ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT-PCR PHÁT HIỆN VIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus-1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE

... đầu xây dựng phƣơng pháp PCR thoái hoá dứa Cayenne làm sở cho việc xác định gene liên quan đến tính kháng virus PMWaV – gây bệnh héo đỏ đầu Nghiên cứu đa dạng di truyền gene kháng giống dứa Cayenne ... 9/2007 “XÁC ĐỊNH GENE LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH KHÁNG VIRUS PMWaV Pineapple mealybug wilt associated virus - GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE BẰNG PHƢƠNG PHÁP PCR THOÁI HOÁ (degenerated PCR) ” ... NGHIỆP XÁC ĐỊNH GENE LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH KHÁNG VIRUS PMWaV - Pineapple mealybug wilt associated virus - GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE BẰNG PHƢƠNG PHÁP PCR THOÁI HOÁ (degenerated PCR) ...

... đó, PCR phương pháp sử dụng hữu hiệu  Xuất phát từ lí trên, tiến hành thực đề tài Ứng dụng kỹ thuật PCR việc phát gen độc lực E.coli gây tiêu chảy người  MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Sử dụng kỹ thuật ... CỨU Sử dụng kỹ thuật PCR với cặp mồi đặc hiệu nhằm phát gen độc lực nhóm E.coli gây bệnh tiêu chảy người, làm tiền đề cho việc tạo sinh phẩm chẩn đoán nhóm E.coli gây tiêu chảy 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ ... nên sử dụng trực tiếp (3 µl/1 phản ứng) mà không cần tiến hành pha loãng Nhược điểm: DNA thu không đủ để phát phương pháp điện di thông thường 3.2 KHUẾCH ĐẠI CÁC GEN ĐỘC LỰC CỦA CÁC NHÓM E.COLI...

... nghiên cứu đề tài: Ứng dụng kỹ thuật PCR phát nhanh Salmonella typhi thực phẩm 1.2 Mục đích nghiên cứu Xây dựng quy trình phát nhanh Salmonella typhi thực phẩm kỹ thuật PCR với độ đặc hiệu ... số Salmonella typhi phục vụ phản ứng PCR phát nhanh Salmonella typhi - Tối ưu điều kiện phản ứng PCR phát Salmonella typhi - Xác định giới hạn phát hiện, độ đặc hiệu phản ứng PCR phát nhanh Salmonella ... trình phát Salmonella typhi kỹ thuật PCR phát nhanh Salmonella typhi 38 4.2.1 Xác định nồng độ DNA tối thiểu phản ứng PCR phát nhanh Salmonella typhi 38 4.2.2 Tối ưu phản ứng PCR phát...

... phản ứng PCR phát nhanh Staphylococcus aureus - Xây dựng qui trình tách chiết DNA phù hợp cho phát nhanh Staphylococcus aureus kỹ thuật PCR - Xác định điều kiện tối ưu phản ứng PCR phát nhanh Staphylococcus ... cặp mồi cho phản ứng PCR 14 3.4.3 Xây dựng qui trình phát nhanh Staphylococcus aureus kỹ thuật PCR 14 3.4.5 Xác định giới hạn phát phản ứng PCR phát nhanh Staphylococcus aureus ... ứng dụng: + 01 cặp mồi đặc hiệu cho phản ứng PCR phát nhanh vi khuẩn tụ cầu vàng Staphylococcus aureus + 01 Quy trình phát nhanh tụ cầu vàng Staphylococcus aureus mức độ chủng phòng thí nghiệm SUMMARY...

... phát từ thực tiễn nghiên cứu đó, tiến hành thực đề tài : ‘ Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR phát bệnh greening có múi ’’ 1.2 Mục đích nghiên cứu Chẩn đoán bệnh vàng greening có múi kỹ thuật PCR ... địa điểm thời gian nghiên cứu 3.2.1 Phạm vi nghiên cứu Đề tài nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR để phát nhanh bệnh vàng greening đối tượng có múi 3.2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu - Địa điểm: Phòng ... đoán bệnh vàng greening 19 2.3 Cơ sở khoa học việc ứng dụng kỹ thuật PCR phát bệnh vàng greening .21 2.3.1 Nguyên lý ứng dụng kỹ thuật PCR 21 2.3.2 Các thành phần phản ứng...

... ACAGGAAGGACAACACTCAC : || :: : 3' CACTCACAACAGGAAGGACA -1, 57 5' ACAGGAAGGACAACACTCAC || : : :: 3' CACTCACAACAGGAAGGACA -1, 57 226 -1.6 -1.6 225 5' ACAGGAAGGACAACACTCAC || :: 3' CACTCACAACAGGAAGGACA ... ACAGGAAGGACAACACTCAC : || 3' CTAACGAACTTCAAACACGC -1, 57 5' ACAGGAAGGACAACACTCAC : || : 3' CTAACGAACTTCAAACACGC -1, 57 5' ACAGGAAGGACAACACTCAC || : : : 3' CTAACGAACTTCAAACACGC -1, 57 5' ACAGGAAGGACAACACTCAC || : : ... CGCACAAACTTCAAGCAATC || :: :: :: 3' CTAACGAACTTCAAACACGC CGCACAAACTTCAAGCAATC || :: 3' CTAACGAACTTCAAACACGC 64 -1,94 5' CGCACAAACTTCAAGCAATC || :: 3' CTAACGAACTTCAAACACGC -1, 47 5' CGCACAAACTTCAAGCAATC...

... cho PMWaV-1 Điều khẳng định độ tin cậy quy trình RT-PCR vừa xây dựng Tỷ lệ nhiễm PMWaV-1 giống dứa Cayenne giám định cao, giống Thái Lan: 53,3%, giống Trung Quốc: 46, 7% giống Lâm Đồng: 46, 7% ... vùng dứa khác để đánh giá xác tình hình bệnh héo đỏ đầu nhiễm PMWaV-1 nước Kết hợp với quy trình phát PMWaV-2 xử lý nhiệt – nuôi cấy mô dứa để xây dựng mô hình cung cấp nguồn giống dứa virus ... nguy lớn bệnh héo đỏ đầu đe dọa người trồng dứa đòi hỏi cấp thiết phương pháp phòng trừ bệnh hiệu 4.2 Đề nghị Với kết luận rút trên, để tiếp tục phát triển hiệu đề tài, đưa số đề nghị sau: Tiếp...

... quy trình RT-PCR trình bày phần phương pháp thực chu trình khảo sát với mẫu RNA ly trích từ bệnh cho kết sau: 46 L 1 .50 0 bp 50 0 bp 58 9 bp Hình 4. 2: Sản phẩm RT-PCR chu trình nhiệt Chú thích: L: ... cần thiết để đánh giá xác diện PMWaV-1 Như vậy, kết luận quy trình RT-PCR xây dựng hoàn toàn đủ độ tin cậy việc phát PMWaV-1 Hình 4. 5: Sơ đồ phản ứng RT-PCR phát PMWaV-1 ... sau: 49 L 58 9 bp 50 0 bp Hình 4. 4: Kết khảo sát số chu kỳ RT-PCR thích hợp Chú thích: L: Ladder Giếng 1: sản phẩm RT-PCR với 41 chu kỳ Giếng 2: sản phẩm RT-PCR với 42 chu kỳ Giếng 3: sản phẩm RT-PCR...

... tắc trên, phản ứng RT-PCR tối ưu khảo sát dựa chu trình sau Bảng 3. 1: Các chu trình nhiệt phản ứng RT-PCR khảo sát Giai đoạn Chu trình nhiệt 45 oC /45 ’ 45 oC /45 ’ 45 oC /45 ’ 94oC/2’ 94oC/2’ 94oC/2’ 94oC/2’ ... 52oC/1’ 54oC/1’ 56oC/1’ 58oC/1’ 58oC/1’ 68oC/1’30’’ 68oC/1’30’’ 68oC/1’30’’ 68oC/1’30’’ (45 chu kỳ) cDNA 45 oC /45 ’ 68oC/1’30’’ Khuếch đại 45 oC /45 ’ 94oC/2’ Tạo cDNA (45 chu kỳ) (45 chu kỳ) (45 chu ... mM 0,6 mM 3.2.3 .4 Xác định số chu kỳ phản ứng tối ưu Phản ứng RT-PCR thực mức 41 , 42 , 43 , 44 , 45 chu kỳ để xác định số chu kỳ cho hiệu khuếch đại tối ưu 3.3 .4 Điện di sản phẩm RT-PCR Sản phẩm...

... tư lớn cho dứa (chương trình cây, thành phố Hồ Chí Minh) cần phải xây dựng quy trình phòng trừ bệnh thật hiệu Từ thành nghiên cứu thực giới, ta đề mô hình phòng trừ bệnh héo đỏ đầu sau: Xử lý nhiệt ... 2.6 Các phương pháp chẩn đoán PMWaV Từ nghiên cứu bệnh héo đỏ đầu thực giới cho thấy, có phương pháp để chẩn đoán PMWaV-1 dứa - Phương pháp ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay ): năm 1978, ... công phương pháp để chẩn đoán bệnh virus hại khoai tây Phương pháp hoạt động dựa nguyên tắc kháng nguyên – kháng thể Hiện phương pháp huyết đại nhanh chóng để chẩn đoán bệnh virus 25 - Phương pháp...

... NGHỆ SINH HỌC ***000*** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS PMWaV -1 GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ (Mealybug wilt) TRÊN CÂY DỨA CAYENNE BẰNG PHƯƠNG PHÁP RT-PCR Giáo viên hướng dẫn Sinh ... HÌNH TRANG Hình 2. 1: Cây dứa Hình 2. 2: Dứa Cayenne Hình 2. 3: Cây dứa Cayenne bị héo đỏ đầu 10 Hình 2. 4: Quả dứa bị héo đỏ đầu 10 Hình 2. 5: Rệp xám (Dysmicoccus ... thụ dứa giới Việt Nam 2.4 Bệnh héo đỏ đầu dứa 2.5 Một số nghiên cứu bệnh héo đỏ đầu giới Việt Nam 13 2.6 Các phương pháp chẩn đoán PMWaV 15 2.7 Gene HSP 70 PMWaV -1 .16 ...