PHẦN IIỊ đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.4Phương pháp nghiên cứu một số chỉ tiêu số lượng, chất lượng tinh dịch tươi của trâu Murrah
dịch tươi của trâu Murrah
- Phương pháp nghiên cứu màu sắc tinh dịch
Phương pháp ựánh giá màu sắc của tinh dịch bằng phương pháp quan sát ngay sau khi thu hoạch tinh. (Phùng Thế Hải, 2013)
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 43
- Phương pháp nghiên cứu thể tắch tinh dịch
Chỉ tiêu này ựược ựánh giá theo phương pháp quan sát trên vạch chia mililit (ml) ở thành ống hứng tinh. (Phùng Thế Hảị 2013)
- Phương pháp nghiên cứu hoạt lực tinh trùng
đánh giá bằng kắnh hiển vi có kết nối với màn hình theo phương pháp của Nhật Bản: lấy 0,1 ml tinh tươi + 0,9 ml môi trường A rồi nhỏ lên lam kắnh, ựậy la men lên sau ựó ựưa lên kắnh hiển vi có gắn Camera phóng ựại 100 lần và ựánh giá hoạt lực theo thang ựiểm 10 của Milovanov.
- Phương pháp nghiên cứu nồng ựộ tinh trùng
Nồng ựộ tinh trùng ựược ựánh giá bằng máy so màu Photometer SDM-5 của hãng Minitub ( đức). Bằng cách dùng pipét hút 0,2 ml tinh dịch pha loãng trong 4 ml nước muối sinh lý 0,9%, hơi lắc nhẹ cho ựều và ựưa vào máy Photomaster SDM-5. Chỉ số hiện trên máy là nồng ựộ tinh trùng (tỷ/ml)
- Phương pháp nghiên cứu pH của tinh dịch
pH tinh dịch ựo bằng máy ựo pH .
- Phương pháp nghiên cứu tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K%).
Bằng phương pháp nhuộm xanh methylen 5% khoảng 5-7 phút hoặc ựỏ Fucsin 5% khoảng 5-7 phút và ựếm tinh trùng kỳ hình và tinh trùng bình thường trên kắnh hiển vi 500 tinh trùng rồi tắnh toán bằng phép tắnh số học thông thường.
K (%) = Số lượng tinh trùng kỳ hình x 100
500
- Phương pháp nghiên cứu tỷ lệ tinh trùng sống(%)
Kiểm tra tỷ lệ tinh trùng sống (%) trong tinh dịch theo phương pháp của Milovanov là: nhỏ 1 giọt tinh dịch lên lam kắnh lõm + 2 giọt Eosin 5%, ựảo
nhẹ rồi sau ựó nhỏ 4 giọt Nogrosin 10%. đảo nhẹ nhàng, ựể ấm 37oC trong 30
giâỵ Lấy 1 giọt phết kắnh dàn mỏng ựều ựưa lên kắnh hiển vi với ựộ phóng ựại 400 lần ựếm tổng số 500 tinh trùng rồi tắnh tỷ lệ %, bằng phép số học thông thường. Tinh trùng chết là những tinh trùng bắt màu ựỏ Eosin.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 44 Tỉ lệ tinh trùng sống (%) =
Số lượng tinh trùng sống
X 100 500 500
3.3.5 Khả năng sản xuất tinh ựông lạnh của trâu ựực giống Murrah
- Tổng số tinh trùng sống tiến thẳng trong một lần khai thác ựược xác ựịnh bằng cách nhân tắch của các chỉ tiêu VxAxC.
- Số lượng tinh cọng rạ sản xuất ựược trong một lần khai thác tinh (liều/lần khai thác), là tổng số tinh trâu Murrah ựông lạnh ựược sản xuất ra trong một lần khai thác tinh, ựược xác ựịnh bằng phương pháp ghi chép và thống kê thông dụng.
- Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông (%) sau khi ựông lạnh 24 giờ, tinh cọng rạ ựược lấy ngẫu nhiên từ 1 ựến 2 cọng rạ giải ựông ở nhiệt ựộ 36 ựến 370C, thời gian 30 giây theo từng ngày sản xuất của từng trâu ựực giống Murrah và ựược ựánh giá bằng kắnh hiểm vi có kết nối với màn hình