Thông tin tài liệu
Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 5(1): 97-106, 2007 NGHIÊN CỨU DAC DIEM SINH HOC VA KHA NANG SINH ENZYME CUA HAI CHUNG NAM MEN SINH BAO TU BAN THUỘC CHI BULLERA NGOAI BAO Dao Thi Luong', Pham Vin Ty’ !Viện Vì sinh vật Cơng nghệ Sinh học Dai ioc Quốc gia, Ha Nội Tho sa, ?Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội TĨM TẮT Ba mươi chín chủng nấm men sinh bào tử bắn phân lập từ Vườn Quốc gia Cúc Phương thuộc Bullera nghiên cứu phân loại sơ dựa vào hình thái bào tử, hình thái khuẩn lạc, thành phần ubiquinone có mặt xyloza té bao Ca 39 chủng có khả phân giải nhất3 chất: tỉnh bột, casein, CMC, kitin, lipid Chting déu khéng sinh chất kháng sinh kháng lại sinh vật kiểm định Trong số 39 chủng nghiên cứu, hai chủng VY-I16, VY-142 có phức hệ enzyme phong phú, chúng có khả phân giài tốt đồng thời năm loại chat la tinh bat, casein, CMC, kitin, lipid Xác định trình tự 26S rDNA (D1/D2) so sảnh với trình tự loài cỏ quan hệ họ hàng gần cho thấy, hai chủng xếp vào2 loài thuộc 8uliera Điều kiện tối ưu cho sinh trường sinh tổng hợp enzyme chủng là: Môi trường YM, pH - 7, nhiệt độ 20- 25°C, thời gian ni ngày Điều kiện thích hợp cho enzyme ngoại bảo hoạt động chủng nấm men nhiệt độ từ 40- 50°C; pH - Từ khúa: Bullera, điều kện tối ưu, enzyme ngoai bao, nắm men sinh bào từ bắn, 26S rDNA DAT VAN DE chọn số chủng có hoạt tính enzyme mạnh để đưa Việt Nam nằm khu vực có khí hậu nóng âm, tạo điều kiện thuận lợi cho ví sinh vật phát triển Việt Nam đánh giá quốc gia có đa dạng sinh học phong phú Tuy nhiên, vi sinh vật nghiên cứu đa dạng chưa thật quan tâm mức Mục tiêu nghiên NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Các chủng nấm men Các chủng nắm men phân lập từ bề mặt cứu đa dạng vi sinh vật nhằm tìm kiểm nguồn gen mới, tiên hành nghiên cứu, tìm cách ứng dụng mọc Vườn Quốc gia Cúc Phương, Ninh đến nhóm hiểm, it nghiên cứu với hy vọng tìm chất có hoạt tính sinh học Các đặc điểm hình thái bào tử, khuẩn lạc, đặc điểm nuôi cấy: Theo mô tả Yarrow (1998) lưu giữ chúng cho hệ sau Trong q trình tìm kiếm nguồn gen, khơng phải ý đến nhóm vỉ sinh vật biết, mà cần phái quan tâm Nấm men sinh bảo tử bắn cư trú cây, nhóm ví sinh vật cịn nghiên cứu, gần bắt đầu đẻ ý đến số loài số chúng có hoạt tính sinh học sant ‘nme vào ứng dụng thực tiên Trong hành trình nghiên cứu nắm men ¡ sinh bào tử bắn Việt Nam, Đào Thị Lương đồng tác giá (2002: 2005) da phân lập 39 chủng thuộc chi Bullera từ Vườn Quốc gia Cúc Phương, hai loài số 39 chủng cơng bé, số lồi khác công bế thời gian tới Trong báo này, nghiên cứu khả sinh số enzyme ngoại bào chủng này, lựa Bình, phân lập theo phương pháp Nakase Takashima (1993) Các đặc điểm hóa phân loại (chemotaxonomy) Tách chiết, tính xác dinh ubiquinone theo phương pháp Nakase Suzukí (1956) Xylose tế bào phân tích sắc ký lóng cao áp, sau thủy phân tế bao bing trifluroaxetic acid theo Suzuki Nakase (1988) Phân tích trình chủng loại tự Trình tự 26S xây rDNA dựng đoạn D1/D2 phát sinh xác 97 Đào Thị Lương & Phạm Văn Ty định theo phương pháp (1997), sử dụng phần mềm Kurtman Robnett CLUSTALW ver 1.83 1- glucose 2-xylose 3-galactose trình tự Thompson đồng tác giả (1994) Các tham khảo dùng nghiên cứu phát sinh 4- mannose chủng loại lấy từ liệu DDBJ, EMBL, 5- glycerol 6- mannitol GenBank Cay phat sinh xây dựng theo Kimura Nei (1980) sử dụng phương pháp Saitou (1987) Hoat tinh enzyme Được xác định phương pháp khuếch tán : (amylase), - thạch sử dụng chat: Tinh bét (protease) casein nase), (chiti kitin CMC (cellulase), Lan Ding ef al., 1972) Sinh khối khô T8 Time or va Tween 80 (lipase) (Ngun (min) Hình Phân tích xylose tế bào chủng VY116 772 trọng Được xác định theo phương pháp cân 1972) al., ef lượng không đổi (Nguyên Lân Diing Q10 KET QUA VA THAO LUAN Tuyển chọn chũng nấm men có hoạt tính sinh học Từ 20 mẫu Vườn Quốc gia Cúc chủng nắm Phương, chúng tơi phân lập 121 hình men sinh bào tử bắn Dựa vào hình thái bào tử, thái khuẩn lạc, phân thành 85 nhóm xác Sau diện đại làm chủng nhóm chọn 1) định có mặt xylose tế bào (Hình thành phần ubiquinone (Hình 2), chủng thuộc xếp vào chỉ, chủng Bannoa, thudc 39 chung thudc chi Bullera, ching thuộc chung 34 Kockovaella, ch thuộc lại cịn chủng Sporobolomyces va Tilletiopsis có đặc Ba mươi chín chủng thuộc Bullera sinh trưng khuẫn lạc có màu trắng đến vàng,bảo tử xứng đối dạng bắn tử sản bào cé ubiquinone chéi, chtra xylose té bao va chủ yếu Q-10 (Boekhout, Nakase, 1998) Kha nang sinh enzyme ngogi bao tử bắn Ba muoi chin ching nắm men sinh bào nuôi môi trường YM dịch thể pH tâm Ly ngày 20°C phút, máy lắc 220 vịng/ g mơi trườn thu dịch trong, nhỏ vào lỗ khoan , kitin, Tween chứa chất (tỉnh bột, CMC, casein vong phan 80), đặt tủ dm 30°C Sau 24 h, giải chất Kết trình bày hình 98 Ft ? r rTP Hình Phân tích hệ thống ubiquinone tế bảo chủng VY-142 Biểu đồ trình bày hình cho thấy khả phân giải chất 39 chủng nấm men khác Trên chất tỉnh bột kitin, số chủng có hoạt tính enzyme mạnh chiếm 15%, tỷ lệ lớn nắm men chủ yếu sử dụng đường cho sinh trưởng, khả sinh enzyme ngoại bào Với e mạnh chât CMC, số chủng có hoạt tính enzym chiếm 8% Trong đó, Tween 80 casein, số lượng chủng không sinh enzyme phân giải chất chiếm 13 33%, khơng có chủng có hoạt tính tinh enzyme manh Da số chúng có hoạt giải phân vịng kính đường bình, trung enzyme chất 10
Ngày đăng: 28/05/2022, 22:03
Xem thêm:
