Ý nghĩa và mục đích- Xác định rõ trạng thái, tính chất bệnh lý của cây - Dựa trên cơ sở khảo sát toàn diện triệu chứng bên ngoài, các biểu hiện bên trong kết luận chính xác nguyên nh
Trang 1CHẨN ĐOÁN BỆNH HẠI CÂY
TRỒNG
Trang 2 Ý nghĩa và mục đích
- Xác định rõ trạng thái, tính chất bệnh lý của cây
- Dựa trên cơ sở khảo sát toàn diện triệu chứng bên ngoài, các biểu hiện bên trong kết luận chính xác nguyên nhân gây bệnh quyết định các biện pháp phòng trừ có cơ sở khoa học và hiệu quả
Trang 3 Điều kiện cần thiết để chẩn đoán bệnh cây
- Xác định chắc chắn những biến đổi: hình thái, các đặc thù của triệu chứng bên ngoài cây bệnh, bộ phận bị bệnh
- Xác định tính chất bệnh lý, khảo sát phát hiện và giám định vi sinh vật gây bệnh
- Đánh giá mức độ, thời gian xảy ra quá trình bị bệnh các điều kiện liên quan tới sự phát bệnh, nêu các biện pháp phòng trừ nếu cần thiết
Trang 4 Các phương pháp chẩn đoán bệnh cây
Phương pháp chẩn đoán theo triệu chứng bên ngoài
Căn cứ vào triệu chứng bên ngoài, những đặc trưng về hình thái, màu sắc, kích thước, sự phân bố vết bệnh
Phương pháp kiểm tra vi sinh vật gây bệnh trên cây bệnh
- Phải bảo đảm điều kiện vệ sinh, điều kiện thuận lợi để
vi sinh vật phát triển nhanh, nắm vững các thao tác giải phẩu mô bệnh, nhuộm mô và ký sinh vật, sử dụng kính hiển vi
Trang 5- Nhuộm mô bệnh: metylen xanh, nitrat bạc, KMnO4, acide fushin phát hiện thể sợi nấm, vi khuẩn trong mô bệnh
- Bệnh do siêu vi trùng hoặc mycoplasma: làm tiêu bản đặc biệt quan sát dưới kính hiển vi điện tử với độ phóng đại hàng chục vạn lần
Trang 6 Phương pháp sinh học: Quy tắc Koch
1- Mô bệnh có triệu chứng điển hình và ở trong đó có
vi sinh vật
2- Vi sinh vật ở mô bệnh có thể tách ra, nuôi cấy được
trên môi trường nhân tạo
3- Đem lây bệnh nhân tạo bằng loại vi sinh vật phân
lập được trên cây khoẻ
4- Phát ra bệnh với triệu chứng như ban đầu (1)
5- Từ vết bệnh do lây nhân tạo (4) - phân lập được loại
vi sinh vật giống như ban đầu (2)
Trang 7Aùp dụng Qui tắc Koch cho từng đối tượng gây bệnh
Nấm
Vi khuẩn Tuyến trùng
Vi rus
Trang 8- Bệnh trên hạt giống: rửa, ly tâm quan sát dưới KHV gieo hạt cách ly căn cứ vào sự xuất hiện triệu chứng bệnh trên cây con để xác định
- Bệnh virus: dùng cây chỉ thị để chẩn đoán
Nicotiana glutinosa (thuốc lá dại) virus TMV
thuốc lá
Gomphrena globosa (cây cúc bạch nhật) vết đốm
(virus X khoai tây)
Datura stramonium (cà độc dược)
Solanum demissum (cây khoai tây dại)
Phaseolus vulgaris (đậu)
Chenopodium quinoa (cây rau muối)
Trang 9 Phương pháp huyết thanh
- Dựa trên cơ sở khi kháng nguyên (VSV) gặp kháng thể đặc hiệu với nó thì mới xảy ra các phản ứng kết tủa vẩn
hoặc phản ứng ngưng kết.
+ kết tủa vẫn trắng như bông: VR hình gậy
+ kết tủa dạng hạt: VR hình cầu
sử dụng cho nhiều loại virus và một số vi khuẩn
Được phát triển rộng rãi với các thử nghiệm hiện đại: khuyếch tán gel, khuyếch tán gel miễn dịch, điện di miễn dịch, ELISA (phương pháp miễn dịch liên kết men)
Trang 10Chẩn đoán bằng huyết thanh theo phương pháp nhỏ giọt
A -Sơ đồ đặt phản ứng
1.Giọt huyết thanh đối
chứng
2 Giọt dịch bệnh
3 Giọt huyết thanh đặc
hiệu
B- Kết quả phản ứng
4 Phản ứng âm (-)
5 Phản ứng dương (+)
(phản ứng kết tủa)
Trang 11 Các phương pháp khác
- Dựa vào sự xuất hiện màu sắc khác nhau: dùng dung dịch CuSO4 3% để chẩn đoán bệnh virus Cucumis virus 2
- Phương pháp huỳnh quang: đặc điểm của mô bệnh, vật ký sinh có khả năng phát sáng trong khi chiếu nguồn tia sáng có độ dài sóng nhất định (nguồn sáng thường dùng là đèn thạch anh)
- Phương pháp đo độ nhớt của dịch cây: chẩn đoán bệnh
lý của một số cây bị bệnh do virus
- Các kỹ thuật sinh học phân tử hiện đại: RFLP (Restriction Fragments Lenghth Polymorphic), Southern blot, RAPD (Randomly amplified polymorphic DNA)…