QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT LÀM BÓNG National technical regulation on Food Additive – Glazing agent

CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM QCVN - 20: 2011/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT LÀM BÓNG National technical regulation on Food Additive – Glazing agent HÀ NỘI - 2011 QCVN - 20: 2011/BYT Lời nói đầu QCVN 4-20:2011/BYT Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia Phụ gia thực phẩm chất hỗ trợ chế biến biên soạn, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt ban hành theo Thơng tư số 01/2011/TT-BYT ngày 13 tháng 01 năm 2011 Bộ trưởng Bộ Y tế QCVN - 20: 2011/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT LÀM BÓNG National technical regulation on Food Additive – Glazing agent I QUY ĐỊNH CHUNG Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau gọi tắt Quy chuẩn) quy định yêu cầu kỹ thuật quản lý chất lượng, vệ sinh an tồn chất làm bóng sử dụng với mục đích làm phụ gia thực phẩm Đối tƣợng áp dụng Quy chuẩn áp dụng đối với: 2.1 Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất làm bóng làm phụ gia thực phẩm (sau gọi tắt tổ chức, cá nhân) 2.2 Cơ quan quản lý nhà nước có liên quan Giải thích từ ngữ chữ viết tắt: 3.1 Chất làm bóng: phụ gia thực phẩm cho thêm vào bề mặt phía ngồi thực phẩm nhằm tạo độ bóng tạo lớp bảo vệ 3.2 JECFA monograph - Vol (JECFA monographs - Combined compendium of food additive specifications; Joint FAO/WHO expert committee on food additives; Volume - Analytical methods, test procedures and laboratory solutions used by and referenced in the food additive specifications; FAO, 2006): Các yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm, Tập Các phương pháp phân tích, quy trình thử nghiệm, dung dịch thử nghiệm sử dụng (hoặc tham chiếu) yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm; JECFA biên soạn; FAO ban hành năm 2006 3.3 Mã số C.A.S (Chemical Abstracts Service): Mã số đăng ký hóa chất Hiệp hội Hóa chất Hoa Kỳ 3.4 TS (test solution): Dung dịch thuốc thử 3.5 ADI (Acceptable daily intake): Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận 3.6 INS (International numbering system): Hệ thống mã số quốc tế phụ gia thực phẩm QCVN - 20: 2011/BYT II YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƢƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử chất làm bóng quy định phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn sau: 1.1 Phụ lục 1: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử sáp ong 1.2 Phụ lục 2: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử sáp Candelila 1.3 Phụ lục 3: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử Shellac 1.4 Phụ lục 4: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử dầu khoáng 1.5 Phụ lục 5: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử sáp vi tinh thể Các yêu cầu kỹ thuật quy định Quy chuẩn thử theo JECFA monograph - Vol 4, ngoại trừ số phép thử riêng mô tả phụ lục Các phương pháp thử hướng dẫn Quy chuẩn khơng bắt buộc phải áp dụng, sử dụng phương pháp thử khác tương đương Lấy mẫu theo hướng dẫn Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng năm 2009 Bộ Khoa học Công nghệ hướng dẫn kiểm tra nhà nước chất lượng hàng hóa lưu thơng thị trường quy định khác pháp luật có liên quan III YÊU CẦU QUẢN LÝ Công bố hợp quy 1.1 Các chất làm bóng phải cơng bố phù hợp với quy định Quy chuẩn 1.2 Phương thức, trình tự, thủ tục cơng bố hợp quy thực theo Quy định chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng năm 2007 Bộ trưởng Bộ Khoa học Công nghệ quy định pháp luật Kiểm tra chất làm bóng Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an tồn chất làm bóng phải thực theo quy định pháp luật QCVN - 20: 2011/BYT IV TRÁCH NHIỆM CỦA TỔ CHỨC, CÁ NHÂN Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với quy định kỹ thuật Quy chuẩn này, đăng ký công bố hợp quy Cục An toàn vệ sinh thực phẩm bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn theo nội dung công bố Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất làm bóng sau hồn tất đăng ký công bố hợp quy bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với quy định pháp luật V TỔ CHỨC THỰC HIỆN Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với quan chức có liên quan hướng dẫn triển khai tổ chức việc thực Quy chuẩn Căn vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn Trường hợp hướng dẫn quốc tế phương pháp thử quy định pháp luật viện dẫn Quy chuẩn sửa đổi, bổ sung thay áp dụng theo văn QCVN - 20: 2011/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI SÁP ONG Tên khác, số Beeswax INS 901 Định nghĩa Sáp ong lấy từ tổ ong mật (họ Apidae, ví dụ Apis mellifera L) sau rút hết ly tâm hết mật ong Tổ ong làm chảy với nước nóng, nước phơi ánh mặt trời, sau sản phẩm tan chảy lọc đóng thành bánh sáp ong vàng Sáp ong trắng thu cách tẩy trắng sáp ong vàng dùng chất oxy hóa hydro peroxyd, acid sulfuric, hay ánh sáng mặt trời Sáp ong hỗn hợp ester acid béo cồn béo, hydrocarbon acid béo tự do, có phần nhỏ cồn béo tự Mã số C.A.S 8006-40-4 (sáp ong vàng) 8012-89-3 (sáp ong trắng) Cảm quan Sáp ong vàng: chất rắn màu vàng nâu sáng, lạnh dễ vỡ, vỡ tạo thành miếng mờ đục, dạng hạt, khơng có dạng tinh thể, nhiệt độ khoảng 35°C trở nên mềm dẻo Có mùi đặc trưng mật ong Sáp ong trắng: chất rắn màu trắng hay màu trắng ngà (lớp mỏng thường mờ), có mùi nhẹ đặc trưng mật ong Chức Chất làm bóng, chất giải phóng, chất ổn định, chất tạo kết cấu cho kẹo cao su, chất mang cho phụ gia thực phẩm (bao gồm mang hương mang màu), chất làm đục Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Khơng tan nước, tan cồn, dễ tan ether 5.2 Độ tinh khiết Khoảng nóng chảy 62 – 65°C Chỉ số acid 17 – 24 Chỉ số peroxyd Không 5,0 (xem mô tả phần Phương pháp thử) Chỉ số xà phịng hóa 87 – 104 Sáp carnauba Đạt yêu cầu (xem mô tả phần phương pháp thử) Ceresin, parafin Đạt yêu cầu (xem mô tả phần phương pháp thử) số sáp khác Chất béo, sáp Nhật Đạt yêu cầu (xem mô tả phần phương pháp thử) QCVN - 20: 2011/BYT bản, colophan xà phòng Glycerin polyol khác Khơng q 0,5% (tính theo glycerin) Chì Khơng 2,0 mg/kg (xem mô tả phần phương pháp thử) Phƣơng pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Chỉ số peroxyd Cân xác g mẫu vào bình nón 200 mL Thêm 30 mL dung dịch cloroform acid acetic (TT) 2:3 đậy nút bình nón Làm nóng mẫu nước ấm xốy trịn để hòa tan mẫu Để nguội đến nhiệt độ phòng thêm 0,5 mL dung dịch kali iodid bão hòa Đậy bình nón nút lắc mạnh 60 giây Thêm 30 mL nước chuẩn độ dung dịch natri thiosulfat dùng thị hồ tinh bột (TT) Tiến hành thêm mẫu trắng Chỉ số peroxyd = (a b) N 1000 m Trong đó: a = số mL natri thiosulfat dùng cho mẫu thử b = số mL natri thiosulfat dùng cho mẫu trắng N = nồng độ đương lượng natri thiosulfat m = khối lượng mẫu (g) Sáp carnauba Cân khoảng 100 mg mẫu thử vào ống nghiệm, thêm 20 mL n-butanol Nhúng ống nghiệm vào chậu nước sôi, lắc hỗn hợp nhẹ nhàng đến mẫu thử hịa tan hồn tồn Chuyển mẫu ống nghiệm vào cốc có mỏ chứa nước 60°C, để yên cho nước nguội xuống nhiệt độ phòng Một khối xốp tinh thể mịn giống hình kim tạo thành, tách khỏi lớp dung dịch mẹ suốt Dưới kính hiển vi, tinh thể xốp hình kim búi hình sao, khơng có khối vơ định hình, chứng tỏ khơng có sáp carnauba Ceresin, parafin Cân 3,0 g mẫu vào bình cầu đáy trịn 100 mL, thêm 30 mL dung dịch kali hydroxyd 4% (kl/tt) ethanol không số loại sáp khác chứa aldehyd đun nhẹ ống sinh hàn hồi lưu Tháo bỏ ống sinh hàn, nhúng vào nhiệt kế Ngâm bình vào chậu nước 80°C nguội, liên tục lắc xốy trịn bình Khơng có kết tủa trước nhiệt độ đạt đến 65°C, dung dịch trắng đục Chất béo, sáp Nhật bản, colophan xà phòng Đun g mẫu với 35 mL dung dịch natri hydroxyd 1:7 30 phút, giữ nguyên thể tích cách thêm nước, để nguội hỗn hợp Sáp tách ra, dung dịch suốt Lọc hỗn hợp lạnh acid hóa dịch lọc acid QCVN - 20: 2011/BYT hydrocloric Khơng có kết tủa tạo thành Glycerin polyol khác Cho 0,20 g mẫu vào bình cầu đáy trịn, thêm 10 mL dung dịch kali hydroxyd ethanol (TT), nối sinh hàn hồi lưu đun bình cách thủy 30 phút Thêm 50 mL acid sulfuric loãng (TT), để nguội lọc Rửa bình phễu lọc acid sulfuric lỗng (TT) Gộp dịch chiết dịch rửa, pha loãng thành 100,0 mL acid sulfuric loãng (TT) Lấy 1,0 mL dung dịch vào ống nghiệm, thêm 0,5 mL dung dịch natri periodat 1,07% (kl/tt) nước, lắc để yên phút Thêm 1,0 mL dung dịch fuchsin làm màu (xem dưới), lắc Kết tủa phải tan hết Đặt ống vào cốc có mỏ chứa nước 40°C Để nguội, quan sát khoảng 10 – 15 phút Nếu dung dịch chuyển thành màu tím xanh, màu phải khơng đậm màu dung dịch chuẩn pha đồng thời theo cách tương tự dùng 1,0 mL dung dịch glycerin 0,001% (kl/tt) acid sulfuric lỗng (TT) Dung dịch fuchsin khử màu Chì Hòa tan 0,1 g fuchsin dạng base 60 mL nước Thêm dung dịch gồm g natri sulfit khan (tinh khiết thuốc thử) 10 mL nước Thêm từ từ mL acid hydrocloric, vừa thêm vừa lắc liên tục Thêm nước đến đủ 100 mL Để yên, tránh ánh sáng vịng 12 giờ, loại màu than hoạt tính lọc Nếu dung dịch trở nên đục, lọc trước dùng Nếu sau để yên, dung dịch chuyển sang màu tím, loại màu lần than hoạt tính Bảo quản tránh ánh sáng - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ QCVN - 20: 2011/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI SÁP CANDELILLA Tên khác, số INS 902 Định nghĩa Sáp candelilla thô thu cách đun sôi nhánh khô candelilla (Euphorbia antisyphilitica) nước acid hóa acid sulfuric để giải phóng sáp Sáp tan chảy sau loại béo đông đặc lại, tinh chế cách xử lý với acid sulfuric qua công đoạn ép - lọc Sáp candelilla chứa n-alkanes mạch lẻ (C29 đến C33) với ester acid rượu có mạch carbon chẵn (C28 đến C34) Các acid tự do, rượu tự do, sterol, keo trung tính chất khống có mặt Mã số C.A.S 8006-44-8 Cảm quan Dạng chất rắn, cứng, rịn, bóng màu nâu vàng, có mùi thơm làm nóng Chức Chất làm bóng, chất tạo kết cấu cho kẹo cao su, chất phủ bề mặt, chất mang cho phụ gia thực phẩm (bao gồm mang hương mang màu), chất làm đục Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Độ hấp thụ hồng ngoại Không tan nước, tan toluen Phổ hồng ngoại mẫu thử, làm tan chảy chuẩn bị để phân tích kali bromid phải tương ứng với phổ hồng ngoại sáp candelilla tiêu chuẩn (xem Phụ lục) 5.2 Độ tinh khiết Khoảng nhiệt độ tan chảy 68,50 – 72,50 Chỉ số acid Từ 12 đến 22 Chỉ số xà phịng hóa Từ 43 đến 65 Chì Không mg/kg Phƣơng pháp thử Độ tinh khiết Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ QCVN - 20: 2011/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI SHELLAC Tên khác, số INS 904 Định nghĩa Senlac nhựa polyester thu từ cánh kiến đỏ, chất nhựa tiết từ loài côn trùng Laccifer (Tachardia) lacca Kerr (Họ Coccidae) Senlac tẩy màu thu nhờ q trình hồ tan cánh kiến đỏ dung dịch Na2CO3 nước, sau tẩy màu natri hypochlorit, kết tủa cánh kiến đỏ tẩy màu dung dịch H2SO4 loãng sấy khô; senlac tẩy màu không chứa sáp điều chế cách xử lý tiếp, theo sáp tách cách lọc Mã số C.A.S 9000-59-3 Cảm quan Senlac tẩy màu: dạng nhựa hạt vô định hình có màu trắng tới vàng nhạt; Senlac tẩy màu không chứa sáp: dạng nhựa hạt vô định hình có màu vàng sáng Chức Chất làm bóng, chất phủ bề ngồi u cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Phản ứng màu Phải có phản ứng màu đặc trưng Độ tan Không tan nước; tan chậm ethanol; tan aceton ether Chỉ số acid 60 – 89 (xem mô tả phần Phương pháp thử) 5.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng sấy khô Không 6,0 % (sấy 400C giờ, sau làm nguội đến nhiệt độ phòng silicagel 15 giờ) Rosin Đạt yêu cầu (xem mô tả phần Phương pháp thử) Sáp Senlac tẩy màu : không 5,5% ; Senlac tẩy màu khơng có sáp: khơng q 0,2% (xem mơ tả phần Phương pháp thử) Chì Không 2,0 mg/kg Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Phản ứng màu Cho vài giọt dung dịch chứa g amoni molybdat ml acid sulfuric vào 50 mg mẫu Màu xanh hình thành chuyển sang màu hoa cà dung dịch mẫu trung hoà dung dịch amoni hydroxyd 6N 10 QCVN - 20: 2011/BYT 280 - 289 0,15 290 - 299 0,12 300 - 359 0,08 360 - 400 0,02 Phƣơng pháp thử Độ tinh khiết Độ nhớt 1000C (ASTM D 445 chấp nhận với cho phép từ Sách thường niên Tiêu chuẩn ASTM quyền Hiệp hội Mỹ Thử nghiệm Vật liệu, 100 Harbor Drive, West Conshohocken, PA 19.428 tiêu chuẩn ASTM hồn chỉnh mua trực tiếp từ ASTM, điện thoại 610-832 9.585, fax: 610-832-9555, e-mail: service@astm.org, website: http://www.astm.org) Sử dụng nhớt kế mao quản thuỷ tinh, hiệu chỉnh có khả đo độ nhớt động học với độ lặp lại có 1/20 trường hợp vượt 0,35% Ngâm nhớt kế chậu chất lỏng nóng nhiệt độ ±0,10C thích hợp mẫu thử, đảm bảo suốt trình đo, lúc mẫu thử nhớt kế bề mặt chất lỏng chậu 20 mm Cho mẫu vào nhớt kế theo cách dẫn thiết kế thiết bị Giữ mẫu chậu khoảng 30 phút Điều chỉnh thể tích mẫu đến vạch qui định theo thiết kế nhớt kế Dùng áp lực điều chỉnh mức mẫu đến vị trí cách phía vạch mức thứ khoảng mm nhánh mao quản thiết bị Cho mẫu chảy tự do, đo, thời gian cần thiết cho chất lỏng chuyển từ vạch định mức thứ đến vạch định mức thứ hai Thời gian đo tính giây với sai lệch ±0,2 giây Nếu thời gian nhỏ 200 giây, chọn nhớt kế có mao quản có đường kính nhỏ lặp lại cách làm Đo thời gian chảy lần hai Nếu hai lần đo có sai số khoảng 0,2%, độ nhớt động học tính giá trị trung bình Nếu hai lần đo khơng tương đồng lặp lại cách xác định sau làm làm khô cẩn thận nhớt kế Độ nhớt 1000C (mm2/giây) = C x t Trong đó: C: Hệ số hiệu chỉnh nhớt kế (mm2/giây) t: thời gian chảy (giây) Số carbon điểm chưng cất 5% “Số carbon” số nguyên tử carbon phân tử Xác định số carbon có mẫu sắc ký khí Dưới số điều kiện hoạt động điển hình để xác định đến số carbon đến 45 Chiều dài cột (m) 25 30 15 15 QCVN - 20: 2011/BYT Đường (mm) kính 0,32 0,53 0,25 DB-1 methyl silicon RTX-1 methyl silicon DB-5 5% phenyl methyl silicon Độ dày lớp phim mỏng (μm) 0,25 0,25 0,25 Khí mang heli heli heli Tốc độ dòng (ml/phút) 1,56 5,0 2,3 Tốc độ tuyến (cm/giây) 33 35 60 800C 800C 800C 10 3800C 3400C 3500C nguội cột nguội cột nguội cột Detector FID FID FID Nhiệt độ 3800C 3400C 3750C 1,0 1,0 1,0 Pha tĩnh Chương trình nhiệt độ Nhiệt độ ban đầu Tốc độ (0/phút) nâng nhiệt Nhiệt độ cuối Kỹ thuật bơm Dung tích mẫu (μl) Lưu ý: Bằng cách tối ưu hoá chiều dài cột tách và/hoặc nhiệt độ cột, loại sáp với số carbon cao 45 phân tích Các chuẩn để hiệu chuẩn định tính: Các mẫu chuẩn parrafin thông thường bao phủ khoảng số carbon mẫu có độ tinh khiết lớn 95% Chuẩn tuyến tính 16 QCVN - 20: 2011/BYT Chuẩn bị hỗn hợp biết khối lượng n – parafin có chuỗi carbon C16 – C65, hồ tan hỗn hợp cyclohexan Sử dụng lượng tương đương loại parafin cân xác đến 1% Các dung dịch có nồng độ 0,01 % (tính theo khối lượng) sử dụng Khơng thiết phải bao gồm n-parafin hỗn hợp miễn chứa C16, C44, C60 xác định số lượng carbon cao liên quan) n - parafin thứ tư Chất chuẩn phải đậy chặt để ngăn ngừa thất dung mơi Dung dịch nội chuẩn: Chuẩn bị dung dịch gốc chứa 0,5% (theo khối lượng w/w) n – C16 n – hexan ( độ tinh khiết tối thiểu 98%) cách cân xác 0,4 g n – C16 cho vào bình định mức dung tích 100 ml Thêm 100 ml cyclohexan cân lại Ghi khối lượng n – C16 ( W ISTP ) tới khoảng 0,001 g khối lượng dung dịch gốc ( W S ) tới khoảng 0,1 g Chuẩn bị dung dịch nội chuẩn loãng cách pha phần dung dịch gốc với 99 phần cyclohexan Tính nồng độ dung dịch nội chuẩn theo công thức sau: Trong đó: CISTP: Nồng độ n – C16 dung dịch nội chuẩn loãng (% theo khối lượng) WS: Khối lượng dung dịch gốc (g) Kiểm tra mẫu trắng: Bơm μl dung mơi Khơng có pick phát khoảng thời gian lưu mà sáp rửa giải Độ phân giải cột: Bơm μl dung dịch 0,05% n – C20 n – C24 cyclohexan Độ phân giải cột R không nhỏ 30 tính tốn theo cơng thức sau: Trong đó: d: Khoảng cách cực đại pic n – C20 n – C24 (mm) W1: Pic nửa chiều cao n – C20 (mm) W2: Pic nửa chiều cao n – C24 (mm) Độ tuyến tính: Phân tích chuẩn tuyến tính Các hệ số đáp ứng khối lượng tính tốn liên quan đến hexadecan phải khoảng 0,90 – 1,10 Độ lặp lại thời gian lưu: Phân tích chuẩn tuyến tính lần Các thời gian lưu 17 QCVN - 20: 2011/BYT phân tích lần phải khơng chênh lệch 0,1 phút Hiệu chuẩn xác định n – parafin: Xác định thời gian lưu n – parafin chuỗi C16 – C44 ( C60 xác định số carbon cao liên quan ) cách bơm lượng nhỏ parafin riêng biệt hỗn hợp biết trước Lấy mẫu: Gia nhiệt mẫu nhiệt độ cao 100C so với nhiệt độ sáp nấu chảy hoàn toàn Trộn cách khuấy sử dụng ống nhỏ giọt sạch, nhỏ vài giọt lên mặt nhôm sạch, để đông đặc bẻ thành miếng Lá nhơm thường có chứa sẵn màng mỏng dầu Trước sử dụng, dầu phải loại bỏ cách rửa nhôm dung môi hexan cồn khống Cách tiến hành: Cân xác 0,01 g mẫu ( Wmẫu ) thu theo mô tả phần lấy mẫu, cho vào lọ thuỷ tinh có dung tích 15 ml Thêm khoảng 12 ml dung dịch nội chuẩn loãng, đậy nắp lọ cân xác khối lượng dung dịch nội chuẩn pha loãng thêm vào ( W INSTD ) Lắc lọ sáp hoà tan hoàn toàn, sử dụng cách gia nhiệt nhẹ cần thiết Bơm 0,5 – 1,0 μl dung dịch mẫu Ghi lại sắc ký đồ lưu giữ tín hiệu detector Pic từ dung dịch nội chuẩn phải phân giải hoàn toàn khỏi diện tích mẫu sáp Dựa vào thời gian lưu thu phần Hiệu chuẩn xác định n – parafin, định tính pic parafin Sử dụng vạch thẳng đứng lên đường nằm ngang, lấy tích phân tín hiệu detector Tổng cộng diện tích tất pic số carbon Theo quy ước, pic gán số carbon n pic rửa giải thung lũng pic parafin (Cn-1) thung lũng tương ứng tiếp sau pic parafin (Cn) Hình 1: Tổng số carbon (sắc ký đồ với đường nằm ngang) Tính kết quả: 18 QCVN - 20: 2011/BYT Đối với số carbon, hàm lượng tính theo % khối lượng tính theo cơng thức sau: Ai WISTD Ci = - x RRFi x x CISTD AISTD Wmẫu Trong đó: Ci: Hàm lượng hydrocarbon có số carbon i (% theo khối lượng) Ai: Tổng diện tích hydrocarbon với số carbon i AISTD: Diện tích pick nội chuẩn n – C16 RRFi: Hệ số đáp ứng liên quan đến n – C16 WINSTD: Khối lượng dung dịch nội chuẩn loãng Wmẫu: Khối lượng mẫu sáp CISTD: Nồng độ n – C16 dung dịch nội chuẩn loãng Hàm lượng tổng hợp thành phần có số carbon nhỏ 25 khơng 5% Khối lượng phân tử trung bình Sử dụng phân bố số carbon thu phần thử “Số carbon điểm chưng cất 5%” tính khối lượng phân tử trung bình theo cơng thức sau: Trong đó: i: Số carbon Ci: Hàm lượng thành phần có số carbon i (%) 19 QCVN - 20: 2011/BYT Cặn sau nung Cân xác g mẫu cho vào đĩa sứ platin biết khối lượng gia nhiệt lửa Mẫu bay mà khơng mùi hăng Nung nhiệt độ khơng q sắc đỏ tối khơng cịn carbon Làm nguội bình hút ẩm cân Màu sắc Làm tan chảy khoảng 10 g mẫu chậu nước cho ml chất lỏng vào ống thử vi sinh thuỷ tinh sạch, kích thước 16 x 150 mm: chất lỏng làm ấm, tan chảy không sẫm màu dung dịch tạo cách trộn hỗn hợp gồm 3,8 ml sắt (III) clorid TS (FNP 5) 1,2 ml cobal clorid TS (FNP 5) ống thử tương tự, so sánh hai ống phản chiếu ánh sáng tương phản với màu trắng, ống thử giữ trực tiếp tương phản với góc mà khơng có huỳnh quang Lưu huỳnh (ASTM D 2622 Xem phép thử Độ nhớt 1000C Bản quyền cho phép) Xác định phép đo phổ tia X sử dụng điều kiện sau: Dụng cụ, thiết bị: - Máy quang phổ tia X trang bị để phát tia mềm dải 537 Å - Đường truyền quang heli - Thiết bị phân tích chiều cao xung thiết bị phân biệt lượng khác - Detector thiết kế để phát tia X bước sóng dài Tinh thể phân tích phù hợp với độ tán sắc tia X Kα lưu huỳnh khoảng góc thiết bị quang phổ sử dụng Pentaerythritol germani phổ biến chất phản chiếu EDDT, ADP thạch anh dùng Ống tia X phát xạ Kα lưu huỳnh Ống tia X với mục tiêu vonfram, platin crom Độ nhạy chuẩn: Các chất petroleum lỏng chứa lưu huỳnh nồng độ xấp xỉ khoảng đồ thị hiệu chuẩn sử dụng cho phép thử Chuẩn hiệu chỉnh: Chuẩn bị chuẩn hiệu chỉnh cách pha cẩn thận lượng din-butyl sulfid (chuẩn tinh khiết cao với phân tích chứng nhận, sản xuất đặc biệt chất hiệu chỉnh cho phương pháp này, ln có sẵn Cơng ty Philips Petroleum, Bartlesville, OK, Mỹ) với dầu trắng (chứa nhỏ mg/kg) Các nồng độ chuẩn xác chuẩn bị gồm 0,1; 0,25; 0,5 1,0% (theo trọng lượng) Đường chuẩn: Đo xạ lưu huỳnh phát thực từ chuẩn hiệu chỉnh Vẽ đồ thị cường độ, dạng số đếm thực giây, với nồng độ lưu huỳnh 20 QCVN - 20: 2011/BYT Để trì giá trị đường chuẩn với thay đổi nhỏ độ nhạy thiết bị, đo độ nhạy chuẩn khoảng thời gian thường xuyên ngày chạy Thiết lập tỷ lệ tính chuẩn cách đo độ nhạy chúng khoảng thời gian thường xun q trình chuẩn bị đường hiệu chuẩn Tính hệ số hiệu chỉnh thay đổi độ nhạy thiết bị hàng ngày công thức sau: Trong đó: A: Số đếm độ nhạy chuẩn xác định thời điểm hiệu chỉnh B: Số đếm độ nhạy chuẩn xác định thời gian phân tích Cách tiến hành: Để mẫu cóng đo thích hợp Mặc dù xạ lưu huỳnh xuyên qua khoảng nhỏ mẫu, phân tán từ cốc mẫu mẫu khác đến mức mà lượng cụ thể lượng tối thiểu mẫu phải sử dụng Đặt mẫu chùm tia X cho phép khí quang học tia X để đến trạng thái cân Xác định cường độ xạ Kα lưu huỳnh 5,373 Å cách đo tốc độ đếm chỗ góc xác đặt cho bước sóng Đo tốc độ đếm 5,190 Å Tính kết quả: Hàm lượng lưu huỳnh mẫu tính theo cơng thức sau: Trong đó: R: Tốc độ đếm thực hiệu chỉnh CK: Tổng số đếm thu 5,373 Å mẫu S1: Thời gian cần thiết để thu số CK (giây) CB: Tổng số đếm thu 5,190 Å S2: Thời gian cần thiết để thu số CB (giây) F’: Tốc độ đếm 5,373 Å / tốc độ đếm 5,190 Å mẫu không chứa lưu huỳnh F: Hệ số hiệu chỉnh thay đổi độ nhạy thiết bị hàng ngày Sử dụng tốc độ đếm thực hiệu chỉnh, đọc nồng độ lưu huỳnh từ đường chuẩn 21 QCVN - 20: 2011/BYT Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 - Xác định kỹ thuật quang phổhấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ Hydrocarbon đa vòng Hướng dẫn chung: Do độ nhạy phép thử, khả sai số phát sinh từ nhiễm thơm bẩn lớn Điều quan trọng tất dụng cụ thuỷ tinh phải cọ rửa nghiêm ngặt để loại bỏ tất chất hữu dầu, mỡ, dư lượng chất tẩy rửa, Kiểm tra tất dụng cụ thủy tinh, bao gồm nút van, ánh sáng tử ngoại để phát nhiễm huỳnh quang cịn sót lại Như biện pháp đề phòng, khuyến nghị thực hành rửa tất dụng cụ thủy tinh với isooctane tinh khiết trước sử dụng Không sử dụng mỡ bôi trơn khớp nối Hết sức cẩn thận để tránh ô nhiễm mẫu sáp việc xử lý để đảm bảo khơng có chất không liên quan phát sinh từ bao bì khơng thích hợp điều cần thiết Bởi số hydrocarbon đa vịng tìm thử nghiệm dễ bị oxy hóa ánh sáng, tồn quy trình phải thực ánh sáng dịu Thiết bị, dụng cụ: - Phễu chiết: dung tích 250 ml, 500 ml, 1.000 ml tốt loại có dung tích 2.000 ml, có khố van polymer tetrafluoroethylen - Bình chứa: dung tích 500 ml, trang bị khớp nối thon chuẩn 24/40 nối đáy bình khớp nối cầu đỉnh bình để nối với nguồn cung cấp nitrogen Khớp nối thích hợp phải trang bị móc thuỷ tinh - Cột sắc ký: dài 180 mm, đường kính 15,7 ±0,1 mm, trang bị với đĩa thuỷ tinh xốp thơ, khố van polymer tetrafluoroethylen khớp nối thon chuẩn 24/40 có lỗ để lắp vị trí cuối đối diện (chiều dài tồn cột với khớp nối có lỗ để lắp 235 mm) - Đĩa: làm polymer tetrafluoroethylen đường kính inch, dày 3/16 inch có lỗ để vừa khít thân cột sắc ký - Áo gia nhiệt: hình nón, dùng cho phễu chiết dung tích 500 ml (Được sử dụng với kiểm soát biến nhiệt) - Bình hút: Bình lọc dung tích 250 ml 500 ml - Ống sinh hàn: khớp nối 24/40, nối với ống khơ, chiều dài khơng bắt buộc - Bình (khơng bắt buộc): Tất bình thuỷ tinh dung tích 250 ml 500 ml trang bị với nắp đậy thon chuẩn có ống dẫn vào cho phép nitrogen qua ngang bề mặt chất lỏng cô - Dụng cụ chưng cất chân không: tất thuỷ tinh (để làm dimethyl sulfoxid); bình cất dung tích lít có áo gia 22 QCVN - 20: 2011/BYT nhiệt; sinh hàn Vigreaux bao chân khơng (hoặc tương đương) có chiều dài khoảng 45 cm đầu chưng cất nối với ống sinh hàn chia nhánh lạnh Dùng polymer tetrafluoroethylen bọc khớp nối thuỷ tinh để ngăn đóng băng Khơng sử dụng mỡ khoá van khớp nối - Các cóng đo quang phổ: cóng đo làm từ thạch anh nấu chảy, chiều dài đường truyền quang 5,0 ±0,005 cm; loại cóng đo khác để kiểm tra hiệu suất thiết bị quang phổ, có chiều dài đường truyền quang học 1,000 ± 0,005 cm Với nước cất cóng đo, xác định xem có chênh lệch độ hấp thụ hay khơng - Thiết bị quang phổ: Dải quang phổ 250 – 400 nm với chiều rộng khe phổ nm nhỏ hơn, theo điều kiện hoạt động thiết bị để đo độ hấp thụ, thiết bị quang phổ phải đáp ứng yêu cầu thực sau đây: Độ lặp lại hấp thụ : ± 0,01 độ hấp thụ 0,4 Độ xác hấp thụ : ± 0,05 độ hấp thụ 0,4 Độ lặp lại bước sóng: ± 0,2 nm Độ xác bước sóng: ± 1,0 nm - Bình khí nitrogen: nitrogen tinh khiết bình khí nén trang bị điều áp van để kiểm sốt dịng khí p.s.i.g Ngun vật liệu hố chất: - Dung mơi hữu cơ: Tất dung mơi sử dụng qui trình phải phù hợp với đặc tính kỹ thuật phép thử mơ tả phần đặc tính kỹ thuật Isooctan, benzen, aceton methyl alcol rõ danh sách phải qua phép thử sau: Cho lượng dung môi xác định vào bình Erlenmeyer dung tích 250 ml thêm vào ml n – hexadecan tinh khiết cô chậu nước dịng nitrogen (áo nhơm rời bao quanh bình làm tăng tốc độ cơ) Ngừng cịn lại khơng q ml cặn (Cho phần 10 ml isooctan tinh khiết vào cặn từ benzen, cô lại lặp lại lần để đảm bảo loại hoàn toàn benzen) Cách khác, thời gian giảm cách sử dụng bình tùy chọn Trong trường hợp dung môi n – hexandecan cho vào bình đặt nồi cách thủy, lắp hệ thống ống dòng nitrogen cho vào qua đường ống vào đường ống nối với bẫy dung môi đường chân không cách để ngăn dịng ngưng quay ngược lại vào bình Hồ tan ml cặn hexadecan isooctan định mức tới vạch Đo độ hấp thụ cóng đo có chiều dài đường truyền cm so với isooctan làm đối chứng Độ hấp thụ dung dịch cặn dung môi (trừ methyl alcol) không vượt 0,01/cm chiều dài đường truyền khoảng bước sóng 280 nm 400 nm Đối với methyl alcol, độ hấp thụ phải - Isooctan (2,2,4 – trimethylpentan): Dùng 180 ml cho phép thử miêu tả đoạn trước Làm cần 23 QCVN - 20: 2011/BYT cách cho qua cột chứa silica gel hoạt hoá (loại 12, Cơng ty hố chất Davison, Baltimore, Maryland, tương đương) có chiều dài khoảng 90 cm đường kính – cm - Benzen tinh khiết: Dùng 150 ml cho phép thử Làm cần chưng cất cách khác - Aceton tinh khiết: Dùng 200 ml cho phép thử Làm cần chưng cất - Hỗn hợp rửa giải: + Benzen 10% isooctan: Dùng pipet lấy 50 ml benzen cho vào bình định mức có nắp đậy thuỷ tinh dung tích 500 ml, điều chỉnh đến thể tích 500 ml isooctan lắc + Benzen 20% isooctan: Dùng pipet lấy 50 ml benzen cho vào bình định mức có nắp đậy thuỷ tinh dung tích 250 ml, điều chỉnh đến thể tích 250 ml isooctan lắc + Hỗn hợp aceton – benzen – nước: Cho 20 ml nước vào 380 ml aceton 200 ml benzen, trộn - n – hexadecan, 99% khơng có olefin: Pha ml n – hexadecan đến thể tích 25 ml isooctan đo độ hấp thụ cóng đo cm so với isooctan làm đối chứng 280 – 400 nm Độ hấp thụ cm đường truyền không vượt Làm cần lọc thấm qua silica gel hoạt hoá chưng cất - Methyl alcol tinh khiết: Dùng 10,0 ml methyl alcol Làm cần chưng cất - Dimethyl sulfoxid: tinh khiết, trong, màu trắng nước, nhiệt độ nóng chảy thấp 180C Pha 120 ml dimethyl sulfoxid với 240 ml nước cất phễu chiết dung tích 500 ml, lắc để nguội -10 phút Thêm 40 ml isooctan vào dung dịch chiết cách lắc phễu mạnh phút Hút lớp nước phía vào phễu chiết thứ hai có dung tích 500 ml lặp lại q trình tách với 40 ml isooctan Hút loại bỏ lớp tan nước Rửa phần chiết 40 ml ba lần phần 50 ml nước cất Thời gian lắc cho lần rửa phút Loại bỏ lớp tan nước Lọc phần chiết qua Na2SO4 khan rửa isooctan (xem Na2SO4 khan phần “Nguyên vật liệu hoá chất” chuẩn bị phễu lọc) vào bình Erlenmeyer bình tùy chọn Rửa phễu chiết thứ phần chiết 40 ml isoocatan thứ hai lọc qua Na2SO4 vào bình Sau rửa phễu chiết thứ hai thứ 10 ml isooctan, cho dung môi qua Na2SO4 vào bình Thêm ml n – hexadecan isooctan cách thủy có đuổi khí nitrogen Ngừng khơng q ml cặn cịn lại Cho 10 ml isooctan vào cặn lại cô tới ml hexadecan Lặp lại, cho 10 ml isooctan vào cặn cô tới 1ml hexadecan để đảm bảo loại bỏ hoàn toàn tất chất bay Hoà tan ml hexadecan isooctan vừa đủ 25 ml Đo độ hấp thụ cóng đo có chiều dài đường truyền cm so với isooctan đối chứng Độ hấp thụ dung dịch không 0,02/cm chiều dài đường truyền dải 280 – 400 nm ( Chú ý: Việc khó đáp 24 QCVN - 20: 2011/BYT ứng đặc tính hấp thụ tạp chất hữu nước cất Sự lặp lại phép thử khơng có dimethyl sulfoxid phát chúng Nếu cần thiết để đáp ứng đặc điểm kỹ thuật, làm nước chưng cất lại, cho chảy qua loại nhựa trao đổi ion, cách khác) Làm cần thiết cách sau: Cho ml dung dịch H3PO4 50 g Norit A (carbon khử màu, kiềm) tương đương vào 1,5 lít dimethyl sulfoxid bình có nắp đậy thuỷ tinh dung tích lít Đậy nắp bình dùng máy khuấy từ (thanh khuấy bọc polymer tetrafluoroethylen) khuấy dung môi 15 phút Lọc dimethyl sulfoxid qua bốn lớp giấy có rãnh (18,5 cm) (Schleicher & Schuell số 597 tương đương) Nếu dịch lọc ban đầu chứa bột carbon, lọc lại theo giống cách dịch lọc thu Bảo quản sulfoxid tránh khơng khí ẩm suốt q trình cách phủ lên dung mơi phễu bình thu lớp isooctan Chuyển phần lọc vào phễu chiết dung tích lít hút dimethyl sulfoxid cho vào bình dung tích lít thiết bị chưng cất chân khơng cất áp suất khoảng mmHg thấp Loại bỏ phần phân đoạn 200 ml đầu dung dịch chưng cất thay bình hứng dịch chưng cất bình Tiếp tục chưng cất thu khoảng lít sulfoxid Khi hồn tất trình chưng cất, chất phản ứng cần phải bảo quản chai có nắp đậy thuỷ tinh dễ hút ẩm phản ứng với số dụng cụ chứa kim loại có mặt khơng khí - H3PO4 tinh khiết 85% - Natri borohydrid 98% - MgO ( Sea Sorb 43, Công ty thiết bị thực phẩm, chi nhánh Westvaco, phân phối hãng hoá chất, tương đương): Cho 100 g MgO vào cốc lớn, thêm vào 700 ml nước cất tạo thành chất sền sệt loãng, gia nhiệt cách thủy 30 phút khuấy Lúc đầu khuấy đảm bảo tất cấu tử MgO thấm nước Sử dụng phễu Buchner giấy lọc có đường kính phù hợp, lọc hút Tiếp tục lọc hút nước khơng cịn chảy nhỏ giọt từ phễu Chuyển chất hấp thụ sang máng thuỷ tinh lót nhơm (đã loại hết dầu chống dính) Làm vỡ magnesi thìa trải chất hấp thụ nhôm lớp dày – cm Sấy 160 ±10C 24 Giã nhỏ magnesi cối giã chày Rây chất hấp thụ giã qua kích thước rây 60 – 180 mesh Dùng magnesi lại rây 180 mesh - Celite 545 (Công ty Johns – Manville, đất tảo cát, tương đương) 25 QCVN - 20: 2011/BYT - Hỗn hợp MgO – Celite 545 (2 + 1) theo khối lượng: Cho phần MgO (60 – 180 mesh) phần Celite 545 theo khối lượng vào bình thuỷ tinh có nắp đậy đủ lớn để trộn cho phù hợp Lắc mạnh 10 phút Chuyển hỗn hợp sang máng thuỷ tinh lót nhơm (đã loại hết dầu chống dính) trải hỗn hợp nhôm lớp dày – cm Lại gia nhiệt hỗn hợp 160 ±10C bảo quản bình đậy chặt - Na2SO4 khan, tinh khiết, tốt dùng dạng hạt: Đối với bình chứa Na2SO4 tinh khiết sử dụng, thiết lập sau, rửa trước Na2SO4 cần thiết để cung cấp lọc yêu cầu phương pháp: Cho khoảng 35 g Na2SO4 khan vào phễu thuỷ xốp thơ có dung tích 30 ml phễu lọc dung tích 65 ml có chốt thuỷ tinh; rửa phần 15 ml dung môi định phần rửa 15 ml có độ hấp thụ 0/cm chiều dài đường truyền bước sóng 280 – 400 nm đo mô tả phần “Dung môi hữu cơ” Thường dùng phần dung môi rửa đủ Cách tiến hành: Trước thực phân tích mẫu, đo độ hấp thụ cóng đo có chiều dài đường truyền cm dải bước sóng 250 – 400 nm mẫu trắng cách thực cách tiến hành, khơng có mẫu sáp, nhiệt độ phòng, ghi phổ sau giai đoạn chiết sau hồn thành cách tiến hành mơ tả Độ hấp thụ cm chiều dài đường truyền sau giai đoạn chiết không 0,04 khoảng bước sóng 250 – 400 nm; Độ hấp thụ cm chiều dài đường truyền sau hoàn thành cách tiến hành khơng q 0,07 khoảng bước sóng 250 – 299 nm, không vượt 0,045 khoảng bước sóng 300 – 400 nm Nếu hai phổ xuất pic benzen đặc trưng vùng 250 – 260 nm, loại bỏ benzen cách tiến hành phần “Dung môi hữu cơ” ghi lại độ hấp thụ Cho 300 ml dimethyl sulfoxid vào phễu chiết dung tích lít thêm vào 75 ml H3PO4 Lắc thành phần phễu để yên 10 phút (Phản ứng sulfoxid acid toả nhiệt Xả áp sau lắc, sau đóng nắp phễu lại) Thêm vào 150 ml isooctan lắc dung môi Hút lớp riêng biệt giữ bình thuỷ tinh có nắp đậy Cho kg mẫu đại diện sáp, lượng khơng có đủ cho tồn mẫu vào cốc có dung tích gấp khoảng ba lần thể tích mẫu gia nhiệt cách thủy sôi, khuấy sáp nóng chảy hồn tồn đồng Cân bốn phần 25 ± 0,2 g sáp nóng chảy cho vào cốc dung tích 100 ml riêng biệt Dự trữ ba bốn phần để phân tích lặp sau cần Đổ phần mẫu biết khối lượng sau nóng chảy lại cách thủy sơi vào phễu chiết dung tích 500 ml có chứa 100 ml hỗn hợp sulfoxid H3PO4 cân trước, gia nhiệt áo nhiệt nhiệt độ vừa đủ cao để làm nóng chảy sáp (Chú ý: Trong q trình gia nhiệt trước hỗn hợp sulfoxid acid, định kỳ mở nắp đậy phễu chiết để giảm áp suất) 26 QCVN - 20: 2011/BYT Nhanh chóng hồn thành việc chuyển mẫu vào phễu áo gia nhiệt với phần isooctan cân trước, làm ấm cốc cần thiết, sử dụng tổng thể tích 50 ml dung môi Nếu sáp tách khỏi dung dịch tồn cách làm này, để phễu chiết đóng nắp áo gia nhiệt sáp tan lại hoàn toàn (Định kỳ mở nắp đậy phễu chiết để giảm áp suất) Khi sáp chảy tan thành dung dịch, lấy phễu chiết khỏi áo gia nhiệt lắc mạnh phút Chuẩn bị sẵn phễu chiết dung tích 250 ml với phễu chứa 30 ml dung môi isooctan cân trước Sau tách pha lỏng, để nguội phần chủ yếu dung dịch sáp – isooctan bắt đầu hình thành kết tủa Lắc xốy nhẹ phễu chiết kết tủa lúc đầu xuất thành phễu chiết nhằm làm tăng nhanh trình Lấy cẩn thận lớp phía dưới, lọc chậm qua lớp thuỷ tinh mỏng vừa đặt lỏng phễu lọc vào phễu chiết thứ dung tích 250 ml, rửa phần 30 ml isooctan chứa phễu chiết dung tích 250 ml cịn lại Thời gian lắc lần rửa phút Lặp lại trình chiết cách thêm hai phần hỗn hợp sulfoxid acid, thay phễu áo gia nhiệt sau lần chiết để đảm bảo sáp tan dung dịch rửa phần chiết thu ba phần isooctan giống Tập trung phần chiết thu (tổng thể tích 300 ml) cho vào phễu chiết (tốt dùng loại phễu có dung tích lít) có chứa 480 ml nước cất, lắc để nguội vài phút sau phần chiết thu cuối thêm vào Thêm 80 ml isooctan vào dung dịch chiết cách lắc mạnh phễu phút Rút lớp tan nước phía phễu chiết thứ hai (tốt dùng loại lít) lặp lại trình chiết 80 ml isooctan Rút loại bỏ lớp tan nước Rửa phần chiết thu 80 ml ba lần với phần 100 ml nước cất Thời gian lắc cho lần rửa phút Loại bỏ lớp tan nước Lọc phần chiết thứ qua Na2SO4 khan rửa trước isooctan (xem Na2SO4 phần “Nguyên vật liệu hoá chất” chuẩn bị phễu lọc) vào bình Erlenmeyer (hoặc bình tùy chọn) Rửa phễu chiết thứ phần chiết 80 ml isooctan thứ hai cho qua Na2SO4 Sau rửa phễu chiết thứ hai thứ phần 20 ml isooctan cho dung môi qua Na2SO4 vào bình Thêm ml n – hexadecan isooctan cách thủy có thổi khí nitrogen Ngừng cịn lại khơng q ml cặn Thêm 10 ml isooctan vào phần cặn, cô lại tới ml hexadecan lặp lại trình lần Chuyển tồn lượng phần cặn isooctan vào bình định mức dung tích 25 ml, định mức tới thể tích 25 ml lắc Đo độ hấp thụ dung dịch cóng đo có chiều dài đường truyền cm so với isooctan đối chứng dải bước sóng 280 – 400 nm (cẩn thận khơng để dung dịch trình đổ mẫu đầy cóng đo) 27 QCVN - 20: 2011/BYT Hiệu chỉnh giá trị độ hấp thụ độ hấp thụ có nguồn gốc từ hố chất xác định tiến hành cách làm khơng có mẫu sáp Nếu độ hấp thụ không vượt giới hạn mơ tả Các đặc tính kỹ thuật, sáp đáp ứng đặc tính kỹ thuật hấp thụ tia cực tím Nếu độ hấp thụ hiệu chỉnh cm chiều dài đường truyền vượt giới hạn quy định Các đặc tính kỹ thuật, tiến hành sau: Chuyển toàn lượng dung dịch isooctan vào bình lắp khớp nối 24/40 dung tích 125 ml isooctan chậu cách thủy dịng nitrogen tới thể tích ml hexadecan Thêm 10 ml methyl alcol khoảng 0,3 g natri borohydrid (Giảm thiểu tiếp xúc borohydrid với bầu khí Một dụng cụ nhúng đo sử dụng) Ngay lập tức, ráp bình với sinh hàn làm nguội nước gá lắp khớp nối 24/40 ống làm khô dẫn vào bình, khuấy borohydrid tan, để yên 30 phút nhiệt độ phòng, lắc xoáy Tại điểm kết thúc giai đoạn này, tháo bình methyl alcol cách thủy có thổi khí nitrogen natri borohydrid bắt đầu tách khỏi dung dịch Sau thêm 10 ml isooctan tới thể tích cịn lại khoảng – ml Lặp lại, cho 10 ml isooctan đến thể tích khoảng ml Lắc xốy bình lặp lại nhiều lần để đảm bảo đủ rửa cặn natri borohydrid Lắp đĩa polymer tetrafluoroethylen lên phần thân cột sắc ký, sau để cột sắc ký với đĩa bình hút hút chân khơng (áp suất khoảng 135 mmHg) Cân 14 g hỗn hợp magnesi oxyd Celite 545 (tỷ lệ 2/1) đổ hỗn hợp chất hấp phụ vào cột sắc ký với lớp dày khoảng cm Sau thêm vào lớp, san phần chất hấp phụ kính phẳng pittơng kim loại cách nhấn xuống thật chất hấp thụ nhồi vào Nới lỏng vài ml lớp hấp phụ kim loại trước bổ sung lớp Tiếp tục nhồi theo cách tất 14 g chất hấp phụ cho vào cột San phần đầu chất hấp phụ kính phẳng pittơng kim loại cách nhấn xuống thật để tạo độ sâu lớp chất hấp phụ khoảng 12,5 cm Tắt chân khơng khố bình hút Nối bình nhận dung tích 500 ml vào bên cột sắc ký làm ẩm cột trước cách cho 100 ml isooctan qua cột Điều chỉnh áp suất khí nitrogen để tốc độ hạ xuống isooctan cột – ml/phút Ngưng áp lực trước isooctan cuối đạt đến mức chất hấp phụ (Chú ý: Không cho phép mức chất lỏng rút mức hấp phụ nào) Tháo bình chứa gạn ml dung dịch isooctan đậm đặc vào cột lại sử dụng áp lực nhẹ đẩy chất lỏng rút xuống mức chất hấp phụ Nhanh chóng hồn thành việc chuyển tương tự với hai phần ml isooctan, lắc xốy bình nhiều lần lần để đảm bảo đủ rửa cặn Ngay trước rửa ml cuối đạt đến đỉnh chất hấp phụ, thêm 100 ml isooctan vào bình nhận tiếp tục thấm qua với tốc độ – ml/phút Ngay trước isooctan cuối đạt đến mức độ hấp phụ, 28 QCVN - 20: 2011/BYT thêm 100 ml dung dịch benzen 10% isooctan vào bình nhận tiếp tục thấm qua với tốc độ đề cập Ngay trước hỗn hợp dung môi đạt đến mức chất hấp phụ, thêm 25 ml dung dịch benzen 20% isooctan vào bình nhận tiếp tục cho thấm qua với tốc độ - ml/phút tất hỗn hợp dung môi loại bỏ khỏi cột Loại bỏ tất dung môi rửa giải thu đến thời điểm Thêm 300 ml hỗn hợp aceton – benzen – nước vào bình nhận cho thấm qua cột để rửa giải hợp chất đa vòng Thu thập phần rửa giải vào phễu chiết dung tích l Để cột chảy hầu hết hỗn hợp dung môi lấy Rửa phần dịch rửa giải ba lần với phần 300 ml nước cất, lắc cho lần rửa (Việc bổ sung lượng nhỏ NaCl tạo điều kiện cho trình phân tách) Loại bỏ lớp dung dịch nước sau lần rửa Sau tách lần cuối cùng, lọc benzen dư qua Na2SO4 khan rửa trước benzen (xem Na2SO4 phần “Nguyên vật liệu hoá chất” chuẩn bị phễu lọc) vào trọng bình Erlenmeyer dung tích 250 ml (hoặc vào bình tùy chọn) Rửa phễu chiết lần nữa, lần với 20 ml benzen lọc qua Na2SO4 Thêm ml n – hexadecan loại hồn tồn benzen cách dịng nitrogen, sử dụng cách tiến hành đặc biệt để loại benzen mô tả phần trước mục “Dung môi hữu cơ” Chuyển tồn lượng cặn với isooctan vào bình định mức dung tích 25 ml điều chỉnh đến thể tích 25 ml Đo độ hấp thụ dung dịch cóng đo có chiều dài đường truyền cm so với isooctan đối chứng khoảng bước sóng 250 – 400 nm Hiệu chỉnh với độ hấp thụ xuất phát từ hoá chất xác định cách thực khơng có mẫu sáp Nếu quang phổ cho thấy pic benzen đặc trưng vùng 250 - 260 nm, cô dung dịch để loại bỏ benzen theo cách tiến hành phần "Dung mơi hữu cơ" Hịa tan cặn, chuyển tồn lượng điều chỉnh thể tích đến thể tích 25 ml bình định mức isooctan Ghi độ hấp thụ lần Nếu độ hấp thụ hiệu chỉnh không vượt giới hạn mô tả phần Các đặc tính kỹ thuật, tiêu sáp đáp ứng kỹ thuật hấp thụ tia cực tím Phụ lục Phổ hồng ngoại Sáp vi tinh thể 29