101_30.10.2014. 72386-388 GENSCREEN ULTRA (883637-2013) VI_ added shelf life

Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab khay – khay – 96 480 72386 72388 (VI) • Có thể xin tài liệu ngôn ngữ khác đại lý BioRad địa phương bạn Phiên tờ thông tin kèm theo ghi hộp sản phẩm phiên buộc phải dùng ( ) [VI] [VI] Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab khay – khay – 96 480 72386 72388 BỘ XÉT NGHIỆM TẦM SOÁT ĐỂ PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN HIV P24 VÀ KHÁNG THỂ KHÁNG HIV-1 VÀ HIV-2 TRONG HUYẾT THANH/HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH ENZYM 883637 – 10/2013 [VI] MỤC LỤC MụC ĐÍCH Sử DụNG TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH VỀ XÉT NGHIỆM NGUYÊN LÝ CỦA QUY TRÌNH THUốC THử CẢNH BÁO VÀ ĐỀ PHÒNG MẪU XÉT NGHIỆM QUY TRÌNH CÁC HẠN CHẾ CỦA XÉT NGHIỆM 13 CÁC ĐẶC ĐIỂM VỀ HIỆU NĂNG 13 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO CHUYÊN MÔN 17 [VI] MụC ĐÍCH Sử DụNG Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab xét nghiệm miễn dịch enzym định tính dùng để phát kháng nguyên HIV p24 kháng thể kháng HIV-1 (nhóm M O) HIV-2 huyết huyết tương người Có thể sử dụng xét nghiệm cho tầm soát HIV Ag HIV Ab trường hợp hiến máu sử dụng cho chẩn đoán TĨM TẮT VÀ GIẢI THÍCH VỀ XÉT NGHIỆM Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải (AIDS) bệnh truyền nhiễm virus gây ra, thể tình trạng suy giảm miễn dịch nghiêm trọng Hai loại virus liên quan đến nhóm lentivirus lập khỏi bạch cầu lympho bệnh nhân nhiễm AIDS tiền triệu bệnh Loại đầu tiên, HIV-1, lập Pháp, sau Hoa Kỳ Loại thứ hai, HIV-2, cô lập từ hai bệnh nhân sống Châu Phi chứng minh gây nên ổ bệnh AIDS Tây Phi Kiến thức biến đổi di truyền chủng virus HIV thu từ giải trình tự gen GAG, POL ENV thuộc chủng đại diện cho tiểu loại Virus HIV-1 chia thành nhóm: nhóm M, bao gồm tiểu loại (A đến I) nhóm O Virus HIV-2 bao gồm tiểu loại Sự phân bố địa lý tiểu loại khác xác định rõ Một số biến thể HIV-1 có 70% mức độ tương đồng gen GAG POL với đợt lập 50% gen ENV; khác biệt giải thích cho việc khơng thể chẩn đốn nhiễm trùng số bệnh nhân Các đợt lập HIV-2 khác có kháng nguyên chung với virus khỉ SIV tất protein (protein vỏ lõi: dị tương đồng = 30%), biểu mức độ tương đồng với protein vỏ HIV-1 40% Kháng nguyên kháng thể HIV xuất phát giai đoạn khác chuyển đổi huyết nhiễm trùng Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab cho phép phát đồng thời kháng thể kháng nguyên anti-HIV-1 (nhóm M O) anti-HIV-2 (xem thêm phần hạn chế quy trình) NGUYÊN LÝ CỦA QUY TRÌNH Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab xét nghiệm miễn dịch enzym định tính theo nguyên lý kỹ thuật “bánh kẹp thịt” để phát kháng nguyên HIV loại kháng thể khác liên quan đến virus HIV-1 và/hoặc HIV-2 huyết huyết tương người Pha rắn bọc bằng: • Kháng thể đơn dịng kháng kháng ngun p24 HIV-1 • Kháng ngun tinh chế: protein tái tổ hợp gp160, peptide tổng hợp mơ định kháng ngun đặc hiệu nhóm O HIV-1 hồn tồn nhân tạo (tức khơng virus mã hóa) peptide mơ định kháng nguyên trội miễn dịch protein vỏ HIV-2 Các chất cộng hợp dựa việc sử dụng: • Kháng thể đa dịng gắn biotin kháng HIV Ag (chất cộng hợp 1) • Streptavidin kháng nguyên HIV - chất cộng hợp peroxidase (peptide gp41 gp36 mô định kháng nguyên trội miễn dịch glycoprotein vỏ HIV-1 HIV-2, peptide tổng hợp tương tự mô định kháng nguyên đặc hiệu nhóm O HIV-1 hồn tồn nhân tạo sử dụng cho pha rắn) (chất cộng hợp 2) Quy trình xét nghiệm gồm có bước phản ứng sau: Chất cộng hợp (kháng thể đa dòng gắn biotin kháng p24 HIV-1 Ag) thêm vào giếng khay vi thể Mẫu huyết xét nghiệm mẫu kiểm sốt đối chứng pipet vào giếng • Nếu có, kháng nguyên HIV liên kết với kháng thể đơn dòng liên kết với pha rắn chất cộng hợp • Kháng thể HIV-1 và/hoặc HIV-2, có, liên kết với kháng nguyên cố định pha rắn • Sự ngưng kết chất cộng hợp mẫu xác định qua việc đổi màu, từ màu vàng-xanh chuyển qua màu xanh dương Sau ủ 37 °C sau rửa, chất cộng hợp thêm vào: • Streptavidin phản ứng với phức hợp Ab-Ag-Ab biotin hóa • Kháng ngun HIV-1 HIV-2 tinh chế, gắn nhãn peroxidase liên kết với kháng thể IgG, IgM IgA giữ lại pha rắn [VI] Sau ủ 18–30 °C, phần không liên kết chất cộng hợp loại bỏ cách rửa Sau ủ với có mặt chất nhiệt độ phịng (18–30 °C), có thay đổi màu có diện chất cộng hợp tạo phức Phản ứng dừng lại độ hấp thu đọc sử dụng quang phổ kế 450/620–700 nm Độ hấp thu đo mẫu định việc có hay khơng có kháng thể HIV Ag HIV-1 và/hoặc HIV-2 THUốC THử 4.1 Mô tả Định danh nhãn Mô tả R1 Khay vi giếng Khay vi giếng 12 dải, dải giếng bọc kháng thể đơn dòng kháng p24 HIV-1 (chuột) kháng nguyên HIV-1 HIV-2 tinh chế Số định danh riêng = 53 R2 Dung dịch rửa đậm đặc (20X) Dung dịch rửa đậm đặc (20X) Dung dịch đệm Tris NaCl pH 7,4 Chất bảo quản: ProClin™ 300 0,04% Dạng Sản Phẩm/Chế Phẩm 72386 72388 khay Dùng khay Dùng lọ 70 ml Để pha loãng lọ 235 ml Để pha loãng Mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính Mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính Huyết tương người loại bỏ hoạt tính nhiệt âm tính với kháng nguyên HBs, kháng nguyên HIV, kháng thể anti-HIV-1, anti-HIV-2 anti-HCV Chất bảo quản: Natri azit < 0,1% lọ 2,5 ml Dùng lọ 2,5 ml Dùng R4 Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ab Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ab Huyết tương người loại bỏ hoạt tính nhiệt dương tính với kháng thể anti-HIV, âm tính với kháng nguyên HBs kháng thể antiHCV dịch pha loãng tổng hợp Chất bảo quản: ProClin™ 300 < 0,1% lọ ml Dùng lọ ml Dùng R5 Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ag Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ag Kháng nguyên HIV-1 tinh chế loại bỏ hoạt tính chất phá vỡ cấu trúc dịch pha loãng tổng hợp Chất bảo quản: ProClin™ 300 < 0,1% lọ ml Dùng lọ ml Dùng R6 Chất cộng hợp Chất cộng hợp Kháng thể đa dòng gắn biotin kháng p24 HIV-1 (cừu) màu vàng – xanh Chất bảo quản: ProClin™ 300 0,5% lọ 10 ml Dùng lọ x 10 ml Dùng R7a Chất cộng hợp Chất cộng hợp Streptavidin gắn nhãn peroxidase đông khô kháng nguyên HIV-1 HIV-2 tinh chế Chất bảo quản: ProClin™ 300 < 0,1% lọ đủ số lượng pha chế 12,5 ml Để hoàn nguyên lọ đủ số lượng pha chế x 30 ml Để hồn ngun R7b Dịch pha lỗng chất cộng hợp Dịch pha loãng chất cộng hợp Dung dịch sữa tách béo màu đỏ Chất bảo quản: ProClin™ 300 0,5% lọ 12,5 ml Để hoàn nguyên lọ x 30 ml Để hoàn nguyên R8 Dung dịch đệm cho chất Dung dịch đệm cho chất Dung dịch citric acid sodium acetate pH 4,0, chứa H2O2 (0,015%) dimethyl sulfoxide DMSO (4%) lọ 60 ml Để hoàn nguyên lọ x 60 ml Để hoàn nguyên R3 [VI] Định danh nhãn Mô tả R9 Chất tạo màu: Dung dịch TMB (11X) Chất tạo màu: Dung dịch TMB (11X) Dung dịch chứa 3,3’ , 5,5’ tetramethylbenzidine (TMB) R10 Dung dịch hãm Dung dịch hãm Dung dịch sulphuric acid (H2SO4 1N) Dạng Sản Phẩm/Chế Phẩm 72386 72388 lọ ml Để hoàn nguyên lọ x ml Để hoàn nguyên lọ 28 ml Dùng lọ x 28 ml Dùng 4.2 Các yêu cầu bảo quản thao tác Cần bảo quản xét nghiệm +2–8 °C Hạn dùng: 18 tháng Có thể sử dụng thứ bảo quản +2–8 °C ngày hết hạn bao bì (nếu khơng có ghi khác) Sau mở không bị ô nhiễm, sử dụng thuốc thử R2, R3, R4, R6, R7, R8, R9 R10 bảo quản +2–8 °C ngày hết hạn nhãn Định danh R1 R2 R7a + R7b R8 + R9 Bảo quản Sau mở túi đóng chân khơng, sử dụng dải vi giếng bảo quản +2–8 °C tháng túi ban đầu chúng đóng kín lại cẩn thận Có thể bảo quản dung dịch rửa pha lỗng +2–30 °C tuần Có thể bảo quản dung dịch rửa đậm đặc (R2) +2–30 °C Sau hồn ngun, bảo quản thuốc thử +2–8 °C tháng Sau hồn ngun đơng lạnh, ngày hết hạn xét nghiệm, đơng lạnh thuốc thử sau rã đơng tối đa 11 lần Sau hoàn nguyên, thuốc thử bảo quản bóng tối sử dụng nhiệt độ phòng (18–30 °C) CẢNH BÁO VÀ ĐỀ PHÒNG Để sử dụng chẩn đoán in vitro Chỉ dành cho nhân viên y tế sử dụng Sản phẩm chứa sodium azide < 0.1% (NaN3 < 0,1%) Không hủy bỏ rác thải sinh hoạt Không đổ sản phẩm xuống hệ thống nước thải Hủy bỏ sản phẩm theo quy định hóa chất độc hại 5.1 Đề phịng cho sức khỏe an tồn • Chỉ nhân viên đủ lực đào tạo quy trình xét nghiệm hiểu biết rành rẽ nguy tiềm ẩn làm việc với xét nghiệm Sử dụng trang phục bảo hộ, găng tay, phương tiện bảo vệ mắt/mặt thao tác phù hợp theo yêu cầu Tiêu Chuẩn Thực Hành Xét Nghiệm Tốt • Bộ xét nghiệm có chứa thành phần máu người Các vật liệu có nguồn gốc từ người sử dụng để điều chế mẫu kiểm soát đối chứng âm tính (R3) kiểm tra cho thấy khơng phản ứng với kháng nguyên bề mặt viêm gan B (HBsAg), kháng nguyên HIV, kháng thể kháng viêm gan C, kháng thể kháng virus gây suy giảm miễn dịch người (HIV-1 HIV-2) Các vật liệu có nguồn gốc từ người sử dụng để điều chế mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính với kháng thể HIV-1 (R4) kiểm tra cho thấy không phản ứng với kháng nguyên bề mặt viêm gan B (HBsAg) kháng thể kháng viêm gan C Chưa biết có phương pháp bảo đảm tuyệt đối khơng có tác nhân lây nhiễm Do vậy, tất dẫn xuất từ máu người, thuốc thử mẫu người, phải thao tác trường hợp có khả truyền bệnh lây nhiễm, theo Biện Pháp Đề Phòng Chung đề nghị cho mầm bệnh mang máu theo định nghĩa quy định địa phương, khu vực quốc gia [VI] • Tràn đổ sinh phẩm: Vật liệu có nguồn gốc từ người bị tràn đổ phải xử lý chất có khả lây nhiễm Vật liệu tràn đổ không chứa acid phải khử nhiễm lập tức, kể khu vực, vật liệu tràn đổ bề mặt hay dụng cụ bị nhiễm vật liệu, hóa chất sát khuẩn phù hợp có hiệu loại bỏ nguy sinh học từ mẫu có liên quan (thường dùng thuốc tẩy gia dụng pha loãng 1:10, Ethanol Isopropanol 70–80%, dung dịch iodophor [chẳng hạn Wescodyne™ Plus 0,5%], v.v.), lau khô Vật liệu tràn đổ chứa acid phải thấm hút phù hợp (lau khơ) trung hịa, khu vực phải xả nước lau khô; phải thải bỏ vật liệu thấm hút chất thải sinh học nguy hại Sau đó, khử nhiễm cho khu vực hóa chất sát khuẩn nói LƯU Ý: Khơng cho dung dịch chứa chất tẩy vào nồi hấp áp suất! • Thải bỏ tất mẫu xét nghiệm vật liệu dùng để thực xét nghiệm trường hợp chúng có chứa tác nhân lây nhiễm Các chất thải phịng xét nghiệm, chất thải hóa học sinh học nguy hiểm phải thao tác thải bỏ theo tất quy định địa phương, khu vực quốc gia • Để biết hướng dẫn nguy biện pháp đề phòng liên quan đến số thành phần hóa học xét nghiệm này, xin xem (các) hình đồ nhãn thông tin phần cuối hướng dẫn sử dụng Bản Thơng Tin An Tồn (SDS) có www.bio-rad.com 5.2 Các biện pháp đề phòng cho quy trình xét nghiệm 5.2.1 Chuẩn bị Độ tin cậy kết phụ thuộc vào việc thực Tiêu Chuẩn Thực Hành Xét Nghiệm Tốt sau đây: • Không sử dụng thuốc thử hết hạn sử dụng • Khơng sử dụng lẫn chung thuốc thử lô khác lần xét nghiệm • Trước sử dụng chờ 30 phút cho thuốc thử ổn định nhiệt độ phịng (18–30 °C) • Tên xét nghiệm, số định danh riêng xét nghiệm, ghi thành khay vi giếng Số định danh riêng ghi dải vi giếng Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab: Số định danh riêng = 53 Kiểm tra lại số định danh riêng trước dùng Nếu số định danh riêng, số định danh riêng khác với số tương ứng với xét nghiệm thực hiện, khơng dùng dải vi giếng GHI CHÚ: Với dung dịch rửa (R2, định danh nhãn là: 20X màu xanh cây), dung dịch đệm cho chất peroxidase (R8, định danh nhãn là: dung dịch đệm TMB màu xanh dương), chất tạo màu (R9, định danh nhãn là: TMB 11X màu tía) dung dịch hãm (R10, định danh nhãn là: 1N màu đỏ), sử dụng lơ khác ngồi lơ chứa xét nghiệm, phải dùng lô lần xét nghiệm Có thể sử dụng thuốc thử với số sản phẩm khác công ty chúng tơi Xin liên lạc với nhóm dịch vụ kỹ thuật (technical services) để biết thêm thông tin chi tiết • Hồn ngun thuốc thử cho cẩn thận tuyệt đối khơng để bị nhiễm • Sử dụng dụng cụ thủy tinh rửa súc kỹ nước khử ion tốt hơn, sử dụng dụng cụ dùng lần • Khơng khay vi giếng bị khô từ lúc rửa xong phân phối thuốc thử • Phải bắt đầu phân phối mẫu sau phân phối chất cộng hợp Thời gian chờ lúc phân phối chất cộng hợp mẫu không 30 phút • Phản ứng enzym nhạy với ion kim loại Do đó, khơng ngun tố kim loại tiếp xúc với dung dịch chất cộng hợp chất khác • Dung dịch màu (dung dịch đệm cho chất + chất tạo màu) phải có màu hồng Nếu màu hồng bị biến đổi vài phút sau hoàn nguyên khơng dùng thuốc thử mà phải thay dung dịch khác Có thể pha dung dịch màu khay nhựa dùng lần dụng cụ đựng thủy tinh rửa trước HCl 1N súc lại cẩn thận nước cất làm khơ Phải bảo quản thuốc thử bóng tối • Khơng sử dụng chung dụng cụ đựng để phân phối chất cộng hợp dung dịch màu [VI] 5.2.2 Xử lý • Khơng thay đổi quy trình xét nghiệm • Khơng thực xét nghiệm có diện có khả phản ứng (hơi acid, kiềm, aldehyde) bụi làm thay đổi hoạt tính enzym chất cộng hợp • Sử dụng đầu phân phối mẫu cho mẫu xét nghiệm • Rửa giếng bước quan trọng quy trình: cần tuân thủ số lần rửa bảo đảm tất giếng đổ đầy làm cạn hoàn toàn Rửa khơng cho kết sai • Hãy tuân thủ cẩn thận quy trình rửa nêu để có kết xét nghiệm xác Với số dụng cụ, cần tối ưu quy trình rửa (tăng thêm số lần rửa bước rửa và/hoặc thể tích dung dịch đệm để rửa lần rửa) để đạt mức mật độ quang (OD) chấp nhận mẫu âm tính Liên hệ với chúng tơi cần có điều chỉnh cho phù hợp quy trình đặc biệt MẪU XÉT NGHIỆM Lấy mẫu máu theo tiêu chuẩn thực hành hành Xét nghiệm phải thực huyết huyết tương chưa pha loãng (lấy với EDTA, Sodium citrate ACD) Không nên sử dụng mẫu xét nghiệm lấy từ ống chứa lithium heparinate Cần loại bỏ huyết khối hay hồng cầu khỏi huyết huyết tương sớm tốt để tránh tuyệt đối trường hợp bị tan huyết Bị tan huyết nhiều ảnh hưởng đến hiệu xét nghiệm Mẫu có chất kết tủa phải làm cách ly tâm trước xét nghiệm Các hạt fibrin lơ lửng hay chất kết tủa dẫn đến kết dương tính giả Có thể bảo quản mẫu +2–8 °C tầm sốt thực khơng q ngày làm đơng lạnh mẫu –20 °C vài ba tháng Phải rã đông nhanh huyết tương cách làm nóng vài phút bể nước 40 °C (Để tránh kết tủa fibrin) Không làm đông lạnh/rã đông lần Mẫu xét nghiệm chứa không 90 g/l albumin, 200 mg/l bilirubin, 50 µg/l biotin, mẫu xét nghiệm nhiều lipid chứa khơng đương lượng 36 g/l triglyceride, mẫu xét nghiệm tan huyết chứa không 10 g/l hemoglobin không ảnh hưởng đến kết Tuy nhiên, không nên sử dụng mẫu huyết huyết tương chứa nhiều lipid bị tan huyết nhiều Không nên gia nhiệt mẫu xét nghiệm Khi cần chuyển đi, mẫu xét nghiệm phải đóng gói theo quy định hành vận chuyển tác nhân gây bệnh nên vận chuyển dạng đơng lạnh QUY TRÌNH 7.1 Vật liệu cần dùng không cung cấp Nước cất Sodium hypochlorite (thuốc tẩy gia dụng) sodium bicarbonate Giấy thấm Găng tay dùng lần Màng dính Kính bảo hộ Ống dùng lần Pipette hay pipette tự động hay bán tự động, loại điều chỉnh hay định mức trước để đong phân phối 25 μl, 75 μl, 80 μl 100 μl • Ống đong dung tích 25 ml; 100 ml; 1000 ml Máy trộn Vortex • Hệ thống rửa khay vi giếng tự động, bán tự động hay thủ cơng (*) • Bể nước, hay tủ ấm tương đương dùng cho khay vi giếng, đặt nhiệt độ 37 °C ± °C (*) • Thùng rác thải sinh học nguy hại • Máy đọc khay vi giếng có kính lọc 450nm, 490 nm 620-700 nm (*) (*) Xin liên hệ với chúng tơi để phịng kỹ thuật hướng dẫn thêm chi tiết thiết bị dụng cụ nên dùng • • • • • • • • [VI] 7.2 Chuẩn bị thuốc thử 7.2.1 Thuốc thử dùng Thuốc thử (R1): Khay vi giếng Mỗi khay chứa 12 dải vi giếng bọc túi kín Dùng kéo hay dao mổ cắt túi vị trí từ 0,5 đến cm đường xi Mở túi lấy khay Cho dải vi giếng chưa dùng lại vào túi Đóng túi lại cẩn thận đưa bảo quản từ +2–8 °C Thuốc thử (R3): Mẫu kiểm soát đối chứng âm tính Thuốc thử (R4): Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ab Thuốc thử (R5): Mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ag Thuốc thử (R6): Chất cộng hợp Thuốc thử 10 (R10): Dung dịch hãm 7.2.2 Thuốc thử để hoàn nguyên Thuốc thử (R2): Dung dịch rửa đậm đặc (20X) Pha với nước cất theo tỷ lệ 1:20 để dung dịch rửa dùng Pha 800 ml cho khay 12 dải Thuốc thử 7a (R7a) + Thuốc thử 7b (R7b): Dung dịch chất cộng hợp để dùng Gõ nhẹ lọ chất cộng hợp đông khô (R7a) lên mặt bàn cho rơi hết phần chất nắp cao su xuống Cẩn thận tháo nắp lọ dịch pha loãng chất cộng hợp (R7b) đổ hết lượng bên vào lọ chất cộng hợp đông khô (R7a) Đậy nắp lại để yên 10 phút đồng thời thình thoảng lắc nhẹ đảo ngược cho dễ tan Thuốc thử (R8) + Thuốc thử (R9): Dung dịch màu enzym Pha loãng theo tỷ lệ 1:11 chất tạo màu (R9) Dung Dịch Đệm (R8) cho Cơ Chất (tức ml thuốc thử R9 +10 ml thuốc thử R8) cho 10 ml cần đủ để xử lý 12 dải vi giếng Làm cho 7.3 Quy Trình Xét Nghiệm Tuân thủ quy trình Sử dụng mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính (R3), dương tính HIV-1 Ab (R4) dương tính HIV Ag (R5) cho đợt xác định nhằm xác nhận chất lượng xét nghiệm Tuân thủ Tiêu Chuẩn Thực Hành Xét Nghiệm Tốt: 1) Thiết lập cẩn thận kế hoạch phân phối định danh mẫu 2) Pha chế dung dịch rửa pha loãng R2 dung dịch chất cộng hợp để dùng (R7a + R7b) (xem mục 7.2) 3) Mở túi bảo vệ lấy khay vi giếng số dải vi giếng (R1) cần dùng Cho dải vi giếng chưa dùng lại vào túi Đóng túi lại đưa bảo quản +2-8 °C 4) Phân phối vào giếng theo thứ tự sau mà không rửa khay trước (cách phõn phi vo khay nờn dựng): ã 25 àl cht cộng hợp (R6) vào giếng • 75 μl mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ag (R5) vào giếng A1 • 75 μl mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ab (R4) vào giếng B1 • 75 μl mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính (R3) vo cỏc ging C1, D1 v E1 ã 75 àl mu vo ging F1 ã 75 àl mu vào giếng G1, v.v Làm cho hỗn hợp lần hút pipet 75 μl máy lắc khay vi giếng giây Phải bắt đầu phân phối mẫu sau phân phối chất cộng hợp Nếu việc phân phối mẫu kéo dài 30 phút, nên phân phối mẫu xét nghiệm trước phân phối mẫu kiểm soát đối chứng âm tính dương tính Tùy theo hệ thống dùng, thay đổi vị trí mẫu kiểm sốt đối chứng hay thứ tự phân phối 10 [VI] GHI CHÚ: Sau phân phối mẫu, giếng chứa chất cộng hợp chuyển từ màu vàng-xanh sang xanh dương Có thể kiểm tra diện (mẫu xét nghiệm + chất cộng hợp 1) cho vào giếng cách đọc quang phổ kế 620 nm (xem mục 7.7) 5) Bao khay vi giếng màng dính 6) Ủ ấm khay vi giếng (± phút) 37 °C ± °C 7) Nếu cần, tháo màng dính Hút thành phần bên tất giếng vào thùng rác thải sinh học nguy hại (có chứa sodium hypochlorite) Thêm vào giếng 0,370 ml dung dịch rửa Thời gian ngâm cần 30 giây Hút lại Lặp lại quy trình hai lần (tức tổng cộng rửa ba lần) Thể tích dịch rửa dư khơng q 10 μl (nếu cần, làm khô khay cách úp ngược lên giấy thấm) Nếu dùng máy rửa tự động, thực chu trình rửa tương tự 8) Phân phối nhanh 100 μl chất cộng hợp (R7a + R7b) vào giếng khay Cần lắc nhẹ dung dịch chất cộng hợp trước dùng Nếu được, đậy lại màng dính ủ ấm 30 phút (± phút) nhiệt độ phòng (18–30 °C) GHI CHÚ: Chất cộng hợp có màu đỏ Có thể kiểm tra diện chất cộng hợp cho vào giếng cách đọc quang phổ kế 620 nm (xem mục 7.7) 9) Nếu cần, tháo màng dính ra, hút cạn tất giếng rửa lần 10) Pha dung dịch màu enzym (thuốc thử R8 + R9) 11) Phân phối nhanh 80 μl dung dịch chất màu enzym pha (R8+R9) vào tất giếng Để cho phản ứng diễn bóng tối 30 phút (± phút) nhiệt độ phòng (18–30 °C) Khơng dùng màng dính bước ủ ấm GHI CHÚ: Việc phân phối dung dịch màu có màu hồng kiểm sốt mắt bước thao tác Có khác biệt rõ ràng màu giếng trống giếng có dung dịch chất màu hồng (xem mục 7.7) 12) Thêm 100 μl dung dịch hãm (R10) theo trình tự tốc độ phân phối dung dịch dung dịch màu GHI CHÚ: Việc phân phối dung dịch hãm khơng màu kiểm sốt mắt bước thao tác Màu chất, hồng (với mẫu âm tính) xanh dương (với mẫu dương tính), giếng phai đi, trở nên không màu (với mẫu âm tính) vàng (với mẫu dương tính) sau thêm dung dịch hãm 13) Cẩn thận lau mặt đáy vi giếng Sau thêm dung dịch hãm, chờ phút đọc đọc vòng 30 phút kể từ ngừng phản ứng, đọc mật độ quang 450/620–700 nm máy đọc khay vi giếng 14) Kiểm tra kết đọc theo khay, kế hoạch phân phối định danh mẫu xét nghiệm quang phổ kế mắt xem có giống khơng 7.4 Kiểm sốt chất lượng Sử dụng mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính âm tính lần chạy đợt xét nghiệm để đánh giá xét nghiệm (Xem mục 7.5) 7.5 Tiêu chí đánh giá xét nghiệm Chỉ đánh giá xét nghiệm điều kiện sau thỏa mãn: 1) Với mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính R3 Độ hấp thu mẫu kiểm soát đối chứng âm tính (R3) cần 0,170: O.D R3 < 0,170 Độ hấp thu trung bình mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính (R3) cần 0,150: O.D R3 < 0,150 Nếu mẫu kiểm soát đối chứng âm tính R3 khơng tn theo quy chuẩn này, bỏ qua giá trị tính lại giá trị trung bình cách sử dụng hai giá trị cịn lại 2) Với mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính với kháng thể HIV R4 Độ hấp thu mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ab (R4) cần 0,9: 11 [VI] 3) Với mẫu kiểm soát đối chứng dương tính với kháng nguyên HIV R5 Độ hấp thu mẫu kiểm sốt đối chứng dương tính HIV Ag (R5) cần 0,9: 7.6 Tính tốn / Diễn giải kết Giá trị tới hạn xác định mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính R3: Tính giá trị độ hấp thu trung bình đo cho mẫu kiểm sốt đối chứng âm tính R3 OD (C1) + OD (D1) + OD (E1) OD R3 = —————————————— Tính giá trị tới hạn: CO = OD R3 + 0,200 Việc có khơng có Kháng Ngun HIV kháng thể kháng HIV-1 và/hoặc HIV-2 phát xác định cách so sánh độ hấp thu đo cho mẫu với giá trị tới hạn tính Tính tỷ số sau cho mẫu xét nghiệm: Tỷ số = O.D mẫu xét nghiệm / Giá trị CO Mẫu xét nghiệm có mật độ quang nhỏ giá trị tới hạn xem âm tính (tỷ số < 1) theo Genscreen™ ULTRA HIV Ag Ab Tuy nhiên, với kết thấp giá trị tới hạn chút (CO-10 % < O.D < CO) cần thận trọng diễn giải Nên làm lại xét nghiệm theo cách thức lặp lại với mẫu xét nghiệm tương ứng hệ thống quy trình xét nghiệm cho phép Các mẫu xét nghiệm có mật độ quang lớn giá trị tới hạn (tỷ số ≥ 1) xem dương tính bước đầu theo Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab Nên xét nghiệm lại mẫu theo cách thức lặp lại trước chấp nhận kết đọc cuối Nếu sau xét nghiệm lại, tỷ số lần xét nghiệm lặp lại lớn 1, kết ban đầu lặp lại mẫu xét nghiệm cơng bố dương tính với Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab Nếu tỷ số lần xét nghiệm lặp lại nhỏ kết ban đầu khơng lặp lại mẫu xét nghiệm cơng bố âm tính Phản ứng thường khơng lặp lại do: • Rửa khay vi giếng chưa đủ sạch, • Mẫu xét nghiệm âm tính bị nhiễm huyết huyết tương có chuẩn độ kháng thể cao, • Dung dịch chất bị nhiễm chất oxy hóa (thuốc tẩy, ion kim loại, v.v.), • Dung dịch hãm bị nhiễm bẩn Các mẫu xét nghiệm xét nghiệm lại hai lần thấy âm tính với Genscreen™ ULTRA HIV Ab-Ag, có giá trị gần giá trị tới hạn (tỷ số nằm khoảng từ 0,9 đến 1) cần phải cân nhắc thận trọng Nên xét nghiệm lại cho bệnh nhân phương pháp khác mẫu xét nghiệm khác Nếu mật độ quang mẫu xét nghiệm thấp (O.D âm) diện mẫu xét nghiệm thuốc thử kiểm soát đối chứng, kết diễn giải âm tính Nên xác nhận mẫu xét nghiệm dương tính theo hướng dẫn giải thuật quốc gia hành 7.7 Kiểm tra quang phổ kế việc cho mẫu chất cộng hợp vào pipette (không bắt buộc) Kiểm tra việc cho mẫu xét nghiệm chất cộng hợp (R6) vào pipette Có thể kiểm tra diện đồng thời chất cộng hợp (R6) mẫu xét nghiệm cho vào giếng cách đọc tự động 620 nm Mỗi giếng chứa mẫu xét nghiệm chất cộng hợp (R6) phải có O.D lớn 0,600 12 [VI] Kiểm tra việc cho dung dịch chất cộng hợp để dùng vào pipette Sự có mặt chất cộng hợp (R7a + R7b) kiểm tra cách đọc tự động 450 / 620 nm Giá trị O.D giếng phải lớn 0,100 (OD nhỏ có nghĩa việc phân phối chất cộng hợp vào không tốt) Kiểm tra việc cho dung dịch màu vào pipette Có thể kiểm tra diện dung dịch màu có màu hồng cho vào giếng cách đọc tự động 490 nm Giếng có dung dịch màu phải có mật độ quang lớn 0,100 (OD thấp dấu hiệu cho thấy việc phân phối dung dịch màu vào giếng không tốt) CÁC HẠN CHẾ CỦA XÉT NGHIỆM Chuẩn độ thấp kháng nguyên kháng thể HIV khơng phát giai đoạn đầu nhiễm trùng; đó, kết âm tính cho thấy mẫu xét nghiệm khơng chứa kháng nguyên HIV kháng thể anti-HIV phát Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab Tuy nhiên, kết không loại trừ khả nhiễm HIV-1 / HIV-2 Khả biến đổi virus HIV-1 (nhóm M nhóm O) HIV dẫn đến phản ứng âm tính giả Chưa biết có phương pháp bảo đảm tuyệt đối khơng có virus HIV Kỹ thuật ELISA nhạy cao cho phản ứng dương tính giả Để kiểm tra độ đặc hiệu phản ứng, kết dương tính (theo tiêu chí diễn giải xét nghiệm Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab) cần xác nhận phương pháp phù hợp (với xét nghiệm HIV Ag đặc hiệu Genscreen HIV Ag EIA, sau trung hịa để chứng minh diện HIV Ag Western-Blot để chứng minh diện kháng thể anti-HIV) Việc gia nhiệt mẫu ảnh hưởng chất lượng kết Việc sử dụng máy quang phổ để kiểm tra lắng đọng mẫu, chất cộng hợp, dung dịch màu khơng cho phép biết độ xác thể tích mẫu chất cộng hợp phân phối Phương pháp cho biết có mặt mẫu chất cộng hợp mà Mức độ sai phương pháp có liên quan chặt chẽ với độ xác hệ thống dùng (hệ số biến thiên tổng hợp hoạt động phân phối đọc cao 10% nên phương pháp kiểm tra có chất lượng thấp) Một số mẫu vàng da, có nhiều lipid bị tan huyết nhiều ảnh hưởng đến phương pháp sử dụng quang phổ để kiểm tra ngưng kết chất cộng hợp Chỉ kiểm tra diện mẫu trường hợp Nếu hiệu rửa kém, sau ủ ấm chất cộng hợp, hoạt động kiểm tra tự động việc cho dung dịch màu vào pipette (bằng cách đọc OD giếng 490 nm) cho kết sai với OD cao 0,100 khơng có dung dịch màu Tuy nhiên, tượng chưa quan sát thấy trình đánh giá 939 mẫu xét nghiệm CÁC ĐẶC ĐIỂM VỀ HIỆU NĂNG 9.1 Đo Lường Độ Chụm Số đo độ chụm xét nghiệm Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab xác định cách phân tích 10 mẫu xét nghiệm: mẫu âm tính, mẫu dương tính Kháng Thể HIV-1, mẫu dương tính Kháng Thể HIV-2 mẫu dương tính Kháng Nguyên HIV-1 Độ lặp lại xét nghiệm đánh giá cách xét nghiệm 10 mẫu với 30 lần làm song song Độ chụm trung gian đánh giá cách xét nghiệm 10 mẫu theo cách thức lặp lại 20 ngày với lần làm độc lập ngày Tính tỷ số trung bình, độ lệch chuẩn (SD) hệ số biến thiên (CV) 13 [VI] Độ lặp lại 9.1.1 Bảng Mẫu Xét Nghiệm N Tỷ Số Trung Bình Độ Lệch Chuẩn (SD) % Hệ Số Biến Thiên (CV %) Âm tính 30 0,28 0,02 5,37 Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao 30 30 30 30 30 30 30 30 30 1,62 2,98 5,37 2,5 5,35 11,19 1,58 4,19 9,21 0,07 0,13 0,18 0,18 0,45 0,58 0,06 0,17 0,34 4,32 4,33 3,32 7,20 8,48 5,21 3,64 4,13 3,65 HIV-1 Ab HIV-2 Ab HIV Ag 9.1.2 Độ chụm trung gian Trong lượt chạy HIV-1 Ab HIV-2 Ab HIV Ag Giữa lượt chạy Độ Lệch Chuẩn (SD) Hệ Số Biến Thiên (CV) Độ Lệch Chuẩn (SD) Hệ Số Biến Thiên (CV) Giữa ngày/người vận hành Độ Hệ Số Lệch Biến Chuẩn Thiên (SD) (CV) Tổng độ chụm Độ Lệch Chuẩn (SD) Hệ Số Biến Thiên (CV) Mẫu N Tỷ Số Trung Bình Âm tính 72 0,26 0,016 6,2% 0,014 5,5% 0,014 5,5% 0,025 9,9% 72 1,04 0,029 2,8% 0,044 4,3% 0,056 5,4% 0,078 7,5% 72 2,67 0,076 2,8% 0,097 3,6% 0,170 6,4% 0,210 7,9% 72 4,91 0,114 2,3% 0,166 3,4% 0,328 6,7% 0,385 7,8% 72 1,73 0,114 6,6% 0,121 7,0% 0,263 15,2% 0,311 17,9% 72 4,40 0,477 10,8% 0,000 Không xác định 0,484 11,0% 0,680 15,4% 72 10,94 0,427 3,9% 0,319 2,9% 0,633 3,4% 0,647 5,9% 72 1,29 0,052 4,0% 0,038 3,0% 0,053 4,1% 0,084 6,5% 72 3,47 0,085 2,5% 0,134 3,9% 0,068 2,0% 0,173 5,0% 72 8,89 1,272 14,3% 0,000 Không xác định 0,000 Không xác định 1,272 14,3% Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao Dương tính thấp Dương tính trung bình Dương tính cao 9.2 Hiệu chẩn đoán Hiệu Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab xác định cách xét nghiệm mẫu từ người hiến máu ngẫu nhiên, từ bệnh nhân nhiễm HIV bảng chuyển đổi huyết có thị trường Ngoài ra, giới hạn độ nhạy HIV Ag xét nghiệm sử dụng Tiêu Chuẩn ANSM Pháp Tiêu Chuẩn quốc tế WHO (90/636) Bệnh nhân bị bệnh không liên quan đến nhiễm HIV xét nghiệm 14 [VI] 9.2.1 Độ Đặc Hiệu Chẩn Đoán Độ đặc hiệu xác định tổng số 6038 người hiến máu chọn ngẫu nhiên từ địa điểm khác 99,95% với khoảng tin cậy 95% [99,85–99,99%] (6035 mẫu âm tính / 6038 mẫu xét nghiệm) mẫu phản ứng lặp lại xác nhận âm tính với HIV theo xét nghiệm Western Blot HIV p24 Ag 409 mẫu từ phịng thí nghiệm lâm sàng bệnh viện xét nghiệm Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab; 14 mẫu xác định phản ứng ban đầu 12 mẫu số phản ứng lặp lại (dương tính xét nghiệm thứ hai): 11 mẫu xác nhận HIV Western Blot, mẫu không xác nhận coi dương tính giả Độ đặc hiệu nhóm (397/398) 99,75%, Cl 95% [98,61–99,99%] 9.2.2 Độ Nhạy Chẩn Đoán Độ nhạy đánh giá cách xét nghiệm mẫu dương tính HIV Ab xác nhận, mẫu từ bệnh nhân nhiễm cấp tính, bảng chuyển đổi huyết có bán thị trường mẫu HIV Ag (đặc pha loãng) 1) Mẫu dương tính với HIV Ab xác nhận 763 mẫu dương tính từ việc theo dõi bệnh nhân nhiễm HIV-1 HIV-2 xét nghiệm Nghiên cứu cho thấy độ nhạy 100% Số lượng mẫu Số lượng mẫu phản ứng Độ nhạy 200 200 100% 200 200 100% 137 137 100% Nhóm O 22 22 100% Nhóm N 1 100% Bảng BBI PRZ 204 7 100% HIV-2 WB với toàn đặc điểm 196 196 100% Loại HIV-1 HIV-2 A, B, C (Phân loại CDC) HIV-1 WB với toàn đặc điểm với dải kháng gag Ab nhẹ HIV nhóm M (18A, 71B, 23C, 9D, 12E, 4F) Thêm 25 mẫu tươi dương tính (trong vịng ngày sau lấy máu) xét nghiệm tất cho kết dương tính 2) Các mẫu từ bệnh nhân nhiễm cấp tính từ bảng chuyển đổi huyết có bán thị trường • 81 mẫu lấy từ bệnh nhân nhiễm HIV-1 cấp tính gần (35 mẫu từ 28 bệnh nhân với hồ sơ chuyển đổi huyết Western-Blot 46 mẫu từ chuyển đổi huyết gần đây) cho kết dương tính theo Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab • 20 mẫu theo chuyển đổi huyết (mẫu chuyển đổi huyết sớm với hồ sơ Western-Blot âm tính với dải nhẹ cho p24 và/hoặc gp160 HIV Western-blot): 19 mẫu số cho kết dương tính • Tổng cộng 90 bảng chuyển đổi huyết HIV có bán thị trường có hồ sơ hoàn chỉnh nghiên cứu so sánh với xét nghiệm miễn dịch enzym (EIA) có bán thị trường Kết từ so sánh 85 bảng với xét nghiệm Ag-Ab đánh dấu CE: Genscreen™ PLUS HIV Ag-Ab 15 [VI] Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab Kết so với Genscreen™ PLUS HIV Ag-Ab Phát sớm (ít lần chảy máu) Phát tương đương (Cùng mẫu ghi nhận dương tính) Phát muộn Số lượng chuyển đổi huyết 44 41 Ít 170 mẫu chuyển đổi huyết sớm xét nghiệm Genscreen™ ULTRA HIV Ag-Ab 9.3 Độ nhạy phân tích Tiêu Chuẩn HIV Ag Độ nhạy phân tích ước tính cách kiểm tra Tiêu Chuẩn Kháng Nguyên HIV p24 Quốc Tế Lần Thứ WHO (90/636) xác định mức 0,85 IU/ml Cl 95% [0,73–1,01 IU/ml] Giới hạn xét nghiệm xác định theo Tiêu Chuẩn Kháng Nguyên ANSM HIV p24 cách ngoại suy đường cong có xét nghiệm pha lỗng (nồng độ ban đầu 100 pg/ml) xác định < 25 pg/ml Trong đánh giá bên ngoài, giới hạn phát xác lập mức 13,6 pg/ml cách hồi quy phạm vi tiêu chuẩn bảng “Ag HIV SFTS 1998” (bảng HIV Ag Hội Truyền Máu Pháp) Độ nhạy mẫu dương tính với HIV Ag 56 mẫu xét nghiệm: 53 mẫu chứa 25 pg/ml HIV Ag dương tính mẫu có HIV Ag 13, 16 19 pg/ml có tỷ số (Mật Độ Quang / Tới Hạn) từ 0,9 đến 1,00 Độ nhạy tế bào nuôi cấy bề mặt 83 tế bào bề mặt từ kiểu gen sau xét nghiệm: 76 mẫu HIV-1 nhóm M (16 A, 16 B, 11 C, 7D, 13 E, F, G, H, J), mẫu HIV-1 nhóm O, mẫu HIV-1 nhóm N mẫu HIV Tất mẫu HIV-1 phản ứng trừ mẫu nhóm O có nồng độ 29 pg/ml HIV Ag xác định với tỷ số (Mật độ quang / Tới hạn) 0,60 9.4 Nghiên cứu Tính Đặc Hiệu Phân Tích / Khả phản ứng chéo 9.4.1 Nghiên Cứu khả phản ứng chéo 404 bệnh nhân cho thấy bệnh tình trạng khác khơng liên quan đến HIV (phụ nữ có thai, yếu tố khớp dạng thấp, bệnh tự miễn (SLE), xơ gan, suy thận mạn tính, thẩm tách máu, lg kháng chuột tình trạng nhiễm vi rút vi khuẩn khác (Viêm gan A, B, C, Rubella, Toxoplasmosis, Quai Bị, Bệnh Sởi, CMV, HSV, EBV, VZV, HTLVI, Sốt Rét, Bệnh nhân tiêm vắc xin cúm) xét nghiệm Genscreen™ UTLRA HIV Ag-Ab mẫu xác định phản ứng lặp lại giả (1 IgG sởi, IgG HSV, rubella, SLE) Độ đặc hiệu 99,0% Cl95% [97,5–99,7%] (400/404) 9.5 Hiệu ứng móc (hook effect) Mẫu dương tính HIV Ag: 19 mẫu pha lỗng thực từ 1000 ng/mL khơng pha lỗng cho 3,125 pg/ml kháng nguyên p24 HIV chất huyết âm tính Khơng quan sát thấy kết âm tính mẫu khơng pha lỗng so với mẫu pha lỗng Mẫu dương tính HIV Ab: Năm (5) mẫu dương tính HIV Ab cao xét nghiệm từ đặc đến pha lỗng 1/512e Khơng quan sát thấy kết âm tính mẫu khơng pha lỗng so với mẫu pha loãng 16 [VI] 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO CHUYÊN MÔN BARRE-SINOUSSI F., CHERMANN J.C., REY F et al Isolation of a T.lymphotropic retrovirus from a patient at risk for acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), Science 1983, 220, 868-871 BRUN-VEZINET F., ROUZIOUX C., BARRE-SINOUSSI F et al Detection of IgG antibodies to lymphadenopathy-associated in patients with Aids or lymphadenopathy syndrome Lancet 1984, june, 1253-1256 CLAVEL F., GUYADER M., GUETARD D et al Molecular cloning and polymorphism of the human immune deficiency virus type Nature 1986, 324, 691-695 NORRBY E., BIBERFELD G., JOHNSON PR et al The chemistry of site-directed serology for HIV infections AIDS Res Human Retroviruses 1989, 5, 487-493 MATHIESEN T., CHIODI F., BROLIDEN P.A., et al Analysis of a subclass restricted HIV-1 gp 41 epitope by omission peptides Immunology 1989, 67,1-7 PASQUALI J.L., KIENY M.P., KOLBE H et al Immunogenicity and epitope mapping of a recombinant soluble gp 160 of the human immunodeficiency virus type envelope glycoprotein AIDS Res Human Retroviruses 1990, 6, 1107-1113 ZAAIJER H.L., EXEL-OEHLERS P.V., KRAAIJEVELD T et al Early detection of antibodies to HIV-1 by third-generation assays The Lancet 1992, 340, 770-772 COUROUCE AM and the other members of the retrovirus study group of the french society of blood transfusion Effectiveness of assays for antibodies to HIV and p24 antigen to detect very recent HIV infections in blood donors AIDS 1992, 6, 1548-1550 LANGE J.M.A., TEEUWSEN V.J.P., VAHLNE A., BARIN F et al Antigenic variation of the dominant gp41 epitope in Africa AIDS 1993, 7, 461-466 10 CONSTANTINE N.T Serologic tests for retroviruses : approaching a decade of evolution AIDS 1993, 7, 1-13 11 VANDEN HAESEVELDE M., DECOURT JL., DE LEYS R et al Genomic cloning and complete sequence analysis of a highly divergent african human immunodeficiency virus isolate J Virology 1994, 68, 1586–1596 12 GURTLER L.G., HAUSER P.H., EBERLE J et al A new subtype of human immunodeficiency virus type (MVP-5180) from Cameroon J Virology 1994, 1581–1585 13 NAIR B.C., FORD G., KALYANARAMAN V.S et al Enzyme immunoassay using native envelope glycoprotein (gp 160) for immunodeficiency virus type antibodies J Clin Microbio 1994, 32, 1449-1456 detection of human 14 GAO F., YUE L., ROBERTSON D.L et al Genetic diversity of human immunodeficiency virus type 2: evidence for distinct sequence subtypes with differences in virus biology J.Virol 1994, 68, 7433-7447 15 BUSCH M.P., SATTEN G.A Time course of viremia and antibody seroconversion following human immunodeficiency virus exposure American J Med 1997, 102, 117-124 17 [VI] 16 AUBUCHON J.P., BIRKMEYER J.D., BUSCH M.P Cost-effectiveness of expanded human immunodeficiency virus-testing protocols for donated blood Transfusion 1997, 37, 45-51 17 WEBER B et al Reduction of diagnostic window by new fourth-generation human immunodeficiency virus screening assays J Clin Microbio 1998, 36, 2235-2239 18 GURTLER L., MUHLBACHER A., MICHL U et al Reduction of the diagnostic window with a new combined p24 antigen and human immunodeficiency virus antibody screening assay J.Virology Methods 1998, 75, 27-38 19 SIMON F., MAUCLERE P., ROQUES P et al Identification of a new human immunodeficiency virus type distinct from group M and group O Nature med 1998, 4, 1032-1037 20 COUROUCE AM et le groupe de travail Retrovirus de la Societe Francaise de Transfusion Sanguine Tests de depistage combine des anticorps anti-VIH et de l’antigene p24 Spectra Bio 1999, 18, 38-44 21 GISLEFOSS RE, GRIMSRUD TK, MOKRID L Stability of selected serum proteins after long-term storage in the Janus Serum Bank 18 [VI] (BG) (CZ) (DE) (DK) (EE) (EN) (ES) (FI) (FR) (GR) (HR) (HU) (IT) (LT) (MT) (NL) (NO) (PL) (PT) (RO) (SE) (SI) (SK) (VI) • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • Този продукт съдържа човешки или животински компоненти Бъдете внимателни при работа с него Tento výrobek obsahuje lidské nebo zvířecí komponenty Zacházejte s ním opatrně Dieses Produkt enthält Bestandteile menschlichen oder tierischen Ursprungs Vorsichtig handhaben Dette produkt indeholder humane og animalske komponenter Skal behandles med forsigtighed Käesolev toode sisaldab inim-või loomseid komponente Käsitseda ettevaatlikult This product contains human or animal components Handle with care Este producto contiene componentes humanos o animales Manejar cuidado Tässä tuotteessa on ihmisestä tai eläimistä peräisin olevia osia Käsittele varovasti Ce produit contient des composants d’origine humaine ou animale Manipuler avec pré-caution Αυτό το προϊόν περιέχει ανθρώπινα ή ζωικά στοιχεία Χειριστείτε το με προσοχή Ovaj proizvod sadrži ljudske ili životinjske sastojke Pažljivo rukovati A készítmény emberi vagy állati eredetű ưsszetevőket tartalmaz Ĩvatosan kezelendő Questo prodotto contiene componenti umane o animali Maneggiare cura Šiame produkte yra žmogiškosios arba gyvūninės kilmės sudėtinių dalių Elgtis atsargiai Dan il-prodott fih komponenti umani jew tal-annimali Uża b’attenzjoni Dit product bevat menselijke of dierlijke bestanddelen Breekbaar Dette produktet inneholder humane eller animalske komponenter Håndteres med forsik- tighet Niniejszy produkt zawiera składniki pochodzenia ludzkiego lub zwierzęcego Należy obchodzić się z nim ostrożnie Este medicamento contém componentes de origem humana ou animal Manuseie com cuidado Acest produs conţine materiale de origine umană sau animală Manevraţi-l cu grijă Denna produkt innehåller beståndsdelar från människa eller djur Hantera produkten varsamt Izdelek vsebuje človeške ali živalske sestavine Rokujte previdno Tento výrobok obsahuje ľudské alebo zvieracie zložky Narábajte s ním opatrne Sản phẩm có chứa thành phần có nguồn gốc từ người động vật Cần thao tác cẩn thận 19 [VI] 20 [VI] 21 [VI] (VI) Nguy hiểm Gây da tổn thương mắt nghiêm trọng Có thể gây dị ứng da Sử dụng găng bảo hộ/quần áo bảo hộ/phương tiện bảo vệ mắt/mặt NẾU BỊ VĂNG VÀO MẮT: Rửa cẩn thận với nước nhiều phút Tháo kính tiếp xúc ra, có dễ thực Tiếp tục rửa NẾU NUỐT PHẢI: súc miệng KHƠNG gây nơn NẾU BỊ DÍNH VÀO DA (hoặc tóc): Cởi/bỏ tất quần áo bị nhiễm Rửa da nước/tắm Nếu bị kích ứng da sảy: Tìm y tế chăm sóc/hướng dẫn Thải bỏ vật liệu bên trong/dụng cụ đựng theo quy định địa phương/khu vực/quốc gia/quốc tế 22 [VI] Bio-Rad 3, Boulevard Raymond Poincare 92430 Marnes-la-Coquette - France Tel : +33 (0) 47 95 60 00 Fax : +33 (0) 47 41 91 33 www.bio-rad.com 10/2013 883637 23 [VI] ... nhiễm trùng Genscreen? ?? ULTRA HIV Ag-Ab cho phép phát đồng thời kháng thể kháng nguyên anti-HIV-1 (nhóm M O) anti-HIV-2 (xem thêm phần hạn chế quy trình) NGUYÊN LÝ CỦA QUY TRÌNH Genscreen? ?? ULTRA HIV... trường Kết từ so sánh 85 bảng với xét nghiệm Ag-Ab đánh dấu CE: Genscreen? ?? PLUS HIV Ag-Ab 15 [VI] Genscreen? ?? ULTRA HIV Ag-Ab Kết so với Genscreen? ?? PLUS HIV Ag-Ab Phát sớm (ít lần chảy máu) Phát tương... kết dương tính (theo tiêu chí diễn giải xét nghiệm Genscreen? ?? ULTRA HIV Ag-Ab) cần xác nhận phương pháp phù hợp (với xét nghiệm HIV Ag đặc hiệu Genscreen HIV Ag EIA, sau trung hịa để chứng minh