Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng

Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhân giống và trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] tại Đồng bằng sông Hồng.

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ THỊ HỒI NGHIÊN CỨU MỘT SỐ BIỆN PHÁP KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG VÀ TRỒNG RAU ĐẮNG ĐẤT [Glinus oppositifolius (L.) DC.] TẠI ĐỒNG BẰNG SÔNG HỒNG Chuyên n Mã số nh : Khoa học trồng : 62 01 10 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2022 Cơng trình hồn thành tại: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Ninh Thị Phíp Phản biện 1: PGS.TS Nguyễn Văn Tập Hội Sinh học Việt Nam Phản biện 2: PGS.TS.Trần Thị Minh Hằng Học viện Nông nghiệp Việt Nam Phản biện 3: PGS.TS Nguyễn Văn Việt Trƣờng Đại học Lâm nghiệp Luận án đƣợc bảo vệ trƣớc Hội đồng Đánh giá luận án cấp Học viện họp tại: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Vào hồi phút, ngày tháng năm 2022 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Trung tâm Thông tin - Thư viện Lương Định Của (HVN) PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] thân thảo, thân cành mảnh, mọc tỏa sát mặt đất Theo Đông y, rau đắng đất có vị đắng, tính mát, có tác dụng lợi tiểu, nhuận gan, hạ nhiệt… nhân dân dùng làm thuốc hạ sốt, dị ứng, mẩn ngứa, chữa bệnh gan, vàng da… (Bộ Y tế, 2017; Đỗ Huy Bích & cs., 2006; Võ Văn Chi, 2004) Theo Y học đại, rau đắng đất giúp chống oxy hóa, giảm đau dày, đau bụng (Sheu & cs., 2014), kháng viêm tăng cường khả miễn dịch (Chakraborty & cs., 2017) Hiện nay, số hãng dược nước nghiên cứu sử dụng rau đắng đất làm nguyên liệu sản phẩm dược viên nang mềm Boganic Traphaco, viên nén bao đường Bar Pharmedic, Livonic BV Pharma chế biến số sản phẩm nước uống đóng chai Hiện nay, có số nghiên cứu khoa học rau đăng đất, nhiên nghiên cứu chủ yếu tập trung vào thành phần hoạt chất công dụng mà chưa quan tâm tới nghiên cứu nghiên cứu chưa đầy đủ giống biện pháp kỹ thuật canh tác Để phát triển tạo nguồn nguyên liệu chất lượng cao, việc đẩy mạnh công tác nghiên cứu giống, đa dạng phương pháp nhân ni, hồn thiện quy trình kỹ thuật canh tác đường tất yếu Xuất phát từ lý đề tài “Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật nhân giống trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] Đồng Sông Hồng” triển khai 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.2.1 Mục tiêu tổng quát Xác định giống quy trình kỹ thuật nhân, trồng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] góp phần phát triển vùng sản xuất nguyên liệu dược Đồng Sông Hồng 1.2.2 Mục tiêu cụ thể Nghiên cứu đánh giá nhằm tuyển chọn mẫu giống tốt phục vụ phát triển vùng sản xuất nguyên liệu dược Đồng sông Hồng; Xác định số biện pháp kỹ thuật nhân giống rau đắng đất (nhân giống hữu tính vơ tính (giâm cành, ni cấy in vitro); Xác định số biện pháp kỹ thuật trồng (thời vụ, mật độ, phân bón, che sáng) kỹ thuật thu hái; Xây dựng mơ hình trồng rau đắng đất Hà Nội Nam Định 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU 1.3.1 Đối tƣợng nghiên cứu Đối tượng rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] thu thập điểm thuộc địa phương khác (Tây Ninh, Hà Nội, Nam Định, Thái Bình, Phú Yên), trồng nhân giống Học viện Nông nghiệp Việt Nam 1.3.2 Thời gian nghiên cứu Từ tháng 10 năm 2016 đến tháng 10 năm 2021 1.3.3 Địa điểm nghiên cứu - Các thí nghiệm phịng ngồi đồng ruộng thực Học viện Nông nghiệp Việt Nam (Khoa Nông học Viện, Trung tâm thuộc Học viện Nông nghiệp Việt Nam); - Kết phân tích mẫu đất thực Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa, kết phân tích chất lượng dược liệu thực Khoa Công nghệ thực phẩm, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Trung tâm Ứng dụng KHCN Dược liệu, Viện Dược liệu - Mơ hình thực nghiệm huyện Gia Lâm, TP Hà Nội huyện Hải Hậu, tỉnh Nam Định 1.4 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN - Tuyển chọn mẫu giống RĐ3 [Glinus oppositifolius (L.) DC.] thu thập Nam Định có đặc điểm hình thái thân non màu lục nhạt, trưởng thành màu vàng lục, phiến màu xanh nhạt kích thước lớn (dài 2,33 cm; rộng 0,86 cm), sinh trưởng phát triển tốt, suất cao (2,45 tấn/ha), chất lượng đảm bảo (hoạt chất saponin tổng số đạt 2,67%, flavonoid tổng số 1,85%), phù hợp sản xuất nguyên liệu dược Đồng sông Hồng - Xác định số biện pháp kỹ thuật nhân giống rau đắng đất hạt cho tỷ lệ mọc mầm cao (90,1%) sử dụng hạt tươi, hạt thu hoạch Đồng thời, xây dựng thành cơng quy trình nhân giống vơ tính biện pháp giâm cành (sử dụng cành bánh tẻ kết hợp chất điều tiết sinh trường giá thể ½ trấu hun + ½ mụn xơ dừa) quy trình ni cấy in vitro (khử trùng mẫu Johnson 1% 10 phút, bổ sung 0,5 mg/l BA giai đoạn tạo đa chồi, kết hợp 0,5 mg/l BA + 0,5 mg/l α-NAA/IAA cho nhân nhanh, bổ sung 0,5 mg/l α-NAA giai đoạn tạo hoàn chỉnh giá thể 100% mụn xơ dừa) - Hồn thiện quy trình kỹ thuật trồng rau đắng đất đạt hiệu kinh tế cao Đồng sông Hồng Xác định thời vụ trồng tốt vụ Xuân (14/2-28/2), mật độ trồng 15 cây/m2, phân bón phân vi sinh Sông Gianh + 90 kg N + 90 kg P 2O5 + 60 kg K 2O/ha; Trồng vụ Hè Thu, thời vụ gieo từ 15/7-30/7, kết hợp che sáng 25% phân bón: phân vi sinh Sông Gianh + 60 kg N + 90 kg P 2O5 + 60 kg K 2O/ha, mật độ trồng 35 cây/m2 Sau 120 - 150 ngày gieo vào vụ Xuân tiến hành thu hoạch phận mặt đất (loại bỏ rễ) 1.5 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 1.5.1 Ý nghĩa khoa học - Kết nghiên cứu đề tài dẫn liệu khoa học xác định loài, giống rau đắng đất, xác định số biện pháp kỹ thuật nhân giống, trồng rau đắng đất góp phần cải tiến quy trình trồng rau đắng đất cho suất chất lượng cao - Luận án tài liệu tham khảo phục vụ cho công tác giảng dạy, nghiên cứu dược liệu nói chung rau đắng đất nói riêng 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Việc đánh giá số đặc điểm nông sinh học, xác định mẫu giống rau đắng đất tiềm năng, số phương pháp nhân giống biện pháp kỹ thuật canh tác phù hợp cho rau đắng đất sinh trưởng phát triển tốt, suất, chất lượng cao điều kiện khí hậu vùng Đồng sơng Hồng góp phần hồn thiện quy trình canh tác, mở rộng diện tích trồng rau đắng đất phục vụ sản xuất dược liệu chất lượng PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY RAU ĐẮNG ĐẤT 2.1.1 Vị trí phân loại Rau đắng đất có tên khoa học Glinus oppositifolius (L.) DC, hay gọi Mollugo oppositifolia (L.), thuộc chi Glinus, họ rau đắng (Molluginaceae), cẩm chướng (Caryophyllales), Lớp ngọc lan (Magnoliopsida) (Võ Văn Chi, 2004) 2.1.2 Đặc điểm thực vật Cây thân thảo, thân cành mảnh, tiết diện tròn, mọc tỏa sát mặt đất, dài nhẵn Lá mọc vòng – lá, to nhỏ khơng Cụm hoa hình tán khơng cuống, mọc nách lá, có bắc gốc Nhị 3-5, nhị mỏng Nhụy có bầu thn dần đỉnh, ơ, vịi nhụy uốn cong, ngắn, đỉnh có phình rộng Hạt nhỏ, hình thận màu nâu sẫm 2.1.3 Phân bố Phân bố nhiệt đới châu Phi (phổ biến châu Phi cận Sahara), châu Á Ôxtrâylia Rau đắng đất thường thấy đồng bằng, vùng trũng ẩm ướt, bờ sông dọc hai bên đường, thường đất cát, phạm vi độ cao lên đến 1600 m (Sukhorukov & cs., 2021), tìm thấy nơi khô cằn Đông Nam Á, nước nhiệt đới độ cao thấp Ấn Độ, Pakistan, Phillipines, Mali, Thái Lan Trung Quốc Ở Việt Nam, rau đắng đất phân bố dọc theo theo tỉnh ven biển, từ Hải Phịng, Nam Định đến Đồng Sơng Cửu Long, thường gặp cát bờ biển hay vùng ngập thời kỳ, hồ ao ruộng 2.1.4 Thành phần hóa học giá trị sử dụng rau đắng đất Rau đắng đất có chứa saponin, flavonoid Lá rau đắng đất chiết cồn ethanol, thu hợp chất triterpenoid saponin (spergulin A spergulin B) Trong vỏ rau đắng đất có anthraglucozit Hạt rau đắng đất chứa số dưỡng chất (trong 100 g) Vitamin E (12.0 IU); Folic axít (108 mg); selenium (86,8 mg); canxi (386 mg); α-sitosterol (79,9 mg); stigmasterol (9,6 mg) Trong rau đắng đất có số thành phần carbohydrat, polysacarit, steroit, alkaloit số hợp chất thơm khác Bằng phương pháp tách chiết với nước 50oC tìm thấy hai hợp chất polisacarit dạng pectin GOA1 GOA2 2.1.5 Yêu cầu sinh thái rau đắng đất Rau đắng đất phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới, độ cao lên tới 1600 m Cây phát triển môi trường sống khác (ven sông, sa mạc, mỏm đá, vùng ven biển đầy cát), đặc biệt vùng nhiệt đới có khí hậu ẩm ướt, bãi cát, bờ sông… Tại Việt Nam, rau đắng đất thường gặp cát bờ biển hay vùng ngập thời kỳ, hồ ao, ruộng, hố nông cạn nước mùa khô, thấy quanh làng, ven đường 2.2 TÌNH HÌNH SẢN XUẤT VÀ TIÊU THỤ DƢỢC LIỆU RAU ĐẮNG ĐẤT 2.2.1 Trên giới Rau đắng đất có nhiều giá trị sử dụng đời sống Y học cổ truyền nhiều quốc giá giới Mali, Ấn Độ, Thái Lan, Philipine, Bangladesh, Trung Quốc… từ lâu đời (Chakraborty & cs 2017) Tuy nhiên, rau đắng đất chủ yếu thu hái từ tự nhiên, kỹ thuật sản xuất xa lạ với người giới, sở liệu tình hình sản xuất rau đắng đất cơng bố (Sheu & cs 2014) 2.2.2 Tại Việt Nam Trên nước, tính đến thời điểm tại, vùng trồng rau đắng đất Phú n có cơng bố quy trình thu hái chế biến dược liệu rau đắng đất theo tiêu chuẩn GACP-WHO từ năm 2014 đăng ký tái chứng nhận thành công vào năm 2017 2020 với diện tích thu hái dự kiến 1.200 ha, sản lượng dự kiến 150 tấn/năm Trung tâm nghiên cứu phát triển dược liệu miền Trung - Công ty TNHH TM-SX Hồng Đài Việt (Hồng Đài Việt) áp dụng quy trình khai thác cải tiến, nguồn rau đắng đất chuyển dịch từ thu hái hoàn toàn tự nhiên sang thu hái bán tự nhiên nhằm đảm bảo việc khai thác bền vững chất lượng dược liệu ổn định 2.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ BIỆN PHÁP NHÂN GIỐNG VÀ KỸ THUẬT TRỒNG 2.3.1 Các biện pháp nhân giống rau đắng đất Cây ray đắng đất chủ yếu mọc hoang, sinh sản hữu tính, tái sinh từ hạt Hạt nhỏ, nảy mầm tách khỏi vỏ gặp thuận lợi độ ẩm đất Tuy nhiên, thời gian sống hạt ngắn nên tỷ lệ mọc mầm thời gian mọc mầm kéo dài, sinh trưởng chậm, chất lượng không đồng Cho đến kết nghiên cứu biện pháp nhân giống rau đắng đất cịn chưa đầy đủ 2.3.2 Kết nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng rau đắng đất Thời vụ gieo trồng rau đắng đất hạt Miền Bắc Việt Nam tốt vụ Xuân, vụ Thu nên gieo cuối tháng – đầu tháng Khoảng cách trồng rau đắng đất Thanh Hóa thích hợp 10 x 15 cm 10 x 20 cm, cho suất đạt 1.611,1 - 1.613,9 kg/ha Để đảm bảo suất khô đạt 1.611,1 1.613,9 kg/ha, lượng phân bón: 20 phân chuồng hoai mục + 50 N + 50 P2O5 + 75 K2O phù hợp chi phí, hiệu sản xuất Quy trình bón phân cho rau đắng đất cơng ty CP Traphaco là: phân vi sinh + 60 N + 90 P2O5 + 60 K2O + 300 kg vôi, suất thân đạt cao 2.4 NHẬN XÉT CHUNG RÚT RA TỪ TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU Rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC., họ Molluginaceae] tìm thấy nhiều quốc gia giới Tại Việt Nam, rau đắng đất tìm thấy nhiều địa phương từ Bắc vào Nam sử dụng Đông y chữa bệnh gan, vàng da, hạ sốt… Về mặt khoa học, rau đắng đất chưa nghiên cứu đầy đủ, phần lớn nghiên cứu khoa học làm bật thành phần hóa học, hoạt chất, tác dụng cây, nghiên cứu giống kỹ thuật cịn Một số tài liệu cơng bố cịn mang tính giả thuyết, nhận định mà chưa chứng minh thực nghiệm, có tài liệu trích dẫn nhầm lẫn tên gọi hình thái rau đắng đất Bởi rau đắng đất khai thác chủ yếu tự nhiên, tái sinh tự nhiên từ hạt quy trình sản xuất rau đắng đất xa lạ với nhiều người thuốc có giá trị PHẦN 3: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU - Nguồn vật liệu nghiên cứu thí nghiệm khảo sát giống mẫu giống rau đắng đất thu thập Tây Ninh, Hà Nội, Nam Định, Thái Bình Phú Yên trồng nhân giống Khu thí nghiệm, Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam - Sử dụng mẫu rau đắng đất tuyển chọn từ mẫu giống thu thập làm vật liệu thí nghiệm nhân giống kỹ thuật trồng - Các chất điều tiết sinh trưởng, giá thể, phân bón dụng cụ sử dụng thí nghiệm 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 3.2.1 Đánh giá đặc điểm nông sinh học số mẫu giống rau đắng đất - Mô tả, so sánh hình thái rễ; thân; lá; hoa; quả; hạt mẫu giống rau đắng đất - Giám định tên khoa học mẫu giống rau đắng đất - Đánh giá đặc điểm cấu tạo giải phẫu mô tế bào mặt cắt ngang rễ, thân, mẫu giống rau đắng đất - Đánh giá khả sinh trưởng, phát triển, suất, chất lượng dược liệu mẫu giống rau đắng đất - Chọn mẫu giống rau đắng đất có suất cao, chất lượng tốt Sử dụng 01 mẫu giống tốt làm vật liệu cho nghiên cứu nội dung 2, 3.2.2 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật nhân giống rau đắng đất - Nghiên cứu số biện pháp nhân giống hữu tính (bằng hạt) - Nghiên cứu số biện pháp nhân giống vơ tính (giâm cành, ni cấy in vitro) 3.2.3 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng (thời vụ, mật độ, phân bón, che sáng) kỹ thuật thu hái (thời điểm thu hái quan thu hái) rau đắng đất - Nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ trồng đến sinh trưởng - phát triển suất rau đắng đất; - Nghiên cứu ảnh hưởng mật độ trồng đến sinh trưởng - phát triển suất rau đắng đất; - Nghiên cứu ảnh hưởng liều lượng bón phân đến sinh trưởng – phát triển, suất rau đắng đất; - Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ che sáng đến sinh trưởng - phát triển, suất chất lượng rau đắng đất; - Nghiên cứu ảnh hưởng kỹ thuật thu hái đến suất, chất lượng dược liệu rau đắng đất 3.2.4 Xây dựng mơ hình áp dụng quy trình cải tiến trồng rau đắng đất Từ kết nghiên cứu trên, hoàn thiện bổ sung quy trình kỹ thuật trồng rau đắng đất xây dựng mơ hình áp dụng quy trình tiến trồng rau đắng đất Gia Lâm - Hà Nội Hải Hậu - Nam Định 3.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.2.1 Nội dung 1: Đánh giá đặc điểm nông sinh học số mẫu giống rau đắng đất * Thí nghiệm 1: Đánh giá đặc điểm nơng sinh học số mẫu giống rau đắng đất Bao gồm mẫu giống rau đắng đất thu thập từ địa phương khác nhau, kí hiệu thứ tự từ RĐ1 (Tây Ninh), RĐ2 (Hà Nội), RĐ3 (Nam Định), RĐ4 (Thái Bình) RĐ5 (Phú n) Hình thái rễ mơ tả thời điểm thu hoạch, hình thái thân mô tả ở giai đoạn (trước cành cấp 2) giai đoạn trưởng thành (khi hoa, đậu quả), hình thái mô tả giai đoạn trưởng thành (lá bánh tẻ) Cơ quan sinh sản (hoa, quả, hạt) mô tả thời kỳ hoa, làm chín Mơ tả đặc điểm hình thái theo phương pháp Nguyễn Nghĩa Thìn (2007) Giải phẫu rễ (cắt miền trưởng thành), thân (ở vị trí bánh tẻ) trưởng thành (khi hoa đậu quả) mẫu rau đắng đất nhuộm Toluidine Blue 0,05% 30s theo phương pháp O'Brien (1964), Bộ môn Thực vật, khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 3.2.2 Nội dung 2: Nội dung 2: Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật nhân giống rau đắng đất (01 mẫu giống tuyển chọn từ nội dung 1) a Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống hạt * Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian ngâm hạt rau đắng đất đến tỷ lệ nảy mầm sinh trưởng Thí nghiệm thực từ tháng 2/2018, bao gồm công thức: không ngâm (Đ/C); ngâm hạt nước ấm 40oC thời gian 5h; 12h; 18h 24h * Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng chất xử lý nảy mầm đến tỷ lệ nảy mầm sinh trưởng Thí nghiệm thực từ tháng 2/2018, bao gồm công thức: ngâm 5h nước ấm (40oC) (Đ/C); 5h + GA3 (1000 ppm); 5h + Atonik (1.8DD); 5h + Supe lân 2% * Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng số biện pháp bảo quản hạt đến tỷ lệ nảy mầm chất lượng - Thí nghiệm bao gồm công thức: Hạt tươi; Hạt khô bảo quản điều kiện phòng; Trong tủ lạnh (5oC) từ tuần đến tháng Thời gian thực từ tháng 6- 8/2018 * Thí nghiệm 5: Nghiên cứu bổ sung phân bón cho giai đoạn vườn ươm Bao gồm công thức: phun nước lã (Đ/C); Phân bón đầu trâu 501; Phân bón NPK (5:10:3) nồng độ 1% Hạt rau đắng đất gieo khay ươm đến có thật, tiến hành tỉa 01 cây/lỗ (mỗi khay 100 cây) bắt đầu bổ sung phân bón theo cơng thức, ngày tưới lần Thời gian thực từ tháng 2- 4/2018 Các thí nghiệm nghiên cứu nhân giống hạt (từ thí nghiệm đến thí nghiệm 5) bố trí theo phương pháp ngẫu nhiên hồn tồn (CRD), lần nhắc lại, lần nhắc lại 100 hạt/khay ươm (thí nghiệm 100 cây) Hạt (rửa sạch, loại bỏ hạt lép), gieo khay ươm (loại khay 105 lỗ/khay) đất cát ẩm, nhà lưới có mái che thuộc mơn Cây cơng nghiệp thuốc, khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam b) Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống rau đắng đất phương pháp giâm cành * Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng vị trí cành giâm tới tỷ lệ rễ chất lượng cành giâm Thí nghiệm thực vị trí cắt khác Cành ngọn: cành chứa đỉnh sinh trưởng; Cành (cành bánh tẻ) vị trí giáp cành cành gần gốc); Cành gần gốc: lấy vị trí từ gốc cành, phần sát với thân đến 1/3 chiều dài cành * Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng tới tỷ lệ rễ chất lượng cành giâm Thí nghiệm nhân tố, sử dụng chất kích thích rễ IAA/ NAA/N3M nồng độ khác (0 chất điều tiết sinh trưởng, 0,5 mg/l, mg/l, 1,5 mg/l, mg/l) * Thí nghiệm 8: Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến khả rễ chất lượng cành giâm Thí nghiệm sử dụng cành bánh tẻ, chất kích thích rễ N3M nồng độ 1mg/l (trong 30 giây), giá thể khác CT1: Trấu hun + mụn xơ dừa (1: 1); CT 2: 100% trấu hun; CT 3: 100% đất phù sa; CT 4: Đất + trấu hun + mụn xơ dừa (1: 1: 1) Các thí nghiệm phương pháp giâm cành (từ thí nghiệm đến thí nghiệm 8) thiết kế theo phương pháp hồn tồn ngẫu nhiên, cơng thức lần nhắc, lần nhắc lại 100 cành, cành giâm có chiều dài 5- cm, lóng/cành giâm Các thí nghiệm đảm bảo đồng ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm (tưới nước dạng phun sương), thí nghiệm sử dụng chất điều tiết sinh trưởng N3M 1mg/l (30 giây) giá thể: trấu hun + mụn xơ dừa + đất phù sa (1:1:1), thí khơng dị hình, khơng nhiễm sâu bệnh) tiến hành trồng vườn thí nghiệm Khoa Nơng học, Học viện Nơng nghiệp Việt Nam Các thí nghiệm thiết kế theo phương pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCBD), diện tích thí nghiệm 10 m2 x lần nhắc lại, mật độ trồng 15 cây/m2 (riêng thí nghiệm mật độ trồng bố trí theo cơng thức xây dựng), sử dụng chung cơng thức bón: phân VSSG + 60 kg N + 90 kg P2O5 + 60 kg K2O/ha (riêng thí nghiệm 18 phân bón xây dựng theo công thức xây dựng) Cách bón: bón lần (bón lót trước trồng): bón lót 100% phân VSSG + 100% P2O5 +50% N + 50 % K2O; Bón lần (bón thúc xuất cành cấp 2): 25% N+ 25% K2O; Bón lần (sau bón thúc lần khoảng 30 ngày): bón lượng phân cịn lại * Thí nghiệm 19: Nghiên cứu ảnh hưởng thời điểm thu hái đến hàm lượng hoạt chất (terpenoid flavonoid) có rau đắng đất - Thí nghiệm thực vào vụ Xuân năm 2020, bao gồm giai đoạn 90 ngày sau gieo; 120 ngày sau gieo 150 ngày sau gieo * Thí nghiệm 20: Ảnh hưởng phận thu hái tới hàm lượng hoạt chất (terpenoid flavonoid) có rau đắng đất Thí nghiệm thực vào tháng 2/2020 gồm cơng thức: Tồn (Đ/C); Toàn thân, cành (bỏ lá); Toàn cây; Hạt; Rễ 3.2.4 Nội dung 4: Xây dựng mô hình áp dụng quy trình cải tiến trồng rau đắng đất Từ kết nghiên cứu → Hoàn thiện bổ sung quy trình trồng (Quy trình cải tiến) → Thử nghiệm mơ hình trồng → Theo dõi đánh giá mơ hình áp dụng quy trình cải tiến so sánh với mơ hình đối chứng điểm (Hà Nội Nam Định) Các thí nghiệm thực phịng ni cấy mơ, vườn ươm ngồi đồng ruộng Định lượng saponin tồn phần tính theo chuẩn acid oleanolic, flavonoid tổng số theo chuẩn quercetin mẫu khô kiệt phương pháp thử UV-VIS hệ thống HPLC (Wang & cs., 1998), chất chiết (%) theo Dược điển Việt Nam V (Bộ Y tế, 2017) phương pháp chiết nóng sử dụng nước làm dung mơi, hàm lượng vitamin C (mg/100g chất khơ) phân tích theo TCVN 6427-2:1998 Kết phân tích thực phân tích Khoa Cơng nghệ thực phẩm, Học viện Nơng nghiệp Việt Nam Trung tâm Ứng dụng KHCN Dược liệu, Viện Dược liệu Phương pháp phân tích dinh dưỡng đất thực theo Tiêu chuẩn Việt Nam, FAO - ISRIC (1987, 1995) Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa (1998) Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa Địa điểm bố trí thí nghiệm thực tại: Khu thí nghiệm đồng ruộng, Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam; Địa điểm thực mơ hình: Tại Hà Nội Nam Định 11 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 ĐÁNH GIÁ ĐẶC ĐIỂM NÔNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ MẪU GIỐNG RAU ĐẮNG ĐẤT 4.1.1 Nghiên cứu đánh giá số tiêu đặc điểm hình thái Đặc điểm hình thái mẫu giống rau đắng đất giống quan sinh dưỡng quan sinh sản có khác màu sắc thân trưởng thành, cành bánh tẻ (lóng thân) mẫu giống RĐ1, RĐ2, RĐ4, RĐ5 có màu xanh phớt tím/nâu đỏ, riêng RĐ3 có màu vàng lục; Phiến mẫu RĐ3 có màu xanh nhạt, kích thước lớn (dài 2,33 ± 0,02 cm; rộng 0,86 ± 0,06 cm), RĐ5 - xanh đậm, kích thước bé (dài 1,80 ± 0,11 cm; 0,51 ± 0,05 cm), RĐ1, RĐ2, RĐ4 – màu xanh; Số lượng rễ cấp mẫu RĐ3 lớn (14,6 rễ cấp 1) sai khác với mẫu lại Hoa mẫu RĐ5 xuất số hoa có mặt ngồi màu phớt tím non màu nâu đỏ, khác biệt với mẫu giống cịn lại (mặt ngồi có màu trắng xanh, non mẫu giống chủ yếu màu xanh lục) 4.1.2 Nghiên cứu đặc điểm cấu tạo giải phẫu (rễ, thân, lá) mẫu giống rau đắng đất 4.1.2.1 Cấu tạo giải phẫu rễ mẫu giống Khơng có sai khác mẫu giống kích thước dày bần nhu mơ vỏ libe- gỗ thứ cấp lớp khoảng biến động cho phép Tuy nhiên, đến bó libe – gỗ thứ cấp 2, bó libe – gỗ thứ cấp libe - gỗ sơ cấp có chênh lệch độ dày mẫu giống, libe-gỗ thứ cấp 3, mẫu RĐ3 cho kết lớn (libe thứ cấp 94,4 µm gỗ thứ cấp 138,9 µm; libe thứ cấp 130,6 µm gỗ thứ cấp đạt 338,9 µm), tiếp đến RĐ5 thấp RĐ1 Đến libe – gỗ sơ cấp, dày bó gỗ mẫu RĐ3 RĐ5 có kết lớn (RĐ3 386,1 µm RĐ5 389,4 µm), bó libe mẫu RĐ3 lại cho kết lớn nhất, sai khác với mẫu lại, RĐ1 có bó libe bó gỗ sơ cấp thấp (dày bó libe 150,0 µm dày bó gỗ 316,7 µm) 4.1.2.2 Cấu tạo giải phẫu thân mẫu giống rau đắng đất Kích thước lớp biểu bì (dao động từ 20,6 µm - 23,3 µm) nhu mô vỏ (141,1 µm - 150,0 µm) khơng có sai khác mẫu giống Vịng cương mơ gồm 2-3 lớp tế bào hình đa giác, số mẫu giống mẫu RĐ5 (92,2 µm) có độ dày lớn nhất, thấp RĐ2 (58,9 µm) Tiếp đến bó libe bắt màu hồng gồm tế bào nhỏ tạo thành vịng bao quanh mơ gỗ Bó gỗ có mạch gỗ to rải rác RĐ3 cơng thức có dày bó libe – gỗ (libe: 128,9 µm - bó gỗ: 243,3 µm) lớn nhất, thấp RĐ1 (libe: 53,3 µm - bó gỗ: 157,8 µm) 12 Cuối nhu mơ ruột nằm thân gồm nhiều tế bào to hình trịn bầu dục dày nhu mô ruột đo mẫu RĐ3 lớn (484,4 µm) 4.1.2.3 Cấu tạo giải phẫu mẫu giống rau đắng đất Giải phẫu lát cắt ngang mẫu giống, gân có cấu tạo mặt lõm, mặt lồi, biểu bì biểu bì gân mẫu RĐ5 dày (dày biểu bì 37,8 µm, biểu bì 43,3 µm), riêng mẫu RĐ3 có lớp biểu bì thấp (20,0 µm) Kích thước mơ mềm gân mẫu RĐ5 lớn mẫu lại (đạt 205,6 µm) Bó libe – gỗ mẫu RĐ5, RĐ3 cho kết lớn mẫu cịn lại (khơng có sai khác RĐ5 RĐ3), thấp RĐ1(bó libe: 26,7 µm bó gỗ: 145,4 µm) Phần phiến lá: dày biểu bì biểu bì khơng có sai khác mẫu giống (Biểu bì dao động từ 28,9 µm - 32,6 µm; ) biểu bì dao động từ 26,0 µm - 31,1 µm), mơ khuyết mẫu RĐ5 có độ dày lớn (198,9 µm), dày mơ giậu mẫu RĐ5 RĐ3 lớn mẫu lại (RĐ5 đạt 277,8 µm RĐ3 đạt 271,1 µm), thấp RĐ1 (mơ giậu 228,9 µm mơ khuyết 127,1 µm) 4.1.3 Giám định tên khoa học mẫu giống rau đắng đất Qua mơ tả hình thái quan sinh dưỡng quan sinh sản mẫu giống rau đắng đất, so sánh với tài liệu tham khảo: Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam (2006), chuyên gia phân loại thực vật thuộc môn Phân loại thực vật, Khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam xác định mẫu giống loài rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC.] 4.1.4 Đánh giá đặc điểm sinh trƣởng, phát triển suất, chất lƣợng số mẫu Rau đắng đất Trong thời vụ thời gian sinh trưởng mẫu giống rau đắng đất đồng đều, sai khác mẫu giống chủ yếu thời gian mọc mầm Tuy nhiên, vụ trồng có chênh lệch rõ ràng thời gian sinh trưởng mẫu giống (Vụ Xuân: 150 ngày -159 ngày; vụ Hè Thu: 120 ngày 125 ngày) Điều nhiệt độ thấp thời gian đầu vụ Xuân làm kéo dài gian đoạn từ gieo đến mọc mầm giai đoạn từ gieo đến phát triển thân cành, hoa rau đắng đất Năng suất mẫu RĐ3 vụ Xuân đạt cao (NSCT 18,55 gam/cây, NSLT 2,78 tấn/ha, NSTT đạt 2,45 tấn/ha) thấp mẫu RĐ1 (NSCT 15,68 gam/cây, NSLT 2,35 tấn/ha, NSTT đạt 1,94 tấn/ha) Tương tự vụ Hè Thu, mẫu RĐ3 cho suất cao (NSCT 13,65 gam/cây, NSLT 2,05 tấn/ha, NSTT đạt 1,64 tấn/ha), RĐ1 cho kết thấp (NSCT 10,62 gam/cây, NSLT 1,59 tấn/ha, NSTT đạt 1,36 tấn/ha) So sánh suất mẫu giống rau đắng đất vụ cho thấy, 13 suất mẫu giống rau đắng đất trồng vụ Xuân (NSTT dao động từ 1,94 tấn/ha - 2,45 tấn/ha) cao vụ Hè thu (NSTT vụ Hè thu dao động từ 1,36 tấn/ha - 1,64 tấn/ha) 4.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CÁC BIỆN PHÁP NHÂN GIỐNG RAU ĐẮNG ĐẤT 4.2.1 Kết nghiên cứu biện pháp nhân giống hữu tính a) Ảnh hưởng thời gian ngâm ủ, chất xử lý nảy mầm đến tỷ lệ nảy mầm Ở thời điểm vụ Xuân (tháng 2) việc ngâm ủ hạt rau đắng đất nước ấm 40oC với thời gian 5h phù hợp với tỷ lệ mọc mầm cao (đạt 78,6%) Tuy nhiên, thời gian ngâm lâu, tỷ lệ mọc mầm có xu hướng giảm kéo dài thời gian mọc mầm hạt Chất kích thích khơng có tác động làm tăng tỷ lệ mọc mầm hạt rau đắng đất so với đối chứng (ngâm hạt 5h nước ấm 40oC), cụ thể: cơng thức đối chứng có tỷ lệ mọc mầm cao (75,3%), GA3 (72,0%), Atonik (68,3%) Supe lân 2% tỷ lệ mọc mầm thấp (62,5%) b Nghiên cứu ảnh hưởng số biện pháp bảo quản hạt tới đến tỷ lệ nảy mầm chất lượng Hạt rau đắng đất có khả mọc mầm từ hạt tươi vừa thu hoạch (CT1) sau ngày gieo khơng qua q trình ngủ nghỉ với tỷ lệ nảy mầm cao (đạt 90,1%) Tuy nhiên, hạt lưu giữ dài ngày tỷ lệ nảy mầm giảm Cụ thể CT2, CT3 có tỷ lệ nảy mầm đạt 86,96-87,37% (thấp CT1), mọc mầm sau 7- ngày gieo, thấp hạt rau đắng sau tháng lưu giữ mẫu điều kiện môi trường (CT7) đạt 42,16%, thời gian mọc mầm kéo dài (16 ngày) sau tháng lưu giữ điều kiện nhiệt độ 5oC (CT6) tỷ lệ mọc mầm đạt 65,25% sau 14 ngày gieo Bảng 4.1 Ảnh hƣởng số biện pháp bảo quản hạt tới tỷ lệ nảy mầm chất lƣợng rau đắng đất thời điểm xuất vƣờn CTTD CT Tỷ lệ mọc mầm (%) CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 LSD0,05 CV% 90,10 87,37 86,96 81,33 72,50 65,25 42,16 7.10 5.3 Thời gian Thời gian mọc mầm xuất (ngày) vƣờn (ngày) 40 45 45 48 10 50 12 55 14 60 16 14 Số rễ (rễ/cây) Chiều dài rễ (cm) Chiều cao (cm) Số (lá/thân chính) 8,57 6,27 6,23 6,15 5,98 5,63 4,25 0.63 5.8 5,69 5,28 5,22 5,12 5,08 4,52 3,25 0.47 5.4 9,24 7,29 7,21 7,11 7,06 6,61 5,21 0.67 5.3 10,53 8,61 8,45 7,24 7,12 6,45 5,15 0.67 4.9 c) Nghiên cứu ảnh hưởng phun bổ sung phân bón đến sinh trưởng giai đoạn vườn ươm Mặc dù rau đắng đất giai đoạn vườn ươm nhỏ, thời gian vườn ươm kéo dài từ 25-35 ngày nên nhu cầu dinh dưỡng không nhiều, việc bổ sung phân bón cho rau đắng đất vườn ươm có hiệu so với đối chứng (không bổ sung) Cụ thể, công thức bổ sung phân bón (CT2, CT3) có rễ, thân, sinh trưởng tốt đối chứng khơng bón (CT1), CT2 cho kết tốt với số rễ đạt 10,27 rễ, chiều dài rễ 4,58 cm, chiều cao đạt 10,24 cm với tổng số lá/thân 10,61 lá, 2,27 cành cấp sau 25 ngày bổ sung phân bón 4.2.2 Kết nghiên kỹ thuật nhân giống rau đắng đất phƣơng pháp giâm cành a Ảnh hưởng vị trí cành giâm đến tỷ lệ rễ chất lượng cành giâm rau đắng đất Cây rau đắng đất giâm cành cành bánh tẻ cho tỷ lệ rễ cao (100%), cành gần gốc tỷ lệ rễ hiệu (đạt 76,67%) Sau 20 ngày theo dõi, giâm cành bánh tẻ đủ tiêu chuẩn xuất vườn với chất lượng tốt (số rễ đạt 12,93 rễ/cây, chiều dài rễ đạt 4,24 cm, 3,3 cành cấp 1), tỷ lệ xuất vườn cao (93,33%) Thấp cành gần gốc số rễ đạt 5,53 rễ/cây, chiều dài rễ 3,07 cm, 1,57 cành cấp 1, tỷ lệ xuất vườn đạt 73,33% thời gian xuất vườn dài (35 ngày) Bảng 4.2 Ảnh hƣởng vị trí cành giâm tới tỷ lệ rễ chất lƣợng giống rau đắng đất (tại thời điểm xuất vƣờn) CTTD CT CT1: Cành CT2: Cành (cành bánh tẻ) CT3: Cành gốc LSD0,05 CV% 100 Tỷ lệ xuất vƣờn (%) 86,67 Thời gian xuất vƣờn (ngày) 20 100 93,33 76,67 6,59 3,8 72,33 5,19 3,1 Tỷ lệ rễ (%) Số rễ (rễ) Chiều dài rễ (cm) Chiều cao (cm) 10,07 3,73 9,24 Số cành cấp (cành /cây) 2,17 20 12,93 4,24 11,10 3,30 35 5,53 1,2 7,1 3,07 0,4 4,1 8,21 2,5 4,6 1,57 0,78 5,2 b Ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng đến tỷ lệ rễ chất lượng rau đắng đất Sử dụng chất điều tiết sinh trưởng nồng độ 0,5 mg/l IAA, mg/l NAA mg/l chế phẩm N3M giá thể phối trộn ½ mụn xơ dừa + ½ trấu hun cho kết tốt 15 c) Ảnh hưởng giá thể giâm cành đến khả rễ chất lượng cành giâm CT1 (giá thể ½ mụn xơ dừa + ½ trấu hun) cho tỷ lệ xuất vườn cao 89,67%, chất lượng giống tốt với số rễ đạt 10,7 rễ/cành, chiều dài rễ 3,98 cm, đạt 2,83 cành cấp chiều cao giống đạt 11,66 cm Rau đắng đất nhân giống biện pháp giâm cành cho hệ số nhân giống cao Sử dụng cành bánh tẻ/cành để giâm kết hợp chất điều tiết sinh trưởng nồng độ IAA 0,5 mg/l, NAA 0,5 mg/l mg/l N3M giá thể phối trộn ½ mụn xơ dừa + ½ trấu hun cho kết tốt nhất, thời gian đảm bảo tiêu chuẩn xuất vườn ngắn (20 ngày sau giâm) 4.2.2.2 Kết nghiên cứu nhân giống in vitro rau đắng đất a Ảnh hưởng thời gian khử trùng mẫu đến chất lượng mẫu cấy in vitro Thời gian xử lý mẫu ảnh hưởng tới hiệu tạo nguồn vật liệu trình khử trùng mẫu Ở công thức (thời gian khử trùng mẫu dung dịch Johnson 1%, 10 phút) có tỷ lệ mẫu sống cao (đạt 76,67%) Bảng 4.3 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng mẫu dung dịch Johnson 1% (Sau tuần theo dõi) Chỉ tiêu theo dõi Công thức CT1:Johnson (1%) phút CT2: Johnson (1%) phút CT3: Johnson (1%) 10 phút CT4: Johnson (1%) 15 phút Tổng Tỷ lệ mẫu mẫu sống cấy (%) (mẫu) 30 30 30 30 43,33 63,33 76,67 60,0 Tỷ lệ mẫu nhiễm, chết (%) Tỷ lệ mẫu chết (%) 6,67 13,33 13,33 26,67 Tỷ lệ mẫu nhiễm (%) 50,0 23,33 10,0 13,33 b Ảnh hưởng BA tới cảm ứng tạo đa chồi rau đắng đất BA có ảnh hưởng tích cực đến tái sinh chồi rau đắng đất Kết ra, rau đắng đất, nồng độ BA 0,5 mg/l phù hợp cho cảm ứng tạo đa chồi sinh trưởng chồi rau đắng đất c Ảnh hưởng tổ hợp BA α-NAA/IAA đến khả nhân nhanh chồi rau đắng đất Sự kết hợp BA α-NAA hay BA IAA có ảnh hưởng tích cực lên trình hình thành chồi sinh trưởng chồi Kết hợp với BA 0,5 mg/l, hệ số nhân chồi rau đắng đất tăng dần tăng nồng độ α-NAA hay IAA từ - 0,5 mg/l Nhưng tăng nồng độ α-NAA/IAA từ 0,75 - 1,0 mg/l hệ số nhân chồi lại giảm dần Điều chứng tỏ, nồng độ α-NAA hay IAA cao lại ức chế khả nhân nhanh chồi rau đắng đất Như vậy, nồng độ 16 BA 0,5mg/l kết hợp với α-NAA/ IAA 0,5 mg/l cho kết tốt với số chồi 8,57/8,5 chồi; số TB 4,97/4,93 chiều cao TB 2,33/2,24cm sau tuần nuôi cấy d Ảnh hưởng nồng độ α-NAA đến khả tạo rễ chất lượng rễ Môi trường rễ tối ưu giống rau đắng đất MS + 0,5 mg/l αNAA + 20 g/l sucrose + 4,5 g/l agar, rễ xuất sớm, số rễ/mẫu nhiều, chất lượng rễ tốt e Nghiên cứu ảnh hưởng loại giá thể khác đến sinh trưởng vườn ươm Kết nghiên cứu cho thấy, tỷ lệ xuất vườn cao sử dụng giá thể 100% mụn xơ dừa (CT2) đạt 86,67% sau 25 ngày cây, thấp sử dụng giá thể 100% đất (CT1) đạt 73,33% sau 40 ngày cây, cơng thức cịn lại mức (từ 80% - 83,33%) Tại thời điểm xuất vườn, sử dụng giá thể 100% mụn xơ dừa sinh trưởng tốt với chiều cao đạt 10,29 cm, số rễ đạt 14,27 rễ, đặc biệt phát triển xanh tốt vượt trội giá thể lại với số đạt 45,90 lá/cây thấp giá thể 100% đất phù sa (CT1) 4.2.3 Ảnh hƣởng phƣơng thức nhân giống đến sinh trƣởng, phát triển suất, chất lƣợng rau đắng đất 4.2.3.1 Ảnh hưởng phương thức nhân giống đến sinh trưởng phát triển rau đắng đất Phương thức gieo hạt cho thấy tỷ lệ đảm bảo tiêu chuẩn xuất vườn thấp phương thức (65,17%), tiếp đến cành giâm đạt 85,1% cao in vitro đạt 86,67% Thời gian từ gieo/trồng đến thu hoạch cơng thức cho thấy có khác nhau, với phương thức giâm cành ngắn (120 ngày), tiếp đến phương thức gieo hạt 145 ngày, tổng thời gian sinh trưởng dài nuôi cấy mô (157 ngày) phương thức có khác nhau, CT2 suất lớn (saponin 50,50 kg/ha, flavonoid 40,23 kg/ha), tiếp đến CT1 (saponin 46,86 kg/ ha, flavonoid 35,75 kg/ha) thấp CT3 (saponin 43,01 kg/ ha, flavonoid 32,72 kg/ha) Như vậy, hàm lượng hoạt chất rau đắng đất phương thức nhân giống đảm bảo chất lượng cho sản xuất nguyên liệu dược Rau đắng đất sử dụng phương thức (nhân giống hạt, giâm cành nuôi cấy in vitro) để nhân giống, phương thức nhân giống hạt đơn giản, dễ áp dụng phương thức lại Tuy nhiên, để chủ động đáp ứng kịp thời nguồn giống cho sản xuất, áp dụng biện pháp nhân giống vơ tính (nguồn giống từ giâm cành nuôi cấy in vitro) cho hiệu cao 17 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng phƣơng thức nhân giống đến suất chất lƣợng dƣợc liệu rau đắng đất Công thức CT1 (Đ/C) CT2 CT3 LSD0,05 CV% NSCT (g/cây) NSLT NSTT (tấn/ha) (tấn/ha) Hàm lƣợng Năng suất hoạt chất hoạt chất saponin flavonoid saponin flavonoid tổng số tổng số Kg/ha Kg/ha % % 14,85 2,23 2,02 2,32 1,77 46,86 35,75 15,67 12,74 1,83 4,1 2,35 1,91 0,12 3,6 2,14 1,87 0,12 4,0 2,36 2,30 1,88 1,75 50,50 43,01 2,10 4,6 40,23 32,72 2,05 5,2 Chú giải: CT1: Phương thức nhân giống hạt; CT2: Phương thức nhân giống nuôi cấy in vitro; CT3: Phương thức nhân giống giâm cành Tại thời điểm thu hoạch kết cho thấy, kết suất hoạt chất thu 4.3 NỘI DUNG 3: CÁC BIỆN PHÁP KỸ THUẬT TRỒNG RAU ĐẮNG ĐẤT 4.3.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời vụ gieo trồng đến sinh trƣởng, phát triển, suất rau đắng đất 4.3.1.1 Ảnh hưởng thời vụ gieo trồng đến sinh trưởng, phát triển suất rau đắng đất Sau trồng vườn thí nghiệm, thời gian từ gieo đến hoa vụ Xuân (dao động từ 80 - 96 ngày), vụ Hè Thu (63 - 67 ngày) thời gian từ gieo đến chín đợt vụ Xuân kéo dài so với vụ Hè Thu Thời gian thu hoạch rau đắng đất vụ Xuân (gieo từ tháng 14/1- 30/3), dao động từ 148 ngày - 165 ngày, dài TV1 (165 ngày) tiếp đến TV2 (159 ngày), TV3, TV4 (152 ngày), TV5 TV6 (148 ngày) Vụ Hè Thu (gieo từ 15/6-29/8), thời gian thu hoạch lại rút ngắn nhiều so với vụ Xuân, dao động từ 120 ngày (TV12) đến 135 (TV8, TV9) Như vậy, vụ Xuân (từ 14/2-28/2) thời điểm gieo trồng rau đắng đất tốt Gieo hạt sớm (tháng 1) làm ảnh hưởng tới khả mọc mầm hạt làm chậm trình sinh trưởng giai đoạn đầu sinh trưởng (do nhiệt độ ánh sáng yếu), gieo muộn (cuối tháng 3) gặp bất lợi cho giai đoạn thu hoạch, làm giảm suất dược liệu rau đắng đất Vụ Hè Thu, nên gieo vào cuối tháng (15/7 -30/7) kết hợp với giải pháp kỹ thuật gieo hạt vườn ươm, làm giàn che đồng ruộng… giúp hạn chế tượng thời tiết cực đoan thường xuất 18 Miền Bắc (nắng nóng tháng 6, mưa bão nhiều vào tháng 8) làm ảnh hưởng tới tỷ lệ mọc mầm chất lượng trồng vườn sản xuất; Nhưng gieo hạt muộn (từ cuối tháng trở đi), vào thời kỳ phát triển mạnh thân gặp nhiệt độ, cường độ ánh sáng giảm làm sớm hoa đậu quả, già hóa nhanh ảnh hưởng tới suất rau đắng đất So sánh vụ trồng, rau đắng đất gieo trồng Gia Lâm - Hà Nội vào vụ Xuân, sinh trưởng phát triển tốt đạt suất cao vụ Hè Thu Kết phù hợp với công bố Trần Trung Nghĩa (2018) nghiên cứu thời vụ gieo trồng rau đắng đất Thanh Hóa Bảng 4.5 Ảnh hƣởng thời vụ gieo trồng đến suất rau đắng đất Công thức NSCT (g/cây) NSLT (tấn/ha) NSTT (tấn/ha) 1,84 2,28 2,79 2,78 2,39 2,13 1,57 1,94 2,54 2,50 2,03 1,81 0,13 3,6 1,88 2,12 2,29 2,26 1,74 1,45 1,52 1,59 1,76 1,72 1,47 1,23 0,11 3,9 Vụ Xuân TV1: 14/1 TV2: 28/1 TV3: 14/2 TV4: 28/2 TV5: 15/3 TV6: 30/3 LSD 0,05 CV% 12,29 15,21 18,61 18,54 15,92 14,22 1,21 4,2 Vụ Hè Thu TV7: 15/6 TV8: 30/6 TV9: 15/7 TV10: 30/7 TV11: 14/8 TV12: 29/8 LSD 0,05 CV% 12,57 14,19 15,32 15,09 11,62 9,67 1,08 4,5 4.3.2 Ảnh hƣởng mật độ trồng đến sinh trƣởng, phát triển, suất rau đắng đất Vụ Xuân, điều kiện thời tiết thuận lợi cho rau đắng đất sinh trưởng phát triển, thân cành phát triển tối ưu nên bố trí mật độ M2 (15 cây/m2) cho suất thực thu cao 19 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng mật độ trồng đến suất rau đắng đất CTTD CT NSCT (gam/cây) NSLT (tấn/ha) NSTT (tấn/ha) Vụ Xuân M1: 10 cây/m2 M2: 15 cây/m2 19,73 18,86 1,97 2,83 1,60 2,51 M3: 35 cây/m2 M4: 65 cây/m2 8,02 4,24 2,81 2,76 2,30 1,92 M5: 100 cây/m2 2,56 2,56 1,87 LSD0,05 CV % 0,99 4,9 0,20 5,1 Vụ Hè Thu M1: 10 cây/m2 M2: 15 cây/m2 13,53 12,33 1,35 1,85 1,16 1,58 M3: 35 cây/m2 M4: 65 cây/m2 7,21 3,52 2,52 2,28 2,09 1,81 M5: 100 cây/m2 LSD0,05 2,12 0,66 2,12 1,74 0,15 CV% 4,3 4,7 Nhưng vụ Hè thu, rau đắng đất sinh trưởng già hóa nhanh vụ Xuân, nên gieo trồng mật độ M3 (35 cây/m2) 4.3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng che sáng tới sinh trƣởng, phát triển, suất chất lƣợng dƣợc liệu rau đắng đất Trong điều kiện vụ Xuân Gia Lâm, Hà Nội, rau đắng đất sinh trưởng phát triển tốt, suất cao điều kiện ánh trực tiếp (không che sáng) Nhưng vào vụ Hè thu, trồng rau đắng đất có sử dụng lưới che sáng (giảm 25% ánh sáng trực tiếp) cho kết tốt không che sáng Bởi vì, việc sử dụng lưới che cho điều kiện vụ Hè Thu Đồng Sông Hồng, giúp hạn chế tác động yếu tố cực đoan (mưa lớn, gió bão…), tác động tích cực đến chất lượng rau đắng đất, đồng thời che sáng điều kiện nắng nóng giảm nhiệt độ khơng khí, nhiệt độ bề mặt lá, bề mặt đất nhiệt độ đất (Nguyễn Xuân Cường, 2019; Nguyễn Thị Dương & cs., 2014) 20 Bảng Ảnh hƣởng che sáng đến hàm lƣợng saponin, vitamin C, chất chiết rau đắng đất CT Chỉ Vitamin C Chất tiêu Saponin (mg/100 g chiết (%) ck) (%) Vụ Xuân CT1 CT2 CT3 CT4 LSD0,05 CV% Vụ Hè CT1 CT2 CT3 CT4 LSD0,05 CV% NS hoạt chất (kg/ha) NS TT (tấn/ha) Saponin Vitamin C Chất chiết 2,60 2,80 3,18 3,15 0,26 4,2 131,37 126,00 150,00 144,90 16,00 5,3 27,35 29,43 35,06 34,16 2,51 4,0 2,76 2,24 1,70 1,39 1,29 3,5 71,76 62,72 54,06 43,79 5,31 4,6 3,63 2,82 2,55 2,01 0,30 5,4 754,86 659,23 596,02 474,84 56,76 4,6 2,67 2,90 3,08 3,12 0,24 4,0 1,24 1,36 1,45 1,56 0,10 3,7 28,35 30,43 32,77 34,16 2,58 4,1 2,25 2,52 2,09 1,96 0,22 4,9 60,08 73,08 64,37 61,15 6,62 5,0 2,79 3,36 3,19 3,29 0,36 5,8 637,88 766,84 684,89 669,54 73,70 5,2 4.3.4 Nghiên cứu ảnh hƣởng liều lƣợng bón phân vô đến sinh trƣởng, phát triển suất rau đắng đất Công thức PB7 với tỷ lệ N-P-K 90 – 90 - 60 bón vụ Xuân cho kết cao toàn tiêu (NSCT đạt 19,58 g/cây, NSLT đạt 2,94 tấn/ha NSTT đạt 2,70 tấn/ha), ngược lại với tỷ lệ N thấp (PB6) làm giảm suất rau đắng đất (đạt 2,36 tấn/ha) Nhưng vụ Hè thu, rau đắng đất sinh trưởng chậm, thời gian sinh trưởng ngắn, việc bón tăng N vào vụ Hè Thu cơng thức PB7 khơng có sai khác NSTT so với PB1 (PB7 - NSTT 2,07 tấn/ha; PB1 - 2,02 khô/ha), thấp PB6 (NSTT 1,59 tấn/ha) mức tin cậy 95% (bảng 4.8) Qua nghiên cứu, theo dõi đánh giá tổng thể từ giai đoạn sinh trưởng, phát triển, suất, chất lượng cơng thức phân bón phân vơ cho rau đắng đất trồng khu thí nghiệm đồng ruộng, xác định cơng thức bón cho rau đắng đất cho 01 ha, vụ Xuân: phân hữu vi sinh + 90 kg N + 90 kg P2O5 + 60 kg K2O (PB7) vụ Hè Thu: phân hữu vi sinh + 60 kg N + 90 kg P2O5 + 60 kg K2O (PB1) phù hợp 21 Bảng 4.8 Ảnh hƣởng liều lƣợng bón phân vơ tới suất rau đắng đất NSCT NSLT NS TT Công thức (g/cây) (tấn/ha) (tấn/ha) Vụ Xuân PB1 (ĐC) 18,60 2,79 2,52 PB2 17,86 2,68 2,41 PB3 18,64 2,80 2,54 PB4 18,25 2,74 2,46 PB5 17,67 2,65 2,44 PB6 17,12 2,57 2,36 PB7 19,58 2,94 2,70 LSD0,05 1,09 0,15 CV% 5,7 6,8 Vụ Hè PB1 (ĐC) 14,99 2,25 2,02 PB2 12,79 1,92 1,73 PB3 13,58 2,04 1,83 PB4 13,88 2,08 1,87 PB5 13,53 2,03 1,83 PB6 11,68 1,75 1,58 PB7 15,30 2,30 2,07 LSD0,05 1,09 0,12 CV% 4,5 3,6 4.3.5 Nghiên cứu số kỹ thuật thu hái ảnh hƣởng tới chất lƣợng dƣợc liệu rau đắng đất 4.3.5.1 Nghiên cứu ảnh hưởng giai đoạn thu hái tới chất lượng dược liệu rau đắng đất Thời điểm thu hoạch rau đắng tốt đảm bảo suất hoạt chất từ bắt đầu sinh trưởng chậm lại thân cành (GĐ2: 120 ngày sau gieo) đến giai đoạn có 1/3 số chuyển màu ánh vàng (GĐ3) (150 ngày sau gieo) Cây rau đắng đất không nên thu sớm, thời điểm giai đoạn đầu sinh trưởng, suất cá thể thấp làm ảnh hưởng suất hoạt chất Nhưng không nên thu hoạch muộn làm cho dược liệu có giảm, ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu 22 4.3.5.2 Nghiên cứu ảnh hưởng phận thu hái tới chất lượng dược liêu rau đắng đất Qua bảng 4.9 cho thấy, hàm lượng saponin tổng số có mẫu rau đắng đất cao (đạt 3,32%), mẫu hạt đạt 2,95%, mẫu thân/cành đạt 2,33% thấp mẫu rễ đạt 1,6% Hàm lượng flavonoid mẫu cho kết cao đạt 2,32% hạt 1,13%, tỷ lệ flavonoid có thân cành rễ thấp với tỷ lệ mẫu rễ đạt 0,49% (thấp nhất) thân cành (loại bỏ lá) đạt 0,82% Bảng 4.9 Ảnh hƣởng phận thu hái đến chất lƣợng dƣợc liệu rau đắng đất Cơng thức Tồn (Đ/C) Thân/cành Lá Hạt Rễ Saponin (%) 2,60 ± 0,03 2,33 ± 0,01 3,32 ± 0,02 2,95 ± 0,02 1,60 ± 0,01 Flavonoid (%) 1,50 ± 0,01 0,82 ± 0,02 2,32 ± 0,03 1,13 ± 0,03 0,49 ± 0,01 4.3.6 Xây dựng mơ hình áp dụng quy trình cải tiến trồng rau đắng đất Sau thực nghiên cứu chọn lọc mẫu giống rau đắng đất xác định số biện pháp kỹ thuật nhằm bổ sung cải tiến quy trình trồng rau đắng đất Đề tài tiến hành thử nghiệm mơ hình áp dụng quy trình cải tiến (MH2) so sánh với quy trình đối chứng (MH1) điểm Hà Nội (huyện Gia Lâm - Hà Nội) Nam Định (Hải Hậu - Nam Định) Kết tổng thu MH2 đạt 132.500.000 đồng/ha (Hà Nội) đến 137.500.000 đồng/ha (Nam Định), cao tổng thu MH1 (đạt 113.500.000 đồng - Hà Nội, 115.000.000 đồng Nam Định), suất rau đắng đất thu MH2 cao so với MH1 Như vậy, áp dụng mơ hình nghiên cứu (MH2) cho thấy, hiệu kinh tế cao so với MH1, hiệu suất đồng vốn MH2 đạt 1,8 - 1,9 lần cao MH1 đạt 1,3 lần (mức thấp) PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN 1) Xác định đặc điểm hình thái, cấu tạo giải phẫu quan sinh trưởng giám định tên khoa học mẫu giống rau đắng đất thu thập Tây Ninh (RĐ1), Hà Nội (RĐ2), Nam Định (RĐ3), Thái Bình (RĐ4) Phú Yên (RĐ5) Tuyển chọn mẫu giống RĐ3 thu thập Nam Định có nhiều đặc điểm nơng sinh học ưu việt: sinh trưởng phát triển tốt, suất đạt 2,45 tấn/ha, hoạt chất saponin tổng số đạt 2,67%, flavonoid tổng số 1,85%, phù hợp sản xuất nguyên liệu Đồng sông Hồng 2) Xác định số biện pháp kỹ thuật nhân giống rau đắng đất: Nhân giống phương pháp hữu tính sử dụng hạt tươi, hạt thu hái cho tỷ lệ mọc mầm cao (90,10%), hạt qua bảo quản cần xử lý nước 23 ấm (40oC) thời gian giờ; Nhân giống phương pháp giâm cành, sử dụng cành bánh tẻ, xử lý chất điều tiết sinh trưởng IAA (0,5 mg/l) N3M (1 mg/l) NAA (1 mg/l), giá thể 50% trấu hun + 50% mụn xơ dừa, sau 20 ngày đạt tiêu chuẩn xuất vườn với tỷ lệ 86,67%; Nhân giống phương pháp nuôi cấy in vitro, khử trùng mẫu dung dịch Johnson 1% 10 phút, sử dụng môi trường MS bổ sung BA (0,5 mg/l) giai đoạn tạo đa chồi, kết hợp BA (0,5 mg/l) + α-NAA/IAA (0,5 mg/l) giai đoạn nhân nhanh, bổ sung α-NAA (0,5 mg/l) giai đoạn tạo hoàn chỉnh giá thể 100% mụn xơ dừa thời kỳ vườn ươm 3) Xác định số biện pháp kỹ thuật trồng rau đắng đất hạt: Trong vụ Xuân, gieo hạt từ 14/2-28/2, mật độ trồng 15 cây/m2, phân bón phân hữu vi sinh Sơng Gianh + 90 kg N + 90 kg P 2O5 + 60 kg K2O/ha; Trong vụ Hè Thu, gieo từ 15/7-30/7 kết hợp che sáng 25%, mật độ thích hợp 35 cây/m2, phân bón phân hữu vi sinh Sông Gianh + 60 kg N + 90 kg P 2O5 + 60 kg K2O/ha Khi bắt đầu sinh trưởng chậm lại (120 ngày sau gieo) đến có 1/3 số bắt đầu chuyển màu ánh vàng (150 ngày sau gieo) tiến hành thu hoạch phận mặt đất (loại bỏ rễ) 4) Hiệu kinh tế kỹ thuật mô hình trồng rau đắng đất phân tích từ điểm (Hà Nội Nam Định) cho thấy: Áp dụng mơ hình canh tác cải tiến (MH2) suất thực thu đạt 2,65 tấn/ha, lãi đạt 84.320.000 đồng/ha hiệu suất đồng vốn đạt 1,8 lần Gia Lâm - Hà Nội suất thực thu đạt 2,75 tấn/ha, lãi đạt 89.320.000 đồng/ha, hiệu suất đồng vốn đạt 1,9 lần trồng Hải Hậu - Nam Định Trong MH1 (Đ/C) hiệu suất đồng vốn đạt 1,3 lần (mức thấp) điểm thực mơ hình 5.2 KIẾN NGHỊ VÀ ĐỀ XUẤT Trong điều kiện Hà Nội phụ cận, sử dụng mẫu giống RĐ3 tốt nhất; Rau đắng đất có khả nhân giống hạt, giâm cành nuôi cấy in vitro Thời vụ trồng tốt vụ Xuân (cuối tháng 2), mật độ 15 cây/m2, lượng phân bón: phân VSSG + 90 kg N + 90 kg P2O5 + 60 kg K2O/ha Vụ Hè Thu, nên gieo cuối tháng 7, kết hợp che sáng (giảm 25% ánh sáng), lượng phân bón phù hợp là: phân VSSG + 60 kg N + 90 kg P2O5 + 60 kg K2O/ha, mật độ 35 cây/m2 Áp dụng trồng xen rau đắng đất tán khác (mức độ che phủ tốt 25% ánh sáng) vùng khí hậu nắng nóng, khô hạn trồng vụ Hè Thu miền Bắc tạo điều kiện thuận lợi cho rau đắng đất sinh trưởng phát triển tăng hiệu sử dụng đất đơn vị diện tích 24 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Vũ Thị Hồi & Ninh Thị Phíp (2019) Nhân giống in vitro rau đắng đất (Glinus oppositifolius (L.) DC.) Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 17 (1): 22 - 28 Vũ Thị Hoài & Ninh Thị Phíp (2020) Ảnh hưởng chế độ che sáng đến sinh trưởng, suất chất lượng dược liệu rau đắng đất (Glinus oppositifolius (L.) DC.) Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam 18 (6): 401 - 407 Vũ Thị Hồi & Ninh Thị Phíp (2021) Ảnh hưởng kỹ thuật giâm cành đến khả nhân giống rau đắng đất (Glinus oppositifolius (L.) DC.) sinh trưởng, phát triển chúng Gia Lâm, Hà Nội Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn 18: 195-201 Vũ Thị Hồi, Ninh Thị Phíp & Nguyễn Thị Ngà (2022) Đặc điểm hình thái giải phẫu số mẫu giống rau đắng đất (Glinus oppositifolius (L.) DC.) Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 20 (7): 873 - 882 ... Đồng sơng Hồng góp phần hồn thi? ??n quy trình canh tác, mở rộng diện tích trồng rau đắng đất phục vụ sản xuất dược liệu chất lượng PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 GIỚI THI? ??U VỀ CÂY RAU ĐẮNG ĐẤT 2.1.1... liệu chất lượng cao, việc đẩy mạnh công tác nghiên cứu giống, đa dạng phương pháp nhân ni, hồn thi? ??n quy trình kỹ thuật canh tác đường tất yếu Xuất phát từ lý đề tài “Nghiên cứu số biện pháp... cho nhân nhanh, bổ sung 0,5 mg/l α-NAA giai đoạn tạo hoàn chỉnh giá thể 100% mụn xơ dừa) - Hồn thi? ??n quy trình kỹ thuật trồng rau đắng đất đạt hiệu kinh tế cao Đồng sông Hồng Xác định thời vụ