Nghiên cứu hàm lượng lipit tổng, thành phần các lớp chất lipit của hai loài san hô mềm Sinularia brassica, Sinularia flexibilis và hai loài thủy tức (san hô lửa) Millepora dichotoma, Millepora platyphylla thu thập được ở vùng biển Nha Trang, Việt Nam cho thấy có sự khác biệt đáng kể.
Vietnam Journal of Marine Science and Technology; Vol 19, No 1; 2019: 87–91 DOI: https://doi.org/10.15625/1859-3097/19/1/13389 https://www.vjs.ac.vn/index.php/jmst Study on total lipid content, lipid class composition of some fire and soft corals collected in Nha Trang, Vietnam Nguyen Ba Kien1,2, Trinh Thi Thu Huong3,*, Luu Van Huyen4, Nguyen Thanh Vinh5, Tran Duy Phong6, Dang Thi Minh Tuyet3, Nguyen Thi Nga3, Dang Thi Phuong Ly3, Pham Quoc Long3 Graduate University of Science and Technology, VAST, Vietnam Vietnam Soils and Fertilizers Research Institute, Hanoi, Vietnam Institute of Natural Products Chemistry, VAST, Vietnam Hanoi University of Natural Resources and Environment, Hanoi, Vietnam Hanoi University of Pharmacy, Hanoi, Vietnam Fisheries Development and Consultancy Joint Stock Company, Hanoi, Vietnam * E-mail: trinhthuhuong2001@gmail.com Received: October 2017; Accepted: 31 December 2017 ©2019 Vietnam Academy of Science and Technology (VAST) Abstract For the first time, the total lipid content and lipid class composition of the Vietnamese soft corals (Sinularia brassica, Sinularia flexibilis) and fire corals (Millepora dichotoma, Millepora platyphylla) were investigated The results indicated that the total lipid content of the investigated species was significantly different Compositions of the lipid classes were analyzed using TLC and image analysis program Sorbfil TLC Videodensitometer DV and the results showed that phospholipids (PL, 10.91–16.02%), monoalkyldiacylglycerols (MADAG, 20.69-39.92%) and hydrocarbon wax (HW, 29.83-37.17%) were the main lipid classes of the total lipid in soft coral species Meanwhile, PL (24.11-33.23%), TG (14.27– 34.92%), ST (10.10–14.50%) and HW (12.08–19.95%) were predominant in fire coral species ST, TG and FFA contents in soft and fire corals were at low level DG was only present in the Sinularia flexibilis but not in other studied corals Keywords: Soft corals, hard corals, lipids, lipid layers Citation: Nguyen Ba Kien, Trinh Thi Thu Huong, Luu Van Huyen, Nguyen Thanh Vinh, Tran Duy Phong, Dang Thi Minh Tuyet, Nguyen Thi Nga, Dang Thi Phuong Ly, Pham Quoc Long, 2019 Study on total lipid content, lipid class composition of some fire and soft corals collected in Nha Trang, Vietnam Vietnam Journal of Marine Science and Technology, 19(1), 87–91 87 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Biển, Tập 19, Số 1; 2019: 87–91 DOI: https://doi.org/10.15625/1859-3097/19/1/13389 https://www.vjs.ac.vn/index.php/jmst Nghiên cứu thành phần, hàm lượng lipit tổng lớp chất lipit số lồi san hơ lửa (thủy tức) san hô mềm vùng biển Nha Trang Việt Nam Nguyễn Bá Kiên1,2, Trịnh Thị Thu Hương3,*, Lưu Văn Huyền4, Nguyễn Thành Vinh5, Trần Duy Phong6, Đặng Thị Minh Tuyết3, Nguyễn Thị Nga3, Đặng Thị Phương Ly3, Phạm Quốc Long3 Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Việt Nam Viện Thổ nhưỡng Nơng hóa, Hà Nội, Việt Nam Viện Hóa học Hợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Việt Nam Trường Đại học Tài nguyên Môi trường Hà Nội, Hà Nội, Việt Nam Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, Việt Nam Công ty Cổ phần tư vấn Phát triển nghề cá, Hà Nội, Việt Nam * E-mail: trinhthuhuong2001@gmail.com Nhận bài: 3-10-2017; Chấp nhận đăng: 31-12-2017 Tóm tắt Nghiên cứu hàm lượng lipit tổng, thành phần lớp chất lipit hai lồi san hơ mềm Sinularia brassica, Sinularia flexibilis hai lồi thủy tức (san hơ lửa) Millepora dichotoma, Millepora platyphylla thu thập vùng biển Nha Trang, Việt Nam cho thấy có khác biệt đáng kể Hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm cao hàm lượng lipit tổng mẫu san hô cứng Các lớp chất mẫu san hơ mềm lipid phân cực (PL; 10,91–16,02%), monoankyldiacylglycerol (MADAG; 20,69–39,92%), hydrocacbon sáp (HW; 29,83–37,17%) Trong đó, mẫu thủy tức lớp chất PL (19,79–21.47%), triacylglycerol (TG; 29,74–41,14%), MADAG (16,54–19,14%) HW (12,08–19,95%) Các lớp chất chiếm tỉ lệ nhỏ mẫu san hô mềm ST (6,62–11,79%), TG (2,31–7,45%) axit béo tự FFA (3,26–7,36%) Ở mẫu thủy tức lớp chất chiếm tỉ lệ nhỏ FFA (0,92–1,77%) ST (8,68–8,79%) Lớp chất diacylglycerol (DG) có mặt lồi san hô mềm Sinularia flexibilis không xuất lồi san hơ khác nghiên cứu Tư khóa: San hô mềm, san hô cứng, lipit, lớp chất lipit GIỚI THIỆU CHUNG Rạn san hô phần quan trọng đại dương, phát triển suy thối rạn san hơ ảnh hưởng trực tiếp đến môi trường sinh thái biển Theo nhà khoa học, với số lồi san hơ phát hiện, khẳng định nhóm san hơ Việt Nam vào loại đa dạng bậc giới Theo kết khảo sát sơ 88 bộ, Việt Nam có khoảng 1.222 km2 rạn san hơ phân bố rộng rãi từ bắc tới Nam, với diện tích lớn tính đa dạng sinh học cao miền Trung miền Nam Các nghiên cứu Việt Nam san hơ ghi nhận gần 400 lồi san hơ tạo rạn vịnh Nha Trang, Ninh Thuận Côn Đảo nơi có 300 lồi [1] Tương tự nhiều loài sinh vật biển cạn, thành phần lipit axit béo Nghiên cứu thành phần, hàm lượng lipit tổng số hóa học có ý nghĩa quan trọng san hơ Trong năm trở lại đây, nhóm nghiên cứu Phạm Quốc Long cộng với nhà khoa học LB Nga tiến hành nghiên cứu thành phần lipit, axit béo 50 lồi san hơ đưa đánh giá sơ ảnh hưởng điều kiện môi trường sống đến trình phát triển chúng [2–5] Tiếp tục hướng nghiên cứu lipit đối tượng san hô, báo này, đưa kết nghiên cứu so sánh khác biệt thành phần lipit số lồi san hơ lửa (thủy tức) san hô mềm Việt Nam THỰC NHIỆM Phương pháp nghiên cứu Phương pháp tách chiết lipit tổng Mẫu sinh vật biển tươi nghiền nhỏ ngâm hỗn hợp dung môi CHCl3:MeOH tỷ lệ 1:2 (v/v) nhiệt độ phòng, sau vài giờ, lọc hỗn hợp để loại bỏ phần bã Phần dung dịch lại bổ sung thêm CHCl3 để hỗn hợp dung dịch đạt tỷ lệ 1:1 (v/v), lắc đều, thêm tiếp H2O lắc kỹ để hỗn hợp dung dịch qua đêm 0oC Cuối cùng, tách lấy lớp dưới, cô quay loại bỏ dung môi thu hỗn hợp lipit tổng Lipit tổng hịa tan dung mơi CHCl3 tinh khiết bảo quản -18oC Hàm lượng lipit tổng tính theo phần trăm lượng lipit tổng thu so với khối lượng mẫu tươi ban đầu Phương pháp xác định thành phần hàm lượng lớp chất lipit Lipit tổng chấm mỏng silicagel (6 × cm) vệt với nồng độ khác nhau, sau chạy hệ dung môi n-Hexane: Et2O:CH3COOH (90:10:1, v:v:v), hình 10% H2SO4/MeOH, sấy đến lớp chất hình hồn tồn; scan máy Epson Perfection 2400 PHOTO (Nagano, Nhật Bản) với độ phân giải kích thước tiêu chuẩn Phần trăm lớp chất lipit tổng xác định dựa đo diện tích cường độ màu chương trình phân tích hình ảnh Sorbfil TLCVideodensitometer DV (Krasnodar, LB Nga) [6] Nguyên liệu Nguyên liệu nghiên cứu gồm mẫu san hô, có mẫu san hơ mềm Sinularia brassica, Sinularia flexibilis, mẫu thủy tức Millepora dichotoma, Millepora platyphylla thu thập vùng biển Nha Trang thời tháng 12/2016, 10/2017 2/2018 Mẫu GS TS Đỗ Công Thung cộng sự, Viện tài nguyên mơi trường biển Hải Phịng giám định tên lồi lưu giữ tiêu Danh sách mẫu nghiên cứu trình bày bảng Bảng Danh sách mẫu nghiên cứu STT Kí hiệu mẫu SHM01 SHM02 TT01 TT02 Tên khoa học Sinularia brassica Sinularia flexibilis Millepora dichotoma Millepora platyphylla KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Lipit tổng Kết phân tích hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm (Sinularia brassica, Sinularia flexibilis) thủy tức (Millepora dichotoma, Millepora platyphylla) trình bày bảng Kết nghiên cứu cho thấy hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm dao động khoảng 0,88–1,66% Trong đó, hàm Địa điểm/thơi gian thu mẫu Vịnh Nha Trang, 14/12/2016 Hòn Nội, Nha Trang, 15/12/2016 Vịnh Nha Trang, 10/2017 Vịnh Nha Trang, 2/2018 lượng lipit tổng mẫu thủy tức dao động khoảng 0,22–0,29% Giá trị thấp nhiều so với giá trị hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm Mẫu san hô mềm Sinularia flexibilis có hàm lượng lipit tổng cao so với hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm Sinularia brassica với giá trị tương ứng 1,66% 0,88% Ở mẫu san hô cứng, hàm lượng lipit tổng khơng có chênh lệch nhiều Các kết hàm lượng lipit tổng 89 Nguyễn Bá Kiên, Trịnh Thị Thu Hương mẫu san hô mềm, thủy tức phù hợp với kết công bố nhóm nghiên cứu Latyshev et al., (1983), Phạm Quốc Long nnk., (2008) [3] Bảng Hàm lượng lipit tổng mẫu nghiên cứu STT Kí hiệu mẫu SHM01 SHM02 TT01 TT02 Khối lượng mẫu tươi (g) 90,91 104,82 58,1 97,2 Khối lượng lipit tổng (g) 0,8 1,74 0,1264 0,284 Các lớp chất lipit Thành phần lớp chất lipit mẫu san hơ nghiên cứu trình bày bảng 3, hình 1, Kết nghiên cứu cho thấy, thành phần lớp chất lipit lipit tổng mẫu san hơ mềm thủy tức có khác biệt Đối với mẫu san hô mềm Sinularia brassica Hàm lượng lipit tổng (%) 0,88 1,66 0,22 0,29 Sinularia flexibilis, lớp chất chiếm hàm lượng PL (10,91–16,02%), MADAG (20,69–39,92%), HW (29,83–37,17%) Trong đó, mẫu thủy tức Millepora dichotoma Millepora platyphylla lớp chất chiếm hàm lượng PL (19,79– 24,47%), TG (14,27–34,92%), ST (8,68– 8,79%) HW (12,08–19,95%) Bảng Thành phần hàm lượng lớp chất lipit mẫu san hô nghiên cứu STT 43 K/h mẫu SHM01 SHM02 TT01 TT02 TT02 Tên khoa học Sinularia brassica Sinularia flexibilis Milleporadichotoma Millepora 21.47 platyphylla Millepora platyphylla PL 10,91 16,02 19,79 8.79 21,47 50 404 30 20 50 10 40 30 20 TT02 Millepora platyphylla 21.47 DG 6,86 -0.92 - FFA TG MADG HW 3,26 2,31 39,92 37,17 7,36 7,45 20,69 29,83 1,77 41,14 16,54 12,08 29.74 19.14 19.95 0,92 29,74 19,14 19,95 Sinularia brassica Ngoài ra, mẫu Sinularia 50 flexibilis cịn thấy có mặt lớp chất DG với 40 - lượng0.92 6,86% Lớp chất không thấy 8.79 hàm 29.74 19.14 19.95 có 30 mặt mẫu nghiên cứu khác Sinularia brassica Sinularia flexibilis Sinularia brassica Sinularia 10 flexibilis Hình Thành phầnphần hàm lượng lớp Biểu đồ 1: Thành hàm lượng cácchất lớp lipit mẫu san hô mềm chất lipit mẫu san hô mềm Với mẫu san hô mềm Sinularia brassica, lớp chất ST, TG FFA, có hàm lượng thấp với giáBiểu trị tương lầnphần lượt là: hàm 6,62%, 2,31% đồ 1: ứng Thành lượng lớp 3,26% Ở mẫu Sinularia flexibilis lớp chất chất lipit mẫu san hô mềm FFA (7,36%) TG (7,45%) có hàm lượng thấp hàm lượng lớp chất PL, MADG, HW, nhiên, hàm lượng lớp chất có giá trị cao so với chúng mẫu 90 ST 6,62 11,79 8,688,79 20 50 10 40 30 20 10 Millepora dichotoma Millepora platyphylla Millepora dichotoma Millepora Biểu đồ 2: Thành phần hàm lượngplatyphylla lớp chất lipit mẫu san hơ cứng Hình đồ Thành phần hàm lượng lớp Biểu 2: Thành phần hàm lượng cácchất lớp lipit mẫu san hô cứng chất lipit mẫu san hô cứng Với mẫu thủy tức Millepora dichotoma Millepora platyphylla lớp chất có hàm lượng thấp axit béo tự FFA với Nghiên cứu thành phần, hàm lượng lipit tổng giá trị tương ứng 1,77% 0,92%, tiếp đến lớp chất ST, với giá trị ương ứng 8,68% 8,79% Các giá trị lớp chất FFA ST hai mẫu san hô tương đồng Đặc biệt, mẫu thủy tức khơng thấy có mặt lớp chất DG Đây khác biệt mẫu thủy tức mẫu san hô mềm nghiên cứu KẾT LUẬN Lần nghiên cứu hàm lượng lipit tổng thành phần lớp chất lipit hai lồi san hơ mềm Sinularia brassica, Sinularia flexibilis hai loài thủy tức Millepora dichotoma, Millepora platyphylla thu thập vùng biển Nha Trang, Việt Nam thực Kết nghiên cứu cho thấy, hàm lượng lipit tổng thành phần lớp chất hai loại san hơ nghiên cứu có khác biệt có đặc trưng riêng Đối với mẫu san hô mềm Sinularia brassica, Sinularia flexibilis, lớp chất chiếm hàm lượng PL (10,91–16,02%), MADAG (20,69–39,92%) HW (29,83–37,17%) Trong đó, mẫu thủy tức Millepora dichotoma, Millepora platyphylla lớp chất chiếm hàm lượng PL (24,11–33,23%), TG (14,27–34,92%), ST (10,10–14,50%) HW (12,08–19,95%) Các lớp chất chiếm tỉ lệ nhỏ mẫu san hô mềm ST (6,62%), TG (2,31%) axit béo tự FFA (3,26%) Các lớp chất chiếm tỉ lệ nhỏ mẫu thủy tứclà FFA (1,77–0,92%) ST (8,68–8,79%) Đặc biệt, mẫu san hô mềm Sinularia flexibilis có xuất lớp chất DG với hàm lượng 6,86%, đó, lớp chất khơng có mặt mẫu san hơ cịn lại Lời cảm ơn: Nhóm tác giả xin trân trọng cảm ơn hỗ trợ kinh phí từ đề tài hợp tác quốc tế cấp viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, mã số: VAST.HTQT.NGA 1505/16–17 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nguyễn Văn Long nnk., 2011 Hiện trạng, xu dự báo biến động đa dạng sinh học rạn san hô vùng ven bờ từ Đà Nẵng đến Bình Thuận Hội nghị khoa học kỷ niệm 35 năm viện Khoa học Công nghệ Việt Nam 1975–2010 Tiểu ban: Khoa học công nghệ biển [2] Phạm Quốc Long, Châu Văn Minh, 2005 Lipit axit béo hoạt tính sinh học có nguồn gốc thiên nhiên Nxb Khoa học Kỹ thuật [3] Phạm Quốc Long, Lưu Văn Huyền, Imbs Andrey B., Dautova T N., 2008 Lipit axit béo rạn san hô Việt Nam - Đa dạng sinh hóa học Nxb Khoa học Kỹ thuật [4] Imbs, A B., Latyshev, N A., Dautova, T N., and Latypov, Y Y., 2010 Distribution of lipids and fatty acids in corals by their taxonomic position and presence of zooxanthellae Marine Ecology Progress Series, 409, 65–75 [5] Pham Quoc Long et al., 2015 Final report of 5th section of the major object: “Study on content and composition of lipids, fatty acids, oxilipin of some Vietnamese corals and marine organisms of East-North coast in Vietnam” [6] Folch, J., Lees, M., and Sloane Stanley, G H., 1957 A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues Journal of Biological Chemistry, 226(1), 497–509 91 ... Hình Thành phầnphần hàm lượng lớp Biểu đồ 1: Thành hàm lượng cácchất lớp lipit mẫu san hô mềm chất lipit mẫu san hô mềm Với mẫu san hô mềm Sinularia brassica, lớp chất ST, TG FFA, có hàm lượng. .. platyphylla thu thập vùng biển Nha Trang, Việt Nam cho thấy có khác biệt đáng kể Hàm lượng lipit tổng mẫu san hô mềm cao hàm lượng lipit tổng mẫu san hô cứng Các lớp chất mẫu san hơ mềm lipid phân... 2: Thành phần hàm lượngplatyphylla lớp chất lipit mẫu san hô cứng Hình đồ Thành phần hàm lượng lớp Biểu 2: Thành phần hàm lượng cácchất lớp lipit mẫu san hô cứng chất lipit mẫu san hô cứng Với