Nghiên cứu thức ăn nhân tạo nhân nuôi nhện bắt mồi Amblyseius swirskii Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae)

Nghiên cứu này nhằm tìm ra loại thức ăn nhân tạo phù hợp nhất cho nhân nuôi nhện bắt mồi Amblyseius swirskii Athias-Henriot. Thí nghiệm được tiến hành theo phương pháp nuôi cá thể trong tủ định ôn ở nhiệt độ 27 độ C với bốn loại thức ăn nhân tạo gồm thức ăn cơ bản TA1 (thành phần gồm Sucrose, Yeast extract, bột lòng đỏ trứng, hỗn hợp 8 vitamin) và thức ăn cơ bản bổ sung thêm 20% bột ruồi lính đen TA2, bột Artemia franciscana tách vỏ TA3 hoặc bột A. franciscana nguyên vỏ TA4.

Vietnam J Agri Sci 2022, Vol 20, No 3: 285-291 Tạp chí Khoa học Nơng nghiệp Việt Nam 2022, 20(3): 285-291 www.vnua.edu.vn NGHIÊN CỨU THỨC ĂN NHÂN TẠO NHÂN NUÔI NHỆN BẮT MỒI Amblyseius swirskii ATHIAS-HENRIOT (ACARI: PHYTOSEIIDAE) Dương Thị Ngà1, Nguyễn Đức Tùng2* Trung tâm Bảo vệ Thực vật phía Bắc, 2Học viện Nơng nghiệp Việt Nam * Tác giả liên hệ: nguyenductung@vnua.edu.vn Ngày nhận bài: 05.08.2021 Ngày chấp nhận đăng: 21.01.2022 TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm tìm loại thức ăn nhân tạo phù hợp cho nhân ni nhện bắt mồi Amblyseius swirskii Athias-Henriot Thí nghiệm tiến hành theo phương pháp nuôi cá thể tủ định ôn nhiệt độ 27C với bốn loại thức ăn nhân tạo gồm thức ăn TA1 (thành phần gồm Sucrose, Yeast extract, bột lòng đỏ trứng, hỗn hợp vitamin) thức ăn bổ sung thêm 20% bột ruồi lính đen TA2, bột Artemia franciscana tách vỏ TA3 bột A franciscana nguyên vỏ TA4 Kết cho thấy nhện ăn TA2 TA3 có vịng đời ngắn 7,68 7,88 ngày, ăn TA4 (8,11 ngày) dài TA1 (8,68 ngày) Tổng số lượng trứng đẻ nhện ăn TA2, TA3 TA4 nhiều rõ rệt so với TA1 Tỉ lệ tăng tự nhiên rm nhện ăn TA2 (0,182), ăn TA3 (0,176) ăn TA4 (0,174) cao rõ rệt so với ăn TA1 (0,151) Từ kết cho thấy, thức ăn nhân tạo TA2, TA3 TA4 hồn tồn sử dụng việc nhân nuôi hàng loạt nhện bắt mồi A swirskii, đồng thời sử dụng chúng loại thức ăn hỗ trợ giúp trì quần thể nhện bắt mồi trồng điều kiện thiếu khơng có thức ăn Từ khóa: Nhện bắt mồi Amblyseius swirskii, thức ăn nhân tạo, tỉ lệ tăng tự nhiên, ruồi lính đen, Artemia franciscana Study on Artificial Diets for Rearing Predatory Mite Amblyseius swirskii Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae) ABSTRACT This study aimed to find out the most suitable artificial diets for rearing predatory mite Amblyseius swirskii Athias-Henriot The experiment was conducted according to individual rearing method in an incubator at 27℃ with four artificial diets, viz TA1 as basic diet (containing sucrose, yeast extract, egg yolk powder, vitamins mix); TA2, basic diet supplemented with 20% black soldier fly pupal powder; TA3 and TA4, basic diet supplemented with 20% decapsulated and non-decapsulated TA4 of dry cysts of Artemia franciscana, respectively The results showed that females of A swirskii fed on TA2 and TA3 had the shortest life cycle (7.68 and 7.88 days, respectively), followed by those fed on TA4 (8.11 days) and the longest was those fed on TA1 (8.68 days) The total number of eggs laid by the females rearing on TA2, TA3 or TA4 was significantly higher than that of TA1 The intrinsic rate of increase (r m) of the females fed on TA2 (0.182), TA3 (0.176) and TA4 (0.174) were significantly higher than those fed on TA1 (0.151) In conclusion, the artificial diets TA2, TA3 and TA4 can be used in mass rearing A swirskii, and can also be used as supplemental diets for supporting the mite population on crops in the absence or lack of prey Keywords: Predatory mite Amblyseius swirskii, intrinsic rates of increase, artificial diet, black soldier fly, Artemia franciscana ĐẶT VẤN ĐỀ Nhện bắt m÷i Amblyseius swirskii (Acari: Phytoseiidae) mût lồi đa thĆc có khâ sĄ dĀng phịng chøng nhiều lồi sâu nhn họi nh bừ trù, bừ phỗn, nhn ú, nhn trắng (Nomikou & cs., 2001; Messelink & cs., 2006; Calvo & cs., 2011) Trên giĉi, nhện bắt m÷i A swirskii chỵ yu c nhõn nuụi hng loọt bng vt m÷i thay nhā nhện vật m÷i Carpoglyphus lactis L (Acari: Carpoglyphidae) Thyreophagus entomophagus (Laboulbene) 285 Nghiên cứu thức ăn nhân tạo nhân nuôi nhện bắt mồi Amblyseius swirskii Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae) (Acari: Acaridae) (Bolckmans & Van Houten, 2006; Fidgett & Stinson, 2008) Tuy nhiên việc nhân nuôi lồi vật m÷i thay cÿng có mût sø hän chế nhā cỉn có thĈi gian, trang thiết bð để ni nhện vật m÷i, ngn vật m÷i bð nhiễm loäi sinh vật khác làm gián đoän q trình nhån ni Đặc biệt khơng khøng chế tứt nhn vt mữi mt ỷ cỵa chỳng tng cao làm chết nhện bắt m÷i Nhằm giâm giá thành nhån nuöi cÿng nhā khắc phĀc hän chế cỵa phng phỏp nhồn nuửi bng vt mữi t nhiờn vật m÷i thay thế, nghiên cău chúng tơi tiến hành thĄ nghiệm nhân ni nhện bắt m÷i A swirskii bøn loäi thăc ăn nhån täo Việc tìm lội thăc ăn thích hợp khơng nhąng giúp cho việc nhân ni hàng lột nhện bắt m÷i A swirskii mà cịn sĄ dĀng tr÷ng giúp trì qn thể nhện bắt m÷i nhąng giai độn khơng có sâu nhện häi PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Phương pháp nuôi nguồn nhện bắt mồi Nguữn nhn bt mữi A swirskii cung cỗp bi cụng ty Koppert (Berkel en Rodenrijs, Hà Lan) đāợc nuôi phịng thí nghiệm Bû mơn Cơn trùng, Hõc viện Nơng nghiệp Việt Nam Nhện bắt m÷i đāợc ni tỗm nha xanh kớch thc (10 ì 10 ì 0,3cm) t trờn mỷt tỗm mýt dy 1cm t hỷp nhĆa kích thāĉc 17 × 11 × 5cm chăa nc Cọnh cỵa tỗm nha c phỵ bi cỏc bng giỗy n nhm cung cỗp nc uứng cho nhn bt m÷i ngăn nhện chäy trøn Nhện bắt m÷i đāợc nuụi bng phỗn hoa cõy cú nn Typha latifolia Hai ngy mỷt lổn, phỗn hoa mi c rc vo lững ni Mût sợi chỵ đen nhó đāợc cho vào khu nuöi để làm giá thể cho nhện đẻ trăng Hai ngày mût læn, trăng nhện đāợc chuyển sang mût hûp ni mĉi để trì ngn nhện đ÷ng phĀc vĀ thí nghiệm nghiên cău đặc điểm sinh hõc 2.2 Phương pháp làm thức ăn nhân tạo Thăc ăn nhån tọo c bõn (TA1): c tọo theo phng phỏp cỵa Nguyen & cs (2014) Thăc ăn g÷m cị 30g đāĈng Sucrose + 16,6g 286 Tryptone + 16,6g Yeast extract + 16,6g bût lịng trăng + 0,13% hún hợp vitamin (g÷m 25,4% nicotinic acid, 4,9% riboflavin, 0,5% thiamine, 1,5% vitamin B6, 12,4% Ca-pantothenate, 1% axit folic, 0,1% biotin 54,2% vitamin C) (Vandekerkhove & cs., 2006) Thăc ăn ri lính en (TA2): 80% TA1 + 20% bỷt ỗu trựng ruữi lính đen Ấu trùng túi cùi ri lính đen đāợc sỗy khử sau ũ nghin thnh bỷt mn Thc n Artemia tách vó (TA3): 80% TA1 + 20% bût trăng bo xỏc Artemia franciscana sỗy khử ó c tỏch vú Thăc ăn Artemia nguyên vó (TA4): 80% TA1 + 20% bỷt trng bo xỏc Artemia franciscana sỗy khử nguyờn vó 2.3 Nghiên cứu đặc điểm sinh học Để nghiên cău đặc điểm sinh vật hõc, nhện bắt m÷i đāợc ni cá thể l÷ng mica đāợc mơ tâ bĊi Nguyen & cs (2013) Múi l÷ng ni g÷m ba miếng mica kớch thc 40 ì 40mm Tỗm mica di cỹng màu đen dày 2mm giąa có mût lú trđn ng kớnh 1mm tọi trung tõm Tỗm mica gia mu đen dày 5mm vĉi mût lú trđn đāĈng kính 18mm trung tõm v tỗm mica trờn cựng mu trng vi lỳ trủn ng kớnh 20mm Tỗm búng kớnh sùt kích thāĉc 40 × 40mm có lú nhú (di 0,1mm) c t gia tỗm mica gia v giúp khơng khí lāu thưng ngồi lững nuửi v ỵ nhú nhn bt mữi khụng th chui ngoi Giỗy n c quỗn lọi thnh si mỷt ổu cm vo lỳ nhú trờn tỗm mica di cựng mỷt ổu nhýng vo nc cung cỗp nc cho nhn bt mữi Mỷt kp giỗy c s dng gi cht cỏc tỗm mica vi Cỏc l÷ng ni đāợc đặt mût khay nhĆa chăa nāĉc Dùng bút lơng nhó chuyển tĂng q trăng nhện bắt m÷i (dāĉi giĈ túi) vào l÷ng ni nhện Nhện non sau nĊ đāợc cho ăn thăc ăn nhån täo đāợc mô tâ Ċ Múi công thăc thăc ăn đāợc lặp läi vĉi 60 trăng Hai ngày mût lỉn, thăc ăn cÿ đāợc dõn säch khói l÷ng ni thăc ăn mĉi đāợc bù sung Sau nhện hòa trāĊng thành, cá thể đĆc đāợc ghép đöi cho đẻ trăng Trăng đāợc thu hàng Dương Thị Ngà, Nguyễn Đức Tùng ngày tỗt cõ trng cỵa cỏc cỏ th cỏi cựng mỷt túi đāợc chuyển vào l÷ng ni vĉi thăc ăn tāćng t thc n cỵa trng thnh cỏi xỏc nh tợ l c cỏi cỵa th th th hai Nhn đāợc quan sát múi ngày mût læn để xác đðnh thĈi gian phát dĀc pha, thĈi gian tiền đẻ trng, sứ lng trng v tuựi thừ cỵa trng thnh cỏi Cỏc thớ nghim c tin hnh tỵ đðnh ơn täi nhiệt đû 27C Để đo kích thāĉc, 15 trăng, cá thể nhện Ċ múi tuùi nhện trāĊng thành đĆc cÿng nhā trāĊng thành đāợc chĀp dāĉi kính hiển vi soi nùi đo kích thāĉc chiều dài chiều rûng phæn mềm Axiovision ver 4.8 2.4 Tính tỉ lệ tăng tự nhiên Tỵ lệ tăng tĆ nhiên (rm) đāợc tính dĆa cơng thăc cỵa Birch (1948): l m e x x rm *x Trong ũ x l ngy tuựi cỵa nhn cỏi (ngy), lx l tợ l sứng sút cỵa nhn täi ngày tuùi x mx sø lāợng cá thể đāợc nhện sinh täi ngày túi x Giá trð mx đāợc tính cách nhân sứ lng trng trung bỡnh cỵa nhn cỏi vi tỵ lệ Ċ hệ sau täi ngày túi x cỵa nhn cỏi Phng phỏp Jackknife cỵa Meyer & cs (1986) Hulting & cs (1990) đāợc sĄ dĀng tớnh sai sứ chuốn cỵa giỏ tr rm Cỏc chợ tiờu khỏc cỵa sc tng quổn th c tớnh theo Maia & cs (2000) nhā tỵ lệ sinh sân thn (R0) chỵ sø lāợng cá thể đāợc sinh bĊi mût nhện (con cái/nhện cái): R o   l x mx hay thĈi gian hệ (T) không thĈi gian cỉn thiết để sø lāợng quæn thể tăng Ro læn (ngày): T ln R o rm ThĈi gian nhån đưi qn thể (DT)(ngày): DT   ln rm 2.5 Xử lý số liệu Tỗt cõ sứ liu c x lý thứng kờ trờn excel phæn mềm SPSS phiên bân 20 Sø liệu đāợc kiểm tra phân bø chuèn dĆa kiểm đðnh Kolmogorov-Smirnov Khi sø liệu không phâi phân bø chuèn kiểm đðnh Kruskal Wallis đāợc düng để xác đðnh sĆ sai khác giąa loäi thăc ăn Nếu sĆ sai khác rõ rệt, kiểm đðnh Mann-Whitney U đāợc tiếp tĀc tiến hành để xác đðnh xác sai khác giąa múi cặp thăc ăn Trong trāĈng hợp phân bø chuèn, kiểm đðnh One-way ANOVA đāợc sĄ dĀng, kết quõ th nghim Levene cho thỗy phng sai ững nhỗt sĄ dĀng kiểm đðnh Tukey để xác đðnh sĆ sai khác giąa cặp thăc ăn, ngāợc läi kiểm đðnh Tamhane đāợc sĄ dĀng Vĉi so sánh tỵ lệ Ċ hệ thă 2, Generalized linear model đāợc sĄ dĀng vĉi sø liệu đāợc nhập theo däng nhð phân, ăng vĉi cá thể ăng vi cỏ th c Trong tỗt cõ cỏc kim nh giá trð P nhó hćn 0,05 tó sai khác cò ý nghïa KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kích thước pha phát dục NBM A swirskii Bõng cho thỗy kớch thc cỵa trng, nhện non tuùi cÿng nhā nhện trāĊng thành ăn lội thăc ăn nhån täo khác khơng có sĆ khác biệt mût cách rõ rệt Kích thāĉc nhện trāĊng thành đĆc có chiều dài dao đûng tĂ 0,414-0,417mm, chiều rûng 0,321-0,327mm Trong đò trāĊng thành cị kích thāĉc lĉn hćn vĉi chiều dài dao đûng tĂ 0,505-0,509mm, chiều rûng 0,409-0,416mm 3.2 Thời gian phát dục pha NBM A swirskii Đøi vĉi nhện cái, thi gian phỏt dc cỵa pha trng, nhn non tuựi 1, túi túi khơng khác mût cách rõ rệt chýng ăn loäi thăc ăn khác Tuy nhiên, tùng thĈi gian trāĉc trāĊng thành cỵa nhn cỏi n cỏc thc n nhồn tọo cú bù sung bût ri lính đen (TA2) (5,04 ngày) bût Artemia tách vó (TA3)(4,83 ngày) nguyên vó (TA4) (4,86 ngày) ngắn hćn rô rệt so vĉi thăc ăn cć bân TA1 (5,56 ngày) ThĈi gian tiền đẻ trng cỵa 287 Nghiờn cu thc n nhõn to nhõn nuôi nhện bắt mồi Amblyseius swirskii Athias-Henriot (Acari: Phytoseiidae) nhện ăn thăc ăn TA2 (2,64 ngày) ngắn hćn rõ rệt so vĉi ăn thăc ăn TA1 (3,12 ngày) thăc ăn TA4 (3,25 ngày) Nhện ăn thăc n TA2 v TA3 cũ vủng i ngn nhỗt lổn lāợt 7,68 7,88 ngày, nhện cỏi n TA4 l 8,11 ngy v di nhỗt l nhện ăn thăc ăn cć bân TA1 8,68 ngày Kt quõ ny cho thỗy thc n c bự sung thêm bût ri lính đen bût Artemia giúp nhện bắt m÷i phát triển nhanh hćn ThĈi gian trc trng thnh cỵa nhn cỏi n thc n TA3 (4,83 ngày) thí nghiệm ngắn hćn so vĉi nhn bt mữi A swirskii n nhn ú hai chỗm Tetranychus urticae Koch (11,6 ngày) Ċ 27C (Abou-Awad & Elsawi, 1992), ăn bõ trï Frankliniella occidentalis (Pergande) (7,8 ngày) Ċ 25C (Wimmer & cs., 2008), tāćng đ÷ng vĉi kết quâ cỵa Fouly & cs (2011) cho nhn bt mữi n bừ phỗn Bemisia tabaci (Gennadius) 26C (4,8 ngy) ứi vi nhn c, thi gian phỏt dc cỵa trng, nhện non túi khơng có sĆ khác biệt rõ rệt nhện ăn loäi thăc ăn khỏc Tuy nhiờn, thi gian phỏt dc cỵa nhn đĆc túi Ċ cơng thăc thăc ăn cị bù sung bût ri lính đen Artemia ngắn hćn rô rệt so vĉi thăc ăn cć bân ThĈi gian trc trng thnh cỵa nhn c n thc n bự sung bût Artemia nguyên vó (TA4) 4,70 ngày ngắn hćn rô rệt so vĉi thăc ăn cć bân TA1 (5,10 ngày) Bâng Kích thước pha phát dục NBM A swirskii nuôi loại thức ăn khác nhiệt độ 27 ± 0,1C, ẩm độ 75 ± 1% Kích thước pha phát dục TB ± SE (mm) Thức ăn n Trứng Nhện non tuổi Nhện non tuổi Nhện non tuổi Trưởng thành đực Trưởng thành Chiều dài TA1 15 0,147a ± 0,003 0,171a ± 0,003 0,290a ± 0,005 0,411a ± 0,006 0,414a ± 0,005 0,505a ± 0,006 TA2 15 0,147a ± 0,003 0,169 a ± 0,003 0,290a ± 0,005 0,411a ± 0,006 0,414a ± 0,005 0,509a ± 0,005 TA3 15 0,149a ± 0,003 0,172 a ± 0,003 0,291a ± 0,005 0,413a ± 0,005 0,416a ± 0,005 0,506a ± 0,005 TA4 15 0,151a ± 0,003 0,171a ± 0,003 0,294a ± 0,005 0,413a ± 0,005 0,417a ± 0,004 0,507a ± 0,005 0,724 0,240 0,151 0,044 0,082 0,334 df 3 3 3 P 0,868 0,971 0,928 0,988 0,970 0,953 F/2 Chiều rộng TA1 15 0,142a ± 0,002 0,163a ± 0,004 0,204a ± 0,005 0,327a ± 0,005 0,321a ± 0,006 0,409a ± 0,004 TA2 15 0,146a ± 0,002 0,155a ± 0,003 0,206a ± 0,004 0,313a ± 0,005 0,325a ± 0,004 0,413a ± 0,004 TA3 15 0,143a ± 0,002 0,164a ± 0,003 0,205a ± 0,004 0,329a ± 0,005 0,323a ± 0,005 0,411a ± 0,004 TA4 15 0,147a ± 0,002 0,157a ± 0,003 0,209a ± 0,004 0,316b ± 0,003 0,327a ± 0,004 0,416a ± 0,003 3,504 1,662 1,059 2,810 0,296 1,740 df 3 3 3 P 0,320 0,168 0,787 0,048 0,828 0,628 F/2 Ghi chú: Trên cột giá trị trung bình mang chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P ≤0,05) với kiểm định Kruskal Wallis Test (chiều rộng pha trứng, nhện non tuổi 2, trưởng thành chiều dài pha trứng, nhện non tuổi 1, trưởng thành cái); kiểm định One Way ANOVA (chiều rộng pha nhện non tuổi 1, nhện non tuổi 3, trưởng thành đực chiều dài pha nhện non tuổi 2, nhện non tuổi 3, trưởng thành đực); 2, Z P giá trị kiểm định Kruskal Wallis Test với mẫu phân bố không chuẩn; F, df P giá trị kiểm định One-way ANOVA với mẫu phân bố chuẩn 288 Dương Thị Ngà, Nguyễn Đức Tùng Bâng Thời gian phát dục pha trước trưởng thành NBM A swirskii ăn loại thức ăn khác nhiệt độ 27 ± 0,1C ẩm độ 75 ± 1% Thức ăn Thời gian phát dục (TB ± SE) (ngày) n Nhện non tuổi Trứng Nhện non tuổi Nhện non tuổi Trước trưởng thành Tiền đẻ trứng Vòng đời Nhện a b a TA1 25 1,56 ± 0,10 1,68 ± 0,10 1,20 ± 0,08 1,12a ± 0,07 5,56b ± 0,10 3,12bc ± 0,11 8,68c ± 0,10 TA2 25 1,76a ± 0,09 1,20a ± 0,08 1,04a ± 0,04 1,04a ± 0,04 5,04a ± 0,04 2,64a ± 0,10 7,68a ± 0,10 TA3 24 1,63a ± 0,10 1,04a ± 0,04 1,13a ± 0,07 1,04a ± 0,04 4,83a ± 0,12 3,04ab ± 0,19 7,88a ± 0,21 TA4 28 1,57a ± 0,10 1,14a ± 0,07 1,11a ± 0,06 1,04a ± 0,04 4,86a ± 0,11 3,25c ± 0,11 8,11b ± 0,16 2 2,715 30,657 3,097 2,226 27,215 12,361 23,951 df 3 3 3 P 0,438 < 0,001 0,377 0,527