -glucose xác định vị trí C-3 thơng qua tương tác HMBC proton anome Hình 2: Các tương tác HMBC hợp chất 1-5 H 5,12 (H-1 ) với C 86,5 (C-3) Như vậy, hợp chất xác định fallaxsaponin A [18] Hợp chất thu dạng bột vơ định hình màu vàng cam Công thức phân tử hợp chất xác định C20H20O11 (M = 436) thơng qua tín hiệu ion m/z 437 [M+H]+ phổ ESIMS, kết hợp với phân tích phổ 1H 13C NMR Trên phổ 1H NMR hợp chất xuất tín hiệu singlet proton thơm H 6,39 (s, H-4), 6,90 (s, H-5), 7,44 (br s, H-8) gợi ý có mặt vịng thơm, vịng thơm năm vị trí vịng thơm vị trí 1,2,4,5 (bảng 3) Phổ 1H NMR cịn ghi nhận tín hiệu oxymetin đơn vị đường H 4,61 (d, J = 9,5 Hz, H-1 ), 3,15 (dd, J = 9,0, 9,5 Hz, H-2 ), 3,19 (H-3 ), 4,08 (br t, J = 9,0 Hz, H-4 ), 3.17 (m, H-5 ), với tín hiệu nhóm oxymetylen H 3,70 (br d, J = 11,0 Hz, H6 a) 3,40 (H-6 b) Ngồi ra, phổ 1H NMR cịn có xuất tín hiệu nhóm methoxy H 3,88 (s) nhóm hydroxyl H 13,72 (s) Phổ 13C NMR hợp chất xuất tín 20 cacbon, bao gồm 13 tín hiệu carbon sp2 có carbon carbonyl C 178,9 (C-9), nhóm metin vịng thơm, cacbon không liên kết với proton hai vịng thơm, tín hiệu cacbon sp3 bao gồm nhóm methoxy C 55,9 tín hiệu carbon thuộc phân tử đường C 73,0 (C-1 ), 70,7 (C-2 ), 79,0 (C-3 ), 70,2 (C-4 ), 81,6 (C-5 ), 61,5 (C-6 ) (bảng 3) Kết hợp với phân tích liệu phổ 1H NMR cho gợi ý cấu trúc hợp chất thuộc khung xanthone mang đơn vị đường -glucopyranose [19] Tuy nhiên, phổ H 13C NMR hợp chất khơng thấy có xuất tín hiệu proton carbon anome, qua cho phép dự đoán cấu trúc hợp chất thuộc lớp chất C-glucosylxanthone Tiến hành so sánh số liệu phổ 1H 13C NMR hợp chất với hợp chất C-glucosylxanthone biết 7-Omethylmangiferin cho kết hoàn toàn tương đồng (bảng 3) [19] Cấu trúc hợp chất khẳng định thơng qua phân tích phổ HSQC HMBC (hình 2) Trên phổ HMBC xuất tương tác H 4.61 (H-1 ) C 161,8 (C-1), 107,8 (C-2), 163,9 (C-3) cho thấy đường glucose có liên kết C-C với aglycone vị trí C-2 Tương tác HMBC H 13,72 với C 161,8 (C-1) 101,3 (C-9a) H 6,39 (H-4) với C 163,9 (C-3) cho phép xác định vị trí hai nhóm hydroxyl vị trí C-1 C-3 tương ứng Tương tác HMBC proton nhóm methoxy H 3,88 với C 146,0 (C-7) cho phép xác định vị trí nhóm methoxy vị trí C-7 Vị trí nhóm hydroxyl cịn lại xác định vị trí C-6 thông qua tương tác HMBC H 7,44 (H-8) với C 154,6 (C-6) Từ phân tích nêu trên, với © 2018 Vietnam Academy of Science and Technology, Hanoi & Wiley-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, Weinheim www.vjc.wiley-vch.de 91 Bài nghiên cứu Một số hợp chất triterpenoid saponin… so sánh số liệu 1H 13C NMR với tài liệu tham khảo [19], hợp chất xác định 7-Omethylmangiferin inflammatory activities of triterpenoid saponins from Polygala japonica Phytomedicine, 2008, 15, 321326 D Zhang, T Miyase, M Kuroyanagi, K Umehara, A Ueno Studies on the constituents of Polygala japonica Houtt I Structures of polygala saponins IX, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1995, 43, 115-120 D Zhang, T Miyase, M Kuroyanagi, K Umehara, A Ueno Studies on the Constituents of Polygala japonica Houtt II Structures of Polygala saponins XI-XIX, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1995, 43, 966-970 D Zhang, T Miyase, M Kuroyanagi, K Umehara, A Ueno Studies on the constituents of Polygala japonica Houtt III Structures of polygala saponins XX-XXVII, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1996, 44, 173-179 D Zhang, T Miyase, M Kuroyanagi, K Umehara, A Ueno Five new triterpene saponins, polygalasaponins XXVIII-XXXII from the root of Polygala japonica Houtt, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1996, 44, 810-815 T Z Li, W D Zhang, G J Yang, W Y Liu, H S Chen, Y H Shen Saponins from Polygala japonica and their effects on a forced swimming test in mice, Journal of Natural Products, 2006, 69, 591-594 H Wang, J Gao, D Zhu, B Yu Two new triterpenoid saponins isolated from Polygala japonica, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 2006, 54, 1739-1742 13 Bảng 3: Dữ kiện phổ H and C NMR hợp chất C # C a,b C 4a 8a 9a 10 10a 7-OCH3 1-OH 161,6 107,6 163,7 93,3 156,0 102,6 154,4 145,8 107,7 111,3 178,8 101,2 161,8 107,8 163,9 93,4 156,2 102,7 154,6 146,0 104,8 111,4 178,9 101,3 151,5 72,9 70,5 78,8 70,2 81,3 61,4 151,7 73,0 70,7 79,0 70,2 81,6 61,5 55,7 55,9 a,c H (mult., J, Hz) 6,39 (s) 6,90 (s) 7,44 (d, 3,0) 4,61 (d, 9,5) 3,15* 3,19* 4,08 (br t, 9,0) 3,17 3,70 (br d, 12,0) 3,40* 3,88 (s) 13,72 (s) Đo DMSO-d6, b125 MHz, c500MHz, *tín hiệu bị che khuất, # C 7-O-methylmangiferin đo DMSO-d6.[19] 10 C Li, J Fu, J Yang, D Zhang, Y Yuan, N Chen Three triterpenoid saponins from the roots of Polygala japonica Houtt, Fitoterapia, 2012, 83, 1184-1190 11 Q C Xue, C J Li, L Zuo, J Z Yang, D M Zhang Three new xanthones from the roots of Polygala japonica Houtt, Journal of Asian Natural Products Research, 2009, 11, 465-469 a Lời cảm ơn Nghiên cứu tài trợ Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 104.01-2016.31 TÀI LIỆU THAM KHẢO V V Chi Dictionary of medicinal plants in Vietnam, Vietnam Publisher of Medicine, 2, pp 1172, 2012 Editorial Board of China Herbal of State Administration of Traditional Chinese Medicine China Herbal, Shanghai Science and Technology Publishers: Shanghai, 7, pp 567, 1999 H Wang, J Gao, J Kou, D Zhu, B Yu Anti- 12 T Z Li, W D Zhang, G J Yang, W Y Liu, R H Liu, C Zhang, H S Chen New flavonol glycosides and new xanthone from Polygala japonica, Journal of Asian Natural Products Research, 2006, 8, 401409 13 J Fu, L Zuo, J Yang, R Chen, D Zhang Oligosaccharide polyester and triterpenoid saponins from the roots of Polygala japonica, Phytochemistry, 2008, 69, 1617-1624 14 T H Quang, N T Ngan, C V Minh, P V Kiem, N X Nhiem, B H Tai, N P Thao, N H Tung, S B Song, Y H Kim Anti-inflammatory triterpenoid saponins from the stem bark of Kalopanax pictus, Journal of Natural Products, 2011, 74, 1908-1915 15 S Sakuma, J Shoji Studies on the Constituents of the Root of Polygala tenuifolia Willdenow II On the 92 Tạp chí Hóa học Structures of Onjisaponins A, B and E, Chemical andPharmaceutical Bulletin, 1982, 30, 810-821 16 R Kasai, M Okihara, J Asakawa, K Mizutani, O Tanaka 13C NMR study of alpha- and beta-anomeric pairs of D-mannopyranosides and Lrhamnopyranosides, Tetrahedron, 1979, 35, 14271432 17 J Zhang, Z -H Cheng, B -Y Yu, G A Cordell, S X Qiu Novel biotransformation of pentacyclic Phan Văn Kiệm cộng triterpenoid acids by Nocardia sp NRRL 5646,Tetrahedron Letters, 2005, 46, 2337-2340 18 J Zhong, B Di, F Feng Chemical constituents from root of Polygala fallax, Zhongcaoyao, 2009, 40, 844-846 19 M Fujita, T Inoue Studies on the constituents of Iris florentina L II C-glucosides of xanthones and flavones from the leaves Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1982, 30, 2342-2348 Liên hệ: Phan Văn Kiệm Viện Hóa sinh biển Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Số 18, đường Hồng Quốc Việt, quận Cầu Giấy, Hà Nội E-mail: phankiem@yahoo.com © 2018 Vietnam Academy of Science and Technology, Hanoi & Wiley-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, Weinheim www.vjc.wiley-vch.de 93 ... phân tử hợp chất C53H84O24 (M = 110 4) So sánh kiện phổ 1H 13 C NMR hợp chất với hợp chất thấy tương đồng, cho thấy hợp chất thuộc lớp chất oleanane triterpenoid saponin Điểm khác biệt hợp chất thể... NMR hợp chất với hợp chất saponin biết, cấu trúc hóa học hợp chất xác định 3O- -D-glucopyranosyl presenegenin 28-O- -D89 Bài nghiên cứu Một số hợp chất triterpenoid saponin? ?? xylopyranosyl(1 4)- ... (H3-2 4) C 67,7 (C-2 3) Cấu trúc hóa học hợp chất khẳng định thêm phù hợp hoàn toàn so sánh kiện phổ 1H 13C NMR hợp chất với hợp chất biết [13] Do đó, hợp chất xác định polygalasaponin XLVII Hợp chất