Ung thư vú là loại ung thư thường gặp nhất ở nữ giới và là nguyên nhân gây tử vong do ung thư hàng đầu của phụ nữ trên toàn thế giới. Hóa trị tân hỗ trợ ngày càng được sử dụng rộng rãi ở nhóm bệnh nhân có u kích thước lớn, không thể phẫu thuật, hoặc ở giai đoạn tiến xa cục bộ vì giúp cải thiện kết quả điều trị rõ rệt ở nhóm bệnh nhân này. Nghiên cứu này nhằm khảo sát tương hợp tỷ lệ thấm nhập lymphô bào u trong ung thư biểu mô vú xâm nhiễm giữa mẫu sinh thiết lõi và mẫu bệnh phẩm phẫu thuật.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 KHẢO SÁT TƢƠNG HỢP TỶ LỆ THẤM NHẬP LYMPHÔ BÀO U TRONG UNG THƢ BIỂU MÔ VÚ XÂM NHIỄM GIỮA MẪU SINH THIẾT LÕI VÀ MẪU BỆNH PHẨM PHẪU THUẬT Đoàn Thị Phương Thảo1, Phạm Minh Tâm2, Hứa Minh Trí3, Thái Anh Tú2 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Ung thư vú loại ung thư thường gặp nữ giới nguyên nhân gây tử vong ung thư hàng đầu phụ nữ tồn giới Hóa trị tân hỗ trợ ngày sử dụng rộng rãi nhóm bệnh nhân có u kích thước lớn, khơng thể phẫu thuật, giai đoạn tiến xa cục giúp cải thiện kết điều trị rõ rệt nhóm bệnh nhân Những nghiên cứu gần đây, cho thấy tỷ lệ thấm nhập lymphô bào u (TILs – Tumor-infiltrating lymphocytes) yếu tố quan trọng ung thư vú giá trị tiên lượng, tiên đoán đáp ứng điều trị mối quan hệ mật thiết với liệu pháp miễn dịch Tỷ lệ TILs cao tiên lượng đáp ứng với hố trị tân hỗ trợ nhóm u ba âm tính (triple negative) HER2 dương mạnh Tuy nhiên, liệu tỷ lệ mẫu sinh thiết lõi có đủ để đại diện cho tồn mơ u câu hỏi chưa có lời giải đáp chắn Vì vậy, chúng tơi thực nghiên cứu nhằm khảo sát tương hợp tỷ lệ thấm nhập lymphô bào u ung thư biểu mô vú xâm nhiễm mẫu sinh thiết lõi mẫu bệnh phẩm phẫu thuật Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Hồi cứu 228 trường hợp ung thư vú xâm nhiễm thực thủ thuật sinh thiết lõi phẫu thuật lấy u tương ứng Đánh giá tỷ lệ TILs hai mẫu bệnh phẩm cách độc lập tiêu nhuộm H&E thông thường Sử dụng phương pháp phân tích thống kê để khảo sát tương hợp yếu tố bệnh học lâm sàng liên quan Kết quả: Giá trị trung bình tỷ lệ TILs mẫu bệnh phẩm phẫu thuật cao mẫu sinh thiết lõi 5,4% (p < 0,001) Hệ số tương quan nội lớp (ICC – Intraclass correlation coefficient) chung nhóm 0,851 (khoảng tin cậy 95% 0,81 – 0,88; p < 0,001) Hệ số ICC > 0,9 tiêu sinh thiết lõi có ≥ lõi sinh thiết (p < 0,001) Các yếu tố liên quan đến bất tương hợp bao gồm: kích thước u lớn số lõi sinh thiết nhỏ (p < 0,001) Kết luận: Nhìn chung, tỷ lệ TILs mẫu sinh thiết lõi đại diện cho tồn khối u carcinơm vú xâm nhập cần cẩn trọng đánh giá u có kích thước lớn Lấy lõi sinh thiết thực thủ thuật giúp ích nhiều việc đánh giá xác tỷ lệ TILs Từ khóa: tỷ lệ thấm nhập lymphơ bào u, carcinơm vú xâm nhiễm, sinh thiết lõi kim ABSTRACT CORRELATION OF TUMOR INFILTRATING LYMPHOCYTE IN INVASIVE BREAST CARCINOMA BETWEEN CORE NEEDLE BIOPSIES AND SURGICAL RESECTION SPECIMENS Doan Thi Phuong Thao, Pham Minh Tam, Hua Minh Tri, Thai Anh Tu * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 - No - 2021: 118 - 125 Introduction: Breast cancer is the most common cancer in women worldwide, where it also has the highest mortality rate out of all cancers occurring in women Neoadjuvant chemotherapy has been increasingly used in breast cancer cases since it delivers notably more successful treatments, especially for patients who have locally Bộ môn Mô phôi – Giải phẫu bệnh, Khoa Giải Phẫu Bệnh BV Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh BM Giải phẫu bệnh, Trường ĐH Y khoa Phạm Ngọc Thạch Khoa Giải phẫu bệnh, Bệnh viện Ung Bướu Tác giả liên lạc: BS Phạm Minh Tâm ĐT: 0778898423 Email: phamminhtam017@gmail.com 118 Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Y học advanced or inoperable tumors Recently, tumor-infiltrating lymphocytes have been considered to be an important factor because of their prognostic and predictive values as well as their close association with immunotherapies in breast cancer In HER2+ and triple negative breast carcinoma, high numbers of TILs associated with a better prognosis and better response to neoadjuvant chemotherapy However, it remains unclear whether the TILs scores in core needle biopsies are closely representative of those in the whole tumor section in surgically resected specimens This study aimed to analyze the correlation of tumor infiltrating lymphocytes in invasive breast carcinoma between core needle biopsies and surgically resected specimens Materials and methods: A retrospective study of 228 patients who received core needle biopsy and underwent surgical resection for the diagnosis of invasive breast carcinoma was conducted The TILs values of the core needle biopsies and the surgically resected specimens were evaluated independently using standard H&E staining slides Clinicopathological parameters and the agreement of TILs scores between the two groups were then statistically analyzed Results: The average TILs score in surgically resected specimens was approximately 5.4% higher than in core needle biopsies (p < 0.001) The overall intraclass correlation coefficient (ICC) value of the TILs score between two groups was 0.851 with the 95% confidence interval being 0.81 – 0.88 (p < 0.001) When a core needle biopsy slide has six or more cores, the ICC value is higher than 0.9 Large size tumors and less than cores included in the biopsy slide were independent factors; both were associated with TILs discordance Conclusion: Overall, the TILs score in core needle biopsies can closely represent for the entire surgically resected specimen but be awared when dealing with large tumors More than six core needle biopsy cores may predict a precise TILs score of the whole tumor Keywords: tumor infiltrating lymphocyte, invasive breast carcinoma, core needle biopsy dấu ấn sinh học quan trọng ung thư vú ĐẶT VẤN ĐỀ xâm nhiễm(3-5) Năm 2019, ấn Ung thư vú loại ung thư thường gặp Phân loại u vú, WHO khuyến cáo đưa nữ giới, chiếm 24% loại ung thư nữ việc định lượng TILs vào báo cáo kết thường giới theo Globocan 2020 nguyên nhân gây quy dựa hướng dẫn quốc tế đồng tử vong ung thư hàng đầu phụ nữ thuận năm 2014(1) Hóa trị tân hỗ trợ ngày Việt Nam toàn giới Gần đây, sử dụng rộng rãi nhóm bệnh nhân có u đánh giá tỷ lệ thấm nhập lymphô bào u kích thước lớn, khơng thể phẫu thuật giai (TILs – Tumor-infiltrating lymphocytes) đoạn tiến xa cục giúp cải thiện kết điều xác định yếu tố tiên lượng, tiên đoán quan trị rõ rệt nhóm bệnh nhân này(6).Việc đánh giá trọng ung thư vú mối quan hệ mật thiết tỷ lệ TILs mẫu sinh thiết lõi yếu tố với liệu pháp miễn dịch Tỷ lệ TILs cao tiên đoán quan trọng việc đáp ứng điều trị tiên lượng đáp ứng với hoá trị tân hỗ Tuy nhiên, liệu tỷ lệ mẫu sinh thiết lõi trợ tốt, đặc biệt nhóm ung thư vú ba có đủ để đại diện cho tồn mơ u câu âm tính (triple negative) HER2+, chứng hỏi chưa có lời giải đáp chắn TILs mức độ 1b(1, 2) Tuy chế miễn dịch lĩnh vực thực hành lâm sàng thể với ung thư vô phức tạp chưa Khoa Giải phẫu bệnh bệnh viện Ung Bướu hiểu rõ hoàn toàn, việc định lượng TILs chúng tơi nói riêng Việt Nam nói chung kính hiển vi quang học tiêu nhuộm Chưa có nghiên cứu Việt Nam thực H&E thường quy chứng minh có giá để trả lời câu hỏi nghiên cứu nêu trị, có tính lặp lại, xem Vì vậy, chúng tơi thực nghiên cứu Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh 119 Nghiên cứu Y học nhằm mục đích (1) khảo sát tương hợp tỷ lệ thấm nhập lymphô bào u mẫu sinh thiết lõivà mẫu bệnh phẩm phẫu thuật đồng thời (2) phân tích yếu tố ảnh hưởng đến tương hợp từ áp dụng vào thực hành lâm sàng thường quy theo khuyến cáo WHO 2019 ĐỐI TƢỢNG-PHƢƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Đối tƣợng nghiên cứu Bệnh nhân có chẩn đốn carcinơm vú xâm nhiễm bệnh viện Ung Bướu TP HCM, từ 01 tháng 01 năm 2020 đến hết ngày 31 tháng 12 năm 2020 Tiểu chuẩn lựa chọn Bệnh nhân làm sinh thiết lõi tuyến vú phẫu thuật cắt bỏ tổn thương tương ứng BV Ung Bướu TP HCM, có chẩn đốn carcinơm vú xâm nhiễm Tiêu chuẩn loại trừ Nam giới, không đủ hai tiêu sinh thiết lõi tiêu bệnh phẩm phẫu thuật tổn thương tuyến vú, điều trị trước phẫu thuật, có chẩn đốn ung thư ngun phát quan khác Phƣơng pháp nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu cắt ngang mơ tả Quy trình tiến hành nghiên cứu Tra cứu thông tin từ liệu lưu trữ Khoa Giải phẫu bệnh BV Ung Bướu thu thập tiêu nhuộm H&E thường quy mẫu sinh thiết lõi bệnh phẩm phẫu thuật 228 trường hợp thỏa tiêu chuẩn chọn mẫu Ghi nhận liệu tuổi, số lượng lõi sinh thiết, kích thước u, loại mơ học carcinơm vú xâm nhiễm chẩn đoán biểu dấu ấn ER, PR, HER2 Ki-67, tra cứu kết FISH trường hợp HER2 2+ (nếu có) Khảo sát tiêu mơ bệnh học tất trường hợp 120 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Đánh giá lại loại mơ học phân nhóm phân tử đại diện dựa vào biểu dấu ấn HMMD liên quan theo WHO 2019, độ mô học đánh giá theo hệ thống phân độ Nottingham Tiến hành đánh giá ghi nhận tỷ lệ TILs tiêu sinh thiết lõi bệnh phẩm phẫu thuật tương ứng cách độc lập theo hướng dẫn WHO 2019 Nhóm nghiên cứu TILs quốc tế(7) Phân tích xử lý số liệu Dữ liệu nhập phần mềm Microsoft Excel 365, liệu sau nhập hoàn chỉnh kiểm tra phân tích phần mềm R 4.1.1 Kết trình bày bảng biểu đồ Y Đức Nghiên cứu Hội đồng Y đức Bệnh viện Ung Bướu Thành phố Hồ Chí Minh thẩm định, xét duyệt thông qua theo định số 331/BVUB-HĐĐĐ việc chấp thuận vấn đề đạo đức NCYSH KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Các đặc điểm bệnh học lâm sàng Nghiên cứu chúng tơi có 228 trường hợp với đặc điểm bệnh học lâm sàng sau Tuổi trung bình bệnh nhân nghiên cứu 50,6; bệnh nhân nhỏ tuổi 27 tuổi lớn tuổi 75 tuổi Về loại mô học, có 216 ca chẩn đốn carcinơm vú xâm nhiễm dạng không đặc hiệu (chiếm 95%), ca chẩn đốn carcinơm tiểu thùy xâm nhiễm (chiếm 3%) loại mô học khác chiếm 2% Về độ mô học, có 22 trường hợp đánh giá độ I (chiếm 10%), 145 trường hợp độ II (chiếm 64%) 61 trường hợp độ III (chiếm 27%) Giá trị trung bình kích thước u 30,9 mm (độ lệch chuẩn 14,1), trung vị 29,5mm Trong đó, u có kích thước nhỏ ghi nhận 13 mm lớn 63 mm Số lượng u xếp vào nhóm pT1 (≤ 20 mm) 84 (chiếm 36,8%), pT2 (20 mm – 50 mm) 117 (chiếm 51,3%), lại 27 trường hợp pT3 (≥ 50 mm) (chiếm 11,9%) Số lõi sinh thiết Chuyên Đề Giải Phẫu Bệnh Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 lớn lõi lõi Chúng tơi ghi nhận trường hợp có lõi sinh thiết nên gộp chung với nhóm có lõi thành nhóm + lõi với số lượng 10 (chiếm 4%), lõi có 37 trường hợp (chiếm 16%), lõi có 96 trường hợp (chiếm 42%), lõi có 56 trường hợp (chiếm 25%) cịn lại lõi có 29 trường hợp (chiếm 13%) Có 162 trường hợp dương tính với dấu ấn ER (chiếm 71,1%), 133 trường hợp dương tính với dấu ấn PR (chiếm 58,3%), 71 trường hợp (chiếm 31,6%) biểu dấu ấn HER2 (3+) dương tính (2+) có kết xét nghiệm FISH dương tính Giá trị trung bình Ki-67 33,1% (độ lệch chuẩn 24,2), trung vị 30%, đó, có 78 trường hợp (chiếm 34,2%) thuộc phân nhóm Ki-67 thấp (< 14%), 150 trường hợp (chiếm 65,8%) thuộc nhóm Ki-67 cao (≥ 14%) Về phân nhóm phân tử đại diện, có 49 trường hợp (chiếm 21,5%) thuộc nhóm lịng ống A, 77 trường hợp (chiếm 33,8%) thuộc nhóm lịng ống B – HER2-âm, 40 trường hợp (chiếm 17,5%) thuộc nhóm lịng ống B – HER2-dương, 32 trường hợp (chiếm 14%) thuộc nhóm HER2+ 30 trường hợp (chiếm 13,2%) thuộc nhóm ba âm tính Tỷ lệ TILs mẫu sinh thiết lõi Giá trị trung bình TILs mẫu sinh thiết lõi 18,9%, độ lệch chuẩn 19% Trung vị 11,5% với giá trị nhỏ 0% lớn 80%, khoảng tứ phân vị từ 5% đến 30% Giá trị trung bình trung vị TILs nhóm lòng ống A, lòng ống B – HER2-âm, lòng ống B – HER-dương, ba âm tính HER2+ 10% 5%; 16,3% 10%; 18,4% 13,7%; 27,9 25%; 31,1% 30% Nghiên cứu Y học Phép kiểm Kruskal Wallis cho thấy có mối liên quan giá trị TILs mẫu sinh thiết lõi yếu tố độ tuổi (p = 0,039), grad mô học (p < 0,001), biểu dấu ấn ER (p < 0,001), biểu dấu ấn PR (p < 0,001), tình trạng HER2 (p=0,008), Ki-67 (p < 0,001) phân nhóm phân tử đại diện (p < 0,001) Tỷ lệ TILs cao có liên quan với độ tuổi thấp (< 60 tuổi), grad mô học cao, ER âm tính, PR âm tính, HER2 dương tính, Ki-67 cao, phân nhóm HER2+ ba âm tính Số liệu trình bày bảng Tỷ lệ TILs mẫu bệnh phẩm phẫu thuật Giá trị trung bình TILs nhóm bệnh phẩm phẫu thuật 24,3%, độ lệch chuẩn 21,6% Trung vị 15,5% với giá trị nhỏ 0% lớn 85%, khoảng tứ phân vị từ 7,8% đến 38% Giá trị trung bình trung vị TILs nhóm lịng ống A, lịng ống B – HER2-âm, lòng ống B – HER2-dương, ba âm tính HER2+ 16,8% 12%; 19,5% 10%; 24,8% 21%; 36,2% 35%; 35,4% 32,5% Phép kiểm Kruskal Wallis cho thấy có mối tương quan giá trị TILs mẫu bệnh phẩm phẫu thuật yếu tố độ tuổi (p