VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1.đối tượng, vật liệu, ựịa ựiểm và thời gian nghiên cứu
3.3.3. Phương pháp lây bệnh nhân tạo
Thắ nghiệm lây bệnh nhân tạo ựược thực hiện ở 2 phương pháp lây là có sát thương và không sát thương. Thắ nghiệm ựược tiến hành như sau
Khi ựã có nguồn bào tử ựược phân lập trên môi trường. dùng que cấy nấm ựã ựược khủ trùng bằng cồn gạt nhẹ lấy bào tử màu ựen nổi trên bề mặt tản nấm cho vào 10ml nước cất vô trùng sau ựó khuấy nhẹ cho ổ bào tử vỡ ra làm bung bào tử trong nước. Trước khi lây bệnh tiến hành ựếm lượng bào tử có trong 1ml nước. Sau khi ựã xác ựịnh ựược lượng bào tử ựể lây ta tiến hành lây bệnh. Tiến hành lây bệnh theo 2 phương pháp là có sát thương và không sát thương, mỗi phương pháp tiến hành 2 cách lây khác nhau là nhỏ dịch bào tủ, dán bông có nhúng qua dịch bào tử. đối với cách lây nhỏ dich bào tủ ta dùng bơm micropipet hút 1ml dịch bào tử sau ựó nhỏ lên bề mặt quả sau ựó dùng kim châm nhẹ vào ựiểm ựã nhỏ dịch bào tử (có sát thương) ựợi ựến khi khô vết lây ta dùng túi nilon bên trong có ựặt bông ẩm ựể giữ ẩm sau ựó dùng ghim ghim miệng túi lại ghi ựánh dấu trên giấy dán vào túi. đối với cách lây bệnh dán bông ta dùng bông y tế nhúng qua dịch bào tử sau ựó dán lên bể mặt quả ổi. Sau khi lây xong cũng bao quả bằng túi nilon.
Cách tắnh lượng bào tử ựể lây bệnh Công thức tắnh số bào tử:
Mỗi buồng ựếm bào tử có 256 ô vuông, thể tắch của mỗi ô vuông là 3.2mm3 Ta có A = n x 256
Trong ựó:
A: số bào tử của 3,2 mm3 thể tắch ô kắnh n: số bào tử trung bình của 1 ô con
- Số bào tử/1ml:
A x 1000 B = ---
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 27 3,2 Trong ựó: B: số bào tử/1ml A: số bào tử của 3,2 mm3 thể tắch ô kắnh
Ở thắ nghiệm lây bệnh trong báo cáo này lượng bảo tử trên 1ml là
A = 18 x 256 = 4608 4608 x 1000
B = = 1440000 (1.44x106) 3,2
Như vậy lượng bảo tử ựể lây là 1.44x106 bào tử /1ml nước.