Chiết xuất:
- Quá trình chiết xuất được thực hiện bằng thiết bị chiết nóng với dung môi là dầu hỏa.
- Lý do lựa chọn dung môi: Dầu hỏa có khả năng hòa tan một cách khá chọn lọc các alkaloid dạng base và đối với quy mô chiết lớn, dầu hỏa là dung môi dễ kiếm, tiết kiệm chi phí.
- Khó khăn: Máy chiết xuất không có bộ phận điều chỉnh nhiệt độ, vì thế nhiệt độ quá trình chiết xuất được duy trì ở khoảng 100oC (nhiệt độ sôi của nước). Nhiệt độ cao này khiến nhiều chất không phải nuciferin được hòa tan vào dung môi chiết.
Phân lập và tinh chế nuciferin:
- Hiệu suất của quá trình phân lập và tinh chế nuciferin không cao (lượng tủa alkaloid thô thu được là 1% và lượng nuciferin tinh khiết là 0,315%)
- Nguyên nhân: Dịch chiết alkaloid chứa nhiều tạp (tạp màu, tạp chất không phải alkaloid, tạp là alkaloid không phải nuciferin).
-Về dung môi kết tinh để thu được nuciferin tinh khiết: Dung môi được lựa chọn là aceton.Theo một số tài liệu nghiên cứu trong nước trước đây như khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ năm 2014- Nguyễn Đắc Tùng [8], khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ năm 2014- Nguyễn Thị Thu Hường [2], sử dụng dung môi kết tinh là ethanol 96o, đây là dung môi không độc, thân thiện với môi trường và dễ thu hồi để tái sử dụng. Chúng tôi đã tiến hành khảo sát kết tinh với dung môi này và kết quả là sau 3 lần kết tinh vẫn chưa thu được nuciferin tinh khiết. Vì vậy sau khi xem xét các dung môi có sẵn trên bộ môn và tính chất của các dung môi này, chúng tôi quyết định sử dụng aceton và đã thu được kết quả tốt hơn (sản phẩm thu được tinh khiết chỉ sau một lần kết tinh).