3. Nội dung nghiên cứu
3.3. Hàm lƣợng polyphenol tổng số trong cao dịch chiết các phân đoạn
3.3.1. Xây dựng đƣờng chuẩn galic
Đƣờng chuẩn galic đƣợc xây dựng bằng cách chuẩn bị các dung dịch acid galic ở các nồng độ 50, 100, 150, 200, 500 mg/l, tiến hành so màu trên máy ERMA ở bƣớc sóng λ = 765nm. Kết quả đƣợc thực hiện ở bảng 3.3 và hình 3.3.
Bảng 3.3 Kết quả đường chuẩn galic
STT Acid galic (mg/l) OD 765nm 1 0 0.009 2 50 0.062 3 100 0.119 4 150 0.168 5 250 0.265 6 500 0.519
Hình 3.3. Đồ thị đường chuẩn acid galic
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0 100 200 300 400 500 600 OD 765nm OD 765nm y = 0.001x + 0.0128
29
3.3.2. Định lƣợng polyphenol tổng số theo phƣơng pháp Folin- Ciocalteau
Dịch chiết cho phản ứng với thuốc thử Folin - Ciocalteau tạo ra sản phẩm có màu xanh lam. So trên máy ERMA ở bƣớc sóng = 765nm, dùng chất chuẩn là acid galic để định lƣợng polyphenol.
Kết quả thể hiện ở bảng 3.4
Bảng 3.4. Kết quả hàm lượng polyphenol tổng số trong các phân đoạn dịch chiết Mẫu Phân đoạn OD765nm Hàm lƣợng (mg/l) Tỉ lệ (%) EtOH 0.29 277.2 9.24 n-hexan 0.31 297.2 9.91 EtOAc 0.68 667.2 22.24
Từ bảng 3.4 cho thấy hàm lƣợng polyphenol trong phân đoạn cao EtOAc chiếm tỉ lệ cao nhất (22.24%), tiếp đó là n-hexan (9.91%) và thấp nhất là ethanol (9.24%).
Từ kết quả trên ta thấy rằng, thành phần hoá học từ dịch chiết của cây Tục đoạn chứa nhiều hợp chất có khả năng tan tốt trong cao ethylacetate. Điều này phù hợp với tính chất vật lý và sự phân cực của phân tử polyphenol, chúng tan tốt trong dung môi ít phân cực và ít tan trong dung môi phân cực.
30
KẾT LUẬN
Một số phân đoạn dịch chiết từ cây Tục đoạn chứa thành phần hợp chất thiên nhiên khá phong phú bao gồm: Flavonoid, tannin, alkaloid, glucosid và sapomin. Trong đó, cao phân đoạn ethanol và ethylacetate chứa hàm lƣợng polyphenol cao hơn cả.
31
KIẾN NGHỊ
Cần tiếp tục nghiên cứu về loài Tục đoạn cũng nhƣ các loài thảo dƣợc khác để hƣớng tới điều chế, thử nghiệm thực phẩm chức năng các đối tƣợng này để điều trị bệnh đặc biệt là bệnh béo phì và đái tháo đƣờng.
32
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt
1.Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học cây thuốc, NXB Y Học
2.Nguyễn Văn Đàn, Ngô Ngọc Khuyến (1999), Hợp chất thiên nhiên dùng làm thuốc, Nxb Y học Hà Nội.
3.Phạm Thanh Kỳ (1998), Bài giảng dược liệu, tập II, Nxb Đại học Dƣợc Hà Nội.
4.Nguyễn Thị Thu Lan (2007), Bài giảng hoá học các hợp chất thiên nhiên, Khoa hoá, Đại học Khoa học, Đại học Huế.
5.Nguyễn Hoàng Lộc, Sản xuất các hợp chất thứ cấp từ nuôi cấy tế bào thực
vật, Viện Tài nguyên Môi trƣờng và Công nghệ sinh học, Đại học Huế.
6.Đỗ Tất Lợi (2005), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam (tái bản có bổ
sung), Nxb khoa học kĩ thuật.
7.Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập chất hữu cơ, Đại học Quốc Gia TP HCM.
8. TS. Đỗ Thị Tuyên, Bài giảng công nghệ tách chiết các hợp chất thứ sinh,
Viện Công Nghệ Sinh học Việt Nam.
9. Nguyễn Minh Thảo (1998), Hoá học các hợp chất dị vòng, NXB Giáo Dục.
10.Oanh Vũ (2009), “Nuôi cấy tế bào để sản xuất các hợp chất thứ cấp”,Tạp
chí Stinfo, trang 12 – 14.
Tài liệu tiếng anh
11.Cragg G.M., Schepartz S.A., Suffuess M., Grever M.R. (1993), The taxol
supply crisis. New NCI policies for handling the large - scale production of novel natural product anticancer and anti - HIV agents, Journal of
33
12. Fett - Neto A.G., Stewart J.M., Nicholson S.A., Pennington J.J., and Dicosmo F. (1994), Improved taxol yield by aromatic carboxylic acid and amino acid feeding to cell cultures of T. cuspidata. Biotechnology
Bioengineering: 967-971.
13. Harborne, J. B. and F. A. Tomas-Barberan (eds.) (1991). Ecological
Chemistry and Biochemistry of the Plant Terpernoids. Oxford Univ.
Press, Oxford.
14.Rao SR (2000) Biotechnological production of phyto-pharmaceuticals.
Journal of Biochemistry Molecular Biology Biophysics: 73-102
15. Slichenmyer W.J., Von Horf D.D. (1991) Taxol: a new and effective
anticancer drug. Anti-Cancer Drug: 519-530
16. Srinivasan V., Pestchanker L., Hirasuma MT., Taticek R.A., and Shuler M.L. (1995) Taxol production in bioreactor; kinetics of biomass accumulation, nutrient uptake, and taxol production by cell suspensions of Taxus baccata. Biotechnol Bioeng: 666 - 676.
17. Wani M.C., Taylor H.L., Wall M.E., Coggon P., and McPhail A.T., (1971) Plant antitumor agents VI. The isolation and structure of taxol, a
novel antileukemic and antitumor agents from Taxus brevifolia. Journal of American Chemical Society: 2325-2327
18. Yamada Y., and Sato F. (1981) Production of berberine in cultured cells
of Coptis japonica. Phytochemistry: 545-547.
19. Zheng H.Z., Dong Z.H., and She J. (1977) Longdan. In. Modern Study of
traditional Chinese Medicine 2: 1398-1408. Beijing Xue Yuan Press, Bijing, China.