vitro của các dẫn chất amido-lactam ở vị trí 7 của khung SAHA.
Nhìn chung, các dẫn chất SAHA chứa (S)-7-amino carboxylactam ức chế các tuýp HDAC với giá trị IC50 ở mức nano, cho thấy sự có mặt của vòng amid trên vùng khóa hoạt động có ảnh hƣởng đặc biệt lên ái lực với enzym. Sự biến đổi trên nhóm khóa hoạt động của SAHA này đã mang lại các chất có hoạt tính cực mạnh trên các HDAC nhóm I và II, đƣợc chứng thực thêm bằng khả năng kháng ung thƣ đầy hứa hẹn trên dòng tế bào thử nghiệm. Chất 6 có thể coi là một chất dẫn đƣờng hấp dẫn, với các biến đổi đơn giản nhƣng tạo đƣợc đƣợc một chất kháng ung thƣ mới hƣớng ức chế HDAC đầy triển vọng [26].
1.4. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU Ở TRONG NƢỚC VỀ CÁC CHẤT ỨC CHẾ HDAC CHẾ HDAC
Tại Việt Nam, lần đầu tiên các nghiên cứu thiết kế, tổng hợp các chất ức chế HDAC và thử hoạt tính để sàng lọc tìm ra chất có hƣớng tác dụng kháng tế bào ung thƣ đã và đang đƣợc nhóm nghiên cứu tại bộ môn Hóa Dƣợc, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội thực hiện.
Luận án tiến sĩ của tác giả Đào Thị Kim Oanh đã tiến hành thay thế nhân phenyl của SAHA bằng khung benzothiazol với vai trò là nhóm khóa hoạt động (hình 1.12). Kết quả khảo sát độ dài cầu nối từ 2 – 6 carbon cho thấy với cầu nối 6C cho hoạt tính tối ƣu [3].
Hình 1.12: Các acid hydroxamic mang khung benzothiazol, cầu nối 6 carbon
Kết quả thử độc tính tế bào in vitro cho thấy chất 9b, 9g có hoạt tính mạnh tƣơng đƣơng SAHA. Thậm chí trên 3 dòng tế bào SW620, AsPC-1 và NCI-H460, chất 9g có tác dụng mạnh gần gấp đôi so với SAHA, thể hiện ở giá trị IC50 = 0,32; 0,34; 0,39 µg/ml (tƣơng ứng với từng dòng tế bào) so với của SAHA là IC50 = 0,50; 0,69; 0,68 µg/ml. Thử nghiệm hoạt tính kháng tế bào ung thƣ tiền liệt tuyến PC-3
in vivo với mô hình ghép dị chủng ở chuột trụi lông cho thấy chất 9g ức chế 49,00% sự phát triển của khối u tƣơng đƣơng SAHA (48,30%) (liều 30 mg/kg).
Giữ nguyên cầu nối 6 carbon đã đƣợc khảo sát trong luận án trên, nhóm nghiên cứu tại bộ môn Hóa Dƣợc trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội tiếp tục hƣớng nghiên cứu thay đổi nhóm khóa hoạt động. Dãy dẫn chất acid hydroxamic mang khung 5-phenyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl đã đƣợc thiết kế, tổng hợp và kết quả cũng cho hoạt tính rất đáng chú ý (bảng 1.4) [21].
Bảng 1.4: Các acid hydroxamic mang khung5-phenyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl và độc tính trên một số dòng tế bào
Chất R Độc tính trên các dòng tế bào (IC50,* µM)
SW620 MCF-7 PC3 AsPC-1 NCI-H460 10a H 0,70 1,80 0,88 2,71 1,07 10b 2-Cl 0,34 1,23 1,42 0,63 0,11 10c 3-Cl 0,45 1,23 1,76 1,10 1,94 10d 4-Cl 1,62 0,73 0,84 1,34 1,50 10e 4-F 3,58 8,05 2,92 1,88 4,79 10f 4-Br 0,72 1,27 0,83 0,08 1,42 10g 4-CH3 11,52 20,78 14,90 6,38 13,16 10h 4-OCH3 1,46 2,46 1,63 0,80 1,97 10i 4-N(CH3)2 6,61 6,67 7,35 7,16 8,18 10j 2-NO2 19,23 31,18 14,69 33,47 16,69 10k 4-NO2 26,71 76,25 25,57 76,25 76,25 10l 2,6-Cl2 16,21 16,29 15,18 14,95 14,38 10m 3,4-CH2OCH2- 1,89 2,15 2,54 3,04 3,34 10n 2,3,4-(OCH3)3 2,29 4,15 1,77 2,11 3,21 10o 3,4,5-(OCH3)3 4,31 3,50 1,89 6,02 10,20 SAHA 3,70 6,82 4,31 3,66 2,77
*Nồng độ của chất gây ra sự giảm 50% số lượng tế bào, số liệu được lấy trung bình ba kết quả với độ lệch dưới 10%.
SAHA: acid suberoylanilid hydroxamic.
Nghiên cứu này đã tổng hợp đƣợc nhiều dẫn chất chất mang khung 5-phenyl- 1,3,4 thiadiazol có hoạt tính kháng tế bào ung thƣ mạnh. Các chất 10a-c có IC50 thấp hơn SAHA 3-20 lần trên các dòng tế bào thử nghiệm, còn 10d-f, 10m-o cũng cho hoạt tính thấp hơn hoặc tƣơng đƣơng SAHA.
Các nghiên cứu trên cho thấy, việc giữ cầu nối 6C và thay nhân phenyl của SAHA bằng các dẫn chất vòng benzothiazol, 5-phenyl-1,3,4-thiadiazol đều tạo ra đƣợc các chất có tác dụng kháng ung thƣ hiệu quả với hoạt lực mạnh hơn. Vì vậy,
đề tài này sẽ tiếp tục hƣớng nghiên cứu trên, thay khung 5-phenyl-1,3,4-thiadiazol bằng khung 5-aryl-1,3,4-thidiazol và vẫn giữ nguyên cầu nối 6 carbon.
Chƣơng 2. NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU