Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 7 pps

... sâu trong một thời gian ngắn để dùng thì phải đặt trên đá tuyết (ice bath). II. Các enzyme trùng hợp 1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase được dùng để tổng hợp DNA ... ứng cắt DNA bằng RE - Ứng dụng chính + Đánh dấu đoạn DNA để làm mẫu dò bằng dịch chuyển điểm đứt. + Khởi đầu cho sự tổng hợp sợi thứ hai trong tạo dòng cDNA. + Xác định...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận thêm một lĩnh vực khác của công nghệ sinh học thông ... truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan trọng và là công nghệ chìa khóa (key technology) của lĩnh vực công nghệ sinh học. Công nghệ DNA tái tổ hợp được ra...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... cerevisiae. Là một vi sinh vật nhân thật được sử dụng nhiều trong công nghệ DNA tái tổ hợp. Genome của nấm men S. cerevisiae khoảng 1,35×10 7 base-pair nhiều hơn E. coli khoảng 3,5 lần. Nấm men ... tổng hợp mạch mới nhờ DNA polymerase chịu nhiệt (Taq polymerase) ở 70 -72 o C. PCR có ứng dụng rộng rãi trong chẩn đoán y học, phân tích sự đa dạng sinh học, chọn giống và tro...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của DNA để phân tích trình tự bằng phương pháp Maxam và Gilbert (1 977 ), dùng làm mẫu dò trong các kỹ thuật lai phân tử (xem chương 5). + Phosphoryl hóa các đoạn nối (linker) và các đoạn DNA ... Phân tích phức hợp protein :DNA (DNase footprinting). + Loại bỏ DNA trong các phân đoạn RNA hay protein. 2. Nuclease S1 (Aspergillus oryzae) Enzyme nuclease S1 cắt DNA sợi đơn h...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... khe nhỏ được cắt trong gel ngay phía trước băng DNA quan tâm và đặt trong khe một mẫu giấy loại NA-45. Gel sau đó được điện di trở lại và băng DNA quan tâm sẽ dịch chuyển vào trong mẫu giấy. ... nhiệt độ Tập tính điện di của DNA trong agarose gel không bị ảnh hưởng rõ rệt bởi thành phần base của DNA hoặc nhiệt độ mà ở đó gel được chạy. Trong agarose gel, tính linh độ...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... genomic DNA. Các giai đoạn trong xây dựng thư viện DNA trong vector bacteriophage l . a, b, c và d trình bày sự khác nhau (nhưng chồng lên nhau) của các đoạn DNA trong genome, được hợp nhất trong ... chứa các đoạn genomic DNA tạo thành thư viện genomic DNA. Mỗi đoạn DNA chứa trong vector của thư viện được gọi là một dòng (clone). Tùy thuộc vào kích thước của các đoạn...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... và chloroform. RNA hòa tan trong pha nước được kết tủa bằng ethanol (hoặc isopropanol) và được thu nhận lại qua ly tâm. RNA được bảo quản trên một năm ở -70 o C trong nước có chứa RNasin (nhân ... hiệu suất tổng hợp cDNA hoàn chỉnh. Nếu số lượng khuôn mẫu nhiều thì hiệu suất của sản phẩm phiên mã cDNA sẽ tăng lên cùng với việc tăng số lượng enzyme reverse transcriptase. Trong nghi...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... trình tự nucleic acid của cDNA được tạo dòng. VII. Xây dựng thư viện cDNA trong bacteriophage  vector Sử dụng thư viện cDNA có hai ưu điểm sau: - Các dòng cDNA chứa trình tự mã hóa liên ... và như vậy trong các tế bào này mRNA của protein đó sẽ có tỷ lệ cao và thư viện cDNA được tạo ra từ các tế bào này sẽ có nhiều cDNA mã hóa cho các protein tương ứng. Sự dồi dào cDNA của một...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... bởi DNA ngoại lai. Các vector pUR 278 , pUR288 và pUR289 chỉ chứa một vị trí PstI trong gen Amp r . Các vector pUR290, pUR291 và pUR292 chứa một vị trí PstI trong vùng tạo dòng do vị trí PstI trong ... thế dễ dàng nhận biết trong điện di polyacrylamide gel của Hình 7. 3. Vector pEX2. Plasmid vector này dài khoảng 5,8 kb được thiết kế để biểu hiện đoạn DNA ngoại lai (cDNA)...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20