Cõy hoa hồng mụn (Anthurium sp.) là giống cõy lớn nhất thuộc họ rỏy Araceae với khoảng 600 loại phõn bố ở vựng Trung và Nam Mỹ. Đõy là cõy hoa đẹp, sang trọng và đa dạng về màu sắc cũng như hỡnh dỏng của hoa. Hồng mụn được trồng trong chậu dựng trang trớ trong nhà, cụng viờn, vườn hoa hoặc trồng sản xuất hoa cắt cành trong thương mại. Sản xuất hoa hồng mụn cắt cành đó đem lại một nguồn lợi lớn đối với một số nơi trờn thế giới như: Hà Lan, Nhật Bản, Mỹ…Cõy hoa hồng mụn đó được nhập trồng tại Đà Lạt từ nhiều năm trước, tuy nhiờn số lượng giống cũn ớt, hỡnh dỏng cõy, hoa cũng như màu sắc hoa
chưa được phong phỳ và đa dạng. Mặc dự ngày nay nhiều giống hoa mới đó được nhập trồng tại Việt Nam nhưng thị trường hoa hồng mụn vẫn khỏ ổn định và tiếp tục được mở rộng. Gần đõy, một số tổ chức và cỏ nhõn đó đứng ra nhập một số giống hồng mụn mới về trồng phục vụ nhu cầu trong nước cũng như xuất khẩu. Tuy nhiờn giỏ thành nhập cõy giống khỏ cao, khú cú thể sản xuất trờn diện rộng.
Bằng phương phỏp nhõn giống hồng mụn từ lỏ cho phộp nhõn nhanh một số lượng lớn cõy giống hồng mụn đồng nhất với giỏ thành hạ, cú thể cung cấp cõy giống cho cỏc nhà trồng hoa thương mại để phỏt triển trồng hoa trờn diện rộng.
2.1. Giai đoạn chuẩn bị
Đõy là giai đoạn quan trọng quyết định toàn bộ quy trỡnh nhõn giống invitro. Mục đớch của giai đoạn này là phải tạo được nguyờn liệu thực vật vụ trựng để đưa vào nuụi cấy. Mẫu đưa từ bờn ngoài vào phải đảm bảo cỏc yờu cầu sau: tỷ lệ nhiễm thấp; tỷ lệ sống cao; tốc độ sinh trưởng nhanh. Kết quả của giai đoạn này phụ thuộc vào cỏch lấy mẫu, nồng độ và thời gian xử lý diệt khuẩn. Vật liệu thường được chọn và đưa vào nuụi cấy hồng mụn là: mụ lỏ non và bụng mỡ.
Chế độ khử trựng mẫu cõy tốt nhất là khử trựng bằng dung dịch NaOCl 2% và HgCl 0,1% với cỏc khoảng thời gian tối ưu cho từng loại mụ khỏc nhau:
+ Mụ lỏ non NaOCl (2%) trong 10 phỳt
+ Bụng mỡ khử trựng trong NaOCl (2% )trong 15 phỳt và HgCl2 (0,1%) trong 3 phỳt.Tỷ lệ sống đạt 24,9%.
2.2. Tỏi sinh mẫu nuụi cấy
Nguồn mẫu ban đầu đó khử trựng được đưa vào mụi trường tạo callus.
Mụi trường tạo callus tốt nhất cho cả mẫu lỏ và bụng mỡ là khoỏng theo cụng thức Nistch cải tiến bổ sung: 1,5ppmBAP+ 1,0ppm Adenin + 0,1ppm 2,4D Khi nuụi trong điều kiện tối hoàn toàn. Tỷ lệ mẫu tạo callus là rất cao ở mụ lỏ là 97,8%, ở bụng mỡ là 95,6%.
Callus tạo ra sẽ được cấy chuyển sang mụi trường tỏi sinh chồi. Mụi trường thớch hợp nhất cho hồng mụn là Nistch cải tiến +1,5ppm BA. tỷ lệ tỏi sinh chồi là 12,5%.
2.3. Giai đoạn nhõn nhanh chồi
Mục đớch của giai đoạn này là tạo hệ số cao nhất. Chớnh vỡ thế giai đoạn này được coi là giai đoạn then chốt của quỏ trỡnh nuụi cấy. Chồi hồng mụn tỏi sinh được cắt và đưa sang mụi trường nhõn nhanh. Mụi trường nhõn nhanh thớch hợp nhất là:
MS +2mg/lBAP +0,2mg/lIAA+1mg/lB1+100ml/lCW+1g/lTHT+5g/l Agar Số lần nhõn nhanh nờn hạn chế ở 4-5 lần
2.4. Tạo cõy hoàn chỉnh
Cỏc chồi hồng mụn cao khoảng 2-3 cm được chuyển sang mụi trường ra rễ. Thường sau 1thỏng, cỏc chồi riờng lẻ này sẽ ra rễ và trở thành cõy hoàn chỉnh. Ở giai đoại này người ta bổ sung vào mụi trường nuụi cấy cỏc chất điều hoà sinh trưởng thuộc nhúm auxin, là nhúm hormon thực vật quan trọng cú chức năng tạo rễ phụ từ mụ nuụi cấy. Mụi trường tạo cõy hoàn chỉnh tốt nhất với cỏc chồi hồng mụn là: MS+ 0,5mg/l NAA+ 5g/l Agar
2.5. giai đoạn đƣa cõy ra đất
Đõy là giai đoạn cuối cựng của quỏ trỡnh và nú quyết định khả năng ứng dụng của quỏ trỡnh nhõn giống invitro trong thực tiễn sản xuất. Đõy là giai đoạn chuyển cõy từ mụi trường dị dưỡng sang mụi trường tự dưỡng hoàn toàn. Do đú phải đảm bảo cỏc điều kiện ngoại cảnh thớch hợp để cõy cú thể đạt tỷ lệ sống cao trong vườn ươm cũng như trong ruộng sản xuất. Cõy trong ống nghiệm khi đạt chiều cao 5-7 cm, cú 3-5 lỏ với bộ rễ tốt sẽ được rỳt ra khỏi ống nghiệm, rửa sạch agar và xử lý qua thuốc trừ nấm (thường dựng Daconil 0.5 %). Sau đú, cõy được trồng trong dớn, xơ dừa hoặc hỗn hợp gồm 60% vỏ trấu và 40% tro trấu. Tỷ lệ cõy sống sau ống nghiệm sau 2 thỏng là 100%. Cõy ra hoa sau 12 thỏng. Bằng cụng nghệ nuụi cấy mụ tế bào, chỳng ta cú thể nghiờn cứu thành cụng quy trỡnh nhõn giống cõy hồng mụn Anthurium andreanum L. từ lỏ với thời gian khoảng 10-12 thỏng. Trong đú: tạo callus (2 thỏng), nhõn callus (4
thỏng), tỏi sinh chồi (3 thỏng) và tỏi sinh rễ (1.5 thỏng). Tỷ lệ cõy sống sau ống nghiệm cao, cõy ra hoa sau 12 thỏng.
C. Bài tập và sản phẩm thực hành của học viờn
Bài tập 1: Thực hành pha chế cỏc loại mụi trường vi nhõn giống cho hoa hồng mụn
- Cỏch thức: chia cỏc nhúm nhỏ (5 – 10 học viờn/nhúm), mỗi nhúm nhận
nhiệm vụ pha chế một loại mụi trường vi nhõn giống cho hoa hồng mụn
- Thời gian hoàn thành: 3 giờ/1 nhúm - Hỡnh thức trỡnh bày: thực hành tại chỗ
- Phương phỏp đỏnh giỏ: kỹ năng vận dụng lý thuyết vào thực hành của
mỗi học viờn trong nhúm và thỏi độ thực hành của học viờn.
- Kết quả sản phẩm cần đạt được:
+ Pha chế được mụi trường vi nhõn giống cho hoa hồng mụn theo đỳng quy trỡnh
+ Mụi trường sau khi pha chế đủ tiờu chuẩn để sử dụng
Bài tập 2: Thực hành nuụi cấy khởi đầu hoa hồng mụn?
- Cỏch thức: chia cỏc nhúm nhỏ (5 – 10 học viờn/nhúm), mỗi nhúm nhận
nhiệm vụ nuụi cấy khởi đầu cho 5 lỏ hồng mụn
- Thời gian hoàn thành: 3 giờ/1 nhúm - Hỡnh thức trỡnh bày: thực hành tại chỗ
- Phương phỏp đỏnh giỏ: kỹ năng vận dụng lý thuyết vào thực hành của
mỗi học viờn trong nhúm và thỏi độ thực hành của học viờn.
- Kết quả cần đạt được:
+ Chọn được mảnh lỏ đạt tiờu chuẩn để nuụi cấy + Thực hiện nuụi cấy khởi đầu đỳng với quy trỡnh + Mẫu sau khi cấy đảm bảo tỷ lệ sống và tỷ lệ vụ trựng
Bài tập 3: Thực hành nhõn nhanh chồi hoa hồng mụn?
- Cỏch thức: chia cỏc nhúm nhỏ (5 – 10 học viờn/nhúm), mỗi nhúm nhận
nhiệm vụ cấy chuyền, nhõn nhanh 5 bỡnh mẫu
- Thời gian hoàn thành: 3 giờ/1 nhúm - Hỡnh thức trỡnh bày: thực hành tại chỗ
- Phương phỏp đỏnh giỏ: kỹ năng vận dụng lý thuyết vào thực hành của
mỗi học viờn trong nhúm và thỏi độ thực hành của học viờn.
- Kết quả cần đạt được:
+ Chọn được bỡnh mẫu đạt tiờu chuẩn để nhõn nhanh + Thực hiện nhõn nhanh chồi đỳng với quy trỡnh
+ Mẫu sau khi cấy đảm bảo hệ số nhõn, chất lượng chồi, tỷ lệ sống và tỷ lệ vụ trựng
Bài tập 4: Thực hành tạo cõy hoàn chỉnh cho chồi hoa hồng mụn nuụi cấy?
- Cỏch thức: chia cỏc nhúm nhỏ (5 – 10 học viờn/nhúm), mỗi nhúm nhận
nhiệm vụ tạo cõy hoàn chỉnh cho 5 bỡnh chồi mẫu
- Thời gian hoàn thành: 3 giờ/1 nhúm - Hỡnh thức trỡnh bày: thực hành tại chỗ
- Phương phỏp đỏnh giỏ: kỹ năng vận dụng lý thuyết vào thực hành của
mỗi học viờn trong nhúm và thỏi độ thực hành của học viờn.
- Kết quả cần đạt được:
+ Chọn được bỡnh mẫu đạt tiờu chuẩn
+ Thực hiện tạo cõy hoàn chỉnh đỳng với quy trỡnh
+ Mẫu sau khi cấy đảm bảo tỷ lệ ra rễ, số lượng rễ, chất lượng rễ, tỷ lệ sống và tỷ lệ vụ trựng
Bài tập 5: Thực hành ra cõy và chăm súc mầm hoa hồng mụn tại vườn ươm?
- Cỏch thức: chia cỏc nhúm nhỏ (5 – 10 học viờn/nhúm), mỗi nhúm nhận
nhiệm vụ ra cõy và chăm súc cho 5 bỡnh hồng mụn đó cú cõy hoàn chỉnh
- Thời gian hoàn thành: 3 giờ/1 nhúm - Hỡnh thức trỡnh bày: thực hành tại chỗ
- Phương phỏp đỏnh giỏ: kỹ năng vận dụng lý thuyết vào thực hành của
mỗi học viờn trong nhúm và thỏi độ thực hành của học viờn.
- Kết quả cần đạt được:
+ Chọn được bỡnh cõy hoàn chỉnh đạt yờu cầu ra cõy
+ Thực hiện ra cõy và chăm súc cõy mầm ở vườn ươm đỳng với quy trỡnh + Cõy mầm sau khi ra cõy đảm bảo tỷ lệ sống và chất lượng cõy con xuất vườn
D. Ghi nhớ: Cần chỳ ý một số nội dung trọng tõm:
- Mụi trường vi nhõn giống hoa hồng mụn - Quy trỡnh vi nhõn giống hoa hồng mụn
Bài 5: Vi nhõn giống hoa cỳc Mó bài: MĐ 05 – 05 Mục tiờu
Sau khi học xong học viờn cú khả năng:
- Thành thạo cỏc bước cụng việc thực hiện trỡnh tự cỏc giai đoạn vi nhõn giống cõy hoa cỳc theo đỳng quy trỡnh
A. Giới thiệu quy trỡnh vi nhõn giống hoa cỳc
B. Cỏc bƣớc tiến hành vi nhõn giống hoa cỳc