C.1.Xác định hàm lƣợng calcium
C.1.1.Nguyên tắc
Dùng trilon B xác định calcium trong dung dich mẫu với chỉ thị murexid (C8H5O6N5) trong môi trường có pH = 12. Ký hiệu chất chỉ thị murexid là H3I- Trong môi trường có pH = 12, H3I-
Có màu tím và khi kết hợp với calcium tạo thành phức chất có màu hồng: H3I- + Ca2+ CaH3I+
Tím hồng
Chất phức hợp của Ca với muruxid không bền bằng chất phức hợp bởi Ca và trilon B đẩy chỉ thị murexid ra khỏi chất phức hợp bởi dạng tự do có màu tím:
64 Hồng tím C.1.2.Dụng cụ và hóa chất Dụng cụ : Bình tam giác 100 ml Ống chuẩn độ 25 ml Ống hút 2, 5, 10 ml Hóa chất Dung dịch NaOH 10% Dung dịch KCN 3 %
Chỉ thị murexid: cân 0.1g murexid + 50g tinh khiết. Nghiền nhuyễn bằng cối, cho vào chai thủy tinh có đậy nút kín.
Dung dịch trilon B 0.02 N
C.1.3.Cách tiến hành
Tùy theo hàm lượng Ca có trong mẫu,cân chính xác 2 – 5g mẫu, nung thành tro trắng, hòa với 5ml HCL tinh khiết, đun cách thủy tới khô trên nồi cách thủy sôi – thực hiện tương tự them một lần nữa. Tiếp đó cho thêm 5ml HCL 20% hòa tan, lọc trên giấy lọc không tro. Rửa chén nung nhiều lần bằng nước cất nóng. Dịch lọc và nước rửa cho cả vào bình định mức, cuối cùng cho thêm nước cất đủ 100ml, ta có được dịch thử.
Hút 20ml dung dịch thử cho vào bình tam giác 100ml thêm 2ml dung dịch NaOH 10%, 5 giọt KCN 3% và khoảng nữa hạt gạo chỉ thị murexid. Chẩn độ bằng dung dịch Trilon B 0.02 N cho đến khi màu hồng của dung dịch chuyển sang màu tím, cần thực hiện song song một sự thử không (đối chứng)
C.1.4.Tính toán:
V1 = (v1*100)/a (ml/100g mẫu khô) Lượng calcium (tính bằng mg) trong 100g mẫu thô là:
65
V1: thể tích Trilon B cần để chuẩn độ khi xác định lượng calcium trong dung dịch mẫu tương đương với 100g mẫu khô.
v1: thể tích Trilon B 0.02 N dùng để chuẩn độ.
a: trọng lượng mẫu khô tương đương với thể tích dung dịch mẫu lấy để chuẩn độ.
20.04 : đương lượng của calcium
C : độ nguyên chuẩn của dung dịch Trilon B
C.2.Định lƣợng phosphor C.2.1.Nguyên tắc
Phương pháp dựa vào khả năng của ion Orthophosphate phản ứng với amomonium Molybdate tạo thành Phosphormolybdate, phức chất có màu xanh lơ 2(MoO24MoO3) + H3PO4 (MoO24MoO3).2H3PO4.4H20
Hàm lượng phosphor phụ thuộc vào cường độ màu của mẫu, đo ở bước sóng hấp thụ cực đại 650ml với cuvet có chiều dày 10mm, dung dịch đối chứng là dung dịch không.
C.2.2.Dung dịch và hóa chất
Dụng cụ
Thời gian chuẩn bị là một giờ, độ nhạy của phương pháp cao do đó các dụng cụ thủy tinh đòi hỏi phải thật sạch.
Máy quang phổ có bước sóng 650nm và cuvet bằng 10mm.
Bình định mức 50,100 ml.
Ống nghiệm.
Hóa chất :
Tất cả các hóa chất sử dụng trong tiêu chuẩn này phải có tinh khiết phân tích
Nước sử dụng phải là nước cất hay có độ tinh sạch tương đương
HCL đậm đặc
66
Hydriquinone [ C6H4(OH)2] pha khi sử dụng
Kali Dihydrophotphat (KH2PO4)
Sodium sulfite (KH2PO4)
C.2.3.Cách tiến hành
Lấy mẫu thử và chuẩn bị mẫu theo TCVN 4325 – 86
Nếu mẫu khô không khí, đã xử lý sơ bộ và bảo quản lạnh
Nếu mẫu tươi, xử lý sơ bộ cô cạn, sấy ở 60 0C, sấy 105 0C nghiền lấy mẫu trung bình.
Chuẩn bị dịch thuốc thử
Dung dịch (1) = dung dịch chuẩn gốc (có chứa 100µg phosphor/ ml). Hòa tan 0.394g KH2PO4 trong bình định mức 1000ml bằng nước cất và định mức đúng 1000ml bằng nước cất và định mức đúng 1000ml. Chuẩn bị dung dịch chuẩn để lập thang chuẩn (có chứa 25µg phosphor/ml ). Lấy 25ml dung dịch vào bình định mức bằng nước cất đúng 100ml ta có dung dịch 1A.
Dung dịch Acid Chlohydric 10% (pha loãng tỉ lệ 1: 3 ) 250ml HCL đậm đậc thêm 750 ml nước cất.
Dung dịch (2) = dung dịch Sodium Sulfite (Na2SO3) 20% trong ít nước và thêm cho đủ 100ml, dung dịch chuẩn bị khi sử dụng.
Dung dịch (3) = dung dịch Hydroquinone [C6H4(OH)2] 0.5%. Hòa tan 0.5g Hydroquinone trong một ít nước và 3 giọt H2SO3, thêm tiếp nước cho đủ 100ml. Dung dịch chuẩn bị khi sử dụng.
Dung dịch (4) = thuốc thử Brigg = dung dịch Amoni Molybdate 5% hòa tan 50g Amoni Molybdate trong 600ml nước. Cho 150ml H2SO4 đậm đậc vào trong 400ml nước để nguội thêm tiếp dung dịch Amoni Molybdate 5% đã chuẩn bị cho vào hổn hợp, để nguội thêm nước cho đủ 1000ml.
Hỗn hợp thuốc thử chuẩn bị khi sử dụng. Trộn lẫn các dung dịch 2, 3, 4 theo tỷ lệ 1: 1: 1
67
Cân chính xác 1 – 5g mẫu ( tùy vào hàm lượng phosphor nhiều hay ít ), vô cơ hóa ở 550 0
C trong 4h, để nguội đến nhiệt độ phòng thấm ướt tro bằng vài giọt nước cất và thêm 10ml dung dịch HCL 10% + 0.5ml HNO3 .
Đun nhẹ trong 5 phút (đến bay hơi), để nguội đến nhiệt độ phòng rửa sạch chén nung và định mức thể tích dung dịch tro 250ml.
Phản ứng lên màu
Lấy 10ml dung dịch tro cho vào bình nón dung dịch 100ml, định mức đủ 100ml ta có dung dịch thứ 2.
Lấy 1ml dung dịch thứ 2 cho vào ống nghiệm.
Thêm 3ml hỗn hợp thuốc thử và nước đủ 10ml, hỗn hợp lắc đều để 30 phút, đo ở bước sóng 650 nm.