STUDYING THE ACUTE TOXICITY AND HEPATOPROTECTIVE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF STEM BARK OF OROXYLUM INDICUM (L.) VENT IN THAI NGUYEN. TNU Journal of Science and Technology 227(14) 35 41 STUDYING THE ACUTE TOXICITY AND HEPATOPROTECTIVE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF STEM BARK OF OROXYLUM IN[.]
TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 STUDYING THE ACUTE TOXICITY AND HEPATOPROTECTIVE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF STEM BARK OF OROXYLUM INDICUM (L.) VENT IN THAI NGUYEN Tran Ngoc Anh*, Nguyen Van Dung, Vi Thị Phương Lan, Nguyễn Khánh Ly, Trần Hải Yến TNU - University of Medicine and Pharmacy ARTICLE INFO Received: 30/5/2022 Revised: 05/8/2022 Published: 23/8/2022 KEYWORDS Ethanol extract Stem bark of Oroxylum indicum Acute toxicity Hepatoprotective effect Carbon tetrachloride (CCl₄) ABSTRACT This research was implemented with the aim of evaluating the acute toxicity and hepatoprotective effect of ethanol extract of stem bark of Oroxylum indicum (L.) Vent The authors used the Litchfield – Wilcoxon’s method to evaluate the hepatoprotective effect of ethanol extract of stem bark of Oroxylum indicum against carbon tetrachloride (CCl₄) induced hepatotoxicity Research results show that the LD50 of the ethanol extract of stem bark of Oroxylum indicum could not be determined After days for oral administration, ethanol extract of stem bark of Oroxylum indicum at doses of 300 mg/kg and 900 mg/kg showed a hepatoprotective effect by reducing AST, ALT and MDA levels, in addition, a dose of 900 mg/kg showed limited damage to the liver injury induced by CCl4 in a mice model Through the study, it can be concluded that the ethanol extract of stem bark of Oroxylum indicum is safe and exhibits hepatoprotective effects against CCl4 ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN CỦA CAO CỒN VỎ THÂN NÚC NÁC THU HÁI TẠI THÁI NGUYÊN Trần Ngọc Anh*, Nguyễn Văn Dũng, Vi Thị Phương Lan, Nguyễn Khánh Ly, Trần Hải Yến Trường Đại học Y Dược - ĐH Thái Nguyên THÔNG TIN BÀI BÁO Ngày nhận bài: 30/5/2022 Ngày hoàn thiện: 05/8/2022 Ngày đăng: 23/8/2022 TỪ KHÓA Cao cồn Vỏ thân Núc nác Độc tính cấp Bảo vệ gan Carbon tetraclorid (CCl4) TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành với mục tiêu đánh giá độc tính cấp tác dụng bảo vệ gan cao cồn vỏ thân Núc nác Nghiên cứu sử dụng phương pháp Litchfield – Wilcoxon để xác định độc tính cấp đường uống đánh giá tác dụng giảm bảo vệ gan mơ hình gây độc gan carbon tetraclorid (CCl4) Kết nghiên cứu cho thấy không xác định LD₅₀ cao chiết cồn vỏ thân Núc nác Sau ngày uống, cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg 900 mg/kg thể tác dụng bảo vệ gan thông qua việc làm giảm nồng độ AST, ALT, MDA, liều 900 mg/kg thể hạn chế tổn thương gan gây CCl4 mơ hình chuột nhắt trắng Qua nghiên cứu kết luận cao cồn vỏ thân Núc nác an toàn thể tác dụng bảo vệ gan chống lại CCl4 DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.6086 * Corresponding author Email: tranngocanhydtn@gmail.com http://jst.tnu.edu.vn 35 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 Đặt vấn đề Bệnh gan nguyên nhân gây tử vong hàng đầu giới Có nhiều nguyên nhân gây tổn thương gan tác nhân sinh học (vi khuẩn, virus, ký sinh trùng), hóa chất (ethanol, carbon tetraclorid (CCl₄), ) thuốc (paracetamol, thioacetamid, ) [1]-[3] Trong xã hội nay, lối sống không lành mạnh với việc sử dụng nhiều thuốc, lạm dụng rượu bia, loại hóa chất công nghiệp khiến tỷ lệ bệnh gan ngày gia tăng Hiện nay, việc lựa chọn sử dụng loại thuốc có nguồn gốc tự nhiên vấn đề đặc biệt quan tâm trở thành xu hướng chung xã hội Mặc dù y học đại đạt bước tiến lớn, song phương pháp điều trị lựa chọn thuốc điều trị bệnh gan nhiều hạn chế Bên cạnh đó, số thuốc có nguồn gốc hóa dược dùng điều trị bệnh gan có khả gây tổn thương gan [1], [2] Vì vậy, nghiên cứu dược liệu có tác dụng dự phòng điều trị bệnh gan vấn đề quan trọng cần thiết Cây Núc nác, tên khoa học Oroxylum indicum (L.) Vent, họ Chùm ớt Bignoniaceae, có nguồn gốc từ Ấn Độ, phân bố khắp nơi nước ta, dân gian sử dụng nhiều để chữa bệnh [4] Những nghiên cứu thành phần hóa học cho thấy Núc Nác có chứa hợp chất có hoạt tính sinh học như: alkaloid, flavonoid, glycoside, tannin steroid [5] Một số nghiên cứu giới cho thấy, flavonoid Núc Nác có tác dụng kháng khuẩn, kháng viêm, chống dị ứng, làm giảm tính thấm màng mao mạch, có tác dụng trị số bệnh tai biến mạch máu não, lão hóa, thối hóa gan, xơ vữa động mạch [6], [7] Các nghiên cứu có Núc Nác phương pháp trị liệu đông y cho thấy loài thực vật tiềm nghiên cứu dược liệu Tại Việt Nam, nghiên cứu độc tính, tác dụng bảo vệ gan vỏ thân Núc Nác cịn hạn chế, vậy, kết nghiên cứu độc tính tác dụng bảo vệ gan vỏ thân Núc Nác góp phần cung cấp liệu nguồn thảo dược tự nhiên Việt Nam tạo sở khoa học cho nghiên cứu Nhóm tác giả tiến hành nghiên cứu với mục tiêu đánh giá độc tính cấp tác dụng bảo vệ gan cao cồn vỏ thân Núc nác Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Nguyên liệu Vỏ thân Núc nác (Tên khoa học Núc nác: Oroxylum indicum (L.), Vent, họ Chùm ớt (Bignoniaceae) thu hái thị xã Phổ Yên, tỉnh Thái Nguyên vào tháng 06/2021 sấy khô nhiệt độ 60oC nghiền thành bột (Độ ẩm mẫu xác định phương pháp sấy khô theo TCVN 1867:2001) Bột dược liệu ngâm với ethanol 70º tỷ lệ 1:10 (dược liệu: dung môi) nhiệt độ phịng giờ, sau chiết phương pháp ngấm kiệt, tốc độ rút dịch chiết ml/phút Gộp dịch chiết cất thu hồi dung môi áp suất giảm cho bốc dung môi nồi cách thủy hết dung môi; thu cao chiết cồn vỏ thân Núc nác (CNN) Hiệu suất chiết: 12,5%; hàm ẩm cao đặc: 13,8% 2.1.2 Động vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng chủng Swiss albino, 25 - 30g, Viện vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp Động vật ni phịng thí nghiệm Bộ mơn Dược lý, Trường Đại học Y Dược – Đại học Thái Nguyên ngày trước nghiên cứu Động vật nuôi dưỡng thức ăn tiêu chuẩn Viện vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp, uống nước tự 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Đánh giá thử độc tính cấp http://jst.tnu.edu.vn 36 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 Nghiên cứu tiến hành tính liều LD₅₀ theo quy định WHO, Quy chế Đánh giá tính an toàn hiệu lực thuốc cổ truyền Bộ Y tế phương pháp Litchfield – Wilcoxon [8]-[10] Chuột nhắt trắng chủng Swiss albino, giống cái, trọng lượng 20 ± 2g, chuột nhịn đói 12 trước uống mẫu thử, nước uống bình thường Sau 12 chuột chia thành lô, lô 10 con: lô uống nước cất, lô 2,3,4,5 uống cao cồn vỏ thân Núc nác với mức liều tương ứng 4, 5, 6, 7g/kg thể trọng Mỗi chuột uống lần cách giờ sau uống thuốc lần 2, chuột cho ăn trở lại, nước uống đầy đủ Nước cất mẫu thử đưa thẳng vào dày chuột kim đầu tù với thể tích 0,2 ml/10g thể trọng chuột/lần Theo dõi chuột liên tục vòng đầu, số chuột chết 72 tình trạng chung chuột ngày sau uống mẫu thử Tất quan sát ghi chép lại cách hệ thống với cá thể động vật nghiên cứu Chỉ tiêu theo dõi: Tình trạng chung chuột: hoạt động tự nhiên, tư thế, màu sắc (mũi, tai, đuôi), lông, phân, nước tiểu Tỉ lệ chuột chết vịng 72 Khi có chuột chết, mổ để quan sát đại thể quan phủ tạng Nếu cần, làm thêm vi thể để xác định nguyên nhân Căn tỷ lệ chuột chết lơ (nếu có) để tính LD₅₀ 2.2.2 Đánh giá tác dụng bảo vệ gan mơ hình gây độc gan cấp CCl₄ * Gây độc gan cấp CCl₄ tiến hành theo phương pháp mô tả Peng cộng (2012) [11] Chuột nhắt trắng chia thành lô, lô 10 con: lô (chứng sinh lý), lô (chứng bệnh lý) uống dung dịch NaCl 0,9% với thể tích 0,1 ml/10g cân nặng/ngày 14 ngày; lơ (đối chiếu) uống Silymarin liều 100 mg/kg/ngày 14 ngày; lô (CNN1) uống cao chiết cồn Núc nác liều 300 mg/kg/ngày 14 ngày; lô (CNN2) uống cao chiết cồn liều 900 mg/kg/ngày 14 ngày Vào ngày thứ 14, sau uống NaCl 0,9% Silymarin mẫu thử CNN giờ, chuột lô tiêm màng bụng dầu oliu với thể tích 0,1 ml/10g cân nặng chuột lô 2,3,4,5 tiêm màng bụng dung dịch CCl4 dầu oliu với liều 0,5 ml CCl₄/kg Sau 24 kể từ tiêm CCl₄, chuột lô lấy máu xoang hốc mắt lấy gan để xác định hoạt độ AST, ALT huyết thanh, hàm lượng MDA gan, mô tả đại thể vi thể gan * Xác định chức gan: Thông qua định lượng enzyme aspartate transaminase (AST) alanine transaminase (ALT) huyết xác định hệ thống phân tích hóa sinh tự động AU680 (Beckman Coulter) Lấy máu từ xoang hốc mắt, ly tâm mẫu máu (5000 vòng/phút 10 phút) lấy huyết để định lượng AST, ALT * Cách xác định hàm lượng MDA (malondialdehyd) gan: Theo phương pháp Wojciech Wasowicz (1993) [12] Nghiền đồng thể khoảng 0,5g gan với dung dịch KCl 0,15M (tỷ lệ 1:10), nhiệt độ – 5oC Sau ly tâm lạnh dịch nghiền đồng thể (5000 vòng/phút phút), lấy 150μl dịch cho vào ống nghiệm thủy tinh có nắp chứa 1ml nước cất thêm 1ml dung dịch acid thiobarbituric (TBA) 0,42% acid acetic 50% Đun cách thủy hỗn hợp nhiệt độ 95 – 100oC vòng Sau làm nguội hỗn hợp nhiệt độ phòng, thêm 25μl HCl 5M, lắc đều, chiết phức hợp tạo thành (MDA-TBA) 3,5ml n-butanol, sau đo quang dung dịch phức hợp n-butanol bước sóng 532nm Song song với mẫu thử, tiến hành phản ứng với mẫu chuẩn, 150μl mẫu thử thay 150μl dung dịch chuẩn có chứa - 8nmol tetramethoxypropan Hàm lượng MDA (nmol/g mô) tính theo phương trình đường chuẩn * Quan sát đại thể gan: Quan sát màu sắc, trạng thái bề mặt, thể chất gan dấu hiệu bất thường khác tất chuột lô * Quan sát vi thể gan: Sau quan sát đại thể gan, lơ thí nghiệm, lựa chọn ngẫu nhiên cá thể để lấy gan làm tiêu mô bệnh học Tiêu thực Bộ môn Giải phẫu bệnh trường Đại học Y - Dược, Đại học Thái Nguyên, với quy trình cụ thể sau: mẫu gan bảo quản dung dịch formol 10% vùi parafin, cắt lát mỏng - 7μm, nhuộm hematoxylin-eosin (HE), nhuộm periodic acid Schiff (PAS), quan sát kính hiển vi quang học để đánh giá mức độ hoại tử gan hình thái, cấu trúc chức tế bào gan không bị hoại tử http://jst.tnu.edu.vn 37 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 2.3 Xử lý số liệu Kết biểu diễn dạng X ± SE (X: giá trị trung bình, SE: sai số chuẩn) So sánh giá trị trung bình lơ phân tích one–way ANOVA, hậu kiểm để so sánh thử với chứng (với thiết kế nghiên cứu từ lô trở lên) dùng T-TEST (với thiết kế nghiên cứu có lơ) Với liệu khơng thuộc phân phối chuẩn, kết trình bày dạng trung vị khoảng (min - max) Dùng kiểm định Kruskal Wallis Mann-Whitney U để so sánh giá trị trung vị lô Sự khác biệt coi có ý nghĩa thống kê p < 0,05 Kết bàn luận 3.1 Kết độc tính cấp Bảng Số chuột chết lô vịng 72 Lơ n 10 10 10 10 10 Liều dùng (mg/kg) 4g/kg 5g/kg 6g/kg 7g/kg Thể tích cho uống 0,2ml x lần 0,2ml x lần 0,2ml x lần 0,2ml x lần 0,2ml x lần Số chuột chết 72 0 0 Tỷ lệ chuột chết (%) 0 0 Kết bảng cho thấy sau cho chuột uống thuốc, qua quan sát, theo dõi biểu hoạt động chuột sau uống 72 thời gian ngày, nhận thấy: Chuột lô (lơ chứng) hoạt động ăn uống bình thường Chuột lô 2, 3, (lô thử với mức liều 4, 5, 6) khơng có chuột bị chết khơng có biểu khác thường Chuột lô (lô thử mức liều 7g/kg) sau uống thuốc có biểu giảm hoạt động, nằm mệt; sau 24 chuột ăn uống hoạt động bình thường trở lại, sau 72 theo dõi khơng có chuột bị chết Theo dõi sau ngày chuột tất lô không thấy xuất bất thường Không xác định LD₅₀ 3.2 Kết tác dụng bảo vệ gan Khả bảo vệ gan cao cồn vỏ thân Núc nác đánh giá mơ hình gây tổn thương gan CCl4 với liều 0,5 ml/kg khối lượng thể đánh giá thông qua tiêu: (i) hàm lượng aminotransferase (AST, ALT), (ii) hàm lượng malondialdehyd (MDA) gan, (iii) kết kiểm tra trực quan tổn thương gan đại thể vi thể 3.2.1 Nồng độ enzym gan huyết AST ALT enzym chuyển hóa acid amin có mặt tất tế bào thể Hai enzym khơng đặc hiệu cho gan thường sử dụng để đánh giá tình trạng tổn thương tế bào gan Khi tế bào gan bị tổn thương, AST ALT giải phóng tế bào gan vào máu làm cho hoạt độ chúng huyết tăng lên Mức độ tăng enzym tùy thuộc vào mức độ tổn thương gan Do đó, định lượng hoạt độ AST ALT huyết giúp đánh giá mức độ tổn thương gan Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác tới nồng độ AST, ALT huyết chuột thể bảng Bảng Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác tới nồng độ AST, ALT huyết chuột gây tổn thương gan CCl₄ Lô Thuốc liều n ALT (UI/L) AST (UI/L) Chứng sinh lý (NaCl 0,9%) 10 46,7 ± 2,87 45,1 ± 3,98 Chứng bệnh lý (NaCl 0,9% + CCl₄) 10 10607,6 ± 1107,83# 15191,6 ± 1328,92# Đối chiếu (Silymarin 100mg/kg + CCl₄) 10 6870,9 ± 683,64** 10070,3 ± 1491,44** CNN1 (Cao cồn Núc nác 300mg/kg + CCl₄) 10 9142,0 ± 1590,39* 13105,7 ± 1334,27** CNN2 (Cao cồn Núc nác 900mg/kg + CCl₄) 10 8250,1 ± 1074,18** 12342,2 ± 1442,88** Ghi chú: * p < 0,05 so với lô chứng bệnh lý; ** p < 0,001 so với lô chứng bệnh lý; # p < 0,001 so với lô chứng sinh lý http://jst.tnu.edu.vn 38 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 Kết bảng cho thấy cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg 900 mg/kg làm giảm số ALT AST so với lô chứng bệnh lý (không sử dụng hoạt chất bảo vệ gan) cách có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Lô đối chiếu dùng silymarin 100 mg/kg/ngày làm giảm số AST, ALT so với lô chứng bệnh lý (p < 0,05) Như vậy, cao cồn vỏ thân Núc nác thể tác dụng bảo vệ phục hồi chức gan sau gây độc CCl₄ 3.2.2 Hàm lượng Malodialdehyd (MDA) gan MDA sản phẩm cuối trình peroxy hóa lipid, đó, MDA dùng để xác định q trình peroxy hóa lipid CCl₄ gián tiếp làm tăng q trình peroxyd hóa lipid tế bào dẫn đến hàm lượng MDA gan tăng Do vậy, định lượng hàm lượng MDA gan phản ảnh trình peroxyd hóa lipid gây CCl₄ Ngồi thể mức độ q trình peroxyd hóa lipid, hàm lượng MDA gián tiếp phản ánh tổn thương gan [13] Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác tới hàm lượng MDA gan chuột thể bảng Bảng Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác tới hàm lượng MDA gan chuột gây tổn thương gan CCl₄ Lô Thuốc liều n Hàm lượng MDA (nmol/g gan) Chứng sinh lý (NaCl 0,9%) 10 100,2 ± 8,32 Chứng bệnh lý (NaCl 0,9% + CCl₄) 10 408,8 ± 32,41# Đối chiếu (Silymarin 100 mg/kg + CCl₄) 10 272,3 ± 40,44** CNN1 (Cao cồn Núc nác 300 mg/kg + CCl₄) 10 359,1 ± 52,43* CNN2 (Cao cồn Núc nác 900 mg/kg + CCl₄) 10 338,4 ± 44,11** Ghi chú: * p < 0,05 so với lô chứng bệnh lý; ** p < 0,001 so với lô chứng bệnh lý; # p < 0,001 so với lô chứng sinh lý Kết bảng cho thấy hàm lượng MDA gan chuột lô cho uống silymarin 100 mg/kg cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg, 900 mg/kg giảm so với lô chứng bệnh lý cách có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 3.2.3 Kết hình ảnh đại thể gan Kiểm tra đại thể gan thể bảng hình Kết cho thấy lô uống cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg, 900 mg/kg lơ uống silymarin 100 mg/kg hình thái bên ngoài, màu sắc gan phục hồi, điểm tổn thương gan có giảm so với lơ chứng bệnh lý Trong đó, lơ chứng bệnh lý gan nhạt màu có điểm tổn thương rải rác Như vậy, quan sát đại thể hình thái gan cho thấy cao cồn vỏ thân Núc nác thể tác dụng tốt đến khả bảo vệ gan gây độc chất oxy hóa mạnh CCl₄ Bảng Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác tới hình ảnh đại thể gan chuột gây tổn thương gan CCl₄ Lơ Thuốc liều n Hình ảnh đại thể gan chuột Gan đỏ nâu, bề mặt nhẵn bóng, nhu mô gan Chứng sinh lý (NaCl 0,9%) 10 đồng 8/10 chuột có gan nhạt màu, bề mặt nhẵn Chứng bệnh lý (NaCl 0,9% + CCl₄) 10 bóng, có điểm tổn thương 7/10 chuột có gan hồng, bề mặt nhẵn bóng, Đối chiếu (Silymarin 100 mg/kg + CCl₄) 10 khơng có điểm tổn thương 4/10 chuột có gan hồng, 6/10 chuột có gan nhạt CNN1 (Cao cồn Núc nác 300 mg/kg + CCl₄) 10 màu 6/10 chuột có gan hồng, 4/10 chuột có gan nhạt CNN2 (Cao cồn Núc nác 900 mg/kg + CCl₄) 10 màu, khơng có điểm tổn thương http://jst.tnu.edu.vn 39 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology Lô 227(14): 35 - 41 Lô Lô Lô Hình Hình ảnh đại thể gan chuột (đại diện) lơ thí nghiệm\ Lơ 3.2.4 Ảnh hưởng cao cồn vỏ thân Núc nác đến cấu trúc vi thể gan chuột thí nghiệm Kết kiểm tra vi thể tế bào gan thể hình 2, kết lơ thí nghiệm cho thấy: Lô chứng sinh lý (1) tế bào gan bình thường Lơ chứng bệnh lý (2) lơ thử uống cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg (4) tiêu tế bào cho thấy nhu mô gan hoại tử cho thấy biến đổi mỡ thối hóa nước Lơ đối chiếu cho uống silymarin 100 mg/kg (3) lô thử uống cao cồn vỏ thân Núc nác liều 900 mg/kg (5) quan sát tổ chức gan thấy rõ tiểu thùy có tổn thương nhỏ tế bào gan mạch máu xung huyết mức độ nhẹ (1) (2) (3) (4) (5) Hình Hình ảnh vi thể gan chuột (đại diện) lơ thí nghiệm (HE x 200) Kết luận - Độc tính cấp: Uống cao cồn vỏ thân Núc nác liều 7g/kg không gây chết chuột khơng xác định LD50 Do vậy, kết luận cao cồn vỏ thân Núc nác an toàn - Tác dụng bảo vệ gan: Cao cồn vỏ thân Núc nác liều 300 mg/kg 900 mg/kg thể tác dụng bảo vệ gan thông qua việc làm giảm nồng độ AST, ALT, MDA, liều 900 mg/kg thể hạn chế tổn thương gan gây CCl4 mơ hình chuột nhắt trắng TÀI LIỆU THAM KHẢO/ REFERENCES [1] N Deshwal, A K Sharma, P Sharma, “Review on hepatoprotective plants,” International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, vol 7, pp 15-26, 2011 [2] G Moharir, A Bharatha, N Ojeh, S V Prasad, “Evaluation of Hepatoprotective Effect of Hydroalcoholic Extract of Momordica Charantia Leaves in Carbon Tetrachloride-Induced Liver Toxicity in Wistar Rats,” Biomed Pharmacol J., vol 12, no 3, 2019, doi: 10.13005/bpj/1786 [3] M.-S Eduardo and M.-B.Eduardo, "Review of natural products with hepatoprotective effects," World journal of gastroenterology, vol 20, no 40, pp 14787-14804, 2014 [4] National Institute of Medical Materials, Medicinal plants and medicinal animals in Vietnam, Science and Technics Publishing House, Ha Noi, pp 492-493, 2004 [5] D C Deka, V Kumar, C Prasad et al., “Oroxylum indicum – a medicinal plant of North East India: An overview of its nutritional, remedial, and prophylactic properties,” Journal of Applied Pharmaceutical Science, vol 3, no 1, pp S104-S112, 2013 [6] R M Ali and P J Houghton, "Antimicrobial and antiinflammatory activities of extracts and constituents of Oroxylum indicum (L.) Vent," Phytomedicine, vol 5, no 5, pp 375-381, 1998 [7] S S Mohapatra, R K Roy, P Mohan, T N Upadhyaya, and J Sarma, "Phytochemical analysis and hepatoprotective effect of hydroethanolic extract of sterm bark of Oroxylum indicum," Int J Curr Microbiol App Sci, vol 7, no 1, pp 1000-1006, 2018 http://jst.tnu.edu.vn 40 Email: jst@tnu.edu.vn TNU Journal of Science and Technology 227(14): 35 - 41 [8] T D Do, Methods of determining drug toxicity Medical Publshing House, Ha Noi, pp 117-126, 2014 [9] J T Litchfield and Jr F.Wilcoxon, "A simplified method of evaluating dose-effect experiments," J Pharmacol Exp Ther, vol 96, no 2, pp 99-113, 1949 [10] World Health Organization, Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization, 2000 [11] P Kang and L L Shu, "Polyporus umbellatus polysaccharides ameliorates carbon tetrachlorideinduced hepatic injury in mice," African Journal of Pharmacy and Pharmacology, vol 6, no 37, pp 2686-2691, 2012 [12] W Wasowicz and J Nève, "Optimized steps in fluorometric determination of thiobarbituric acidreactive substances in serum: importance of extraction pH and influence of sample preservation and storage," Clin Chem, vol 39, no 12, pp 2522-2526, 1993 [13] B Han and Y Gao, "Protective effect of a polysaccharide from Rhizoma Atractylodis Macrocephalae on acute liver injury in mice," Int J Biol Macromol, vol 87, pp 85-91, 2016 http://jst.tnu.edu.vn 41 Email: jst@tnu.edu.vn ... and antiinflammatory activities of extracts and constituents of Oroxylum indicum (L.) Vent, " Phytomedicine, vol 5, no 5, pp 375-381, 1998 [7] S S Mohapatra, R K Roy, P Mohan, T N Upadhyaya, and. .. N Upadhyaya, and J Sarma, "Phytochemical analysis and hepatoprotective effect of hydroethanolic extract of sterm bark of Oroxylum indicum, " Int J Curr Microbiol App Sci, vol 7, no 1, pp 1000-1006,... Medicinal plants and medicinal animals in Vietnam, Science and Technics Publishing House, Ha Noi, pp 492-493, 2004 [5] D C Deka, V Kumar, C Prasad et al., ? ?Oroxylum indicum – a medicinal plant of