Nội dung và phương pháp nghiên cứu
Đối tượng nghiên cứu
Virus cúm A/H5N6 đã được phát hiện trong các mẫu dịch ngoáy hầu họng của gà và vịt, cùng với các mẫu môi trường như phân tươi, nước thải, nước uống và chất thải trên lông nhốt gia cầm Những mẫu này được thu thập từ bốn chợ buôn bán gia cầm sống tại tỉnh Lạng Sơn.
Yếu tố nguy cơ nuôi hỗn hợp nhiều loại gia cầm
Yếu tố không vệ sinh khử trùng chuồng trại bằng hóa chất định kỳ
Yếu tố nguy cơ trại chăn nuôi gần chợ buôn bán gia cầm sống
Yếu tố nguy cơ không áp dụng tiêm phòng trong chăn nuôi gia cầm Yếu tố nguy cơ giết mổ gia cầm gần khu vực chăn nuôi
Từ tháng 8/2016 đến tháng 4/2017, nghiên cứu được thực hiện tại 4 chợ gia cầm được chọn ngẫu nhiên, sau khi thống kê toàn bộ chợ có gia cầm sống trong tỉnh Đồng thời, điều tra cũng tập trung vào các ổ dịch xảy ra tại Lạng Sơn từ năm 2014 đến nay.
Xét nghiệm mẫu, Phân tích, xử lý số liệu tại Cơ quan thú y vùng II.
Nội dung nghiên cứu
3.2.1 Tình hình chăn nuôi gia cầm tại tỉnh Lạng Sơn, giai đoạn 2010-2016 3.2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm tại Lạng Sơn, giai đoạn 2011-2017
3.2.3 Nghiên cứu bệnh chứng để xác định các yếu tố nguy cơ làm phát sinh dịch cúm gia cầm
3.2.4 Nghiên cứu lưu hành virus cúm A/H5N6 tại các chợ gia cầm sống
- Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm virus cúm type A trong các mẫu giám sát
- Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm virus cúm subtype H5 trong các mẫu giám sát
- Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm virus cúm subtype N6 trong các mẫu giám sát
- Nghiên cứu lưu hành virus cúm A/H5N6 qua các vòng lấy mẫu
- Nghiên cứu lưu hành virus cúm A/H5N6 tại các chợ lấy mẫu.
Phương pháp nghiên cứu
3.3.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ học hồi cứu
Từ năm 2010 đến 2016, chúng tôi đã thu thập số liệu về tình hình chăn nuôi gia cầm tại Lạng Sơn, bao gồm thông tin về dịch cúm gia cầm và các hộ chăn nuôi có dịch trong giai đoạn 2011-2017.
Theo báo cáo của Chi cục Thú y Lạng Sơn và điều tra tại các hộ chăn nuôi Trong đó:
Gia cầm mắc cúm gia cầm là những đàn gia cầm biểu hiện triệu chứng lâm sàng đặc trưng của bệnh này Các trường hợp mắc bệnh được xác nhận và báo cáo bởi cán bộ thú y địa phương tới Chi cục Thú y.
Hộ có dịch cúm gia cầm là hộ có gia cầm mắc cúm gia cầm
Xã có dịch được xác định là nơi có gia cầm nhiễm bệnh cúm gia cầm, với kết quả xét nghiệm dương tính với virus cúm gia cầm từ phòng thí nghiệm của Cơ quan Thú y vùng II.
Sử dụng các phương pháp tính toán, phân tích dịch tễ học để xử lý, phân tích các số liệu thu thập được
- Sử dụng phương pháp thống kê sinh vật học
Cơ sở dữ liệu dịch bệnh cúm A (H5N6) ở gia cầm được xây dựng từ mã số của các địa phương trong bảng Excel Dựa trên dữ liệu này, chương trình ArcGIS 10.0 được sử dụng để tạo bản đồ dịch tễ học của bệnh cúm A (H5N1) ở gia cầm, phân tích theo không gian, thời gian và chủng loại gia cầm mắc bệnh.
Sử dụng phần mềm phân tích dịch tễ học EPICALS 2000 và chương trình
MS Excel để tổng hợp, phân tích và so sánh các tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ chết với độ tin cậy 95%
- Sử dụng chương trình ArcGIS 10.0 (ESRI Inc, USA) để vẽ bản đồ mô tả tình hình dịch bệnh theo không gian và thời gian
3.3.2 Phương pháp nghiên cứu bệnh chứng (case - control study) để xác định các yếu tố nguy cơ làm phát sinh dịch cúm gia cầm
Để nghiên cứu về bệnh chứng, tôi đã thu thập số liệu dịch bệnh từ năm 2014 đến 2017 tại tỉnh Lạng Sơn, trong đó có sự xuất hiện của dịch cúm.
Tại 6 thôn thuộc 6 xã của 4 huyện Tràng Định, Hữu Lũng, Bình Gia và Chi Lăng, có 21 hộ chăn nuôi Trước tình hình dịch bệnh xảy ra một cách nhỏ lẻ, tôi đã thực hiện điều tra bằng cách bố trí phiếu khảo sát với tỷ lệ 1 hộ bệnh và 4 hộ không bệnh làm đối chứng.
- Các hộ bệnh: tôi lấy toàn bộ 21 hộ có bệnh để phát phiếu điều tra
Tại mỗi xã có dịch, tôi đã tiến hành thống kê toàn bộ các hộ chăn nuôi không bị ảnh hưởng bởi dịch bệnh, được mã hóa từ 1 đến n Sau đó, số hộ chăn nuôi không có dịch trong xã được lựa chọn ngẫu nhiên thông qua phần mềm EPICALS 2000 để phục vụ cho việc điều tra.
Bước 1: Thống kê danh sách hộ chăn nuôi không có dịch cúm mã hóa từ 1-n (hình 3.1)
Hình 3.1 Lấy mẫu ngẫu nhiên bằng phần mềm Epcals 2000
Bước 2: Dùng phần mềm epicals 2000 để lấy mẫu ngẫu nhiên (hình 3.2)
Hình 3.2 Lấy mẫu ngẫu nhiên bằng phần mềm Epcals 2000
Hình 3.3 Lấy mẫu ngẫu nhiên bằng phần mềm Epcals 2000
Như hình minh họa trên (hình 3.3): Thống kê hộ chăn nuôi của xã Hoàng văn thụ là 126 hộ mã hóa từ 1 đến 126
Chọn 8 hộ cần lấy, sau khi phần mềm chạy các hộ cần để điều tra có số thự tự lần lượt là: 29,54,3,60,78,62,117,16.- Trong nghiên cứu này đã tiến hành thu thập 105 phiếu điều tra tại 6 xã thuộc 4 huyện theo tỷ lệ điều tra tại 01 hộ có bệnh và 04 hộ không có bệnh với số phiếu điều tra tại các xã (bảng 3.1)
Bảng 3.1 Số lượng phiếu điều tra trong nghiên cứu bệnh chứng
TT Xã Huyện Hộ có bệnh Hộ không bệnh Tổng
1 Hoàng Văn Thụ Bình Gia 2 8 10
Để thu thập thông tin về các yếu tố nguy cơ gây ra dịch cúm gia cầm gần đây, chính quyền địa phương, đặc biệt là cấp xã, đã triển khai điều tra 12 người tại 6 xã Việc này nhằm đánh giá hiệu quả công tác chỉ đạo và tổ chức thực hiện các biện pháp phòng chống dịch.
Việc điều tra hộ chăn nuôi cần sự hỗ trợ từ trưởng thôn và trưởng ban chăn nuôi thú y, đặc biệt khi không thể gặp trực tiếp hộ chăn nuôi Thông tin bổ sung từ trưởng thôn và thú y xã đóng vai trò quan trọng trong quá trình này.
Phiếu điều tra được thiết kế đơn giản và dễ hiểu, với thời gian phỏng vấn khoảng 30 phút để không gây phiền hà cho người chăn nuôi Quá trình điều tra sẽ diễn ra trong vòng 1 tuần, được hỗ trợ bởi các cán bộ kỹ thuật từ Chi cục Thú y Lạng Sơn.
Phân tích số liệu: Đưa dữ liệu trong phiếu câu hỏi điều tra đã phỏng vấn vào bảng Ms Excel
Để xác định các yếu tố nguy cơ, dữ liệu được nhập trực tiếp vào phần mềm EPICALC 2000 nhằm tính toán tỷ suất chênh OR (odds ratio) và P-value với mức độ tin cậy 95%.
Để xác định các yếu tố nguy cơ chính có khả năng làm lây lan dịch, các yếu tố nguy cơ với P-value < 0,05 đã được đưa vào phần mềm EPICALC 2000 (hình 3.4).
Phương pháp nghiên cứu lưu hành virus cúm A/H5N6 được thực hiện tại bốn chợ gia cầm sống được chọn ngẫu nhiên, đảm bảo mỗi chợ có ít nhất 06 hộ buôn bán gà và 06 hộ buôn bán vịt Kỹ thuật chẩn đoán bệnh cúm gia cầm trong phòng thí nghiệm sử dụng phương pháp PCR (polymerase chain reaction) để phát hiện virus Việc lựa chọn chợ dựa trên thống kê toàn bộ số chợ có gia cầm sống trong tỉnh nhằm đảm bảo tính đại diện cho nghiên cứu.
Mỗi chợ sẽ thực hiện việc lấy 18 mẫu gộp, trong đó 5 mẫu swabs đơn sẽ được gộp lại thành 1 mẫu gộp Cụ thể, 6 mẫu gộp sẽ được lấy từ vịt, 6 mẫu gộp khác cũng từ vịt, và 6 mẫu gộp còn lại sẽ được lấy từ môi trường.
Thời gian từ: tháng 8/2016- 4/2017 (6 vòng lấy mẫu, mỗi tháng 1 vòng) Phương pháp lấy mẫu (theo tài liệu hướng dẫn của Cục thú y)
* Phương pháp lấy mẫu swab hầu họng