Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam.
1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN THỊ MINH NGUYỆT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HYDROCARBON DẦU MỎ CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN TÍA QUANG HỢP TẠO MÀNG SINH HỌC PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI – 2022 VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ …… ….***………… NGUYỄN THỊ MINH NGUYỆT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HYDROCARBON DẦU MỎ CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN TÍA QUANG HỢP TẠO MÀNG SINH HỌC PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 42 01 07 Người hướng dẫn khoa học: TS Lê Thị Nhi Công PGS.TS Đồng Văn Quyền Hà Nội – 2022 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, trước tiên tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới TS Lê Thị Nhi Cơng - Trưởng phịng Cơng nghệ sinh học mơi trường PGS.TS Đồng Văn Quyền, Phó Viện trưởng Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam trực tiếp hướng dẫn, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm qúy báu suốt trình học tập thực đề tài nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn TS Đỗ Thị Liên toàn thể anh, chị cán nhân viên phịng CNSH mơi trường Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, bảo đóng góp lời khun bổ ích suốt q trình học tập nghiên cứu để tơi hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn chân thành đến Ban lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học, Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ tạo điều kiện cho học tập nghiên cứu suốt năm qua Bên cạnh đó, xin chân thành cảm ơn chuyên viên Bùi Thị Hải Hà phụ trách đào tạo Viện Công nghệ sinh học chuyên viên Nguyễn Thị Minh Tâm phịng Đào tạo, Học viện Khoa học Cơng nghệ giúp đỡ tơi hồn thành thủ tục cần thiết suốt trình nghiên cứu sinh bảo vệ luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Quỹ Nghiên cứu cấp Nhà nước (Nafosted) cấp kinh phí cho nhóm nghiên cứu Trong thời gian qua, tơi nhận hỗ trợ nhiệt tình tạo điều kiện thuận lợi từ trường ĐH Sư phạm Hà Nội nơi công tác, với giúp đỡ nhiệt tình đóng góp quý báu bạn bè đồng nghiệp Nhân dịp xin chân thành cảm ơn giúp đỡ q báu Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến người thân gia đình, người bạn thân thiết ln bên cạnh động viên khích lệ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Một lần tơi xin chân thành cảm ơn! Tác giả luận án Nguyễn Thị Minh Nguyệt LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu tơi số kết cộng tác với cộng khác; Các số liệu kết trình bày luận án trung thực, phần công bố tạp chí khoa học chuyên ngành với đồng ý cho phép đồng tác giả; Phần cịn lại chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cảm ơn, tài liệu trích dẫn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Tác giả luận án Nguyễn Thị Minh Nguyệt MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm sinh học vi khuẩn tía quang hợp 1.1.1 Giới thiệu chung vi khuẩn tía quang hợp 1.2.2 Sinh thái học vi khuẩn tía quang hợp .3 1.2.3 Đa dạng vi khuẩn tía quang hợp .4 1.2.4 Đặc điểm máy quang hợp 1.2.5 Dinh dưỡng carbon 12 1.2 Ứng dụng vi khuẩn tía quang hợp để phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 13 1.2.1 Tính độc hydrocarbon dầu mỏ 13 1.2.2 Các phương pháp xử lý ô nhiễm dầu mỏ 18 1.2.3 Ứng dụng vi khuẩn tía quang hợp để phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 22 1.3 Vi sinh vật có khả phân hủy hydrocarbon dầu mỏ tạo màng sinh học 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Vật liệu nghiên cứu .30 2.1.1 Nguyên liệu .30 2.1.2 Hóa chất, mơi trường nuôi cấy 31 2.1.3 Các thiết bị máy móc .32 2.2 Phương pháp nghiên cứu .33 2.2.1 Các phương pháp phân tích vi sinh vật 34 2.2.2 Các phương pháp sinh học phân tử 42 2.2.3 Nhóm phương pháp phân tích hóa học 43 2.2.4 Xử lý thống kê 43 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Kết phân lập tuyển chọn chủng VKTQH khả tạo màng sinh học phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 44 3.1.1 Kết phân lập chủng VKTQH từ mẫu nước bùn ô nhiễm dầu 44 3.1.2 Tuyển chọn chủng VKTQH khả tạo màng sinh học phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 48 3.2 Các đặc điểm sinh học định danh ba chủng DQ41, DD4 FO2 56 3.2.1 Các đặc điểm hình thái 56 3.2.2 Trình tự 16S rRNA định danh ba chủng DQ41, DD4 FO2 .58 3.2.3 Các đặc điểm sinh học 59 3.3 Ảnh hưởng số điều kiện mơi trường đến hình thành màng sinh học chủng VKTQH 63 3.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ 63 3.3.2 Ảnh hưởng pH 64 3.3.3 Ảnh hưởng nồng độ muối (NaCl) .65 3.4 Hiệu suất phân hủy số hydrocarbon dầu mỏ màng sinh học từ chủng VKTQH 66 3.4.1 Hiệu suất phân hủy số hydrocarbon thơm màng sinh học đơn chủng không gắn giá thể chủng VKTQH lựa ch ọn 66 3.4.2 Phân hủy hydrocarbon dầu mỏ màng sinh học từ VKTQH lựa chọn 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 97 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 98 TÀI LIỆU THAM KHẢO 99 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh BA Benzoic acid Bchl Bacteriochlorophyl BLAST Basic local alignment search tool BOD Biochemical oxygen demand BTNMT CB Cinder bead CF Coconut fiber CFU Colony Forming Unit COD Chemical oxygen demand DAD Diode array detector DNA Deoxyribonucleic acid DSMZ Deutch samplung microorganism zentrum GCMS Gas chromatography – Mass spectrometry HPLC High performance – Liquid chromatography MSH OD Optical density PAH Polycyclic aromatic hydrocarbon PCR Polymerase chain reaction PUF Polyurethare foam QCVN rARN Ribosomal ribonucleic acid RNA Ribonucleic acid TCVN VK VKTQH PNSB Purple non-sulfur photosynthetic bacteria PSB Purple sulfur photosynthetic bacteria VSV Tiếng Việt Axit benzoic Cơng cụ tìm kiếm trình tự tương đồng Nhu cầu oxy sinh hóa Bộ tài nguyên mơi trường Sỏi nhẹ Xơ dừa Đơn vị hình thành khuẩn lạc Nhu cầu oxy hoá học Detectơ dãy diode Axit đeoxyribônuclêic Trung tâm lưu trữ giống vi sinh vật – Đức Sắc kí khối phổ Sắc kí lỏng cao áp Màng sinh học Mật độ quang Hydrocacbon thơm đa vòng Chuỗi phản ứng trùng hợp Mút xốp Quy chuẩn Việt Nam Axit ribônuclêic ribôxôm Axit ribônuclêic Tiêu chuẩn Việt Nam Vi khuẩn Vi khuẩn tía quang hợp Vi khuẩn tía quang hợp khơng lưu huỳnh Vi khuẩn tía quang hợp lưu huỳnh Vi sinh vật DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các chi vi khuẩn tía quang hợp Bảng 1.2 Những ảnh hưởng đến sức khỏe người động vật 17 Bảng 1.3 Các chi vi khuẩn có khả phân huỷ hiếu khí hydrocarbon 24 thơm Bảng 1.4 Các chi vi khuẩn có khả phân huỷ hiếu khí hydrocarbon 24 no Bảng 1.5 Các nhóm vi khuẩn có khả phân huỷ kỵ khí hydrocarbon Bảng 2.1 Các loại giá thể 31 Bảng 3.1 Kết phân lập chủng VKTQH từ mẫu mẫu nước bùn ô nhiễm dầu Bảng 3.2 25 45 Khả sinh trưởng phát triển chủng VKTQH phân lập (theo ∆OD800) 48 Bảng 3.3 Khả sinh trưởng phát triển nguồn chất VKTQH 56 Bảng 3.4 So sánh mức độ sử dụng số nguồn C ba chủng DQ41, DD4 FO2 với đại diện loài Rhodopseudomonas Bảng 3.5 Khả phân hủy số hydrocarbon thơm màng sinh học chủng VKTQH tạo thành sau 14 ngày nuôi cấy Bảng 3.6 67 Sự phân hủy thành phần (%) 20 (g) dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy Bảng 3.7 62 90 Sự phân hủy hydrocacbon no (%) dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy MSH đơn chủng đa chủng VKTQH không giá thể 93 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Hình ảnh chụp kính hiển vi huỳnh quang VKTQH Hình 1.2 Sơ đồ vị trí thành phần máy quang hợp sơ cấp VKTQH 10 Hình 1.3 Quang hợp vi khuẩn tía khơng lưu huỳnh 11 Hình 2.1 Hình ảnh loại giá thể 31 Hình 2.2 Sơ đồ bước thí nghiệm thực luận án 33 Hình 2.3 Sơ đồ xử lý sơ loại giá thể 39 Hình 2.4 Chi tiết mơ hình xử lý hydrocarbon dầu mỏ Hình 2.5 Các giai đoạn mơ hình xử lý hydrocarbon dầu mỏ 41 Hình 3.1 Mẫu bùn ô nhiễm dầu trước sau làm giàu 44 Hình 3.2 Một số khuẩn lạc VKTQH phân lập từ mẫu làm giàu Hình 3.3 Khả tạo MSH dựa khả bắt giữ tím tinh thể MSH chủng VKTQH tạo thành Hình 3.4 45 50 Khả tạo màng sinh học chủng VKTQH phân hủy hydrocarbon dầu mỏ Acinetobacter calcoaceticus P23 Hình 3.5 40 50 Khả sinh trưởng 10 chủng VKTQH sau ngày nuôi cấy nồng độ dầu diesel khác 51 Hình 3.6 Dịch ni cấy 10 chủng VKTQH 10% dầu diesel sau ngày nuôi cấy 51 Hình 3.7 Khả sinh trưởng 10 chủng VKTQH nồng độ toluene khác sau ngày ni cấy 52 Hình 3.8 Dịch nuôi cấy 10 chủng VKTQH 250 ppm toluene sau ngày nuôi cấy 52 Hình 3.9 Khả sinh trưởng 10 chủng VKTQH sau ngày nuôi cấy nồng độ phenol khác 53 Hình 3.10 Dịch ni cấy 10 chủng VKTQH 150 ppm phenol sau ngày 53 Hình 3.11 Khả sinh trưởng 10 chủng VKTQH nồng độ naphthalene khác sau ngày ni cấy Hình 3.12 Dịch nuôi cấy 10 chủng VKTQH nồng độ 200 ppm 54 naphthalene sau ngày nuôi cấy 54 Hình 3.13 Khả sinh trưởng chủng VKTQH nồng độ pyrene khác sau ngày nuôi cấy 55 Hình 3.14 Dịch ni cấy 10 chủng VKTQH nồng độ 200 ppm pyrene sau ngày nuôi cấy 55 Hình 3.15 Hình dạng khuẩn lạc hình dạng tế bào kính hiển vi điện tử chủng DD4, DQ41, FO2 57 Hình 3.16 Cây phát sinh chủng loại chủng DD4, DQ41, FO2 58 Hình 3.17 Phổ hấp phụ dịch huyền phù tế bào chủng DD4 (A), DQ41 (B), FO2 (C) 60 Hình 3.18 Khả tạo sắc tố quang hợp VKTQH hai điều kiện (A) kỵ khí, sáng (B) hiếu khí, tối 61 Hình 3.19 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả hình thành màng sinh học chủng VKTQH 64 Hình 3.20 Ảnh hưởng pH tới khả hình thành màng sinh học chủng VKTQH 64 Hình 3.21 Ảnh hưởng nồng độ NaCl tới khả hình thành màng sinh học chủng VKTQH 66 Hình 3.22 Thí nghiệm đánh giá đối kháng lẫn chủng VKTQH lựa chọn 70 Hình 3.23 Mật độ tế bào chủng DD4, DQ41 FO2 màng sinh học VKTQH sau ngày ni cấy 71 Hình 3.24 Hình ảnh hiển vi điện tử quét (SEM) giá thể trước sau VKTQH bám dính 72 Hình 3.25 Thời gian phân hủy dầu diesel mật độ tế bào chủng VKTQH màng sinh học đơn đa chủng không giá thể 74 Hình 3.26 Khả phân hủy dầu diesel mật độ tế bào chủng VKTQH DD4, DQ41 FO2 MSH đa chủng giá thể 75 Hình 3.27 Hiệu suất phân hủy thành phần n-alkane (từ C8 đến C16) có dầu diesel màng sinh học đa chủng VKTQH 174 175 W.E Levison, K.E Stormo, H.L Tao, R.L Crawford, Hazardous waste cleanup and treatment with encapsulated or entrapped microorganisms, Biological Degradation and Bioremediation of Toxic Chemicals, Chapman & Hall, London, 1994, 455–469 176 X Wang, X Wang, M Liu, Y Bu, J Zhang, J Chen & J Zhao, Adsorption– synergic biodegradation of diesel oil in synthetic seawater by acclimated strains immobilized on multifunctional materials, Mar Pollut Bull., 2015, 92 (1-2), 195– 200 177 Y Chen, B Yu, J Lin, R Naidu & Z Chen, Simultaneous adsorption and biodegradation (SAB) of diesel oil using immobilized Acinetobacter venetianus on porous material, Chem Eng J., 2016, 289, 463–470 178 J Cheng, H Dong, H Zhang, L Yuan, H Li, L Yue, J Hua, J Zhoua, Improving CH4 production and energy conversion from CO2 and H2 feedstock gases with mixed methanogenic community over Fe nanoparticles, Bioresour Technol., 2020, 314, 123799 179 P Chandran, N Das, Degradation of diesel oil by immobilized Candida tropicalis and biofilm formed on gravels, Biodegradation, 2011, 22 (6), 1181-1189 180 P.W.G Liu, J.W Liou, Y.T Li, W.L Su, C.H Chen, International Biodeterioration & Biodegradation The optimal combination of entrapped bacteria for diesel remediation in seawater, Int Biodeterior Biodegrad., 2015, 102, 383- 391 181 K.L Simons, P.J Shepparda, E.M Adetutu, K Kadali, A.L Juhasz, M Manefield, 182 P.M Sarma, B Lal, A.S Ballae, Carrier mounted bacterial consortium facilitates oil remediation in the marine environment, Bioresour Technol., 2013, 134, 107- 116 183 Y Zhang, W Gao, F Lin, B Han, C He, Q Li, X Gao, Z Cui, C Sun & L Zheng, Study on immobilization of marine oil-degrading bacteria by carrier of algae materials, World J Microbiol Biotechnol., 2018, 34 (6), 1-8 184 Ł Ławniczakl, E Kaczorek, A Olszanowski, The influence of cell immobilization by biofilm forming on the biodegradation capabilities of bacterial consortia, World J Microbiol Biotechnol., 2011, 27 (5), 1183–1188 185 186 S.N Nunal, S.M.S Santander-de Leon, E Bacolod, J Koyama, S Uno, M Hidaka, 187 T Yoshikawa & H Maeda, Bioremediation of heavily oil-polluted seawater by a bacterial consortium immobilized in cocopeat and rice hull powder, Biocontrol Sciences, 2014, 19 (1), 11–22 188 J Xue, Y Wu, Z Liu, M Li, X Sun, H Wang & B Liu, Characteristic Assessment of Diesel-degrading Bacteria Immobilized on Natural Organic Carriers in Marine Environment: the Degradation Activity and Nutrient, Scientific Reports, 2017, (1), 1-9 189 G.E Wright & M.T Madigan, Photocatabolism of aromatic compounds by the phototrophic purple bacterium Rhodomicrobiumvannielii, Appl Environ Microbiol., 1991, 57 (7), 2069–2073 190 S Lamichhane, K.C Bal Krishna, R Sarukkalige, Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) removal by sorption: a review, Chemosphere, 2016, 148, 336353 191 R Farber, I Dabush-Busheri, G Chaniel, S Rozenfeld, E Bormashenko, V Multanen, R Cahan, Biofilm grown on wood waste pretreated with cold lowpressure nitrogen plasma: Utilization for toluene remediation, Int Biodeterior Biodegrada., 2019, 139, 62-69 192 S Manohar, C.K Kim, T.B Karegoudar, Enhanced degradation of naphthalene by immobilization of Pseudomonas sp strain NGK1 in polyurethane foam, Appl Microbiol Biotechnol., 2001, 55 (3), 311-316 193 X.Q Tao, Q.N Lu, J.P Liu, T Li, L.N Yang, Rapid degradation of Phenanthrene by using Sphingomonas sp GY2B immobilized in calcium alginate gel beads, Int J Environ Res Public Health, 2009, (9), 2470-2480 194 R Huang, W Tian, Q Liu, H Yu, X Jin, Y Zhao, Y Zhou, G Feng, Enhanced biodegradation of pyrene and indeno (1,2,3-cd) pyrene using bacteria immobilized in cinder beads in estuarine wetlands, Mar Pollut Bull., 2016, 102 (1), 128-133 195 H Zhang, J Tang, L Wang, J Liu, R.G Gurav, K Sun, A novel bioremediation strategy for petroleum hydrocarbon pollutants using salt tolerant Corynebacterium variabile HRJ4 and biochar, J Environ Sci., 2016, 47, 7-13 196 Lê Thị Nhi Công, Cung Thị Ngọc Mai, Đỗ Văn Tuân, Đồng Văn Quyền, Khả phân hủy hydrocarbon thơm màng sinh học từ vi sinh vật gắn giá thể 197 198 cellulose hệ thử nghiệm dung tích 50 lít, Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 2016, 14 (4), 796-775 199 M Lin, Y Liu, W Chen, H Wang, X Hu, Use of bacteria-immobilized cotton fiber to absorb and degrade crude oil, Int Biodeterior Biodegrad., 2014, 88, 8-12 200 W.F.M Röling, I.M Head, S.R Later, The microbiology of hydrocarbon degradation in subsurface petroleum reservoirs: perspectives and prospects, Res Microbiol., 2003, 154 (5), 321-328 201 A.R Gentili, M.A Cubitto, M Ferrero, M.S Rodriguéz, Bioremediation of crude oil polluted seawater by a hydrocarbon-degrading bacterial strain immobilized on chitin and chitosan flakes, Int Biodeterior Biodegrad., 2006, 57 (4), 222-228 202 W Nopcharoenkul, P Netsakulnee, O Pinyakong, Diesel oil removal by immobilized Pseudoxanthomonas sp RN402, Biodegradation, 2013, 24,387–397 203 M Hazaimeh, S.A Mutalib, P.S Abdullah, W.K Kee, S Surif, Enhanced crude oil hydrocarbon degradation by self-immobilized bacterial consortium culture on sawdust and oil palm empty fruit bunch, Ann Microbiol., 2014, 64 (4), 1769-1777 204 E.A Podorozhko, V.I Lozinsky, I.B Ivshina, M.S Kuyukina, A.B Krivorutchko, 205 J.C Philp, et al., Hydrophobised sawdust as a carrier for immobilisation of the hydrocarbon-oxidizing bacterium Rhodococcus ruber, Bioresour Technol., 2008, 99 (6), 2001-2008 206 S.J Varjani, D.P Rana, A.K Jain, S Bateja, V.N Upasani, Synergistic ex-situ biodegradation of crude oil by halotolerant bacterial consortium of indigenous strains isolated from on shore sitesof Gujarat, India, Int Biodeterior Biodegrad., 2015, 103, 116-124 207 A.S Roy, R Baruah, M Borah, A.K Singh, H.P.D Boruah, N Saikia, M Deka, N Dutta, T.C Bora, Bioremediation potential of native hydrocarbon degrading bacterial strains in crude oil contaminated soil under microcosm study, Int Biodeterior Biodegrad., 2014, 94, 79-89 208 209 210 PHỤ LỤC 211 Phụ lục Khả tạo màng sinh học chủng dựa bắt giữ tím tinh thể màng sinh học 212 213 214 215 216 217 15 218 Phụ lục 2: Sắc kí đồ hàm lượng toluene lại mẫu dịch nuôi cấy sau 14 ngày 219 220 221 222 223 224 225 Phụ lục 3: Sắc kí đồ hàm lượng naphthalene cịn lại mẫu dịch ni cấy sau 14 ngày 226 227 228 229 230 231 232 Phụ lục 4: Sắc kí đồ hàm lượng pyrene cịn lại mẫu dịch ni cấy sau 14 ngày 233 234 235 15 236 Phụ lục 5: Sự phân hủy hydrocarbon no (%) dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy màng sinh học đơn chủng đa chủng VKTQH không giá thể 237 238 DD4 239 DQ4 240 FO2 243 244 84.68 nC10 ±1.11 249 250 84.68 nC11 ±1.26 255 256 84.68 nC12 ±2.37 261 262 84.67 nC13 ±1.23 267 268 84.64 nC14 ±1.18 273 274 84.08 nC15 ±1.55 279 280 82.60 nC16 ±1.99 285 286 80.89 nC17 ±1.76 291 292 80.29 nC18 ±1.11 297 298 79.58 nC19 ±1.91 303 304 79.26 nC20 ±1.35 309 310 78.88 nC21 ±1.12 315 316 78.64 nC22 ±1.29 321 322 78.09 nC23 ±1.12 327 328 78.04 nC24 ±1.28 333 334 76.99 nC25 ±1.71 339 340 77.15 ±1.16 245 84.79 246 ±1.19 251 84.79 252 ±1.13 257 84.79 258 ±2.69 263 84.65 264 ±1.54 269 83.71 270 ±1.23 275 81.74 276 ±1.42 281 81.07 282 ±1.83 287 80.29 288 ±1.64 293 80.30 294 ±1.25 299 79.87 300 ±1.31 305 79.68 306 ±1.28 311 79.45 312 ±1.67 317 79.26 318 ±1.32 323 78.73 324 ±1.87 329 78.70 330 ±1.91 335 77.74 336 ±1.93 341 77.90 342 ±1.29 241 MSH đa 242 K chủng không giá thể 85.15± 1.27 247 86.95 85.15± 1.72 253 86.95 85.15± 1.91 259 86.95 85.14± 1.63 265 85.98 85.12± 1.51 271 83.55 84.45± 1.17 277 79.82 83.03± 1.11 283 77.87 81.32± 1.55 289 76.08 80.66± 1.68 295 75.55 79.91± 1.19 301 75.59 79.61± 1.73 307 75.98 79.30± 1.88 313 77.37 79.09± 1.11 319 78.95 78.53± 1.65 325 80.72 78.51± 1.76 331 82.76 77.49± 1.11 337 83.98 77.80± 1.98 343 85.37 ±1.13 ±1.58 ±1.48 ±1.26 ±1.53 ±1.26 ±1.29 ±1.48 ±1.24 ±1.81 ±1.14 ±1.13 ±1.13 ±1.13 ±1.26 ±1.26 ±1.84 248 0.33±0.0 02 254 0.26±0.0 08 260 0.23±0.0 04 266 0.55±0.0 03 272 73±0.32 278 84±0.53 284 05±0.15 290 21±0.18 296 08±0.17 302 08±0.05 308 86±0.06 314 07±0.09 320 18±0.09 326 12±0.07 332 17±0.03 338 42±0.01 344 0.97±0.0 02 15 nC26 345 346 76.93 nC27 ±1.93 351 352 78.20 nC28 ±1.32 357 358 78.52 nC29 ±1.56 363 364 79.82 nC30 ±1.24 369 370 80.62 nC31 ±1.98 375 376 81.49 nC32 ±1.35 381 382 82.48 nC33 ±1.88 387 388 83.36 nC34 ±1.11 393 394 83.70 nC35 ±1.56 347 77.64 348 ±1.76 353 78.82 354 ±1.24 359 79.08 360 ±1.98 365 80.25 366 ±1.28 371 80.95 372 ±1.57 377 81.73 378 ±1.28 383 82.70 384 ±1.28 389 83.45 390 ±1.2 395 83.81 396 ±1.35 77.57± 1.51 349 86.03 78.86± 1.89 355 86.49 79.11± 1.11 361 86.66 80.34± 2.03 367 86.78 81.15± 1.82 373 86.82 81.99± 1.11 379 86.84 83.05± 1.32 385 86.90 83.76 ±1.5 391 86.92 84.13± 1.57 397 86.90 ±1.39 ±1.38 ±1.58 ±1.84 ±1.38 ±1.89 ±1.69 ±1.26 ±1.82 350 0.99±0.0 03 356 06±0.02 362 02±0.06 368 08±0.02 374 0.63±0.0 09 380 1.01±0.0 07 386 1.05±0.0 01 392 0.51±0.0 01 398 1.15±0.0 01 399 400 401 DD4 402 DQ4 403 FO2 404 MSH đa 407 84.11 408 84.21 409 84.52±1 410 86.91 nC36 ±1.11 ±1.28 87 ±1.38 412 413 84.26 414 84.36 415 84.66±1 416 86.93 nC37 ±1.35 ±1.24 32 ±1.84 418 406 419 84.38 420 84.46 421 84.79±1 422 86.94 nC38 ±1.11 ±1.33 81 ±1.69 424 425 84.68 426 84.79 427 85.15±1 428 86.95 nC39 ±1.81 ±1.11 35 ±1.04 430 431 84.68 432 84.79 433 85.15±1 434 86.95 nC40 ±1.32 ±1.29 54 ±1.26 436 437 84.68 438 84.79 439 85.15±1 440 86.95 nC41 ±1.91 ±1.76 77 ±1.32 442 443 84.68 444 84.79 445 85.15±1 446 86.95 nC42 ±2.39 ±2.11 24 ±1.13 448 449 84.68 450 84.79 451 85.15±1 452 86.95 nC43 ±1.95 ±1.89 71 ±1.93 454 455 84.68 456 84.79 457 85.15±1 458 86.95 nC44 ±1.16 ±1.92 83 ±1.13 460 461 84.68 462 84.79 463 85.15±1 464 86.95 nC45 ±1.26 ±2.35 59 ±1.94 466 467 84.67 468 84.78 469 85.14±1 470 86.94 Pris ±2.03 ±2.31 95 ±1.56 P r/Phy 473 84.67 474 84.77 475 85.14±1 476 86.92 ±1.11 ±1.27 96 ±1.13 P 479 84.68 480 84.79 481 85.15±1 482 86.95 ±1.73 ±1.48 74 ±1.13 P hy/nC18 485 84.68 486 84.79 487 85.15±1 488 86.95 ±1.62 ±1.86 97 ±1.13 490 C 491 84.67 492 84.78 493 85.14±1 494 86.92 PI-1 (C20-C28) ±1.11 ±2.39 36 ±1.13 496 C 497 84.67 498 84.78 499 85.14±1 500 86.91 PI-2 (C22-C30) ±1.35 ±1.63 11 ±1.69 502 C 503 84.67 504 84.78 505 85.14±1 506 86.92 PI-3 (C24-C32) ±2.28 ±2.11 93 ±1.38 472 478 r/nC17 484 405 K chủng không giá thể 411 2.03±0.0 01 417 0.23±0.0 02 423 0.87±0.0 02 429 435 441 447 453 459 465 471 0.02±0.0 01 477 0.05±0.0 02 483 0.01±0.0 01 489 0.00 495 0.03±0.0 01 501 0.03±0.0 01 507 0.03±0.0 02 508 509 84.68 510 84.78 511 85.14±1 512 86.94 Phy ±1.11 ±1.32 86 ±1.13 513 0.01±0.0 01 514 Phụ lục 6: Sự phân hủy hydrocarbon no (%) dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy màng sinh học đa chủng VKTQH giá thể 515 522 n C10 529 n C11 536 n C12 543 n C13 550 n C14 557 n C15 564 n C16 571 n C17 578 n C18 585 n C19 592 n C20 599 n C21 606 n C22 613 n C23 620 n C24 627 n C25 634 n C26 516 MSH 517 Sỏi đa chủng sỏi nhẹ nhẹ 523 89.71± 524 1.03± 1.86 530 89.71± 1.84 537 89.71± 1.73 544 89.35± 1.11 551 87.57± 1.13 558 84.32± 1.15 565 81.76± 1.44 572 79.29± 1.68 579 78.02± 1.94 586 77.48± 1.26 593 77.25± 1.21 600 79.16± 1.32 607 80.70± 1.38 614 82.89± 1.59 621 85.40± 1.53 628 86.81± 1.13 635 88.14± 1.13 518 MSH đa 519 Xơ chủng xơ dừa 525 0.02 531 0.69± 532 0.06 538 0.58± 539 0.009 545 0.55± 546 0.004 552 5.73± 553 0.21 559 16.84 560 ±0.87 566 20.55 567 ±0.98 573 24.21 574 ±1.01 580 23.28 581 ±0.75 587 24.86 588 ±0.19 594 24.86 595 ±0.28 601 25.75 602 ±0.61 608 25.88 609 ±0.98 615 27.92 616 ±0.18 622 27.61 623 ±0.52 629 31.24 630 ±0.97 636 30.27 ±0.78 637 dừa 92.38 ±1.92 526 7.99 92.38 ±1.39 533 8.97 92.38 ±2.31 540 8.57 92.19 ±1.98 547 8.91 90.99 ±2.33 554 7.99 88.79 ±1.13 561 7.75 88.18 ±1.13 568 7.15 87.50 ±1.13 575 6.95 87.6± 1.26 582 6.92 87.33 ±1.28 589 6.65 87.22 ±1.27 596 6.05 86.62 ±1.82 603 6.25 86.86 ±1.38 610 5.78 86.39 ±1.63 617 5.42 86.43 ±1.45 624 18.9 85.59 ±1.81 631 18.9 85.75 ±1.48 638 18.9 ±0.03 ±1.65 ±2.59 ±0.32 ±0.7 ±0.23 ±0.34 ±0.09 ±0.07 ±0.23 ±0.43 ±0.22 ±0.23 ±0.26 5±0.23 5±0.55 5±0.12 520 MS 521 H đa chủng mút xốp 527 98.9 528 5±1.86 534 99.0 535 5±1.76 541 98.5 542 1±2.81 548 98.0 549 5±2.34 555 96.9 556 5±1.91 562 96.5 563 1±1.39 569 95.9 570 5±1.26 576 85.5 577 6±1.89 583 85.5 584 0±1.13 590 84.9 591 5±1.13 597 84.1 598 9±1.13 604 84.1 605 5±1.98 611 84.1 612 9±1.38 618 84.9 619 5±1.78 625 84.1 626 5±1.54 632 79.9 633 1±1.59 639 78.6 640 5±1.75 Mút xốp 1.03 ±0.01 0.69± 0.003 0.58± 0.003 0.55± 0.001 5.73 ±0.13 6.84 ±0.78 6.55 ±0.12 4.21 ±0.11 3.28 ±0.13 4.86 ±0.24 4.83 ±0.18 5.75 ±0.33 5.88 ±0.19 2.92 ±0.02 2.61 ±0.09 3.24 ±0.03 3.27 ±0.08 641 n C27 648 n C28 655 n C29 662 n C30 669 n C31 676 n C32 683 n C33 690 n C34 697 n C35 642 88.93± 1.13 649 89.27± 1.38 656 89.44± 1.26 663 89.54± 1.91 670 89.57± 1.48 677 89.58± 1.38 684 89.65± 1.13 691 89.68± 1.13 698 89.64± 1.13 643 30.96 644 ±0.27 650 25.68 651 ±0.56 657 25.29 658 ±0.67 664 19.84 665 ±0.23 671 17.33 672 ±0.18 678 14.04 679 ±0.25 685 9.65± 686 0.11 692 6.50± 693 0.19 699 4.55± 0.02 700 85.57 ±1.13 645 18.9 86.70 ±1.13 652 18.9 86.93 ±1.13 659 18.9 88.08 ±1.26 666 18.9 88.72 ±1.84 673 18.9 89.46 ±1.38 680 18.9 90.46 ±1.93 687 18.9 91.11 ±1.87 694 18.9 91.50 ±2.32 701 18.9 5±0.18 5±0.11 5±0.24 5±0.63 5±0.58 5±0.42 5±0.31 5±0.28 5±0.11 646 80.7 647 5±1.38 653 74.5 654 5±1.87 660 77.5 661 5±1.23 667 74.9 668 5±1.82 674 74.1 675 8±1.19 681 74.0 682 5±1.84 688 73.9 689 5±1.5 695 73.8 696 7±1.84 702 73.9 703 1±1.3 3.96 ±0.06 2.68 ±0.01 2.29 ±0.04 1.84 ±0.09 1.33 ±0.03 1.04± 0.008 2.65± 0.003 2.50± 0.002 4.55± 0.003 704 705 712 706 MSH 707 Sỏi 710 MS 711 Mút đa chủng sỏi nhẹ nhẹ chủng xơ dừa dừa H đa chủng mút xốp xốp 713 89.66± 714 2.88± 715 91.75 716 18.9 717 73.2 718 2.88± 0.003 ±1.26 5±0.27 5±1.26 0.002 721 2.23± 722 92.00 723 18.9 724 73.0 725 2.26± 0.07 ±2.32 5±0.18 9±1.3 0.001 728 1.87± 729 92.08 730 18.9 731 73.0 732 1.57± 0.04 ±2.32 5±0.29 5±1.13 0.003 735 736 92.38 737 18.9 738 73.0 739 ±1.84 5±0.31 2±1.13 743 92.38 744 18.9 745 72.9 ±1.69 5±0.26 5±1.13 750 92.38 751 18.9 752 72.8 ±2.28 5±0.63 9±1.04 757 92.38 758 18.9 759 72.2 ±1.93 5±0.57 5±1.78 764 92.38 765 766 45.4 nC36 2.32 719 720 89.68± nC37 1.89 726 727 89.67± nC38 2.18 733 734 89.71± nC39 2.32 740 741 89.71± nC40 1.04 747 748 89.71± nC41 2.32 754 755 89.71± nC42 1.69 761 762 89.71± nC43 2.08 768 769 89.71± nC44 1.04 775 776 89.71± nC45 1.69 782 783 89.70± Pris 1.38 789 P r/Phy 790 89.68± P r/nC17 797 89.71± P 804 89.71± 796 803 1.04 1.69 hy/nC18 1.38 810 C 811 89.68± 2.32 PI-1 (C20-C28) 817 C 818 89.67± 1.04 PI-2 (C22-C30) 824 C 825 89.68± 1.69 PI-3 (C24-C32) 742 749 756 0 763 708 MSH đa 709 Xơ ±2.38 770 771 92.38 778 92.38 772 785 92.37 0.001 ±2.37 791 0.05± 792 92.37 0.001 ±1.38 798 0.01± 799 92.38 0.001 ±1.69 805 0.00 806 92.38 779 813 92.37 0.001 ±2.19 819 0.03± 820 92.37 0.001 ±2.02 826 0.03± 827 92.37 0.001 ±2.02 767 773 43.2 774 780 40.6 781 7±0.87 786 793 800 807 ±1.68 812 0.03± 760 1±0.98 ±1.97 784 0.02± 753 2±1.01 ±1.76 777 746 787 37.9 788 0.02± 2±1.01 0.001 794 36.0 795 0.05± 1±0.82 0.002 801 35.3 802 0.01± 2±0.96 0.001 808 34.4 809 0.00 8±0.78 814 821 828 815 32.3 816 0.03± 8±0.81 0.001 822 32.3 823 0.03± 5±0.45 0.002 829 32.2 830 0.03± 1±0.59 0.001 831 832 89.70± Phy 1.38 838 833 0.01± 834 92.38 0.001 ±1.98 835 836 37.0 837 0.01± 3±0.67 0.001 ... Tiêu chuẩn Vi? ??t Nam Vi khuẩn Vi khuẩn tía quang hợp Vi khuẩn tía quang hợp khơng lưu huỳnh Vi khuẩn tía quang hợp lưu huỳnh Vi sinh vật DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các chi vi khuẩn tía quang hợp ... 1.1 Một số đặc điểm sinh học vi khuẩn tía quang hợp 1.1.1 Giới thiệu chung vi khuẩn tía quang hợp 1.2.2 Sinh thái học vi khuẩn tía quang hợp .3 1.2.3 Đa dạng vi khuẩn tía quang hợp. .. hydrocarbon dầu mỏ chỗ (in situ) bên (ex situ) Luận án ? ?Nghiên cứu khả phân hủy hydrocarbon dầu mỏ số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập Vi? ?̣t Nam? ?? thực với mục tiêu nội dung nghiên