Giáo trình DNA tái tổ hợp part 8 ppsx

... nghệ DNA tái tổ hợp 1 38 6.5 dG:dC. -. AAAAAACCCCCC Tổng hợp sợi cDNA thứ hai Plasmid PstI AAAAAA AAAAAA TTTTTT Tổng hợp ... từ mô/cơ quan. (complementary DNA) tổng hợp cDNA do. . QcDNA qua ba enzyme reverse transcriptase. (2) Biến tính và c -cDNA Công nghệ DNA tái tổ hợp 126 Kit khác nhau, trong đó ... 3’ TTTTTT 5’ cDNA sợi đôi Nuclease S1 DNA polymerase I Tổng hợp sợi cDNA thứ hai Biến tính thể lai mRNA-cDNA AAAAAA 3’ mRNA 5’ 5’ 3’ 3’ 3’ 5’ 3’ Tổng hợp sợi cDNA thứ nhất trên...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 3 ppsx

... Công nghệ DNA tái tổ hợp 10 ). C 5’ 3’ DNA polymerase DNA OH + ndNTP DNA- (pdN)n + nPPi DNA đơn/nhóm 3’-OH tự do 3’ 5’ Exonuclease 5’pNOH DNA sợi đơn ... enzyme Mg2+ enzyme Mg2+ Công nghệ DNA tái tổ hợp 13 . Quá trình tổng hợp này không cần mồi. 5’ 3’ RNA polymerase dsDNA + nrNTP RNA + PPi promoter của bacteriophage ... RNA :DNA mà không cắt DNA hoặc RNA không ở trong thể lai, enzyme này thường được dùng để phá hủy khuôn mẫu RNA sau khi tổng hợp sợi cDNA thứ nhất bằng phiên mã ngược, để tiếp tục tổng hợp sợi cDNA...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 10 pdf

... dạng tái tổ hợp của protease 3C từ rhinovirus của người. Protease này có kích thước nhỏ (20 kDa) và có một tính đặc hiệu rất hạn chế. Nó được biểu hiện như là một protein tái tổ hợp được dung hợp ... sống bằng phương pháp ly Công nghệ DNA tái tổ hợp 165 Hình 7 .8. Vector pAS1. Vector pAS1 là một plasmid dài khoảng 5 ,8 kb mang promoter PL của bacteriohage ... quá trình này. Chaperonins là các protein cần để đảm bảo cuộn xoắn chính xác các in vivo protein, với khả năng thuận lợi của chaperonin tái tổ hợp chúng được dùng để xúc tác cho quá trình tái...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 7 pps

... BHB2 688 và BHB2690. Các hỗn hợp đóng gói chỉ cần chuẩn bị một lần và có thể bảo quản ở -80 oC. Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 08 Tùy thuộc vào loại vector mà có thể dùng một lượng thích hợp ... các vector tái tổ hợp để đóng gói chúng khi có mặt các đầu rỗng của phage và các protein đóng gói. Phương thức này đòi hỏi các phân tử vector tái tổ hợp phải có chiều dài ít nhất là 38 kb và ... 3’ Công nghệ DNA tái tổ hợp 107 thành sẽ không được đẩy vào trong các tế bào mới của quá trình phân chia tế bào. Ngoài ra, còn phải có một gốc tái bản để sao chép DNA. Các nhân tố này...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 1 pdf

... Quốc Dung Giáo trình Công nghệ DNA tái tổ hợp NXB Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh 2007 Công nghệ DNA tái tổ hợp 181 đã có những đóng góp đáng ... tạo xây dựng thư viện cDNA (cDNA library). DNA khuôn mẫu (template DNA) .(sao chép) hoặc khuếch đại DNA (PCR) . DNA polymerase. mẫu . Công nghệ DNA tái tổ hợp 187 Gradient. Biến thiên ... Quá trình biến đổi này xảy ra trong nhân tế bào. Gốc tái bản (origin, ori). Trình tự nucleotide hoặc vị trí trên DNA mà ở đó bắt đầu sự tái bản (sao chép). Công nghệ DNA tái tổ hợp 182 ...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 2 pdf

... với protein dung hợp, protein nguyên thể được tổng hợp từ đầu N của nó chứ không phải từ đầu N của vector. Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi là kỹ ... Công nghệ DNA tái tổ hợp 200 Trình tự điều hòa (regulatory sequence). Một trình tự của DNA tham gia vào quá trình điều hòa của gen. Ví dụ: trình tự promoter hoặc operator. Trình tự khởi ... hạn chế (restriction patterns). Thể tái tổ hợp (recombinant). Các cá thể hoặc tế bào mang các tổ hợp gen khác với cha mẹ của chúng do các quá trình tái tổ hợp di truyền sinh ra. Thông tin di...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 6 pps

... trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp 104 15-23 kb), cosmid (45 kb) hay BAC (>100 kb). g(xem chương 6). II. Tạo dòng các đoạn DNA để xây ... cos DNA Đuôi DNA A λ B Công nghệ DNA tái tổ hợp 103 5.1 .. a, b, c và d trình bày sự khác nhau (nhưng chồng lên nhau) của các đoạn DNA ... như Mbo 5’-GATC-3’ngay trong gen. Công nghệ DNA tái tổ hợp 88 Hình 4.10. Phân tử DNA của phage . A: Tự tái bản DNA từ dạng vòng của làm cho nó trở thành dạng dây...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 5 pptx

... thái Vùng hợp nhất và tái tổ hợp (vùng đệm) Vùng điều hòa và miễn dịch Vùng sao chép DNA Vùng phân giải vật chủ Vùng điều hòa chức năng muộn R-cos Công nghệ DNA tái tổ hợp 83 được ... Biến nạp vector tái tổ hợp vào vi khuẩn/tế bào vật chủ Sau khi tạo được vector tái tổ hợp mang gen ngoại lai, việc tiếp theo là biến nạp nó vào tế bào vật chủ. Trong trường hợp này tế bào vật ... khuẩn E. coli để khuếch đại một lượng lớn DNA plasmid tái tổ hợp dùng cho các phân tích về sau. Hai phương pháp được dùng để biến nạp vector tái tổ hợp vào E. coli là điện biến nạp (electroporation...

Giáo trình DNA tái tổ hợp part 4 pps

... DNA thứ nhất, sau đó dùng sợi này làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự như giai đoạn thứ nhất và thứ hai của quá trình tổng hợp cDNA-xem chương 6). Giai đoạn thứ hai. Dùng DNA ... các ười ta thưđ -, tạo thành sợi đôi ổn định trong tổng hợp DNA. Thông thư 28- 35 mer cần cho việc khuếch đại các trình tự có mức độ dị hợp cao. Đối với những primer ngắn hơn 20 mer, có thể ... về mRNA cũng cần đến RT-PCR để biến đổi sợi RNA thành DNA cho quá trình tạo dòng để phân tích trình tự gen (gene sequencing) hay tái tổ hợp (recombination) trong nghiên cứu biểu hiện gen. ...

Giáo trình DNZ tái tổ hợp part 9 pdf

... bỏ 27. Công nghệ DNA tái tổ hợp 143 Tổng hợp cDNA sợi thứ hai bằng primer-adapter sợi đơn.Tạo ra nhiều vị trí cắt hạn chế ở đầu tận cùng cDNA CCCCCCCCCC 3’ (T)nCAGCTGAGG ... nghệ DNA tái tổ hợp 159 Hình 7.3. Vector pEX2. Plasmid vector này dài khoảng 5 ,8 kb được thiết kế để biểu hiện đoạn DNA ngoại lai (cDNA) được dung hợp ... Ampr ori pUR2 78 (5,2 kb) 1000 3000 4000 5000 EcoRI Plac 2000 lacZ Vùng tạo dòng Pst I lac UV5 Công nghệ DNA tái tổ hợp 155 Chương 7 gen tái tổ hợp trong Escherichia...

18
1,640
1

Xem thêm