qcvn-4-7-chất-chống-tạo-bọt

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM QCVN 4-7 : 2010/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM -YÊU CẦU KỸ THUẬT ĐỐI VỚI CHẤT CHỐNG TẠO BỌT National technical regulation on Food Additive - Antifoaming Agent HÀ NỘI - 2010 Lời nói đầu QCVN 4-7:2010/BYT Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia Phụ gia thực phẩm chất hỗ trợ chế biến biên soạn, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt ban hành theo Thơng tư số 24/2010/TT-BYT ngày 20 tháng năm 2010 Bộ trưởng Bộ Y tế QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT CHỐNG TẠO BỌT National technical regulation on food additive – Antifoaming Agent I QUY ĐỊNH CHUNG Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau gọi tắt Quy chuẩn) quy định yêu cầu kỹ thuật quản lý chất lượng, vệ sinh an toàn chất chống tạo bọt sử dụng với mục đích làm phụ gia thực phẩm Đối tƣợng áp dụng Quy chuẩn áp dụng đối với: 2.1 Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất chống tạo bọt làm phụ gia thực phẩm (sau gọi tắt tổ chức, cá nhân) 2.2 Cơ quan quản lý nhà nước có liên quan Giải thích từ ngữ chữ viết tắt: 3.1 Các chất chống tạo bọt: phụ gia thực phẩm sử dụng với mục đích ngăn ngừa giảm thiểu tạo bọt cho sản phẩm thực phẩm 3.2 JECFA monograph - Vol (JECFA monographs - Combined compendium of food addiditive specifications; Joint FAO/WHO expert committee on food additives; Volume - Analytical methods, test procedures and laboratory solutions used by and referenced in the food additive specifications; FAO, 2006): Các yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm, Tập Các phương pháp phân tích, quy trình thử nghiệm, dung dịch thử nghiệm sử dụng (hoặc tham chiếu) yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm; JECFA biên soạn; FAO ban hành năm 2006 3.3 Mã số C.A.S (Chemical Abstracts Service): Mã số đăng ký hóa chất Hiệp hội Hóa chất Hoa Kỳ 3.4 TS (test solution): Dung dịch thuốc thử 3.5 ADI (Acceptable daily intake): Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận 3.6 INS (International numbering system): Hệ thống mã số quốc tế phụ gia thực phẩm QCVN 4-7 : 2010/BYT II YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƢƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử chất chống tạo bọt quy định phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn sau: 1.1 Phụ lục 1: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử propylen glycol 1.2 Phụ lục 2: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử polyethylen glycol 1.3 Phụ lục 3: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử polyoxyethylen (20) sorbitan monooleat Các yêu cầu kỹ thuật quy định Quy chuẩn thử theo JECFA monograph - Vol 4, ngoại trừ số phép thử riêng mô tả phụ lục Các phương pháp thử hướng dẫn Quy chuẩn khơng bắt buộc phải áp dụng, sử dụng phương pháp thử khác tương đương Lấy mẫu theo hướng dẫn Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng năm 2009 Bộ Khoa học Công nghệ hướng dẫn kiểm tra nhà nước chất lượng hàng hóa lưu thơng thị trường quy định khác pháp luật có liên quan III YÊU CẦU QUẢN LÝ Công bố hợp quy 1.1 Các chất chống tạo bọt phải công bố phù hợp với quy định Quy chuẩn 1.2 Phương thức, trình tự, thủ tục cơng bố hợp quy thực theo Quy định chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng năm 2007 Bộ trưởng Bộ Khoa học Công nghệ quy định pháp luật Kiểm tra chất chống tạo bọt Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an toàn chất tạo bọt phải thực theo quy định pháp luật IV TRÁCH NHIỆM CỦA TỔ CHỨC, CÁ NHÂN Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với quy định kỹ thuật Quy chuẩn này, đăng ký cơng bố hợp quy Cục An tồn vệ sinh thực phẩm bảo đảm chất lượng, vệ sinh an tồn theo nội dung cơng bố QCVN 4-7 : 2010/BYT Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất chống tạo bọt sau hoàn tất đăng ký công bố hợp quy bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với quy định pháp luật V TỔ CHỨC THỰC HIỆN Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với quan chức có liên quan hướng dẫn triển khai tổ chức việc thực Quy chuẩn Căn vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn Trường hợp hướng dẫn quốc tế phương pháp thử quy định pháp luật viện dẫn Quy chuẩn sửa đổi, bổ sung thay áp dụng theo văn QCVN 4-7 : 2010/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI PROPYLEN GLYCOL Tên khác, số Propanediol, methyl glycol, INS 1520 ADI= 0-25 mg/kg thể trọng Định nghĩa Tên hóa học Propan-1,2-diol, 1,2-dihydroxypropan Mã số C.A.S 57-55-6 Công thức phân tử C3H8O2 Công thức cấu tạo OH H3C OH Khối lượng phân tử 76.10 Cảm quan Chất lỏng sánh, trong, không màu, hút ẩm Chức Chống tạo bọt, dung mơi, chất làm bóng, chất làm ẩm u cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Tan nước, ethanol aceton Phổ hồng ngoại Phổ hồng ngoại mẫu phân tán kali bromid tương ứng với phổ hồng ngoại kèm theo quy chuẩn 5.2 Độ tinh khiết Nước Không 1,0% (Phương pháp Karl Fischer) Khoảng chưng cất Dung dịch với hàm lượng 99% (tt/tt) có khoảng chưng cất 185-189 C Tỷ trọng d (20,20) = 1,035 – 1,040 Tro sulfat Không 0,07 % (Thử g mẫu) Acid tự Đạt u cầu (mơ tả phần phương pháp thử) Chì Không 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C3H8O2 Không thấp 99,5 % tính theo chế phẩm khan QCVN 4-7 : 2010/BYT Phƣơng pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Nước (Phương pháp Karl Fischer) Acid tự Thêm đến giọt dung dịch đỏ phenol (TS) vào 50 ml nước, thêm dung dịch natri hydroxyd 0,1 N dung dịch có màu đỏ bền vững 30 giây Thêm 50 g mẫu thử cân xác vào dung dịch Chuẩn độ dung dịch natri hydroxyd 0,01 N dung dịch trở lại màu đỏ ban đầu bền vững 15 giây Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,01 N sử dụng để chuẩn độ cho 50,0 g mẫu thử Khơng q 1,67 ml Chì - Thử theo hướng dẫn JECFA monograph - Vol.4 - Sử dụng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp để xác định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ) 6.2 Định lượng Bơm 10 µL mẫu thử vào hệ đo sắc kí khí phù hợp, trang bị detector đo độ dẫn nhiệt cột tách làm thép không rỉ, m x 1/4 in, nhồi Carbowax 20 M 4% Chromosorb T 40/60 mesh, vật liệu tương đương Sử dụng khí mang heli với tốc độ 75 ml/phút Nhiệt độ cổng injector 240 C, nhiệt độ cột từ 120 đến 200 C, đặt chương trình tăng nhiệt với tốc độ C/phút, nhiệt độ block 250 C Trong điều kiện trên, thời gian lưu propylen glycol khoảng 5,7 phút thời gian lưu đồng phân dipropylen glycol 8,2; 9,0 10,2 phút Đo diện tích pic, tính phần trăm diện tích pic propylen glycol tổng diện tích pic quy phần trăm khối lượng QCVN 4-7 : 2010/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI POLYETHYLEN GLYCOL Tên khác, số PEG, Macrogol; INS 1521 ADI= - 10 mg/kg thể trọng Định nghĩa Là polymer cộng hợp ethylen oxyd nước, ký hiệu số tương ứng với trọng lượng phân tử Tên hóa học alpha-Hydro-omega-hydroxypoly (oxy-1,2-ethandiol) Mã số C.A.S 25322-68-3 Cơng thức phân tử (C2H4O)n+1H2O Công thức cấu tạo HOCH2 - (CH2 - O - CH2)n - CH2OH Khối lượng phân tử 200 Cảm quan Các PEG có khối lượng phân tử nhỏ 700 thường chất lỏng suốt đến đục, không màu, hút ẩm nhẹ có mùi nhẹ Các PEG có khối lượng phân tử khoảng từ 700 đến 900 chất nửa rắn Các PEG có khối lượng phân tử lớn 1000 chất rắn dạng sáp, dạng vẩy, bột trơn chảy, màu trắng kem Chức Chống tạo bọt, dung mơi, chất làm bóng, chất làm ẩm 9500 Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Các Polyethylen glycol có khối lượng phân tử lớn 1000 dễ tan nước; polyethylen glycol tan nhiều dung môi hữu keton béo cồn béo, cloroform, glycol ether, ester hydrocarbon thơm; không tan ether phần lớn hydrocarbon béo; khối lượng phân tử tăng, độ tan nước độ tan dung môi hữu giảm Khối lượng phân tử Các PEG có khối lượng phân tử 1000: không thấp 95,0% không 105,0% giá trị công bố Các PEG có khối lượng phân tử khoảng từ 1000 đến 7000: không thấp 90,0% không 110,0% giá trị cơng bố Các PEG có khối lượng phân tử lớn 7000: không thấp 87,5% không 112,5% giá trị công bố Khoảng độ nhớt,theo đơn vị cSt, PEG nhiệt độ 100 ± 0,3 C: Độ nhớt QCVN 4-7 : 2010/BYT KLPT trung bình 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 1450 1500 1600 1700 1800 1900 2000 2100 2200 2300 2400 2500 2600 2700 2800 2900 3000 3250 3350 3500 3750 4000 4250 4500 4750 5000 5500 6000 6500 7000 7500 8000 Khoảng độ nhớt, cSt 4,1-4,8 5,4-6,4 6,8-8,0 8,3-9,6 9,9-11,3 11,5-13,0 12,5-14,5 15,0-17,0 16,0-19,0 18,0-22,0 20,0-24,5 22,0-27,0 24,0-30,0 25,0-32,0 26,0-33,0 28,0-36,0 31,0-39,0 33,0-42,0 35,0-45,0 38,0-49,0 40,0-53,0 43,0-56,0 46,0-60,0 49-65 51-70 54-74 57-78 60-83 64-88 67-93 73-105 76-110 87-123 99-140 110-158 123-177 140-200 150-228 170-250 206-315 250-390 295-480 350-590 405-735 470-900 Với PEG không cho bảng, tính tốn giá trị giới hạn cách nội suy QCVN 4-7 : 2010/BYT 5.2 Độ tinh khiết pH 4,5 7,5 (dung dịch 1/20) Tro sulfat Không 0,1 % Thử g mẫu Độ acid Khơng q 0,05% kl/kl (tính theo acid acetic) 1,4-Dioxan Khơng 10,0 mg/kg Ethylen oxyd Không 0,02% Ethylen glycol diethylen glycol Tổng hàm lượng không q 0,25% (kl/kl) tính riêng kết hợp Chì Phƣơng pháp thử Không 1,0 mg/kg 6.1 Độ tinh khiết Độ acid Chuyển g mẫu thử vào bình nón 250 ml, thêm dung dịch phenolphtalein (TS) 50 ml ethanol trung tính chuẩn độ dung dịch kali hydroxyd 0,1 N ethanol tới dung dịch chuyển màu hồng bền vững 15 giây Thể tích dung dịch kali hydroxyd 0,1 N ethanol để chuẩn độ không được 0,5 ml 1,4-Dioxan Tiến hành hướng dẫn chuyên luận thử giới hạn dioxan Sắc kí khí Xem thêm phần phương pháp sắc kí khí khơng gian Phần phương pháp thử Ethylen oxyd Chì Thử theo hướng dẫn JECFA monograph - Vol.4 Sử dụng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp để xác định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ) 6.2 Định tính Khối lượng phân tử Dung dịch Anhydrid phthalic Cho 49 g anhydrid phthalic vào chai màu nâu hổ phách hòa tan 300 ml pyridin (mới cất lại để loại anhydrid phthalic) Lắc mạnh chai để hịa tan hồn tồn Để yên qua đêm trước sử dụng QCVN 4-7 : 2010/BYT Chuẩn bị mẫu polyethylen glycol lỏng Cẩn thận thêm 25 ml dung dịch anhydrid phthalic vào bình khơ, sạch, có áp suất chịu nhiệt Thêm vào bình lượng cân xác mẫu thử, tương đương với khối lượng phân tử chia cho 160 (ví dụ, với PEG 200 cân khoảng 1,3 g mẫu thử, với PEG 600 cân khỏang 3,8g mẫu thử) Đóng nút bình lại, gói cẩn thận túi vải Chuẩn bị mẫu polyethylen glycols rắn Cẩn thận thêm 25 ml dung dịch anhydrid phthalic vào bình áp suất chịu nhiệt khơ Thêm vào bình lượng cân xác mẫu thử nung chảy, tương đương với khối lượng phân tử chia cho 160 Do độ tan hạn chế mẫu, không lấy nhiều 25 g mẫu thử Thêm vào 25 ml pyridin (đã cất lại để loại anhydrid phthalic) Lắc để hịa tan hồn tồn, đóng nút bình gói cẩn thận túi vải Tiến hành Đặt bình đựng mẫu vào bể nước mức ngang với vạch chất lỏng bình giữ nhiệt độ khoảng từ 96 đến 100 C Đun bình 30 đến 60 phút Lấy bình làm lạnh đến nhiệt độ phịng Mở nắp bình cẩn thận để xả áp suất, lấy bình khỏi túi vải, thêm giọt dung dịch phenolphtalein pyridin 1/100 Chuẩn độ dung dịch natri hydroxyd 0,5 N đến xuất màu hồng bền vững 15 giây Ghi lại thể tích cần dùng, S, theo ml Tiến hành làm mẫu trắng song song với 25 ml dung dịch anhydrid phthalic cộng với lượng pyridin thêm vào mẫu Ghi lại thể tích natri hydroxyd 0,5 N cần dùng để chuẩn độ, B, theo ml Tính khối lượng phân tử mẫu theo công thức sau: Khối lượng phân tử = 2000 × W / [(B-S)N] đó: W = khối lượng mẫu thử, g B = thể tích dung dịch NaOH 0,5 N dùng để chuẩn độ mẫu trắng, tính theo ml S = thể tích dung dịch NaOH 0,5 N dùng để chuẩn độ mẫu thử, tính theo ml N = độ chuẩn xác NaOH QCVN 4-7 : 2010/BYT Phương pháp dự kiến khác dùng sắc kí rây kích thước (sắc kí gel thẩm thấu) Các polyethylene glycol có khối lượng phân tử dự đốn 1000 Thiết bị Dùng sắc kí lỏng hiệu cao HPLC thích hợp, trang bị phận đo khúc xạ vi phân cột 0,60 m x 7,7 mm (đường kính trong), nhồi gel PL 10 µm 50 Å, dùng pha động tetrahydrofuran Điều kiện đo Các thơng số đo thay đổi tùy thuộc vào hệ đo dùng điều kiện sau để thu sắc đồ hợp lý: -Tốc độ pha động: ml/phút - Áp suất: 35 bar - Thể tích mẫu bơm: 20 µl dung dịch 1% (kl/tt) - Nhiệt độ detector: 25 C ± 0,1 C Qui trình cho phép nhận biết PEG sau so sánh với chất chuẩn dùng để kiểm tra hỗn hợp PEG Các polyethylene glycol có khối lượng phân tử dự đóan lớn 1000 Thực qui trình với pha động Tetrahydrofuran/n-heptan (80/20) Thể tích rửa giải dự kiến PEG, tùy thuộc vào hệ đo điều kiện đo, cho bảng sau: KLPT V rửa giải, ml 35 000 21,2 10 000 22,8 000 24,2 000 25,1 000 26,8 000 28,4 10 QCVN 4-7 : 2010/BYT KLPT Độ nhớt V rửa giải, ml 35000 21,2 10000 22,8 6000 24,2 4000 25,1 2000 26,8 1000 28,4 Thiết bị Nhớt kế Ubbelohde, minh họa hình vẽ đây, dùng để xác định cách hiệu độ nhớt polyethylen glycol Hình Nhớt kế Ubbelohde (các kính thước cho theo mm) Để xác định độ nhớt khoảng từ 300 to 600 centistoke, dùng thiết bị đo độ nhớt cỡ 3, có đường kính mao quản 2,00 ± 0,04 mm Thiết bị đo độ nhớt phải đặt giá đỡ phù hợp với kính thước ống tách hình vẽ, giữ thiết bị đo độ nhớt thẳng đứng Mũi tên bầu A thể tích tối đa tối thiểu chất lỏng, sử dụng điều kiện phù hợp Thể tích bầu B xấp xỉ ml Hiệu chuẩn thiết bị đo độ nhớt Xác định số nhớt (C) cho thiết bị đo độ nhớt cách sử dụng loại dầu có độ nhớt biết Nghiêng thiết bị khoảng 30 độ so với phương thẳng đứng, bầu A nằm mao quản, đưa lượng mẫu vào ống đủ để mức chất lỏng ngang với vạch nạp Vạch chất lỏng không phép cao vạch nạp cho thiết bị đo độ nhớt quay phương thẳng đứng cho mẫu thử chảy từ ống 11 QCVN 4-7 : 2010/BYT Nạp chất lỏng vào thiết bị cho ống hình chữ U đặt đáy phải hồn tồn khơng có bọt khí Sau đặt thiết bị đo độ nhớt vào bình điều nhiệt thời gian đủ để mẫu cân nhiệt, đặt ngón tay lên ống hút ống chất lỏng hút vào đến bầu C Ngừng hút, rút tay khỏi ống 3, đặt lên ống mẫu thử chảy giọt khỏi đầu mao quản Rút tay khỏi ống 2, tính khoảng thời gian (chính xác đến 0,1 giây) cần thiết để mặt khum chất lỏng chuyển dịch từ vạch T1 đến vạch T2 Để thu kết xác khoảng thời gian hợp lý, thiết bị cần phải điều chỉnh cho khoảng thời gian trôi từ 80 đến 100 giây Tính số nhớt C theo cơng thức sau C = cSt/t1 cSt độ nhớt, tính theo đơnvị centistoke, t1 thời gian chảy (efflux), tính theo giây, chất lỏng chuẩn Xác định độ nhớt mẫu thử, giữ nhiệt độ 100±0,3 C sử dụng nhớt kế mao quản có thời gian chảy 200 giây (s) PEG cần kiểm tra Độ nhớt phải nằm giới hạn định bảng, nội suy từ giá trị cho bảng 6.2 Độ tinh khiết Ethylen oxyd Dung dịch Morpholin Trộn phần morpholin cất lại với phần methanol khan Chỉ thị hỗn hợp Cân 0,050 g 4,4'bis-(amino-1-naphthylazo-2,2'stilbendisulfonic acid) 0,010 g vàng brilliant vào bình 65 ml Dung pipet lấy 1,5 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N vào bình, trộn Thêm vào 3,5 ml nước, trộn Chuyển hỗn hợp vào bình bảo quản, tráng rửa 45 ml methanol, trộn Dung dịch acid hydrocloric methanol chuẩn Trộn 8,5 ml acid hydrocloric 1000 ml methanol khan Chuẩn lại nồng độ cách lấy ml dung dịch, chuẩn độ dung dịch NaOH 0,1 N (TS) với thị phenolphtalein Chuẩn hoá lại nồng độ dùng dung dịch sau 48 Để chuẩn bị mẫu thử trắng, chuyển 25 g mẫu thử cân xác vào bình cầu, lắc để tan hồn tồn Chuẩn độ dung dịch acid hydrocloric methanol chuẩn hóa đến chuyển màu xanh biếc 12 QCVN 4-7 : 2010/BYT Khi gần tới điểm kết thúc phải thêm từ từ lượng nhỏ chất chuẩn Thêm 50 ml dung dịch morpholin vào bình áp suất chịu nhiệt Tạo mẫu thuốc thử trắng cách thêm lượng tương đương Morpholin vào bình tương tự khác Thêm vào bình thứ 25 g mẫu thử cân xác, lắc để tan hồn tồn Gói cẩn thận bình túi vải, đặt bình cạnh bể cách thủy điều nhiệt 98 ± C 30 phút, giữ mức nước bể mức chất lỏng bình chút Lấy bình ra, để nguội đến nhiệt độ phịng Khi bình nguội, nới lỏng túi vải bọc, mở nắp bình để xả áp lực gỡ túi vải bọc Từ từ thêm 20 ml anhydrid acetic khan vào bình, lắc để tan hồn tồn Để n nhiệt độ phịng 15 phút Nếu bình ấm, để nguội đến nhiệt độ phòng Thêm vào bình đến giọt thị hỗn hợp chuẩn độ dung dịch acid hydrocloric methanol chuẩn đến chuyển màu xanh biếc Khi gần tới điểm kết thúc phải thêm từ từ lượng nhỏ chất chuẩn Tính phần trăm ethylen oxyd theo cơng thức sau: đó: N = độ chuẩn dung dịch acid hydrocloric methanol chuẩn A, B, and C = thể tích (ml) tương ứng dùng để chuẩn độ mẫu thử, mẫu thuốc thử trắng mẫu thử trắng, W1 and W = khối lượng (g) tương ứng mẫu thử lấy cho phản ứng cho mẫu thử trắng Sắc kí khí khơng gian (headspace): Phương pháp đề xuất khác để xác định 1,4-Dioxan and Ethylen oxyd Nguyên tắc: Sau thêm nước vào mẫu, phân tích ethylen oxyd 1,4-dioxan sắc kí khí không gian (headspace) Dung dịch chuẩn - Dung dịch gốc 1,4-Dioxan 13 QCVN 4-7 : 2010/BYT - Dung dịch chuẩn 1,4-dioxan nước pha cách cân khoảng 1,00 g 1,4-dioxan trong100 ml nước cất (dung dịch gốc) sau pha lỗng nhiều lần Sử dụng hai dung dịch chuẩn 20 and 100 µg 1,4dioxan/ml nước - Dung dịch gốc chuẩn Ethylen Oxyd (EO) Thêm 25 ml nước cất vào lọ bơm mẫu nhiều lần (multidose injection vial) Đóng septum lại cắm syranh khơng dị khí vào Từ từ đưa 20 ml khí ethylen oxyd (khoảng 40 mg) vào dung dịch Xác định xác khối lượng ethylen oxyd thêm vào cách cân lọ mẫu trước sau thi thêm khí (dung dịch gốc) Chuẩn bị hai dung dịch làm việc chuẩn cách pha lỗng 10 µg ethylen oxyd ml nuớc, pha loãng nhiều lần Thiết bị Dùng máy sắc kí khí trang bị detector ion hóa lửa (FID), với cột mao quản 30 m tráng dimethylpolysiloxan, đường kính 0,25 mm, độ dày lớp tráng 1,0 µm Điều kiện đo Điều kiện đo thay đổi tùy thuộc vào thiết bị cụ thể, dùng điều kiện sau để thu sắc đồ phù hợp: Đặt chương trình lấy mẫu không gian (Headspace Sampler) - Thời gian cân nhiệt: 45 phút - Nhiệt độ: 70 C - Nhiệt độ đường truyền: 150 C - Thời gian đặt áp lực: 30 giây - Thời gian bơm: giây - Thời gian phân tích: 45 phút Điều kiện đo sắc kí khí Nhiệt độ: Cột, 50 C (giữ phút), tăng lên 180 C với tốc độ tăng nhiệt C /phút Detector (FID): 250 C Khí mang: Heli, ml/phút Áp suất khí mang : 0,7 bar 14 QCVN 4-7 : 2010/BYT Tỉ lệ chia dòng: 40 : Hydro khơng khí: cho FID Chuẩn bị mẫu Chuyển khoảng g mẫu cân xác đến 0,1 mg vào lọ mẫu thêm ml nước cất Đóng lọ mẫu lại đặt vào thiết bị phân tích khơng gian để cân 45 phút 70 C Chuẩn bị lọ mẫu điều kiện, thêm vào lọ mẫu g mẫu thử (đã cân xác tới 0,1 mg) ml dung dịch gốc 1,4-dioxan EO Dung dịch chuẩn làm việc Pha hai dung dịch chuẩn A B (để thêm chuẩn) sau: A ml dung dịch gốc EO có nồng độ xấp xỉ 200 mg EO/100 ml + ml dung dịch gốc 1,4-dioxan có nồng độ xấp xỉ 1000 mg dioxan/100 ml + nước đến thể tích đủ 100 ml Dung dịch pha loãng với nước theo tỷ lệ : 10 để có nồng độ khoảng µg EO/ml 20 µg 1,4-dioxan/ml B ml dung dịch gốc EO có nồng độ xấp xỉ 500 mg EO/100 ml + ml dung dịch gốc 1,4-dioxan có nồng độ xấp xỉ 1000 mg dioxan/100 ml + nước đến thể tích 100 ml Dung dịch pha loãng với nước theo tỷ lệ : 10 để có nồng độ khoảng 10 µg EO/ml 100 µg 1,4-dioxan/ml Tính tốn Nồng độ chất (i) tính theo cơng thức sau: µg chất (i)/g = (W i ì Ai)/Ais ú àg cht i/g = khối lượng 1,4-dioxane EO mẫu thử [µg/g] Wi = khối lượng chất i thêm vào, chuẩn lại theo g mẫu thử [µg/g] Ai = Diện tích pic chất i mẫu thử, chuẩn lại theo g mẫu thử Ais = Diện tích pic chất i mẫu thử thêm chuẩn, chuẩn lại theo g mẫu thử 15 QCVN 4-7 : 2010/BYT Ethylen glycol diethylen glycol Các polyethylen glycol có khối lượng phân tử nhỏ 450 Thiết bị Dùng máy sắc kí khí trang bị detector ion hóa lửa hydro cột thép không rỉ 1,5 m x mm (đường kính trong, nhồi sorbitol 12%, theo khối lượng, đất diatomit 60/80 mesh không rửa acid (Chromosorb W, tương đương) Điều kiện đo Các thông số đo thay đổi tùy thuộc vào thiết bị sử dụng, thu sắc đồ phù hợp điều kiện sau: Nhiệt độ cột: 165 C; Nhiệt độ đầu khí vào: 260 C ; Khí mang: nitơ (hoặc khí trơ phù hợp); tốc độ khí: 70 ml/phút; Máy ghi: - 0,5 to 1,05 mV, toàn thang, giây, đáp ứng toàn thang; Khí hydro khơng khí với tốc độ khí vào đầu đốt tối ưu hóa để có độ nhạy lớn Dung dịch chuẩn Chuẩn bị dung dịch sắc kí tiêu chuẩn cách hịa tan nước lượng cân xác ethylen glycol thương mại diethylen glycol (nếu cần cất tinh khiết lại) Khoảng nồng độ phù hợp từ đến mg glycol/ml Chuẩn bị dung dịch Chuyển khoảng g mẫu thử, cân xác, vào bình định mức 10 ml, định mức đến vạch lắc Tiến hành Bơm µl dung dịch chuẩn ghi lại sắc kí đồ Trong điều kiện cho, thời gian rửa giải ethylen glycol diethyl glycol tương ứng khoảng phút 6,5 phút Đo chiều cao pic, ghi lại gía trị sau: A = chiều cao, tính theo mm, pic ethylen glycol; B = khối lượng, tính theo mg, ethylen glycol ml dung dịch chuẩn; C = chiều cao, mm, pic diethylen glycol; D = khối lượng, mg, diethylen glycol ml dung dịch chuẩn Tương tự, bơm µl dung dịch dung dịch mẫu thử ghi lại sắc đồ Đo chiều cao pic, E, ethylen glycol, chiều cao F pic diethylen glycol 16 QCVN 4-7 : 2010/BYT Tính tốn Tính phần trăm ethylen glycol mẫu theo cơng thức sau: (E x B) / A x khối lượng mẫu thử (g) Tính phần trăm diethylen glycol mẫu theo công thức: (F x D) / C x khối lượng mẫu thử (g) Các polyethylen glycol có khối lượng phân tử lớn 450 Chuẩn bị mẫu Hòa tan 50 g mẫu thử vào 75 ml diphenyl ether bình cất 250 ml Cất chậm áp suất 1-2 mm Hg hứng vào bình 100 ml chia vạch đến ml, thu 25 ml dịch cất Thêm 25 ml nước vào dịch cất, lắc mạnh, để yên lúc để dung dịch tách lớp Làm lạnh đá để lớp diphenyl ether đóng rắn dễ tách loại Lọc lớp nước qua giấy lọc vào ống đong thủy tinh 50 ml chia độ có nút đậy Thêm thể tích tương đương acetonitril (mới cất tinh khiết lại) vào dịch lọc Chuẩn bị dung dịch chuẩn Chuyển 50 mg diethylen glycol vào bình định mức 25 ml, pha lỗng tới vạch hỗn hợp 1:1 acetonitril (mới cất tinh khiết lại) nước, trộn Tiến hành Chuyển 10 ml dung dịch mẫu 10 ml dung dịch chuẩn vào bình 50 ml, riêng bình chứa 15 ml dung dịch ceri IV amoni nitrat (TS), trộn Đo độ hấp thụ quang dung dịch máy đo quang cuvet cm bước sóng 450 nm vòng đến phút Đo mẫu trắng có chứa 15 ml dung dịch ceri IV amoni nitrat (TS) 10 ml hỗn hợp 1:1 acetonitril nước Độ hấp thụ quang dung dịch mẫu thử không lớn độ hấp thụ quang dung dịch chuẩn Phương pháp dự kiến khác xác định mono and diethylen glycol Dung dịch thử Cân g mẫu cần kiểm tra vào bình định mức 100 ml, hịa tan aceton pha lỗng tới vạch aceton Dung dịch đối chiếu Cân 100 mg monoethylen glycol 500 mg diethylen glycol vào bình định mức 100 ml Pha loãng 100 ml aceton Pha loãng ml dung dịch thành 10 ml aceton 17 QCVN 4-7 : 2010/BYT Tiến hành Tiến hành đo sắc kí khí sử dụng : - Cột thủy tinh 1,8 m có đường kính mm, nhồi diatomit dùng cho sắc kí khí, rửa sach silan hóa (Chromosorb G.AW.DMCS 100-125 mesh phù hợp), ngâm tẩm % (kl/kl) polyethylen glycol 20.000 (Carbowax 20 M phù hợp) - Khí mang Nitơ, với tốc độ dịng khí 30 ml/phút, - Detector ion hóa lửa Trong trường hợp cần thiết, luyện cột 200 khoảng 15 C Điều chỉnh nhiệt độ ban đầu để thu thời gian lưu thu diethylen glycol có giá trị từ 14 đến 16 phút Hạ nhiệt độ cột xuống 140 C Bơm dung dịch vào tăng nhiệt độ cột lên 170 C, với tốc độ tăng nhiệt C/phút Duy trì nhiệt độ cổng bơm nhiệt độ detector 250 C Bơm 2,0 µl dung dịch thử 2,0 µl dung dịch so sánh Kiểm tra độ lặp lại tín hiệu sau lần bơm Tính tốn Đo diện tích pic thu mono diethyl glycol sắc đồ dung dịch thử dung dịch so sánh Tính hàm lượng mono diethylen glycol dung dịch thử từ diện tích pic 18 QCVN 4-7 : 2010/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI POLYOXYETYLEN (20) SORBITAN MONOOLEAT Tên khác, số Polysorbat 80; INS 433 ADI=0-25 mg/kg thể trọng Định nghĩa Hỗn hợp bao gồm ester phần sorbitol dẫn chất mono- dianhydrid (có số acid 7,5 hàm lượng nước 0,2%) với acid oleic thực phẩm cô với xấp xỉ 20 mol ethylen oxyd cho mol sorbitol anhydrid Mã số C.A.S 9005-65-6 Cơng thức cấu tạo Công thức danh nghĩa thành phần gần đúng: CH2 H H(OC2H4)xO C O(C2H4O)wH O CH CH H C O(C2H4O)yH CH2C(C2H4O)2OCR Cảm quan Trong w + x + y + z = ~20 RCO- phần acid béo Ở 25oC dung dịch sánh màu vàng chanh đến màu hổ phách có mùi nhẹ đặc trưng Chức Chống tạo bọt, Chất nhũ hóa, chất phân tán Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Tan nước, ethanol, methanol, ethyl acetat toluen; khơng tan dầu khống ether dầu hỏa Hấp thụ hồng ngoại Phổ hồng ngoại mẫu thử đặc trưng cho este phần acid béo polyoxyethyl polyol Phản ứng màu Đúng yêu cầu (mô tả phần Phương pháp thử) Acid béo Phải có phản ứng đặc trưng acid béo Liên kết không no Phải có phản ứng đặc trưng liên kết khơng no Gelatin hoá Tại nhiệt độ thường thấp hơn, hỗn hợp mẫu thử nước cất (60/40: v/v) tạo khối đặc Xà phịng hóa 100 g mẫu cho khoảng 23 g acid béo 75 g polyol 19 QCVN 4-7 : 2010/BYT 5.2 Độ tinh khiết Nước Không 3,0% (phương pháp Karl-Fischer) Tro sulfat Không 0,25% Chỉ số acid Không 2,0 Chỉ số Xà phịng hóa Khơng thấp 45 không 55 Chỉ số Hydroxyl Không thấp 65 khơng q 80 Chì Khơng 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng Không thấp 65,0% khơng q 69,5% nhóm oxyethylen tương đương với không thấp 96,5% không 103,5% polyoxyethylen (20) sorbitan monooleat tính theo chế phẩm khan Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Phản ứng màu Thêm 10 ml dung dịch amoni cobalt (II) thiocyanat ml chloroform vào ml dung dịch mẫu thử tan nước nồng độ 5% (m/v) Lắc để tách lớp; lớp chloroform có màu xanh da trời (Dung dịch amoni cobaltothiocyanat: 37,5 g cobalt nitrat 150 g amoni thiocyanat hịa tan chỉnh thể tích đến đủ 100 ml nước cất - pha hàng ngày trước sử dụng) Acid béo Thêm ml dung dịch natri hydroxyd (TS) vào ml dung dịch mẫu thử 5% (m/v) nước Đun sôi hỗn hợp vài phút, để nguội, acid hóa hỗn hợp acid hydrocloric loãng Dung dịch đục, acid béo giải phóng Liên kết khơng no Nhỏ giọt dung dịch brom (TS) vào dung dịch mẫu thử (1/20) Dung dịch brom màu Gelatin hoá Tại nhiệt độ thường thấp hơn, hỗn hợp mẫu thử nước cất (60/40: v/v) tạo thành khối mềm đặc 6.2 Độ tinh khiết Chì Thử theo hướng dẫn JECFA monograph - Vol.4 Xác định kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 (phần phương pháp phân tích công cụ) 20 QCVN 4-7 : 2010/BYT 6.3 Định lượng Xác định hàm lượng nhóm Oxyethylen (theo hướng dẫn JECFA monograph - Vol.4) 21