Quan sát hiện tương tạo bọt:
Dịch thử: hòa tan 1g cao rau đắng biển vào trong 100ml nước cất.
Lấy 5ml dịch thử cho vào ống nghiệm, lắc mạnh trong vòng 5 phút. Để yên và quan sát. Nếu cột bọt bền vững trong 30 phút thì dương tính.
Kết quả: phản ứng dương tính.
Tiến hành các phản ứng tạo màu.
- Chuẩn bị dịch thử: hòa tan 1g cao rau đắng biển vào trong 100ml ethanol
Phản ứng salkowski:
Cho vào ống nghiệm 3ml dịch thử bốc hơi cách thủy đến cắn, thêm 1ml chloroform, cho từ từ 1ml H2SO4 đặc theo thành ống nghiêm. Quan sát. Nếu thấy màu đỏ tía xuất hiện ở mặt phân cách giữa 2 chất lỏng thì phản ứng dương tính.
Kết quả: phản ứng dương tính.
Phản ứng Lieberman- burchard:
Cho vào ống nghiệm 5ml dịch thử, bốc hơi cách thủy đến cắn, thêm 1ml anhydride acetic. Cho thêm 1 giọt H2SO4 đặc. Nếu thấy xuất hiện màu đỏ nâu thì phản ứng dương tính.
Kết quả: phản ứng dương tính.
Bảng 3.1 : Kết quả định tính saponin bằng các phản ứng hóa học
STT Phản ứng định tính Hiện tƣợng Kết quả
1 Quan sát hiện tượng tạo bọt Cột bọt bền vững trong
30 phút +++
2 Phản ứng Salkowski
Màu đỏ tía xuất hiện ở mặt phân cách giữa mặt
phân cách 2 chất lỏng
+++
3 Phản ứng Liberman- burchard Xuất hiện màu đỏ nâu +++
Chú thích: (+) : phản ứng dương tính
(+++) : phản ứng dương tính rất rõ
Nhận xét: cả 3 phản ứng hóa học định tính saponin đều dương tính rõ. Kết luận: cao khô phân đoạn n- butanol từ cao chiết ethanol của cây rau đắng biển chứa saponin
Phản ứng để sơ bộ phân biệt saponin steroid và saponin triterpenoid
Dịch thử: hòa tan 1g cao rau đắng biển vào trong 100ml nước cất.
Lấy 2 ống nghiệm cỡ bằng nhau, cho vào ống thứ nhất 5ml HCl 0,1N, ống thứ hai 5ml NaOH 0,1N. Cho thêm vào mỗi ống 2-3 giọt dung dịch thử rồi bịt ống nghiệm, lắc mạnh cả 2 ống nghiệm trong 15giây. Để yên và quan sát thấy cột bọt trong cả 2 ống cao ngang nhau và bền vững như nhau trong khoảng 30
phút.
Kết quả được thể hiện trong hình 3.1
Hình 3.1: Kết quả phản ứng phân biệt saponin steroid và saponin triterpenoid (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Kết luận: sơ bộ xác định saponin trong cao rau đắng biển là saponin triterpenoid