Đang tải... (xem toàn văn)
Mục tiêu của đề tài là nghiên cứu thành phần hóa học từ vỏ quả Dó bầu và xác định cấu trúc các hợp chất phân lập bằng phương pháp so chuẩn với phương pháp HPLC và phổ MS, NMR. Kết quả, phân lập được 12 hợp chất và định danh được 7 hợp chất từ vỏ quả Dó bầu.
Giải thưởng Sinh viên Nghiên cứu khoa học Euréka lần thứ XIX năm 2017 Kỷ yếu khoa học NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG VỎ QUẢ DÓ BẦU (AQUILARIA CRASSNA PIERRE EX LECOMTE) Phạm Nguyễn Minh Thư* Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh * Tác giả liên hệ: thu.pnmd12@uphcm.edu.vn TĨM TẮT Thời gian gần đây, Dó bầu trở thành loài trồng phổ biến nước ta mang lại hiệu cao kinh tế Ngồi việc khai thác trầm, người trồng Dó bầu cịn phụ thu nguồn sử dụng loại trà Mặc dù Dó bầu với nguồn nguyên liệu dồi chưa nghiên cứu Việt Nam Do đó, mục tiêu đề tài nghiên cứu thành phần hóa học từ vỏ Dó bầu xác định cấu trúc hợp chất phân lập phương pháp so chuẩn với phương pháp HPLC phổ MS, NMR Kết quả, phân lập 12 hợp chất định danh hợp chất từ vỏ Dó bầu Từ khóa: Aquilaria crassna, saponin triterpen, cucurbitacin INVESTIGATION OF THE CHEMICAL COMPONENTS FROM FRUIT OF AQUILARIA CRASSNA PIERRE EX LECOMTE (THYMELAEACEAE) Pham Nguyen Minh Thu* University of Medicine and Pharmacy Ho Chi Minh City * Corresponding Author: thu.pnmd12@uphcm.edu.vn ABSTRACT In the recent years, Aquilaria crassna becomes a popular cultivated plant due to its significant economic benefit Beside agarwood production, its leaves are also used as herbal tea However, fruits of A crassna have not been studied yet In this study, principal compounds were isolated from fruits of this plant, and the structures of isolated compounds were identified by HPLC with standards, or elucidated by MS and NMR spectroscopy methods In conclusion, 12 compounds were isolated and compounds were identified from A crassna fruits Keywords: Aquilaria crassna, saponin triterpen, cucurbitacin Các tỉnh thành Bình Phước, Đồng Nai đẩy mạnh việc trồng trọt sản xuất Ngoài việc khai thác trầm, người trồng Dó bầu cịn phụ thu nguồn sử dụng loại trà với nhiều tác dụng: nhuận trường, kháng viêm, an thần giảm đau Cây Dó bầu từ tuổi bắt đầu hoa, kết quả, năm cho từ – 10 kg quả, từ khoảng – tuổi bắt đầu cấy tạo trầm Với mật độ trồng 1.600 – 2.000 cây/hecta (400 – 500 cây/ hecta trồng đất rừng cằn cõi), Dó bầu nguồn nguyên liệu dồi cần phát triển kinh tế Một số nghiên cứu gần giới nghiên cứu thành phần thu từ loài A sinensis cho thấy loài giàu thành phần saponin triterpen với tác dụng độc tế bào mạnh TỒNG QUAN Hiện nay, xã hội ngày phát triển, người có xu hướng quay sử dụng thuốc có nguồn gốc tự nhiên, sử dụng dược liệu phòng điều trị bị bệnh Cây Dó bầu lồi phổ biến, biết đến từ lâu đời quốc gia Phương Đơng Lồi có khả bị gây nhiễm hình thành trầm hương có giá trị kinh tế cao, hương liệu dược liệu quý giá gây nhiễm phần gỗ Do có giá trị cao mặt kinh tế nên diện tích trồng Dó bầu tăng nhanh (8.000 hecta lên đến 20.000 hecta từ năm 2007-2011) Hiện nay, bên cạnh lồi Dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte) trồng phổ biến, nước ta cịn trồng lồi Dó Bà Nà (A bananensis), Dó nhăn (A rugosa L.C.Kiet & Kebler), Dó Mã Lai (A malaccensis Lamk ), Dó Trung Quốc (A sinensis) để thu trầm sản xuất tinh dầu 39 Giải thưởng Sinh viên Nghiên cứu khoa học Euréka lần thứ XIX năm 2017 Kỷ yếu khoa học Hình Quả Dó bầu UHPLC ACCQUITY ArcTM Water, đầu dị PDA Cột: Phenomenex Gemini C18 (150 x 4,6 mm; µm) Tốc độ dịng: ml/phút, thể tích tiêm mẫu: µl Nhiệt độ cột 40°C, phát PDA 330 nm Pha động: A: 0,2% AcOH/CAN B: dung dịch 0,2% AcOH Dung môi pha mẫu: MeOH HPLC VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Nguyên liệu: Quả Dó bầu (Aquilaria crassna Piere ex Lecomte) thu hái xã Đồng Tâm, huyện Đồng Phú, tỉnh Bình Phước (cơng ty TNHH Tiến Phước) tháng 05/2015 Loài A crassna định danh trước nuôi trồng quy mô lớn Quả sau thu hái phơi sấy khô, phần hạt tách riêng, vỏ xay nhỏ sử dụng nghiên cứu Dược liệu bảo quản bao bì kín Phương pháp: Sử dụng phương pháp sắc ký cột cổ điển, sắc ký rây phân tử, phương pháp tinh chế kết tinh lại dung mơi thích hợp Cấu trúc hợp chất phân lập xác định phương pháp so chuẩn với phương pháp HPLC phổ MS, NMR Bảng Chương trình gradient rửa giải kiểm tra tinh khiết Thời gian (phút) 10 13 14 15 18 19 22 23 27 28 31 %A %B 10 10 13 13 25 25 30 35 64 65 65 85 85 10 90 90 87 87 75 75 70 75 36 35 35 15 15 90 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Từ dịch chiết MeOH 2,2 kg vỏ quả, tiến hành chiết phân bố lỏng – lỏng thu chất AC1 (1.625mg) Phân đoạn tan aceton A-1 (6g) phân lập SKC cổ điển (CHCl3-MeOH) thu 11 phân đoạn Phân lập sắc ký cột tinh chế phân đoạn thu 11 hợp chất: AC2 (200 mg), AC3 (1,55mg), AC4 (24,45mg), AC5 (4,65mg), AC6 (34,32mg), AC7 (27,75mg), AC8 (0,92mg), AC9 (72,36mg), AC10 (93,51mg), AC11 (35,25mg) AC12 (20,09mg) Tiến hành so chuẩn, biện giải so sánh với liệu phổ MS, NMR xác định cấu trúc AC1, AC2, AC3, AC5, AC10, AC11 AC12 mangiferin, 1-octacosanol, genkwanin-4’-methoxy, genkwanin, cucurbitacin E 2-O--D-glucopyranoside, genkwanin-4’-methoxy-5-O--primeveroside genkwanin-5-O--primeveroside 40 Giải thưởng Sinh viên Nghiên cứu khoa học Euréka lần thứ XIX năm 2017 Kỷ yếu khoa học Hình Sắc ký đồ chất phân lập methoxy-5-O--primeveroside (AC11) genkwanin-5-O--primeveroside (AC12) Từ kết đó, tiếp tục tiến hành thử nghiệm tác dụng sinh học vỏ dó dầu dòng tế bào ung thư KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Đề tài phân lập 12 hợp chất, chất xác định mangiferin (AC1), 1-octacosanol (AC2), genkwanin-4’-methoxy (AC3), genkwanin (AC5), cucurbitacin E 2-O--Dglucopyranoside (AC10), genkwanin-4’- Mẫu AC1 AC2 AC3 AC4 AC5 AC6 AC7 AC8 Bảng Kết phân lập định cấu trúc từ vỏ A crassna Tinh khiết Khối lượng Cấu trúc (%) (mg) 100,00 1.625 Mangiferin 200 1-octacosanol 100 1,55 Genkwanin-4’-methoxy 95,53 24,45 100 4,65 Genkwanin 99,32 34,32 95,56 27,75 0,92 41 Giải thưởng Sinh viên Nghiên cứu khoa học Euréka lần thứ XIX năm 2017 AC9 AC10 AC11 95,68 97,53 84,18 72,36 93,51 35,25 AC12 80,58 20,09 Kỷ yếu khoa học cucurbitacin E 2-O--D-glucopyranosid genkwanin-4’-methoxy-5-O-primeverosid genkwanin-5-O--primeverosid Hình Quy trình phân lập từ vỏ A Crassna TÀI LIỆU THAM KHẢO MEI WEN-LI, LIN FENG, ZUO WEN-JIAN, WANG HUI, DAI HAO-FU (2012), “Cucurbitacins from fruits of Aquilaria sinensis”, Chinese Journal of Natural Medicines, 10 (3), 234-237 TRÂM N T N (2016), “Nghiên cứu phân lập bước đầu xây dựng quy trình định lượng thành phần Polyphenol Dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte)”, Đại học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh, XIN LIANG, XIAN-PING CAO, HUI-MIN ZHONG (2012), “Flavonoids from fruit of Aquilaria sinensis”, Journal of Qingdao University of Science and Technology (Natural Science Edition), 6, 010 42 ... 234-237 TRÂM N T N (2016), ? ?Nghiên cứu phân lập bước đầu xây dựng quy trình định lượng thành phần Polyphenol Dó bầu (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte)? ??, Đại học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh, XIN... PHƯƠNG PHÁP Nguyên liệu: Quả Dó bầu (Aquilaria crassna Piere ex Lecomte) thu hái xã Đồng Tâm, huyện Đồng Phú, tỉnh Bình Phước (cơng ty TNHH Tiến Phước) tháng 05/2015 Loài A crassna định danh trước...Giải thưởng Sinh viên Nghiên cứu khoa học Euréka lần thứ XIX năm 2017 Kỷ yếu khoa học Hình Quả Dó bầu UHPLC ACCQUITY ArcTM Water, đầu dị PDA Cột: Phenomenex Gemini C18 (150 x 4,6 mm;